全 文 ：2016年9月第22卷第17期 September.2016 Vol.22 No.17
龙船花为茜草科（Rubiaceae）龙船花属（Ixora）植物Ixora
chinensis Lam.[1]，其花具有清热凉血，散瘀止痛功效，主治高
血压病、月经不调、闭经、跌打损伤、疮疡疖肿[2-3]。龙船花作为
药用已有悠久的历史，历代药学专著及植物志，如《新修本
草》《本草纲目》等都有关于龙船花的记载，在民间应用广泛。
但龙船花药材目前尚未有法定的质量标准，而且尚未见质量
分析方面的文献报道。在之前笔者对龙船花化学成分研究中
发现其含有熊果酸和齐墩果酸成分，而熊果酸和齐墩果酸是
两种五环三萜化合物，具有抗炎、保肝、抗肿瘤、抗艾滋、抗
菌、抗溃疡、降血糖和降血脂等药理活性[4－12]。由于熊果酸和齐
墩果酸互为同分异构体，结构相似，性质相近，用一般的薄层
色谱法难以分离，本文采用原位预处理法，建立龙船花中同
时鉴别熊果酸和齐墩果酸的薄层色谱方法；采用高效液相色
谱法建立同时测定龙船花中熊果酸和齐墩果酸含量的方法，
为制定龙船花药材质量标准、研究和利用药材资源提供依
据。
1 仪器与材料
1.1 仪器 高效液相色谱仪LC-10AVp、SPD-10AVP紫外检
测器（日本岛津公司）；威玛通用多媒体色谱数据工作站（南
龙船花中熊果酸和齐墩果酸的同时分析*
李文琪1，蒋珍藕1，2，汤婷婷3
（1.广西中医药研究院，广西 南宁 530022；
2.广西中药质量标准研究重点实验室，广西 南宁 530022；
3.广西中医药大学，广西 南宁 530222）
[摘要] 目的：研究同时分析龙船花中熊果酸和齐墩果酸的定性、定量方法，为制定龙船花质量标准奠定实
验基础。方法：采用原位预处理－薄层色谱法同时鉴别、采用高效液相色谱法同时测定龙船花中熊果酸和齐墩果
酸。结果：薄层鉴别中，熊果酸、齐墩果酸能够很好地被分离，可以同时被检识；含量测定中，熊果酸和齐墩果酸
分别在0.6941～6.9412 μg、0.3826～3.8264 μg范围内呈良好线性关系(r=0.9990，n=5)，平均回收率（n=6）分别为
97.47％（RSD%为1.58％）、101.08%（RSD%为2.01％）。结论：所建立的定性、定量分析方法简便、易行、准确、重复性
好，可用于龙船花药材质量控制。
[关键词] 龙船花；熊果酸；齐墩果酸；薄层色谱；高效液相色谱
[中图分类号] R284 [文献标识码] A [文章编号] 1672-951X（2016）17-0040-03
SynchronizatioAnalysis of Ursolic acid and Oleanolic Acid
in Flos Ixorae Chinensis
LI Wen-qi1, JIANG Zhen-ou1,2, TANG Ting-ting3
(1. Guangxi Institute of Chinese Medicine and Pharmaceutical Science, Nanning Guangxi 530022, China;
2. Guangxi Key Laboratory of Tradtitonal Chinese Medicaine Quality Stardands, Nanning Guangxi 530022, China;
3. Guangxii University of Chinese Medicine, Nanning Guangxi 530222, China)
[Abstract] Objective: To study the methods of synchronization snalysis of ursolic acid and oleanolic acid in
Flos Ixorae Chinensis and provide the basis for the establishment of quality standard. Methods: In situ
pretreatment -TLC and HPLC were adopted to identify and determine the content of both ursolic acid and
oleanolic acid in Flos Ixorae Chinensis. Results: In TLC, the ursolic acid and oleanolic acid could be well
separated and identified simultaneously. In HPLC, the linear ranges of oleanolic acid and ursolic acid (r=0.9990,
n=5) were 0.6941-6.9412 μg and 0.3826-3.8264μg respectively, and the average recovery rates (n=6) were 97.47％
(RSD=1.58％) and 101.08％(RSD=2.01％) respectively. Conclusion: The established methods are simple, reliable,
accurate and reproducible and can be used to control the quality of Flos Ixorae Chinensis.
