全 文 ：HPLC测定撑篙竹竹叶中异牡荆苷的含量
黄秀香，陆俊宇，黄珍
（河池学院化学与生物工程学院，广西宜州 546300）
摘 要：建立 HPLC测定撑篙竹竹叶中异牡荆苷的含量。采用反相高效液相色谱法，色谱柱：Z0RBAX SB-C18（2.1 mm×
100 mm，3.6 μm），甲醇（A）-0.1 %冰醋酸水溶液（B）为流动相，梯度洗脱（0 min~3 min，85 %~70 % B；3 min~6 min，
70 %~55 % B；6 min~9 min，55 %~35 % B；9 min~12 min，35 %~35 % B；12 min~15 min，35 %~70 %B；15 min~18 min，
70 %~85 %B），流速 0.6 mL/min，检测波长 340 nm，柱温 30℃。异牡荆苷在 1.733 1 μg/mL~10.832 0 μg/mL呈良好的线
性关系（r=0.999 6），平均回收率为 98.01 %，RSD1.02 %，试验测得异牡荆苷的含量为 2.928 5 mg/g。
关键词：撑篙竹；异牡荆苷；高效液相色谱；含量测定
Determination of Isovitexin in Bambusa Pervariabilis McClure Leaves by HPLC
HUANG Xiu-xiang，LU Jun-yu，HUANG Zhen
（College of Chemistry and Biology Engineering，Hechi University，Yizhou 546300，Guangxi，China）
Abstract：To establish a HPLC method for the determination of isovitexin in Bambusa Pervariabilis McClure
Leaves. The method was applied with ZORBAX SB-C18 column （2.1 mm×100 mm， 3.6 μm）， the mobile phase
consisted of methanol（A）-（0.1 %）aqueous acetic acid（B）， with an optimized gradient program of 0 min-
3 min，85 %-70 % B；3 min-6 min，70 %-55 % B；6 min-9 min，55 %-35 % B；9 min-12 min，35 %-35 % B；
12 min-15 min， 35 %-70 %B；15 min-18 min， 70 %-85 %B，the flow rate was 0.6 mL/min， the column
temperature was maintained at 30 ℃ and the UV detection wavelength was set at 340 nm. The linear in the
range of 1.733 1 μg/mL-10.832 0 μg/mL （r=0.999 6），the average recovery of isovitexin was 98.01%，RSD1.02%，
the content of isovitexin was 2.928 5 mg/g.
Key words：Bambusa Pervariabilis McClure； isovitexin； HPLC；determination
食品研究与开发
Food Research And Development
2016年 1月
第 37卷第 1期
DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2016.01.035
基金项目：广西高校科学技术研究重点项目（ZD2014113）；河池学院
科研重点课题（2014ZD-N004）
作者简介：黄秀香（1969—），女（壮），教授，硕士，研究方向：天然有机
化学。
撑篙竹（Bambusa pervariabilis McClure），别名稿
竹、油竹、白眉竹、花眉竹等，分布在广西、广东、福建等
地的沿河岸或低丘地带，其竹叶被《中华本草》、《广西
