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常春卫矛与爬行卫矛的镇痛抗炎作用及急性毒性研究



全 文 :- α含量降低(P < 0. 05) ,提示槌果藤抗类风湿性关节炎作用可
通过抑制 TNF - α 的产生达到。近年来,粘附分子(Adhesion
molecules,ADMs)在 RA 发病中受到普遍关注,Aori 等[10]发现,
sICAM -1 在 RA 患者外周血中水平与其关节破坏轻重程度呈正
相关,动物实验和临床前期试验均证实,抗 sICAM - 1 单抗可成
功阻断及减轻 RA 的严重程度。本研究结果显示与对照组相比,
槌果藤可减少外周血中 sICAM - 1 的含量(P < 0. 05) ,提示槌果
藤可通过抑制 sICAM -1 产生达到抗 RA的作用。
通过本实验,我们可看到 AA性关节炎大鼠模型血清中 TNF
- α及 sICAM -1 明显增高,两者在 RA 的发病和关节损伤中起
着重要作用。经槌果藤治疗后,血清中 TNF - α 及 sICAM - 1 含
量明显下降,提示其可通过降低外周血中炎性细胞因子 TNF - α
及 sICAM -1 的产生,达到减轻炎性细胞浸润,抑制滑膜组织增
生,减轻软骨和骨破坏,从而对 AA 型关节炎大鼠模型起到了治
疗作用,这为进一步探讨槌果藤治疗类风湿性关节炎的机制提供
理论基础。
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收稿日期:2011-09-27; 修订日期:2011-12-13
基金项目:广西壮族自治区自然科学基金资助
(No. 2010GXNSFA013224) ;
广西壮族自治区科学研究与技术开发计划项目资助
(No. 0815005 - 2 - 6)
作者简介:农毅清(1968-),女(壮族),广西宁明人,现任南宁食品药品检验
所副主任药师,学士学位,主要从事中药新产品开发及质量标准研究工作.
* 通讯作者简介:蒋 林(1965-) ,男(汉族) ,广西荔浦人,现任广西中医
学院制药厂教授级高级工程师,学士学位,主要从事药品食品开发工作.
常春卫矛与爬行卫矛的镇痛抗炎作用及急性毒性研究
农毅清1,蒋 林2* ,吴玉强2,钟正贤3
(1.南宁食品药品检验所,广西 南宁 530001; 2. 广西中医学院制药厂,广西 南宁 530023;
3. 广西中医药研究院,广西 南宁 530023)
摘要:目的 研究常春卫矛和爬行卫矛的镇痛、抗炎作用及急性毒性。方法 巴豆油所致小鼠耳廓肿胀法,2%醋酸所致小
鼠扭体法,对比研究常春卫矛和爬行卫矛药材的抗炎镇痛作用;小鼠灌胃给药法,测定常春卫矛和爬行卫矛药材的最大
给药量。结果 在采用相同给药剂量下实验表明,常春卫矛和爬行卫矛均能抑制巴豆油引起的小鼠耳廓肿胀;减少醋酸
所致小鼠扭体次数具有明显的抗炎、镇痛作用。急性毒性实验结果:常春卫矛最大给药量为 161. 4 g·kg -1,爬行卫矛最
大给药量为 321. 8 g·kg -1。结论 常春卫矛和爬行卫矛均具有抗炎镇痛作用,两者的急性毒性都很小,这为常春卫矛替
代爬行卫矛作为扶芳藤药材用于抗炎、镇痛方面提供了药理学实验依据。
关键词:常春卫矛; 爬行卫矛; 抗炎; 镇痛; 急性毒性
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2012. 06. 028
中图分类号:R285. 5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2012)06-1384-02
扶芳藤是广西常用药材,临床上常用植物爬行卫矛 Euony-
mus fortunei (Turcz.)Hand. - Mazz.的地上部分入药,具有舒筋活
络,止血消淤功效[1]。常春卫矛为卫矛科植物常春卫矛 Eueny-
mus Hederaceus Champ ex Benth 的地上部分,具有补肝肾,强筋
骨,活血调经功效[2]。由于扶芳藤近年来规模化应用,爬行卫矛
资源已日见匮乏。鉴于文献记载爬行卫矛与常春卫矛具有相同
的功效,生药学特征和物质基础接近,吴玉强等[3,4]对常春卫矛
与爬行卫矛提取物免疫调节抗疲劳作用和止血消淤药效进行了