[Keywords] Flos Ixorae Chinensis; ursolic acid; oleanolic acid; TLC; HPLC
*基金项目：1.广西卫生厅中医药科技专项（GZPT13-31）；广西
中药质量标准研究重点实验室基金项目（桂中重科201102）
通讯作者：蒋珍藕，E-mail：zhenoujiang@163.com
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中药制剂与药理研究
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DOI:10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2016.17.013
2016年9月第22卷第17期 September.2016 Vol.22 No.17
宁市威玛龙色谱科技有限公司）；KQ3200DE型数控超声清洗
器（昆山市超声仪器有限公司）；LIBROR AEL-200万分之一
电子天平（日本岛津公司）；SHIMADZU AUW220D十万分之一
天平（日本岛津公司）；电热恒温干燥箱（上海精密实验设备
有限公司）；ZF-2型三用紫外仪（上海市安亭电子仪器厂）；
YOKO－ZS薄层色谱成像仪（武汉药科新技术开发有限公司）。
1.2 材料 熊果酸对照品（批号110742-201421，供含量测定
用，含量以93.8%计），齐墩果酸对照品（批号110709-201206，
供含量测定用，含量以94.9%计），均由中国食品药品检定研
究院提供。甲醇为一级色谱纯，水为重蒸水，其余所用试剂均
为分析纯。薄层层析硅胶G预制板（批号20121108，青岛海洋
化工有限公司），薄层层析硅胶G（化学纯，批号060320，青岛
海洋化工有限公司）。
本实验所用龙船花药材样品均采自广西南宁市郊区，经
广西中医药研究院方鼎和赖茂祥研究员鉴定为茜草科龙船
花属植物龙船花Ixora chinensis Lam.的花。阴干，备用。
2 方法与结果
2.1 薄层鉴别
2.1.1 供试品溶液的制备 取样品粉末1 g，加乙醇30 mL，超
声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇1 mL使溶解，
即得。
2.1.2 对照品溶液的制备 取熊果酸、齐墩果酸对照品，分
别加无水乙醇制成每1 mL含1 mg溶液，即得。
2.1.3 薄层原位预处理 吸取供试品溶液5 μL、齐墩果酸对
照品溶液和熊果酸对照品溶液各3 μL，分别点于同一硅胶G
薄层板上。将薄层板点样的一端浸入1%碘-二氯甲烷溶液约
12~15 mm，使溶液浸过迅速取出，立即覆以一玻璃板，30 min
后取下玻璃板，挥去薄层板上残留的溶液。
2.1.4 薄层色谱条件 以甲苯─乙酸乙酯─冰醋酸（14∶4∶
0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在
105℃加热至斑点清淅，置紫外灯（365 nm）下检视，供试品色
谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑
点。
2.1.5 薄层试验 取10批龙船花供试样品分别制成供试品
溶液，按上述方法进行薄层试验。（见图1）
图 1 龙船花薄层色谱图（紫外光 365 nm下）
2.2 含量测定
2.2.1 色谱条件和系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合
硅胶为填充剂（KromasiL C18柱，250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动
相：甲醇－乙腈－0.5%醋酸铵溶液（12∶67∶21）；检测波长：210
nm；柱温：室温；流速：1.0 mL·min－1。对照品溶液和供试品溶
液均进样20 μL。在上述色谱条件下，供试品中齐墩果酸与熊
果酸及其它杂质的分离度大于1.5，理论板数按熊果酸峰计算
应不低于8000，溶剂不产生干扰。（见图2）
A.对照品；B.供试品；C.溶剂；1.齐墩果酸；2.熊果酸
图 2 龙船花样品高效液相色谱图
2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取齐墩果酸对照品5.04 mg
（含量以94.9%计）、熊果酸对照品9.25 mg（含量以93.8%计），
置25 mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对
照品贮备溶液。
2.2.3 供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）0.5 g，精
密称定，精密加入甲醇25 mL，称定重量，超声30 min，放冷，再
称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即
得。
2.2.4 线性关系考察 精密量取“2.2.2”项下的对照品贮备
溶液1、2、5、7、10 mL，分别置于10 mL量瓶中，加甲醇稀释至
刻度，摇匀，分别作为对照品溶液，按上述色谱条件分别进
样20 μL测定。以进样量(μg)为横坐标(X)，峰面积为纵坐标
(Y)，进行线性回归。表明2种成分在各自线性范围内与峰面积
均呈良好的线性关系。（见表1）