药用植物名录》收载为传统中药[1]，具有清热、除烦、止
呕、止血等功效。竹叶提取物含有黄酮类化合物、生物
碱、酚酸类化合物等，其中，以异荭草苷、荭草苷、异牡
荆苷、牡荆苷为代表的黄酮类化合物具有抗自由基、
抗氧化、抗疲劳、抗菌、抗病毒等功效[2]。同时，黄酮类
化合物还应用于具有调节血脂、降血糖、增强免疫、抗
炎等功效的保健食品，液体食品中如保健食品口服
液、各种酿造、软饮料、调味品等[3]，竹叶还可用于食品
添加剂作为抗氧化物。本文采用 HPLC测定撑篙竹竹
叶中异牡荆苷的含量，为撑篙竹竹叶的在食品添加剂
的开发利用提供理论参考。
1 材料与方法
1.1 仪器
DXF-4B粉碎机：广州大祥电子机械设备有限公
司；KQ2200DE型数控超声波清洗器：昆山市超声波有
限公司；SHB-Ⅲ循环水式多用真空泵：郑州长城科工
贸有限公司；AE240S型电子天平：奥豪斯仪器上海有
限公司；Agilent 8453 二极管阵列紫外分光光度计、
Agilent 高效液相色谱：美国安捷伦公司。
1.2 试剂与原料
异牡荆苷对照品：贵州迪大生物有限公司；分析
检测分析
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甲醇、色谱甲醇、分析纯冰醋酸：河北四友卓越科技有
限公司；所用水为超纯水。撑篙竹竹叶：采自河池学院
校园龙江河岸，经河池学院覃国乐副教授鉴定为禾本
科植物撑篙竹 Bambusa pervariabilis McClure的叶子。
1.3 方法
1.3.1 样品的处理
将撑篙竹竹叶洗涤干净、晒干、粉碎，过 60 目，
备用。
1.3.2 样品溶液的提取与配制
准确称取 5.000 0 g竹叶粉末，置于 100 mL的烧
杯中，加入石油醚，刚好浸过粉末，超声 30 min，然后减
压抽滤，弃掉滤液，脱去色素和蜡质，向滤渣中加入
30 mL分析纯甲醇，再超声 30 min，减压抽滤，弃掉滤
渣，滤液过 0.45 μm滤膜，定容于 50 mL容量瓶，4℃冰
箱中保存，作为待测样品。
1.3.3 对照品溶液的配制
准确称取异牡荆苷对照品 0.004 3 g，以色谱甲醇
作溶剂于 50 mL容量瓶中溶解定容，分别取 1、1.5、2、
2.5 mL体积，且各自定容于 10 mL容量瓶中，以色谱甲
醇稀释成摩尔浓度为 0.020、0.030、0.040、0.050 mmol/L
的溶液，4℃冰箱中保存，备用。
1.3.4 色谱条件
色谱柱：ZORBAXSB-C18（2.1mm×100mm，3.6μm），
流动相甲醇（A）-0.1 %冰醋酸水溶液（B），梯度洗脱
（0 min~3 min，85 %~70 % B；3 min~6 min，70 %~55 %
B；6 min~9 min，55 %~35 % B；9 min~12 min，35 %~35 %
B；12 min~15min，35 %~70 %B；15 min~18min，70 %~
85 %B），流速 0.6 mL/min，检测波长为 340 nm，柱温为
30℃，进样体积 5 μL。
2 结果与分析
2.1 线性关系考察
将对照品溶液配制成 0.004、0.010、0.015、0.020、
0.025 mmol/L 5个不同浓度，分别精密吸取不同浓度的
异牡荆苷溶液，按 1.3.4色谱条件 HPLC测定其峰面
积，以浓度为横坐标、吸收峰面积为纵坐标制作标准
曲线，线性回归方程为：y=11 427x-0.923 3，线性范围
为 1.733 1 μg/mL~10.832 0 μg/mL，相对系数 r=0.999 6。
异牡荆苷 HPLC测定结果见图 1，异牡荆苷的标准曲
线图见图 2。
2.2 精密度试验
精密吸取 0.020 mmol/L异牡荆苷对照品溶液，在
1.3.4色谱条件下，HPLC测定其峰面积，重复进样 5次，
计算 RSD。RSD=1.85 %，表明仪器精密度良好。
2.3 重复性试验
准确称取 5.000 0 g竹叶粉末 5份，按照 1.3.2提
取与配制样品溶液，在 1.3.4色谱条件下，HPLC测定
异牡荆苷的峰面积，计算 RSD。异牡荆苷 RSD=0.83 %，
表明本方法重复性好。
2.4 加样回收率试验