对比研究,证明均具有抗凝血和活血化淤作用;黎明等[5]对常春
卫矛农药残留及重金属含量进行了分析研究。本实验对两种卫
矛属植物进行抗炎、镇痛药效作用对比研究,以期发现两种药材
药理作用的相似性或差异性,为临床应用提供新的用药途经,从
而更好地深度开发利用常春卫矛。现报道如下。
1 材料
1. 1 药物与试剂 常春卫矛 50%乙醇提取物,1. 886 g 药材 /g
膏;爬行卫矛 50%乙醇提取物,3. 022 g 药材 /g 膏,均由广西中
医学院制药厂提供。实验时称量一定量药膏加蒸馏水研磨后用
蒸馏水配制成实验所需浓度。阳性药阿斯匹林,为武汉远大制药
集团有限公司产品,批号:081101。
1. 2 仪器 FA1004 万分之一天平,上海精科天平厂产品。
1. 3 动物 昆明种小鼠,体质量 18 ~ 22 g,雌雄各半,清洁级。实
验小鼠由广西医科大学实验动物中心提供,合格证号:SCXK 桂
2003 - 0002。小鼠分性别饲养于空调实验室内,室温(22 ± 2)℃,
相对湿度(60 ± 2)%,喂颗粒标准饲料,自由饮水和摄食。
1. 4 统计方法 实验所得数据采用 PEMS3. 1 统计软件进行分
析,各用药组与空白对照组或模型组之间采用 t 检验,进行差异
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时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 6 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL. 23 NO. 6
显著性比较。
2 方法与结果
2. 1 对巴豆油所致小鼠耳廓肿胀的抑制作用[6] 取小鼠 80 只,
随机均分为 8 组,分别设为常春卫矛高、中、低剂量(32. 0,16. 0,
8. 0 g生药 /kg)组,爬行卫矛高、中、低剂量(32. 0,16. 0,8. 0 g 生
药 /kg)组,阳性药阿司匹林(200 mg /kg)组和空白对照组,每组
10 只小鼠。用药各组每天灌胃给药 1 次,空白对照组给予等体
积蒸馏水,连续给予 7 d。于末次给药 30 min 后,用微量注射器
取 0. 05 ml 2%巴豆油溶液涂于小鼠右耳,待 4 h后处死小鼠。立
即用口径为 8 mm的打孔器,沿着小鼠左右耳廓相同部位打孔取
材,然后在电子天平上分别称重,以两耳片重量(mg)的差值作为
肿胀程度指标,并求出百分抑制率(%)。结果见表 1。
表 1 常春卫矛和爬行卫矛对巴豆油引起小鼠耳廓肿胀的影响(珋x ± s)
组别 剂量 C / g·kg -1 肿胀度 m /mg 抑制率(%)
空白对照 - 21. 3 ± 6. 1 -
阿司匹林 0. 2 12. 6 ± 6. 9** 40. 8
常春卫矛 32. 0 10. 2 ± 7. 2**▲ 52. 1
16. 0 11. 6 ± 3. 7**▲ 45. 5
8. 0 13. 3 ± 3. 8** 37. 5
爬行卫矛 32. 0 16. 5 ± 3. 0* 22. 5
16. 0 16. 1 ± 2. 6* 24. 4
8. 0 15. 0 ± 3. 2* 29. 5
与模型组比较,* P < 0. 05;**P < 0. 01;与爬行卫矛比较,▲ P <
0. 05;n = 10
结果表明,与空白对照组比较,常春卫矛、爬行卫矛高中低剂
量组和阳性药阿司匹林组均能明显抑制巴豆油所致小鼠耳廓肿
胀度,抑制率在 22. 5% ~ 52. 1%之间。提示常春卫矛和爬行卫
矛均有明显的抗炎作用。与爬行卫矛比较,常春卫矛高中剂量组
抗炎作用明显比爬行卫矛强,具有显著性差异。
2. 2 对醋酸所致小鼠扭体次数的影响[7] 取小鼠 80 只,随机均
分为 8 组,分别设为常春卫矛高,中,低剂量(32. 0,16. 0,8. 0 g生
药 /kg)组,爬行卫矛高,中,低剂量(32. 0,16. 0,8. 0 g 生药 /kg)
组,阳性药阿司匹林(200 mg /kg)组和空白对照组,每组 10 只小
鼠。每天灌胃给药 1 次,空白对照组给予等体积蒸馏水,连续给
予 7 d。于末次给药后 1 h,每只小鼠腹腔注射 0. 6%醋酸溶液 0.
