全 文 ：[文章编号 ] 1671— 8178(2007)01— 0110— 03
竹节参皂苷抗氧化作用的实验性研究
闵　静　敖敏章　胡菁　汪忠波　黄世英
(湖北职业技术学院 ,湖北 孝感 432000)
[摘 要 ] 目的:观察竹节参的有效成分竹节参总皂苷( tota l saponins o f Panax japonicus, TSPJ)的抗氧化
作用;方法:通过小鼠血清 GSH -PX、SOD、MDA检测观察 TSPJ的抗氧化作用. 结果:TSPJ(75, 150, 300mg
kg -1) ig能显著升高血清 GSH - PX , SOD活性 ,降低血清 MDA含量. 结论:TSPJ具有明显的抗氧化作
用 ,与空白对照组比较差异性显著。
[关键词 ] 竹节参总皂苷;抗氧化作用;血清 GSH - PX、SOD、MDA;小鼠
[中图分类号 ] R284. 2;R285 [文献标识码 ] A
[收稿日期 ] 2007 -01 - 22
[作者简介 ] 闵静(1971— ), 女 ,湖北应城人 , 湖北职业技术学院医学院讲师 , 华中科技大学生物医学工程专业在读研究生 ,主
要研究抗炎药物及病理生理学机制。
　　竹节参别名:竹根七 、萝卜七 、峨三七 (四川 )。
Panax japonicum C. A. M ey. ──五加科 A ra liaceae,以
其根茎状如竹节而得名。无臭 ,味苦 、后微 、性温 ,有
滋补强壮 、散瘀止痛 、止血 、祛痰功能。用于病后虚
弱 、肺结核咯血 、咳嗽痰多 、跌打损伤。目前国内对
于竹节参的报道仅限于复方制剂 ,而且抗氧化内容
极少。本文对其有效成分竹节参总皂苷 (TSPJ)的抗
氧化能力进行研究。
1　材料与方法
1. 1　动物
实验用小鼠为昆明种小鼠 ,体重 (18 ～ 22)g,雌
雄各半 ,湖北省动物实验中心 ,合格证号:SCXK(鄂)
2003 -0005。
竹节参总皂苷( tota l saponins of Panax japonicus,
TSPJ),华中科技大学药理实验室从竹节参的干燥根
茎中提取 ,纯度 33. 3%;褪黑素 (sigma公司 )作为阳
性对照;[ 1] SOD检测试剂盒 (批号:20061027,南京建
成生物工程研究所 );MDA 测定试剂盒 (批号:
20061025,南京建成生物工程研究所 );GSH - PX测
定试剂盒 (批号:20061026,南京建成生物工程研究
所 );其他试剂均为分析纯 。
1. 2　仪器
电子天平 (SARTOR2US , BP211D), 德国生产;
SHZ -Ⅲ型循环水真空泵 (上海伊利仪器制造有限公
司 );CENTRIFUGE TDL - 5型离心机;723分光光度
仪 ,上海第三分析仪器厂生产;GF -D200半自动生
化分析仪 (山东高密彩虹分析仪器有限公司)。恒温
水浴箱 ,南京高新科技开发有限公司。
1. 3　实验方法
连续给药 10d,末次给药后 1小时 ,摘眼球取血 ,
分离血清 。
1. 3. 1　谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH - PX)活性测定
谷胱甘肽过氧化物酶(GSH -PX)可以促进过氧
化氢 (H2O 2)与还原型谷胱甘肽 (GSH)反应生成
H2O及氧化型谷胱甘肽 (GSSG),谷胱甘肽过氧化物
酶的活力可用其酶促反应的速度来表示 ,测定此酶
促反应中还原型谷胱甘肽的消耗可求出酶的活
力 。[ 2] , [ 3]
H2O2 +2GSH→2H 2O +GSSG
GSH - PX的活力以催化 GSH 的反应速度来表
示 。由于这二个底物在没有酶的条件下 ,也能进行
氧化还原反应 (称非酶促反应 ),所以最后计算此酶
活力时必须扣除非酶促反应 ,所引起的 GSH减少的
部分 。GSH和二硫代二硝基苯甲酸作用生成 5 -硫
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第 10卷第 1期 湖 北 职 业 技 术 学 院 学 报 N o. 1 Vo.l 10
2007年 3月 Journa l o fHube iVoca tiona l- Technical Co llege M ar. 2007
代二硝基苯甲酸阴离子呈现较稳定的黄色 , 在
412nm处测吸光度即可算出 GSH的量。按试剂盒说
明书操作方法测定。规定每 2μL血浆在 37℃反应
5m in,扣除非酶促反应的作用使反应体系中 GSH浓
度降低 1μmo l /L为 1个酶活力单位(U)。单位为 U /
m l。
1. 3. 2　超氧化物歧化酶(SOD)活性测定
通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧
阴离子自由基 (O -2 ),后者氧化羟胺形成亚硝酸盐 ,
在显色剂的作用下呈现紫红色 ,用可见光分光光度
计 550nm处测其吸光度 。当被测样品中含 SOD时 ,
则对超氧阴离子自由基有专一性的抑制作用 ,使形
成的亚销酸盐减少 ,比色时测定管的吸光度值低于
对照管的吸光度值 ,通过公式计算可求出被测样品
中的 SOD活力。单位为 U /m l。
1. 3. 3　丙二醛 (MDA)含量的测定
通过过氧化脂质降解产物中的丙二醛 (MDA)可
与硫代巴比妥酸 (TBA)缩合 , 形成红色产物 , 在
532nm处有最大吸收峰 。按南京建成生物工程研究
所提供的试剂盒检测方法检测。单位为 nmol /m l。
1. 4　统计方法
数据以 x ±s表示 ,应用 SPSS12. 0统计软件包进
行分析。
2　结果
2. 1　 TSPJ对小鼠血清 GSH - PX水平测定结果
