全 文 ：repellent d eet on Aedes agypti ( Diptera: Cu ticidae)
[ J ]. J Med. En tomol , 1981, 18: 357～ 361.
[3 ]　W righ t R H. Why Mosqui to repellent pepel [ J ]. Sci.
Am. 1975, 233( 1): 104～ 111.
[4 ]　薛飞群 ,汪汉卿 ,赵荣材 .芳香羧酸衍生物驱避活性及
定量关系分析 [ J] .中国兽医学报 , 1996, 16( 4): 378
～ 382.
[5 ]　薛飞群 ,赵荣材 ,李金善等 . 兽医昆虫驱避剂的合成
及筛选 [ J ]. 中国兽医科技 , 1994, 24( 10): 8～ 11.
[6 ]　薛飞群 ,赵荣材 ,李金善等 . 昆虫驱避剂筛选方法的
研究 [ J ]. 中兽医医药杂志 , 1994, 6: 13～ 16.
[ 7 ]　 Kier L B, Hall L H. Molecular Connectivi ty in
St ructu re Activi ty Analysis [M ] , Research Studies.
Press. England. 1989.
[8 ]　薛飞群 ,汪汉卿 ,赵荣材等 .芳香羧酸衍生物驱避活性
测定及定量构效关系研究 [ J] .中国农业科学 , 1997,
30( 1): 77～ 83.
Quantitative Structure Activity Relationship Study with the
Aromatic Acid Repellents by Molecular Connectivity
XUE Fei-qun, WANG Yu-chun, XU Zhong-zan, LI Jin-shan, YAN Xiang-ling
( Inst itu te of Lanzhou An imal and Animal Pharm aceutical , CAAS , Lanzhou 730050,China )
Abstract: Quantitativ e st ructure activi ty relationships of the aroma tic acid repellents w ere
studied using molecular connectivi ty ( M C) , relationship of molecula r connectiv e index and
physiochemical pa rameters of the compounds w as analy zed. The resul ts indicated that M C
could demonstrate quanti ta tiv ely to the structure characteristic of the compounds. Parameter
1XV could be rela ted w ith mo la r ref ractivi ty ( MR) and be a good relationship w ith
repel lency.
Key words: Molecular connectivi ty; Repellent; Quantitative st ructure activi ty relationship
( QSAR)
药用鼠尾草二萜醌类及有关中药单体对羟自由基的清除效能
薛　明 1 ,　崔　颖 1 ,　汪汉卿2 ,　史彦斌 1 ,　张　彬 1 ,
罗永江 1 ,　周宗田 1 ,　夏文江1 ,　赵荣材 1
( 1.中国农业科学院中兽医研究所农业部新兽药工程重点开放实验室 ,兰州 730050; 2.中国科学院兰州化学物理研究所 )
“九五”国家重点科技攻关项目 ( 96-005-02-04-05)部分内容
[收稿日期 ] 1998-06-08　　　　 [文献标识码 ] A　　　　 [文章编号 ] 1002-1280( 1999)-03-0015-04
[摘　要 ]　采用电子自旋共振和自旋捕集技术 ,观
察药用鼠尾草丹参二萜醌类化合物及其它中草药中