2ml /只,立即观察并记录 20 min 内各小鼠的扭体次数。比较给
药物组与对照组之间的差异,评价受试药物的镇痛作用。结果见
表 2。
表 2 常春卫矛和爬行卫矛对小鼠的镇痛作用(珋x ± s)
组别 剂量 C / g·kg -1 20min内扭体 /次数
空白对照 - 19. 6 ± 7. 2
阿司匹林 0. 2 6. 6 ± 4. 1***
常春卫矛 32. 0 9. 6 ± 4. 7**△
16. 0 12. 2 ± 5. 4*△
8. 0 14. 7 ± 7. 4
爬行卫矛 32. 0 10. 7 ± 4. 8**
16. 0 13. 0 ± 4. 6*
8. 0 13. 7 ± 7. 0
与模型组比较,* P < 0. 05;**P < 0. 01;与爬行卫矛比较,▲ P <
0. 05;n = 10
结果表明,与空白对照组比较,常春卫矛高、中剂量组,爬行
卫矛高、中剂量组和阿司匹林均能明显减少醋酸所致小鼠扭体次
数,提示常春卫矛和爬行卫矛均有明显的镇痛作用。与爬行卫矛
比较,常春卫矛镇痛作用强度与爬行卫矛相当,差异不显著。
2. 3 常春卫矛和爬行卫矛药材急性毒性实验 常春卫矛和爬行
卫矛经小鼠预试后,另取 60 只小鼠,雌雄各半,分为 3 组。分别
设空白对照组,常春卫矛和爬行卫矛组,每组 20 只小鼠 。以常
春卫矛最大浓度(1. 35 g / ml) ,爬行卫矛最大浓度(2. 68 g / ml) ,
均以最大体积(0. 4 ml / 10 g体重)给各组小鼠灌胃给药,空白对
照组给予同体积蒸馏水,24 h 内连续用药 3 次,连续观察 14 d,
记录动物体质量、外观、食欲、行为活动、死亡等毒副反应情况。
结果见表 3。
表 3 常春卫矛和爬行卫矛药材
对小鼠急性毒性实验体质量的影响(珋x ± s)
组别
给药前
体质量 m /g
给药 14 d后
体质量 m /g
14 d后体质量增长
百分率(%)
空白对照 20. 05 ± 1. 09 28. 45 ± 1. 50 41. 89
常春卫矛 20. 35 ± 1. 13 28. 75 ± 1. 40 41. 27
爬行卫矛 20. 05 ± 1. 23 29. 00 ± 2. 12 44. 63
与空白对照组比较,* P >0. 05;n =20
结果表明,小鼠体质量正常增长,无任何毒副作用。测出常
春卫矛的最大给药量为 161. 4 g 生药 /kg 体质量,爬行卫矛的最
大给药量为 321. 8 g生药 /kg 体质量,提示常春卫矛和爬行卫矛
的毒性很小。
3 讨论
为了比较常春卫矛和爬行卫矛的药用价值,本文采用多种动
物模型及实验方法,在药物的制备、剂量、给药途径同等的条件
下,对常春卫矛和爬行卫矛进行镇痛、抗炎作用对比研究,并且对
其进行了急性毒性研究。结果显示,常春卫矛和爬行卫矛均具有
明显的抗炎、镇痛作用;抗炎作用:常春卫矛作用强于爬行卫矛;
镇痛作用强度常春卫矛与爬行卫矛相当。急性毒性实验结果,常
春卫矛的最大给药量为 161. 4 g·kg -1,爬行卫矛的最大给药量
为 321. 8 g·kg -1,表明毒性很低。综上所述,常春卫矛和爬行卫
矛在抗炎、镇痛方面药效作用明显,但略有差异,本研究为对常春
卫矛临床的应用与开发提供了实验依据。
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL. 23 NO. 6 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 6 期