全 文 ：顶果木离体培养研究
周传明1，秦武明1，吕曼芳1，熊 英2 (1．广西大学林学院，广西南宁 5300041;2．广西大学农学院，广西南宁 530004)
摘要 ［目的］研究顶果木离体培养最佳方法。［方法］以顶果木种子获得的无菌苗进行离体培养，通过诱导丛生芽的发生，获得再生植
株。［结果］采用 MS +6-BA 0． 8 ～3． 0 mg /L + NAA 0． 2 ～0． 5 mg /L培养基、改良 MS +6-BA 0． 2 ～1． 2 mg /L + NAA 0． 18 ～0． 2 mg /L培养
基均能保持无菌苗的生长，其中改良 MS +6-BA 0． 2 mg /L + NAA 0． 18 mg /L培养基最适宜无菌苗生长，但培养 40 d后，未见芽苗分化;
将无菌苗转入改良 MS +6-BA 0． 5 ～1． 2 mg /L + NAA 0． 2 mg /L培养基中培养，均能诱导芽的分化和增殖，培养 20 d后，芽繁殖系数可达
1． 72 ～2． 30，其中改良MS +6-BA 1． 2 mg /L + NAA 0． 2 mg /L培养基芽繁殖系数达2． 30，总体芽苗生长情况差异不明显。［结论］改良MS
+6-BA 1． 2 mg /L + NAA 0． 2 mg /L培养基为诱导顶果木最适培养基。
关键词 顶果木;无菌苗;离体培养
中图分类号 S727． 3 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2012)03 －01457 －02
Study on Tissue Culture of Acrocarpus fraxinifolius
ZHOU Chuan-ming et al (College of Forestry，Guangxi University，Nanning，Guangxi 530004)
Abstract ［Objective］The aim of the study was to seek the best method on tissue culture of Acrocarpus fraxinifoliu． ［Method］The multi-
buds induction and regeneration system of Acrocarpus fraxinifolius from seed in vitro was preliminary investigated． ［Result］The results showed
that the MS + 6-BA 0． 8 － 3． 0 mg /L + NAA 0． 2 － 0． 5 mg /L culture medium，modified MS + 6-BA 0． 2 － 1． 2 mg /L + NAA 0． 18 － 0． 2 mg /L
culture medium could maintain seedling growth，which modified MS + 6-BA 0． 2 mg /L + NAA 0． 18 mg /L culture medium was the most suit-
able for seedling growth，but the bud differentiation were not happened after 40 days． The modified MS + 6-BA 0． 5 － 1． 2 mg /L + NAA 0． 2
mg /L culture medium could induce bud differentiation and proliferation． The propagation coefficient of the bud could reach 1． 72 － 2． 30 after
20 days，which the propagation coefficient was 2． 30 that culture in modified MS + 6-BA 1． 2 mg /L + NAA 0． 2 mg /L medium，the overall
shoots growth were not significant． ［Conclusion］The modified MS + 6-BA 1． 2 mg /L + NAA 0． 2 mg /L culture medium was the most suitable
for tissue culture of Acrocarpus fraxinifoliu．
Key words Acrocarpus fraxinifolius;Aseptic seedlings;In vitro culture