有关单体化合物对 Fenten反应产生的羟自由基的
清除效能。结果表明 ,试验浓度的二萜醌类化合物对
羟自由基有不同程度的清除作用 ,其中对醌类的抑
制作用强于邻醌类。含多羟基醌类化合物具有较强
的清除效能 ,分子中的羟基对消除自由基有促进作
用。在一定浓度范围内 ,隐丹参酮对羟自由基有较好
的清除作用。
[关键词 ]　电子自旋共振 ;羟自由基 ;药用鼠尾草二
萜醌 ;中药
药用鼠尾草 (丹参、甘肃丹参等 )是我国
传统中药 ,具有多种药理活性 [ 1, 2]。主要有效
·15·1999, 33( 2): 15～ 18 /薛　明等　　　　　　　 　中国兽药杂志
成份的二萜醌化合物是产生药理活性的主要
药物。以二萜醌类化合物对羟自由基的抑制
作用为题 ,利用电子自旋共振 ( ESR)与自旋
捕集技术 ,观察了药用鼠尾草丹参、甘肃丹参
中二萜醌类化合物及其它中草药中有关单体
化合物对 Fenten反应模型产生的羟自由基
的清除作用 ,并探讨其分子水平的作用机制
及构效关系。
1　材料与方法
1. 1　试剂与样品　硫酸亚铁 ( FeSO4 7H2O)
与 30%过氧化氢 ( H2O2 )为国产分析纯。二甲
基吡咯氮氧化物 ( 5, 5-dimethy l-py rroline-N-
Oxide, DMPO)购自 Sigma公司 ,经活性炭
纯化其 ESR波谱中无杂质信号存在。药用鼠
尾草中二萜醌类化合物隐丹参酮、丹参酮Ⅱ
A、丹参酮Ⅱ B、丹参酮Ⅰ 、二氢丹参酮、丹参
酸甲酯、羟基丹参酮Ⅱ A、丹参新醌甲、丹参
新醌乙、总丹参醌、β-谷甾醇等标准品均为本
实验室从甘西鼠尾草 ( Salvia przewa lskii ,甘
肃丹参 )的根中提取纯化 ,经 T LC, mp, IR,
UV, NM R等技术鉴定为纯品 [3～ 6 ]。青蒿素由
中国中医研究院屠呦呦研究员赠送 ;鹿蹄草
素、甲苯醌由本所梁建平博士赠送 ; α-香附
酮、穿心莲内酯、小檗碱、丹皮酚、芦荟大黄
素、生育酚等均购自中国药品生物制品检定
所。上述样品用少量等体积吐温 -80溶解 ,再
用磷酸缓冲液 ( 0. 1mol /L, pH7. 4)稀释至所
需浓度 ( 0. 5mg /ml ) ,置 - 20℃保存。
1. 2　羟自由基发生体系的产生　采用
Fenten反应产生 OH,其体系为 Fe (Ⅱ )-
H2O2 ,取 10 mmol /L FeSO4 7H2O 10μl, 1%
H2O2 10μl, 0. 1mo l /L 磷 酸 缓 冲 液 25μl,
0. 1mo l /L DMPO 20μl,混匀后立即吸入谐
振腔 ,测 ESR谱。
1. 3　鼠尾草二萜醌及其它中草药中有关单
体化合物对 OH的影响　按上述方法 ,用不
同化合物代替磷酸缓冲液 ,混匀后 ,放入
ESR谐振腔测试。
1. 4　不同浓度隐丹参酮对 OH的作用　选
择一定范围内 ( 0. 05～ 2mg /ml )不同浓度的
抗金黄色葡萄球菌活性单体化合物隐丹参酮
代替磷酸缓冲液 ,立即混匀后 ,放入谐振腔测
试。
1. 5　 ESR测试条件　 ESR谱在 Varian
E115型电子自旋共振仪上测试 ,条件为微波
功率 10mW ,X波段 , 100KHz高频调制 ,调制
幅度 0. 5G,中心磁场 3390G,扫宽 200G,时间
常数 0. 25s,扫描时间 4min。
2　结　果
2. 1　鼠尾草丹参二萜醌类化合物对羟自由
基的清除作用　见表 1、图 1。
图1 Fenten反应产生的 DMPO-O H加合物的 ESR谱
A为不加药品的 ESR谱 , B为加隐丹参酮后的 ESR谱
表 1　鼠尾草丹参二萜醌类化合物*
对羟自由基的清除作用　 (% )
化合物 抑制率 ( E± SD) 化合物 抑制率 ( E± SD)
隐丹参酮 55. 56± 14. 56 丹参酮Ⅱ B 76. 52± 5. 35
丹参酮Ⅱ A 58. 33± 22. 50 丹参酸甲酯 65. 91± 9. 64
羟基丹
参酮Ⅱ A 78. 79± 12. 86 丹参新醌甲 84. 85± 3. 22
丹参酮Ⅰ 68. 94± 24. 63 丹参新醌乙 72. 94± 1. 85
二氢丹
参酮Ⅰ 59. 85± 5. 35 总丹参酮 53. 03± 6. 43