表 1 龙船花 2种成分的线性回归方程
成分 回归方程 r 线性范围(μg)
齐墩果酸 Y=210470X-4701.4 0.9990 0.3826～3.8264
熊果酸 Y=210038X-6361.4 0.9990 0.6941～6.9412
2.2.5 精密度试验 精密吸取同一供试品溶液（批号1#），进
样20 μL，连续测定6次，测得齐墩果酸和熊果酸峰面积RSD%
分别为1.21%、0.41%。表明仪器精密度良好。
2.2.6 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液（批号1#），在
0、1、2、4、6、24 h各进样20 μL，测得齐墩果酸和熊果酸峰面积
RSD%分别为1.06%、1.39%。表明供试品溶液在24 h内稳定。
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2.2.7 重复性试验 取同一批样品（批号1#）6份，按2.2.3项
下制备供试品溶液，按2.2.1项下色谱条件进样测定齐墩果酸
和熊果酸含量，测得2种成分含量的平均值分别为1.7368mg·g－1、
6.5244 mg·g－1，RSD%分别1.80%、1.90%。表明重复性较好。
2.2.8 加样回收试验 精密称取重复性试验项下的样品（批
号1#）约0.25 g，平行取6份，精密称定，分别加入一定量的齐
墩果酸和熊果酸对照品溶液，按“2.2.3”项下方法提取、测定，
计算回收率。（见表2）
表 2 龙船花中 2种成分的加样回收率
成分 取样量(mg) 原含量(mg) 加入量(mg) 测得量(%) 回收率(%)
齐墩果酸 0.2527 0.4389 0.4517 0.9002 101.13
0.2520 0.4377 0.4517 0.8931 100.82
0.2501 0.4344 0.4517 0.8976 102.54
0.2505 0.4351 0.4517 0.9050 104.02
0.2567 0.4458 0.4517 0.8895 98.23
0.2517 0.4372 0.4517 0.8878 99.76
熊果酸 0.2527 1.6487 1.5477 3.1565 97.42
0.2520 1.6441 1.5477 3.1416 96.76
0.2501 1.6318 1.5477 3.1580 98.61
0.2505 1.6344 1.5477 3.1799 99.86
0.2567 1.6748 1.5477 3.1547 95.62
0.2517 1.6422 1.5477 3.1862 96.52
2.2.9 样品测定 取10批龙船花药材样品0.5 g，各2份，精密
称定，按“2.2.3”项下制备供试品溶液，按“2.2.1”项下色谱条
件进样测定齐墩果酸和熊果酸含量。（见表3）
表 3 样品测定结果 （n=2）
样品 熊果酸含量(mg· -1)RAD(%) 齐墩果酸含量(mg·g-1)RSD(%)
1﹟ 6.4727 1.33 1.7311 1.44
2﹟ 6.4592 0.71 1.6289 0.55
3﹟ 6.8280 0.20 1.7012 0.08
4﹟ 7.5755 0.96 1.8839 1.14
5﹟ 5.6656 0.95 1.2921 0.61
6﹟ 7.4037 0.03 1.8587 0.03
7﹟ 6.3367 0.04 1.6050 0.05
8﹟ 6.6977 0.61 1.6706 0.66
9﹟ 6.7484 0.44 1.7037 0.42
10﹟ 6.5866 0.68 1.6625 0.42
3 讨 论
由于熊果酸和齐墩果酸是同分异构体，结构相似，性质
相近，用一般的薄层色谱法难以分离，而采用本文的原位预
处理-薄层色谱方法，熊果酸和齐墩果酸能够很好地被分离,
可以同时被检识。而且重复性和耐用性均良好。
3.1 液相条件的选择 参照《中国药典》（2010年版一部）“木
爪”“枇杷叶”“翼首草”等药材项下，选择210 nm作为测定波
长；经比较试验，选用Kromasil C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色
谱柱；经对流动相甲醇-0.2％醋酸溶液（82.5∶17.5）、甲醇-水-
冰醋酸-三乙胺（265∶35∶0.1∶0.05）、甲醇-乙腈-0.5%醋酸铵溶
液（12∶67∶21）、甲醇-0.1 mol/L乙酸铵溶液（85∶15）等的比较
试验，选择甲醇-乙腈-0.5%醋酸铵溶液（12 ∶67 ∶21）为流动
相；经对流速1.0、0.8、0.6、0.5、0.4mL·min－1进行考察，选择流速为
1.0 mL·min－1。
3.2 供试品溶液制备方法的考察 分别考察了提取溶剂（甲
醇、乙醇）、提取方法（超声、回流、浸渍）、提取时间（30、45、
60 min），结果发现采用甲醇25 mL超声处理30 min，所测成分
可达到最佳提取效率。
本文所建立的龙船花中齐墩果酸和熊果酸的薄层色谱
同时鉴别、高效液相色谱同时测定含量的方法，操作简便，准
确、可行，可用于控制龙船花药材的质量。
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（收稿日期：2016-01-05 编辑：蒋孟良）
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