作者简介 周传明(1962 － ) ，男，广西南宁人，高级实验师，从事植物组
织培养方面的研究。
收稿日期 2011-11-04
顶果木(Acrocarpus fraxinifolius Wight)别名毛榔、顶果
树、梣叶豆，为苏木科顶果木属高大落叶乔木，是我国云南南
部和广西西部亚热带地区常见树种。其干材圆满通直，木材
耐久藏，在国际市场作为橡树或者胡桃材的代用品，我国用
于代替红椿木材制作家具或作装修、胶合板用材;树形美观，
花色鲜艳，可作行道树及风景树，南亚热带用于石灰岩绿化、
河谷营造防护林和用材林［1］，属国家三级保护植物，广西速
生乡土阔叶树种之一［2］。目前为调整以速生桉树占主导地
位而出现的林产品单一格局，开展速生珍贵阔叶树种发展计
划。传统的种子繁殖育苗无法满足造林大量苗木的需求，为
了保证造林苗木的数量与质量，获得较好的营林表现，采用
优良母株进行无性繁殖可以满足实际需要。顶果木作为拟
定发展的珍贵树种，相关研究主要集中在树种生态学习性、
栽培技术以及造林技术规程上［3 －5］，关于组织培养的研究尚
未见报道。为此，笔者对顶果木进行组织培养快繁技术研
究，以期提升速生珍贵乡土阔叶树种组织培养技术水平，为
完善快繁技术体系提供技术支撑和示范样板;对发展珍优阔
叶树大径材人工林，保障国家木材安全与木材战略储备，满
足国家木材需求具有深远意义。
1 材料与方法
1． 1 材料 采用优良顶果木种子作为繁殖材料。
1． 2 方法
1． 2． 1 种子的消毒及培养。将顶果木种子放入烧杯中，用
95%的浓硫酸浸泡 10 min，浸泡时用玻璃棒搅拌，防止局部
碳化，浸泡后用流动自来水冲洗残余硫酸;在无菌条件下，先
用 70%乙醇表面消毒 30 s，再用 0． 1%HgCl2 消毒 15 min，用
无菌水冲洗 3 ～ 4 次后取出接种至初始培养基中。种子经
15 d培养至芽苗长达 3 ～5 cm时，切取约 1 cm长带有顶芽的
嫩茎转接至分化培养基中进行诱导培养。
1． 2． 2 培养基及培养条件。初始培养基:采用 MS为基本培
养基，未加任何调节剂，用于种子萌发诱导。
分化和增殖继代培养基:MS + 6-BA 0． 8 ～ 3． 0 mg /L +
NAA 0． 2 ～0． 5 mg /L培养基、改良MS +6-BA 0． 2 ～1． 2 mg /L
+ NAA 0． 18 ～0． 2 mg /L培养基。各种培养基分别附加蔗糖
30 g /L，琼脂 7． 0 g /L。pH调至 5． 8，培养基分装后在 1． 1 kPa
高压、121 ℃高温下灭菌 20 min。
培养条件:培养室温度为 25 ～ 28 ℃，白天附加 2 000 lx
人工光照 12 h。
2 结果与分析
2． 1 初代培养 将消毒处理的种子接种至未添加任何调节
剂的培养基时，培养至第 5 天时种子开始膨胀露白，第 7 天
有 45%的种子发芽，苗高 0． 5 ～ 3． 0 cm，子叶嫩黄色，部分未
展开;第 10天观测发现种子发芽率达 98%以上，苗高在 1． 0
～5． 0 cm，子叶嫩绿色，大部分舒展，茎干脆嫩较粗，生长良
好。虽然培养基未添加任何生长调节剂，但所使用的初始培
养基完全可以满足种子发芽以及幼苗生长。培养过程未见
污染，成活率极高。
2． 2 继代增殖培养 顶果木无菌苗培养至 15 d，苗木长势
较好，苗高达 3． 0 ～ 6． 0 cm，切取约 1 cm长带有顶芽的嫩茎
转接至添加不同用量生长调节剂的分化培养基中进行诱导
安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2012，40(3):1457 － 1458 责任编辑 李占东 责任校对 傅真治
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2012.03.223
培养，结果发现，采用 MS +6-BA 0． 8 mg /L + NAA 0． 2 mg /L、
MS +6-BA 3. 0 mg /L + NAA 0. 5 mg /L 培养基、改良 MS + 6-
BA 0． 2 mg /L + NAA 0． 18 mg /L 3种培养基均能保持无菌苗
的生长，苗木第 15 天的生长情况见表 1。由表 1 可知，在
NAA 0. 2 ～0. 5 mg /L的条件下，6-BA浓度从 0． 8 mg /L增加
到 3． 0 mg /L时，2 号比 1 号培养基的苗木平均高度高 0． 5
cm，而顶芽长度相差不大，2 号培养基苗木总体生长情况也
略优于 1号培养基;3号培养基的苗高、顶芽长度以及生长情
况均优于 1、2号培养基，并已有子叶舒展(图 1) ，由此可知，3
号培养最适宜无菌苗生长。
