全 文 ：复叶耳蕨地上部分总酚含量的分析＊
李辉敏　刘频健
＊基金项目:江西省自然科学基金资助项目 , 项目编号:2007GQY0114
收稿日期:2009-11-18
(九江学院基础医学院　江西九江　332000)
　　摘要:目的:对鳞毛蕨科复叶耳蕨属植物复叶耳蕨地上部分酚类物质进行了分析及含
量测定。方法:样品分别经乙醇 -三氯乙酸的混合液 、 乙醇及水三种溶剂提取 , 以 Folin-
酚法于波长 500nm下测定 , 以没食子酸为标准计算样品中总酚物质的含量;结果:复叶耳
蕨地上部分总酚含量较高 , 以 Folin-酚法测定其酚类物质的含量在 45min内显色稳定性
好 , 平均回归率为 97.56%。结论:该方法简便 , 可用于实际样品的测定。
　　关键词:复叶耳蕨;总酚;含量分析;Folin-酚法
　　中图分类号:R927.2　文献标识码:A　文章编号:1006-3838 (2010)01-0100-(03)
　　复叶耳蕨 (ArachniodesexilisChing)为鳞毛
蕨科复叶耳蕨属植物 , 广泛分布于世界热带和亚
热带湿润区域 , 以亚洲东部和东南部种类最为丰
富 , 我国主要分布于长江流域以南地区及山东 、
河南等省 , 具有清热利湿 , 抗菌消炎 , 镇静作用 ,
民间用于急性黄疸型肝炎 、关节炎 、 腰腿疼 、痢
疾 、烫火伤 、 抗癌等[ 1] 。蕨类植物以全草或地上
部分茎入药 , 含有多种化学成分 , 其中酚类化合
物是药用活性成分之一 。作者对九江地区产复叶
耳蕨地上部分中酚类物质的含量进行分析 , 现报
道如下 。
1　材料及方法 [ 2]
1.1试剂和材料
1.1.1试剂 　Folin-酚试剂.
(1)FolinⅠ试剂:①4%Na2CO3溶液 , ②0.2 mol/
L的 NaOH溶液 , ③1%的 CuSO44 5H2 O溶液 , ④
2%酒石酸钠 。①②等体积混合配成碳酸钠 -氢氧
化钠溶液 , ③④等体积混合配成硫酸铜 -酒石酸
钠溶液 。碳酸钠 -氢氧化钠溶液与硫酸铜 -酒石
酸钠溶液以 50∶1比例混合 , 制成的试剂为 FolinⅠ
试剂。现配现用 。
(2)FolinⅡ试剂:将①50gNa2 WO4 · 2H2 O,
②12.5gNa2 MO4 · 2H2 O, ③350 mL蒸馏水 , ④
85%H3PO425mL, ⑤50 mL浓 HCl均置于磨口洄
流装置中 , 用文火洄流 10 h(洄流过程中不能使
液体沸腾 , 只能维持在缓慢冒气泡阶段)后 , 再
往装置中加入 , ⑥87.4 gLi2 SO4 , ⑦25mL蒸馏
水 、 ⑧数滴液溴 , 沸腾 15min, 以除去过量的溴 ,
最后冷却 , 即为 FolinⅡ试剂 。用 0.1 mol/LNaOH
标定 , 计算出 Folin-酚 Ⅱ的浓度 , 并将 Folin-酚
Ⅱ试剂稀释为 1 mol/L。用棕色试剂瓶保存 , 贴上
标签 , 贮于冰箱内可长期保存。 100μg/mL没食子
酸 , 4-氨基安替比林 -铁氰化钾试剂 (甲液:2%
4-氨基安替比林乙醇液 , 乙液:8%铁氰化钾溶
液), 2% 4-氨基安替比林乙醇溶液 , 8%铁氰化
钾溶液 , 2%铁氰化钾 , 2%FeCl3乙醇溶液。
1.1.2材料　材料采自九江市星子县 , 由九江学
院药学系吴家忠副教授鉴定 , 采集后将样品洗净 ,
切碎 , 80℃烘干 , 粉碎 , 过 80目筛 , 作为待测样
品备用。
1.2方法
1.2.1标准曲线的制备　精确称取一定量没食子
酸对照品 , 用乙醇溶解 , 定容配成没食子酸对照
品储备液 (99.20μg/mL)。分别取对照品溶液
0.1、 0.2、 0.4、 0.6、 0.8及 1.0 mL于干燥试管
中 , 用蒸馏水补足 1mL。另取 1地上部分干燥试
管加 1mL蒸馏水作对照 。分别加入 5 mLFolin-
酚试剂Ⅰ , 于 25℃水浴中 10 min, 后加入 0.5 mL
(总第 88期)(SumN0 88)2010年第 1期No.1, 2010　　　　　　　　　　　　 九江学院学报 (自然科学版)JournalofjiujiangUniversity(naturalsciences)