精密吸取已知异牡荆苷含量的样品溶液 5份，分
别加入已知异牡荆苷含量的对照品，混合均匀，在
1.3.4色谱条件下，HPLC测定峰面积，计算平均回收率
和 RSD。平均回收率=98.01 %，RSD=1.02 %；具有好的
回收率。加样回收率试验结果见表 1，样品及样品加对
照品的 HPLC测定结果见图 3、图 4。
2.5 撑篙竹竹叶中异牡荆苷的含量测定
准确称量 5.000 0 g撑篙竹竹叶放在 100 mL烧杯
中，按方法 1.3.2提取与配制，在 1.3.4色谱条件下测定
峰面积，5次平行试验，取平均值，异牡荆苷的含量为
50
40
30
20
10
0
峰
面
积
/m
AU
11 12 14
时间/min
13
1
350
300
250
200
150
100
50
0
峰
面
积
/m
AU
0 0.005 0.030
浓度/（mmol/L）
0.010 0.015 0.020 0.025
图 1 异牡荆苷的 HPLC色谱图
Fig.1 HPLC chromatograms of isovitexin
图 2 异牡荆苷标准曲线图
Fig.2 The standard curve of isovitexin
样品中
含量/mg
加入量/
mg
测得值/
mg
回收率/%
平均回收
率/%
RSD/%
2.768 7 4.332 8 7.088 2 99.69
2.905 1 4.332 8 7.123 6 97.36
2.924 6 4.332 8 7.186 1 98.35 98.01 1.02
3.028 6 4.332 8 7.261 2 97.69
3.105 8 4.332 8 7.321 4 97.30
表 1 加样回收率试验结果（n=5）
Table 1 The result of recovery rate of isovitexin（n=5）
黄秀香，等：HPLC测定撑篙竹竹叶中异牡荆苷的含量 检测分析
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2.928 5 mg/g。
3 讨论
将异牡荆苷对照品溶液在 190 nm~450 nm 进行
紫外扫描，根据最大吸收波长和参考文献[4-5]，我们
选定了 340 nm作为检测波长，在此波长条件下，所测
定成分与其它成分能较好的分离，且基线稳定，试验
测得异牡荆苷的含量为 2.928 5 mg/g。
本文以高效液相色谱法测定撑篙竹竹叶中异牡
荆苷的含量，方法简单、快速、稳定性、重复性好，结果
较为满意，可用于竹叶黄酮类化合物成分测定和进一
步的研究提供一定的参考。
参考文献：
[1] 孙嘏.撑篙竹(Bambusa pervariabilis McClure)竹叶化学成分及其
生物活性研究[D].北京:中国林业科学研究院,2010:7
[2] 陆柏益,张英,吴晓琴.竹叶黄酮的抗氧化性及其心脑血管药理
活性研究进展[J].林产化学与工业,2005,25(3):120-124
[3] 郭维图, 孙福平.微波提取竹叶黄酮及其在食品加工中的应用
[J].包装与食品机械,2009,27(5) :113-117
[4] 龚金炎,吴晓琴,夏道宗. RP-HPLC法测定竹叶提取物中黄酮类
和酚酸类成分[J].中草药,2010,41(1):63-65
[5] 袁珂,薛月芹,殷明文. RP-HPLC同时测定淡竹叶中 4种黄酮苷
的量[J].中国中药杂志,2008,33(19):2215-2218
收稿日期：2014-08-04
15
12
9
6
3
0
峰
面
积
/m
AU
10 11 16
时间/min
12
1
13 14 15
图 3 样品的 HPLC色谱图
Fig.3 HPLC chromatograms of sample
1.异牡荆苷。
图 4 样品加对照品的 HPLC色谱图
Fig.4 HPLC chromatograms of sample spiked with isovitexin
standard
30
25
20
15
10
5
0
峰
面
积
/m
AU
10 11 16
时间/min
12
1
13 14 15
1.异牡荆苷。
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