全 文 ：[ 作者简介] 张淑慧 ,女 ,主任药师 ,电话:0311-85988137 , E-mail:zhang shh299@s oh u.com
·医院制剂 ·
蒲公英阴道栓的制备及质量控制
张淑慧 ,孙颖光 ,马杰 ,张咏梅 ,赫立恩 ,邱志宏(河北
省人民医院药学部 ,河北 石家庄 050051)
[ 摘要] 　目的:建立蒲公英阴道栓的制备方法及质量控制标
准。方法:筛选基质 , 确定栓剂中的主要成分和基质的组成
与比例 ,并采用高效液相色谱法测定栓剂中绿原酸 、咖啡酸
的含量。结果:制备得到水溶性基质的蒲公英栓剂;主要成
分绿原酸 2～ 50 mg·L-1质量浓度范围内线性关系良好(r=
0.994 3), 平均回收率为(100.6±3.4)%;咖啡酸在 2 ～ 50
mg·L-1质量浓度范围内线性关系良好(r=0.994 4), 平均回
收率为(101.0±3.0)%。结论:该制剂制备工艺简单 , 质量
稳定 ,质量控制方法简便 、准确 、精密度好。
[ 关键词] 　蒲公英;绿原酸;咖啡酸;阴道栓;高效液相色谱
法
[ 中图分类号] R283　　[ 文献标识码] A　　[ 文章编号] 1001-5213
(2010)23-2029-02
　　蒲公英(Taraxacum)是菊科多年生草本植物 , 具有清热
解毒 ,消肿散结 , 利尿通淋等功效。蒲公英有广谱抑菌 ,抗内
毒素 ,免疫促进等作用[ 1] , 其临床应用范围不断扩大 , 尤其在
治疗消化系统 、泌尿系统 、生殖系统疾病等方面。我院既往
研制了蒲公英注射液 ,经过多年的临床应用治疗慢性盆腔炎
等妇科炎症疗效显著[ 2] 。栓剂作为一种方便的给药途径 , 既
可以发挥局部作用也可起到全身作用 , 为此研制了蒲公英阴
道栓 ,建立了其含量测定方法 , 现将其研制及质量控制方法
报道如下。
1　材料
2695 型高效液相色谱仪 , 2487 型紫外检测器 , Empower
色谱工作站 ,美国 Water s公司;栓剂融变仪(S R-1 型 , 天津大
学精密仪器厂)。蒲公英药材(乐仁堂饮片厂 ,批号 071228);
咖啡酸对照品(中国药品生物制品检定所 , 批号 110885-
200102);绿原酸对照品(中国药品生物制品检定所 , 批号
110753-200413);聚乙二醇 4000;聚乙二醇 6000;甲醇为色谱
纯;其他试剂均为分析纯。
2　制备
2.1　药材有效成分的提取　取蒲公英药材 500 g , 加 9 ～ 13
倍量水 ,静置 30 min , 加热煮沸1.5 h , 趁热过滤 , 得滤液①,
药渣再加 6 倍量水 ,加热煮沸 1 h ,趁热过滤 , 弃去药渣 ,得滤
液②,合并滤液①②, 浓缩 ,经过两次醇沉 、回流后 , 即得蒲公
英浓缩药膏。
2.2　栓剂处方　蒲公英浓缩药膏 200 g , 167 g 聚乙二醇
6000 , 33 g聚乙二醇 4000 , 甘油0.8 g , 0.4 g 聚山梨醇酯-80。
制成栓剂 100 枚 , 4 g/粒。
2.3　制备工艺　采用热融法 。取聚乙二醇 6000 约 167 g ,
聚乙二醇 4000 约 33 g ,加热融化 , 加入甘油0.8 g ,聚山梨酯-
80 0.4 g 及蒲公英药膏 200 g , 搅拌均匀 , 注入涂有润滑剂液
体石蜡的模具中 ,冷却 , 削平 ,脱模 , 即得。
3　质量控制
3.1　外观　本品为棕褐色鸭嘴型栓剂。
3.2　质量差异　取栓剂 10 枚 , 精密称出总质量 , 求得平均
枚重。每枚质量与平均枚重比较 , 测得 10 枚栓剂的质量差
异在平均质量的±5%内。符合中国药典 2005 年版关于栓
剂重量差异限度的规定[ 3] 。
3.3　融变时限　按中国药典 2005 年版方法每批取 3 枚 ,室
温放置 1 h 后 , 用栓剂融变仪检测 , 均在 40 min 内溶解 ,应在
60 min 内溶解 ,符合 2005 年版中国药典规定[ 3] 。
3.4　微生物限度检查　经微生物限度检查法验证 , 蒲公英
阴道栓的微生物限量符合中国药典要求[ 4] 。
3.5　咖啡酸 、绿原酸的薄层鉴别　取栓剂 2 粒 , 切碎 , 加甲