Folin-酚试剂 Ⅱ , 立即混匀 , 再于 25℃水浴中放
置 30 min, 于 500nm处测样品的吸光度 。测得结
果用最小二乘法作线性回归 , 得方程:Y=1.6×
10
-3X+2.53 ×10-3 , 其线性范围为 0.0159 -
0.1389μg/mL, 线性关系 γ=0.9991。以没食子酸
的含量表示样品中总酚物质的含量。
1.2.2样品处理　 (1)乙醇 -三氯乙酸提取法:
称取样品 0.25 g, 加入 10 mL95%乙醇和 1
mL10%三氯乙酸液体于研钵中匀浆 , 再用 10%三
氯乙酸定容至 25 mL, 静置 0.5 h后 , 过滤 , 待
测 。(2)乙醇提取法:称取 5 g样品 , 置于洄流装
置中 , 加 85%乙醇 110 mL, 80℃水浴中洄流 3 h,
冷却后过滤 , 滤液定容至 100mL待测。(3)水提
取法:称取 5g样品 , 置于具塞锥形瓶中 , 加蒸馏
水 100mL, 置于 80℃水浴中 3h, 冷却后过滤 , 滤
液定容至 100 mL待测 。
1.2.3样液测定　精确吸取滤液 0.2 mL, 用溶液
(乙醇∶三氯乙酸 =2∶3配制)定容至 10 mL。取
1 mL样液加入 5 mLFolin-酚 Ⅰ试剂 , 在 25℃水
浴中放置 10 min, 再加入 0.5 mLFolin-酚 Ⅱ试
剂 , 在 25℃水浴 30 min, 每一样液做两管 , 以确
保实验的准确 , 另取一管加 1 mL定容液做对照
管;依同样步骤加入 FolinⅠ 、 FolinⅡ试剂 , 用对
照管调零 , 测样液的吸光度 , 从回归方程中求得
样液中酚类的含量 (μg)。 (样液含量较高时 , 应
适当稀释倍数 , 使 A值在 0.15 ～ 0.8范围内)。再
进一步计算出 1g样品中酚类物质的含量 (%)。
2　结果
2.1精密度实验　精密吸取没食子酸对照品溶液
0.2ml, 同 “ 1.2.3” 项下进行显色和测定 , 记录
吸光度 A, 吸光度 A的 RSD为 0.85 (n=6)。
2.2重现性实验　精密称取样品 , 按 “1.2.2” 及
“1.2.3” 项下进行样品处理 、 显色和测定 , 记录
吸光度 , 三种样品处理吸光度 A的 RSD分别为
1.8、 1.6、 1.8 (n=6)。
2.3稳定性实验　精密吸取没食子酸对照品溶液
0.2ml, 同 “1.2.3” 项下进行显色 , 分别在 15、
20、 25、 30、 35、 40、 45、 50、 55、 60min内测
定 , 结果表明样品在 15 ～ 45min内稳定。
2.4回收率实验　以复叶耳蕨地上部分乙醇 -三
氯乙酸提取溶液为材料 , 在样液中加适量标准液 ,
按前述操作进行 , 测吸光度 , 计算回收率 , 所得
平均回收率为 96.64, RSD为 1.9 (n=6)。
2.5总酚含量测定结果　乙醇 -三氯乙酸提取法
所得样品总酚含量为 23.36mg/g, 乙醇提取法所
得样品总酚含量为 5.45mg/g, 水提取法所得样品
总酚含量为 14.16mg/g。
3　讨论
本实验结果表明刺头复叶耳蕨地上部分中酚
类成分的含量较高。分别用 3种溶剂提取复叶耳
蕨地上部分酚类物质 , 其总酚含量高低依次为乙
醇 -三氯乙酸液 、 水提液 、 乙醇液 , 其中以乙醇
-三氯乙酸液提取液中的含量明显高于其他两种
溶剂提取液 。由此可见 , 用乙醇 -三氯乙酸液提
取蕨类植物中总酚较为合适 , 而其他两种提取溶
剂仅提取其中部分的酚类物质。
从稳定性实验及重现性实验可看出 Folin-酚
测定蕨类中酚类的含量具有明显的稳定性 , 重现
性好 , 可作为刺头复叶耳蕨质量控制中总酚含量
测定的方法 。此方法仪器要求不高 , 操作简便快
速。
参考文献:
[ 1] 周道年 , 阮金兰 , 蔡亚玲.复叶耳蕨地上部分黄酮类化合物 [ J] .中国药学杂志 , 2008,
43 (16)∶1218.