* ( 0. 5mg /ml)
Fenten反应是产生纯 OH的经典反应 ,
图 1中 , A是在 Fenten反应体系中不加药物
所得的自旋捕集剂 DMPO与 OH形成的自
旋加合物 DM PO-OH的特征性 ESR谱 , B
是反应体系中加丹参二萜醌类化合物隐丹参
酮后的 ESR谱。用各谱线的第二峰的峰高 h
( mm )表示信号的相对强度。　药物对 OH
的清除作用以清除率 E表示。
·16· 中国兽药杂志　　　　　　　　 1999, 33( 2): 15～ 18 /薛　明等
E= ( ho- hx ) /ho× 100%
其中: ho为对照样品 DMPO-OH的第
二峰的峰高度 ,
hx为加药样品 DMPO-OH的第二峰的
峰高度。
表 1结果表明 ,鼠尾草丹参二萜醌化合物
可不同程度地清除 Fenten反应生成的 OH,
其中以丹参新醌甲对 OH的清除作用最强。
2. 2　中草药中有关单体化合物对 OH的清
除作用　见表 2。
表 2　单体化合物* 对羟自由基的清除作用　 (% )
化合物 抑制率 ( E± SD) 化合物 抑制率 ( E± SD)
青蒿素 31. 06± 3. 76 α-香附酮 38. 64± 7. 05
双氢青蒿素 42. 56± 10. 89 β-谷甾醇 62. 87± 20. 36
丹皮酚 53. 81± 11. 82 穿心莲内酯 41. 67± 20. 79
芦荟大黄素 77. 43± 14. 78 小檗碱 37. 83± 16. 80
鹿蹄草素 83. 02± 5. 98 生育酚 65. 29± 8. 05
甲基苯醌 49. 96± 2. 14
* (0. 5mg /ml)
由表 2可见 ,在所选取的单体化合物中 ,
以醌类化合物 ,尤其是含多羟基氢醌及蒽醌
类化合物对 Fenten反应产生的 OH有显著
的清除作用。
2. 3　不同浓度隐丹参酮对 OH的清除作用
　见图 2所示。
图 2　不同浓度隐丹参酮与清除羟自由基效能的关系
当隐丹参酮浓度较低时 ( 0. 05mg /m l) ,
清除 OH效能较低 ,随着浓度的增加 ,其清
除作用也逐渐增强 ,当浓度达到 0. 75mg /ml
时 ,清除率可以达到 70%左右 ,至此 ,当隐丹
参酮的量再增加时 ,其清除效果基本稳定 ,增
加较少。
3　讨　论
鼠尾草丹参二萜醌的结构如图 3。实验结
果得知 ,分子结构中具有邻醌或对醌等还原
性基团时 ,可与自由基反应 ,消除自由基。
O
O
O
隐丹参酮
O
O
O
丹参酮Ⅰ
O
O
O
二氢丹参酮Ⅰ
R2
R1
O
O
O
丹参酮Ⅱ A: R1= H, R2= Me
羟基丹参酮Ⅱ A: R1= OH, R2= Me
丹参酮Ⅱ B: R1= H, R2= CH2OH
丹参酸甲酯: R1= H, R2= COOMe
　
O
OH
CH2R
O
丹参新醌甲: R= OH
丹参新醌乙: R= H
图 3　鼠尾草二萜醌类化合物的化学结构
在浓度为 0. 5mg /ml时 ,丹参二萜醌类化合
物对 Fenten反应产生的 OH的清除作用强
于或基本相当于生育酚。分子骨架基本相同 ,
但在不同位置上含有羟基取代基时 ,对 OH
的清除作用起促进作用。在含有多羟基基团
时 ,对位醌类二萜醌对 OH的清除效果强于
邻位醌类二萜醌。值得注意的是 ,抗金黄色葡
萄球菌活性主成份隐丹参酮清除羟自由基的
效果低于抗菌活性较低的对位醌类丹参醌 ,
对位丹参二萜醌清除羟自由基的机理及其生
物医学意义有待于进一步探讨。
在随机选取的中草药已知单体化合物 ,
有生物碱、醌类、萜类、甾体及酚类化合物。其
中 ,在所测化合物中 ,以氢醌类化合物鹿蹄草
素对 OH的清除效果最强。可以看出 ,含羟
基醌类化合物对羟自由基都具有较强的清除
效果 ,而不含此结构的其它类化合物清除自
由基的作用一般都不强 ,这或许是结构上的
共性 ,其共同特性是都可提供电子与 H+ 与
羟自由基的结合。这为清除自由基药物的发
现与改进提供了线索。
冯良波研究员进行了波谱测试 ,特致谢意。
·17·1999, 33( 2): 15～ 18 /薛　明等　　　　　　　 　中国兽药杂志
参考文献:
[1 ]　方允中 . 生物物理学报 , 1987, 3( 4): 424.