醇 20 mL 加热回流 30 min , 滤过 ,滤液蒸干 , 残渣加水 10 mL
使溶解 ,滤过 , 滤液用醋酸乙酯振摇提取 2 次 , 每次 10 m L。
合并醋酸乙酯液 , 蒸干 , 残渣加甲醇 1 mL ,使溶解作为供试
品溶液。取咖啡酸对照品 , 绿原酸对照品 , 分别加甲醇制成
0.5 g·L -1的溶液 , 作为对照品溶液。将供试品溶液与对照
品溶液分别点于同一硅胶 G 薄层板上 , 以醋酸丁酯-甲酸-水
(7∶2.5∶2.5)的上层溶液为展开剂 ,展开 , 取出 , 晾干 , 置紫外
灯下检测 ,在相同位置显示相同颜色斑点。
3.6　刺激性试验　按照《中华人民共和国卫生部新药(西
药)临床前指导原则》 ,将性成熟新西兰白色家兔分为空白对
照组 、基质组 、剂量组 ,每组 4 只 ,体质量(2.5±0.5)kg ,常规
饲养;取蒲公英栓及空白栓适量(约相当于人每公斤体质量
用量的 2～ 3 倍),分别置于给药组及基质组家兔阴道中 ,与
黏膜接触 4 h , qd ,连续 10 d。实验期间观察家兔活动 、精神 、
食欲等状况 ,于给药第 1 , 2 , 7 , 10 天处死各组家兔 , 解剖后采
集阴道和子宫 ,用常规方法制备组织切片 , 并对阴道切片进
行打分[ 5] ;结果表明 , 实验期间所有家兔活动 、精神及食欲均
正常 ,且阴道黏膜无充血 、红肿现象。可见本栓剂无刺激性 ,
可长期应用。
3.7　含量测定
3.7.1　对照品溶液的制备　精密称取咖啡酸对照品 5 mg ,
绿原酸对照品 5 mg , 置 50 mL 量瓶中 , 加甲醇适量使溶解 ,
并稀释至刻度 ,摇匀即得①。从①中精密取 25 m L至 50 mL
量瓶中 ,加甲醇适量使溶解 , 并稀释至刻度 ,摇匀即得②。从
①中精密取 1 mL 至 10 mL 量瓶中 , 加甲醇适量使溶解 ,并
稀释至刻度 ,摇匀即得③。
3.7.2　供试品溶液的制备　取蒲公英栓 10 粒 , 称定质量 ,
切碎 ,取约 0.6 g , 置 10 mL 量瓶中 , 加甲醇适量 , 超声 20
min ,放冷至室温 , 用甲醇定容至刻度 , 摇匀 ,滤过 , 即得供试
品溶液。
3.7.3　阴性对照品溶液的制备　按“ 2.3”项下方法制备不
含蒲公英浓缩药膏的阴性对照品 ,按“ 3.7.1” ～ “ 3.7.3”项下
方法制备溶液。
3.7.4　色谱条件　色谱柱:Sinochrom ODS-BP(250 mm×
4.6 mm , 5 μm)。流动相:0.02 mol· L -1磷酸二氢钠缓冲
液-甲醇(70∶30 , 用磷酸调 pH 4.0), 流速:1.0 mL·min -1 。
柱温:30℃, 检测波长:323 nm , 进样量:10 μL 。取上述对照
品溶液 、阴性对照品溶液 、供试品溶液进样分析(10 μL)。
·2029·中国医院药学杂志 2010年第 30卷第 23期 Chin H osp Pharm J , 2010 Dec , Vol 30 , No.23
结果 , 在上述色谱条件下 , 基质对测定没有干扰 , 色谱图见
图 1。
图 1　高效液相色谱图
A.对照品;B.阴性对照品;C.供试品;1-绿原酸;2-咖啡酸
Fig 1　HPLC chromatograms
A.reference;B.negative reference;C.sam ple;1-chlorogenic;2-caf-
f eic acid
3.7.5　线性关系考察　精密吸取对照品溶液0.2 , 0.5 , 1 , 2 ,
3 , 5 mL 分别置于 10 mL 量瓶中 ,加甲醇至刻度。依次进样
各 10 μL ,按“3.7.4”项下色谱条件测定咖啡酸 、绿原酸峰面
积(Y),并以其为纵坐标 , 同时以咖啡酸 、绿原酸进样浓度
(X)为横坐标 , 进行线性回归。得回归方程为:绿原酸 Y =
15 559.573 9X-32 587.024 4 (r=0.994 3), 咖啡酸 Y =
31 086.52 109X -67 594.328 0 (r=0.994 4)。绿原酸检
测浓度在 2～ 50 mg·L-1范围内线性良好 , 咖啡酸检测浓度
在 2～ 50 mg·L-1范围内线性良好。