表 1 第 1代苗生长情况
编号 培养基
苗高
cm
顶芽
cm 生长情况
1 MS +6-BA 0． 8 mg /L
+ NAA 0． 2 mg /L
2． 0 0． 1 ～0． 3 生长差，子叶下垂，部分基
部膨大，无分化，未生根
2 MS +6-BA 3． 0 mg /L
+ NAA 0． 5 mg /L
2． 5 0． 1 ～0． 5 生长好于1号，子叶略下垂，
基部膨大，无分化，未生根
3 改良 MS +6-BA
0． 2 mg /L + NAA
0． 18 mg /L
3． 3 1． 0 ～2． 0 生长较好，子叶舒展，有真
叶，有 3株生根，无分化
图 1 第 15天各培养基苗木生长情况
无菌苗培养 40 d后，未见芽苗分化，说明以上培养基诱
导效果不理想。将无菌苗转入改良MS +6-BA 0． 5 ～1． 2 mg /L
+ NAA 0． 2 mg /L 培养基中，结果发现，不同 6-BA 浓度的 3
个培养基均能诱导芽的分化和增殖。培养 20 d后，苗高、复
叶数、顶芽平均长度随着 6-BA用量的增加而递减，6-BA 0． 5
mg /L的培养基与 6-BA 1． 2 mg /L的培养基苗木的生长情况
差异不大。6-BA 1． 2 mg /L 的培养基繁殖系数较高为 2． 30
(表 2)。培养材料切口处均不同程度地出现愈伤组织，在 6-
BA浓度为 0． 5、1． 2 mg /L培养基培养时，较多苗木基部出现
膨大情况，而 6-BA浓度为 1． 0 mg /L培养基培养时基部膨大
程度较小。各培养基苗木生长情况均良好，少量出现侧芽萌
生，但 6-BA 浓度为 1． 2 mg /L时部分苗木出现落叶现象。
方差分析表明，3个培养基的无菌苗苗高、复叶数、叶长、
增殖芽数和芽长间差异在 95%检验水平下均未达显著水平。
但采用改良MS +6-BA 0． 5 ～1． 2 mg /L + NAA 0． 2 mg /L培养
基可以促进芽苗增殖分化，改良 MS + 6-BA 1． 2 mg /L + NAA
0． 2 mg /L能取得较好的增殖效果。
表 2 第 2代苗生长情况
6-BA浓
度∥mg /L
苗高
cm 复叶数
叶长
cm
增殖
系数
芽平均
长∥cm 生长情况
0． 5 1． 58 2． 2 0． 78 1． 72 0． 39 生长良好，愈伤组织大，基
部膨大
1． 0 1． 51 2． 2 0． 92 1． 72 0． 35 生长良好，愈伤组织少于
1号，1 /3基部膨大
1． 2 1． 50 1． 8 0． 80 2． 30 0． 30 生长良好，愈伤组织最多，
基部膨大，部分出现落叶
2． 3 培养基类型对顶果木生长的影响 为研究不同类型
培养基对顶果木组织培养的影响，将无菌苗转接到 MS和改
良 MS 2种基本培养基中，设置相同浓度水平的 6-BA 0． 8
mg /L和 NAA 0． 2 mg /L。经 15 d培养观察发现，MS培养基
中无菌苗顶芽伸长 0． 2 ～0． 5 cm，复叶下垂，45%的苗木基部
膨大;而改良 MS培养基中无菌苗顶芽伸长 0． 5 ～ 1． 2 cm，复
叶平展，苗木基部膨大较少，少量已经有侧芽萌生，苗木生长
情况明显较MS培养基培育的苗木好。表明不同基本培养基
对苗木生长有明显的影响。
3 结论与讨论
(1)培养基成分是影响离体快繁的一个重要因素，顶果
木组织培养快繁技术目前处于初步研究阶段，该研究采用的
MS培养基和改良 MS培养基对无菌苗培养过程中发现，在
相同浓度水平的 6-BA 和 NAA 前提下，MS培养基仅能保持
苗木生活力，但生长较差，子叶均下垂;改良 MS培养基培养
的无菌苗长势较好，真叶生长较好。MS培养基因无机盐和
离子浓度较高，所以并不适合顶果木无菌苗的生长，而以经
过降低无机盐及离子浓度的改良 MS 为基本培养基则较有
利于培养苗的生长。
(2)该研究发现，过高的 6-BA浓度对苗木生长不利，而
过低的 6-BA浓度则无法诱导不定芽的形成。因此要提高增
殖系数的同时能使培养苗生长良好，在生长调节剂的选用及
配比上有待于进一步研究。
参考文献
［1］谢福惠，莫新礼．速生优良树种———广西顶果木初步研究［J］．广西植
物，1981，1(1):31 －33．
［2］何关顺，文宝，何广琼．乡土速生树种顶果木育苗技术［J］．广西林业，
2008(5):32．
［3］周全连，李文付．顶果木栽培技术［J］．林业科技开发，2007，21(1):91 －
92．
［4］杨成华．速生珍稀树种顶果木［J］．贵州林业科技，1989，17(2):59 －62．
［5］吕福基，袁杰，朱德金．顶果木的生物学特性及其繁殖栽培［J］．西部林
业科学，1987(1):27 －30．
8541 安徽农业科学 2012 年