阳性对照组与空白组之间差异性极显著 (P <
0.01);与空白组比较:TSPJ小剂量组 、中剂量组血清
GSH - PX差异性显著(P <0. 05), TSPJ大剂量组差
异性极显著 (P <0. 01),见表 1。与剂量变化呈线性
关系 ,见图 1。
表 1　TSPJ对小鼠血清 GSH - PX、SOD活性 、MDA含量测定 (x±s)
组别 Dose /(mg kg- 1) n GSH - PX /U m l-1 SOD /U m l- 1 MDA /nmo l m l-1
空白组 / 10 424. 19±45. 04 59. 49±5. 91 5. 08±1. 1
褪黑素组 5 10 887. 04±122. 83** 104. 12±5. 44** 1. 55±0. 46**
TSPJ组 1 25 10 485. 28±35. 24* 72. 71±3. 63* 2. 91±1. 22*
TSPJ组 2 50 10 595. 99±96. 89* 83. 97±5. 1** 2. 59±0. 64*
TSPJ组 3 100 10 739. 93±114. 69** 90. 92±5. 46** 2. 32±0. 85*
　　注:和空白组比较:* P <0. 05, **P <0. 01
图 1　TSPJ对小鼠血清 GSH - PX活性影响
2. 2　TSPJ对小鼠血清 SOD水平测定结果
阳性对照组与空白组之间差异性极显著 (P <
0.01);与空白组比较:TSPJ小剂量组血清 SOD差异
性显著 (P<0. 05), TSPJ中剂量组 、大剂量组差异性
极显著 (P <0. 01),见表 1。与剂量变化呈线性关
系 ,见图 2。
图 2　TSPJ对小鼠血清 SOD活性影响
2. 3　TSPJ对小鼠血清 MDA水平测定结果
阳性对照组与空白组之间差异性极显著 (P <
0.01);与空白组比较:TSPJ小剂量组 、中剂量组 、大
剂量组血清 MDA差异性显著 (P <0. 05), 见表 1。
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闵　静　敖敏章　胡　菁　汪忠波　黄世英:竹节参皂苷抗氧化作用的实验性研究
与剂量变化呈线性关系 ,见图 3。
图 3　TSPJ对小鼠血清 MDA含量影响
3　讨论
自由基是机体代谢过程中产生的一类内源性物
质 ,适量的自由基在杀灭细菌 、调节免疫力方面起着
重要作用。但在一些病理情况下 ,机体内自由基的
量明显增多 ,对生物大分子产生超氧化反应 ,从而导
致细胞结构和功能的改变 ,引起许多的疾病性发生 ,
如机体的免疫功能下降 、肿瘤和炎症等的发生都与
自由基有关 。[ 4]研究表明 ,过量的自由基能造成机体
免疫功能的紊乱 。[ 5]所以 ,寻找外源物质来抑制体内
自由基的氧化作用以保护机体 ,已成为人们努力的
方向。[ 6] , [ 7] , [ 8] , [ 9]动物体内存在着有效地清除自由
基的抗氧化酶系统 ,其中主要的有 GSH - PX、SOD
等 。MDA是自由基作用于生物膜中的多不饱和脂
肪酸(PUFA)引发的脂质过氧化作用而产生的脂质
过氧化物 , MDA含量的多少可显示脂质过氧化作用
程度的大小 ,间接反映出细胞结构的受损害程度。
实验表明竹节参总皂苷(TSPJ)能显著升高血清 GSH
- PX, SOD活性 ,降低血清 MDA含量;可直接清除
自由基 ,并抑制脂质过氧化作用 ,具有一定的抗氧化
能力 ,这可能与其治疗风湿性疾病机理之一 ,还有待
进一步研究 。
[参考文献 ]
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(特约审稿人:沈建林)
Expermi entalResearch on Anti- ox idation Effect of
Total Sapon ins of Panax Japonicus
M IN Jing　AOM ing - zhang　HU Jing　WANG Zhong - bo　HUANG Shi -y in
(Medica lSchoo l, HubeiVocational- Techn ica lCo llege X iaogan, Hubei 432000)
Abstract:Purposes:To obse rve the an ti - ox idation effect o f TSPJ. Methods:By m ice b lood plasm a GSH -
PX , SOD andMDA to observe the anti - ox idation effect o fTSPJ. Results:TSPJ (75, 150, 300mg kg-1) can en-
hance activities o fGSH - PX and SOD and decrease the percentage ofMDA. Conclusions:TSPJ show s obvious anti
- oxidation effect, and there exist g rea t differences be tw een w ith TSPJ and w ithout TSPJ.
KeyW ords:Tota l Saponins o f Panax Japonicus;An ti - ox ida tion E ffect;GSH -PX , SOD andMDA;M ice.
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湖北职业技术学院学报 2007年第 1期 第 10卷第 1期