[ 2] 陈炳华 , 李淑慧 , 林菊霞 , 等.4种鳞毛蕨科植物中总酚含量的分析 [ J] .福建师范大学学
报 (自然科学版), 2003, 19 (1)∶86.
AnalysisofTotalPhenolicsContentin
theAerialPartsofArachniodesExilisChing
(下转第 107页)
·101·李辉敏 , 等:复叶耳蕨地上部分总酚含量的分析
为 “下的去 、用得上 ” 的适宜农村卫生人才。
参考文献:
[ 1] 廖薇薇 , 周燕荣 , 钟晓妮 , 等.忠县农村贫困居民就医行为定性调查 [ J] .重庆医科大学
学报 , 2006, 31 (5):711.
[ 2] 邢海燕 , 沈毅 , 赵华娟 , 等.农村居民就医行为及其影响因素的对应分析 [ J] .中国农村
卫生事业管理 , 2002, 22 (5):12.
[ 3] 岩磊 , 王爽.对医学生到基层就业问题的思考 [ J] .辽宁教育研究 , 2007, (5):102.
TheSurveyandAnalysisonMedicalCareConduct
ofRuralResidentsinJiujiangDistrict
JIANGHongtao, WANGXin, FANWenyan, eta1.
(SchoolofBasicMedicalSciences, JiujiangUniversity, Jiujiang, Jiangxi332000 , China)
ABSTRACT　OBJECTIVE:Tounderstandthestatusofruralresidents medicalcareinJiujiangDistrict.to
analyzetheirsatisfactionwiththeexistingmedicalinstitutions, andtodiscussthefactorsthatinfluencedutilizationof
healthservice.whichOf.ferevidenceforconstructinganewruralcommunityandformulatingsomehealthpolicies.
METHOD:Aquestionnairesurveywasconductedamong1 450menof18townsof9countiesinJiujiangthroughcluster
sampling.RESULTS:39.6%ofourresponderschoseruraldoctorsformedicalcare.59.9%ofthemoptedformedical
institutionsbecauseof“closetohome”.Amongthepatientswhodidnotseedoctors, 78.83%ofthemdidnottreatthem-
selvesfor“self-feltlightly”.Theruralresidentswerehighlysatisfiedwithruraldoctorsworkingintownshiphospitals
andvilagechinicsandratesofsatisfactionsatisifactionwererespectively44.3%and60.1%.CONCLUSION:The
mainreasonwastheavailabilityofhealthservicewhytheruralresidentswantedtochoosemedicalinstitutionsandanother
wasfamilyeconomicconditionwhichaffectedtheirmedicalcareconducttoacertainextent.Atthesametime, therural
residents awarenessshouldbefurtherenhanced, ruralhealthfacilitiesshouldbeconstructed, andouratitudeshouldbe
corected.
KEYWORDS　Ruralresidents;Medicalcareconduct
(责任编辑　胡安娜)
(上接第 101页)
LIHui-min　LIUPin-jian
(SchoolofBasicMedicalSciences, JiujiangUniversity, Jiujiang, Jiangxi332000 , China)
ABSTRACT　OBJECTIVE:AnalysisoftotalphenolicscontentintheaerialpartsofArachniodesexilisChing
wasconducted.METHOD:ExtractedbyEtOH-TCA、 EtOH、 watersolvent, phenolicsquantitatedbyFolin-phenol
reagentat500nm.Thegallicacidwasusedasastandardcompound.RESULTS:Theresultsshowedthecontainoftotal
phenolicsintheaerialpartsofArachniodesexilisChingwashigh.Thestabilityofproducedcolorwasgoodin45minutes,
therecoverywas97.56%.CONCLUSION:Folin-phenolmethodwassuitableforcontentanalysisoftotalphenolics
inArachniodesexilisChing.
KEYWORDS　Arachniodesexilisching;Totalphenolics;Contentanalysis;Folin-phenolmethod
(责任编辑　胡安娜)
·107·江洪涛 , 等:九江地区农村居民就医行为的调查分析