[2 ]　 Halliw ell B, et al. Natural Reviews , 1994, 52( 8):
253.
[3 ]　高玉桂 ,等 . 药学学报 , 1979, 14( 2): 75.
[4 ]　陈维洲 ,等 . 药学学报 , 1979, 14( 5): 277.
[5 ]　房其年 ,等 . 化学学报 , 1976, 34( 3): 33.
[6 ]　 Chang H M, et al. J Org Ch em, 1990, 55( 11): 3537.
Scavenging Effect of Diterpenoid Tanshinones and Some
Natural Products on Hydroxyl Free Radicals
XUE Ming , CUI Yin, WANG Han-qin, et al
(Lanzhou Inst itute of An imal & Veterinary Pha rmaceut ics Science, Ch inese Academy
of Ag ricul tural Science, Lanzhou　 730050, China )
Abstract: Wi th the use o f the spin trapping methods, the scavenging effects o f di terpenoid
tanshinones f rom the roots of Salvia Pr zew alskii and smoe related pigments f rom Chinese
t radi tional herbs are studied. In Fenten Reaction, Diterpenoid tanshnones have the di fferent
scavenging ef fect ( 53%～ 82% ) , para-quinones have the st ronger scavenging ef fects than
o rtho-quinones. The hydroxyl radical in the molecular bone has been proved as the inhibition
g roup on OH. The relationship betw een the compound st ructure and scavenging the free
radical activi ties wa s also discussed.
Key words: Spin t rapping method; hydroxyl f ree radicals; Di terpenoid tanshinones; Chinese
t radi tional herbs
地克珠利在溶液中稳定性的研究
梁先明 ,　聂　严 ,　黄耀泰
(中国兽药监察所 , 北京　 100081)
[收稿日期 ] 1998-01-29　　　　 [文献标识码 ] A　　　　 [文章编号 ] 1002-1280( 1999)-03-0018-04
[摘　要 ]　地克珠利是一种高效低毒的广谱驱球虫
药。本研究分别采用 60℃密闭、避光加热实验 , 37℃
密闭、避光加热实验 ,室温自然光照实验及连续加热
不同酸碱度溶液实验 ,对地克珠利溶液的稳定性进
行了考查。结果表明:地克珠利在溶液中对光、对热、
对碱不稳定 ;地克珠利溶液制剂应在避光、阴凉处保
存。
[关键词 ]　地克珠利 ; 溶液 ; 稳定性
地克珠利 ( Diclazuri l,化学名: 2, 6-二氯-
a-( 4-氯苯基 ) -4-[4, 5-二氢 -3, 5-二氧 -1, 2, 4-
三嗪基 2( 3H) ]苯乙腈 )是一种高效、低毒的
广谱驱球虫药 ,于 1986年由比利时 Janssen
公司研究开发 ,以 CLIN ACOX在英国、德国
等 43个国家上市 ,并于 1995年向我国农业部
申请登记注册 ,其规格为 0. 2%和 0. 5%的预
混剂 , 1997年获准进口 ,国内商品名为伏球。
我国于 1989年由中国农业科学院上海寄
生虫研究所着手研究其原料和制剂 , 1997年
获准生产。现全国有 5家兽药厂和几家化工厂
生产 ,市场上使用的预混剂规格为 0. 2%、 0.
·18· 中国兽药杂志　　　　　　　 1999, 33( 3): 18～ 21 /梁先明等