3.7.6　精密度试验　精密吸取对照品溶液 10 μL , 重复进样
求 6 次峰面积的相对标准偏差。绿原酸 RSD 为 0.67%, 咖
啡酸 RSD为0.75%。
3.7.7　重复性试验　取同一批样品 6 份 , 按“ 3.7.3”项下方
法处理后 , 再按“ 3.7.1” 项下色谱条件进样测定。 绿原酸
RSD为2.3685%,咖啡酸 RSD为2.5982%,重复性良好。
3.7.8　稳定性试验　精密吸取同一供试品溶液 ,分别于 1 ,
2 , 3 , 4 , 5 , 6 , 8 h 后测定咖啡酸 、绿原酸峰面积。绿原酸 RSD
为3.52%,咖啡酸 RSD 为4.45%, 表明供试品溶液 8 h 内稳
定性良好。
3.7.9　加样回收率试验　分别精密吸取一定量的对照品溶
液①②③,依次加入精密吸取已知量供试品 , 按“3.7.1”项下
色谱条件进样分析 ,回收率结果见表 1。
3.8　样品含量测定　取 3 批样品 , 按“ 3.7.1”项下方法处理
后 ,各精密吸取 10 μL进样 , 按“ 3.7.1”项下色谱条件测定咖
啡酸 、绿原酸的峰面积 , 计算含量。结果见表 2。
表 1　咖啡酸 、绿原酸回收率试验结果(n=6)
Tab 1　Results o f recovery de te rmination of caffeic acid and
chlor ogenic acid(n=6)
品名 编号样品含量/μg
对照品加入量
/μg
测得量
/μg
回收率
/ %
平均值
/%
RSD
/ %
1 0.368 1 1.353 98.97
咖啡酸 2 0.368 0.5 0.861 99.23 99.11 0.13
3 0.368 0.1 0.464 99.14
4 0.224 1 1.212 99.01
绿原酸 5 0.224 0.5 0.729 100.70 99.60 0.96
6 0.224 0.1 0.321 99.08
表 2　样品含量测定结果(n=3)
Tab 2　Results of determina tion of sample content(n=3)
批号
含量/(mg/粒)
绿原酸 平均含量 RSD/ % 咖啡酸 平均含量
RSD
/ %
1 1.13 1.84
2 1.14 1.12 1.9 1.78 1.84 2.9
3 1.10 1.89
4　讨论
由于阴道腔道内的液体量有限 , 水溶性基质更有利发挥
局部药效。本栓剂选用水溶性基质 ,其成分为聚乙二醇 4000
和聚乙二醇 6000 , 经动物试验表明刺激性小 , 可长期应用。
因此蒲公英栓剂有望成为一种安全有效的治疗女性盆腔感
染的新型制剂。
HPLC 法测定咖啡酸和绿原酸的流动相有多种 , 曾尝试
了不同比例的流动相测定 ,分离效果均不佳。经过比较和考
察 ,确定了该色谱条件 , 可使两者色谱峰与相邻峰达到基线
分离 ,且基质不影响主药含量测定。试验表明 , pH 越高 ,组
分保留时间越长 , 磷酸调至 pH 4.0的流动相具有合适的保
留时间和分离度。
高效液相色谱法专属性及重复性好 , 结果准确可靠 ,可
用于该制剂的质量控制和分析。
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[ 收稿日期] 2009-10-09
(上接第 2028页)
话费 、运费。存贮变动成本是指与存货的数量有关的存贮成
本 ,如存货资金的应计利息 、存货的破损和变质损失 、存货的
保险费用等。用边际成本制定的订购决策是合理的 , 并且总
库存费用比用平均成本制定的订货决策的总库存费用低。
所以说边际成本制定的订购决策是合理并且经济的决策。
边际成本所指的变动成本(如电话费 、存货的破损和变质损
失等)存在很多人为因素 , 需要及时调整成本因素和经济订
购量 ,才能有效应用边际成本制定的订购决策 , 使之行之有
效。
参考文献:
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[ 收稿日期] 2010-01-04
·2030· 中国医院药学杂志 2010年第 30卷第 23期 Chin H osp Pharm J , 2010 Dec , Vol 30 , No.23