全 文 ：2012 年 08 月 云南化工 Aug． 2012
第 39 卷第 4 期 Yunnan Chemical Technology Vol． 39，No． 4
doi:10． 3969 / j． issn． 1004-275X． 2012． 04． 006
·分析测试·
紫外分光光度法测定赛北紫堇中总生物碱含量
李吉昌1，林跃华1，龙清平1，马鹏常1，李干鹏2
(1． 中山职业技术学院 化学工程系 广东 中山 528404;
2． 云南民族大学 化学与生物技术学院 云南 昆明 650500)
收稿:2011-10-31
基金项目:教育部科学技术研究重点项目(208132)
作者简介:李吉昌(1980-) ，男，湖南益阳人，工程师，硕士，主要从事天然药物化学的研究工作。
通讯作者:李干鹏(1972-) ，男，湖南郴州人，教授，博士，主要从事天然药物化学的研究工作。
E － mail:ganpeng_li@ sina． com
摘 要: 以盐酸小檗碱为对照品，采用紫外分光光度法在 410 nm 处测定赛北紫堇中总生物碱
含量。结果表明，测定在 6． 48 ～ 38． 88 μg /mL 范围内线性关系良好，回归方程:y = 0． 00825x －
0． 00200，R2 = 0． 99979 (n = 7) ，平均加标回收率为 101． 70%，相对标准偏差(RSD)为 3． 19%。实验结
果表明，用紫外分光光度法测定赛北紫堇总生物碱含量具有稳定性好、方法简便的优点。
关键词: 赛北紫堇;盐酸小檗碱;总生物碱;紫外分光光度法
中图分类号: O657． 32 文献标识码: A 文章编号: 1004-275X(2012)04-0019-03
赛北紫堇(Corydalis impatiens)为罂粟科(Pa-
paveraceae)紫堇属植物，是一种常用中药，据《藏药大
典》记载:其花、叶、根均可入药，具有清热解毒、镇静、
活血化淤、收敛止痒、祛风利气等功效。李吉昌［1］等
针对云南紫堇属植物资源研究现状进行了综述，以期
为云南紫堇属植物的全面而合理的开发利用提供科
学依据和建议。从目前对该属植物的化学成分研究
结果来看，本属植物主要含原托品碱类、原小檗碱类、
苯酚异喹啉类、苯骈菲啶类、卞基异喹啉类、阿朴碱
类、螺苄异喹啉类、枯拉灵类等结构类型的生物碱。
该属植物及其提取物大多具有广泛的药理活性 ，如
调节心血管系统、抗肿瘤、抗菌等［2，3］。李吉昌［4］等
对赛北紫堇的化学成分进行了研究，并从中分离得到
了 7个生物碱。本文对紫外分光光度法测定赛北紫
堇中总生物碱含量进行研究，以建立一种简便、快捷、
有效的赛北紫堇总生物碱含量测定方法。
1 实验部分
1． 1 试剂与仪器
1． 1． 1 药材
实验用赛北紫堇于 2006 年 10 月采自云南省
迪庆藏族自治州香格里拉县 ，经迪庆自治州藏医
院扎西泽仁医师鉴定为罂粟科紫堇属植物赛北紫
堇 (Corydalis impatiens)的 根。标 本 编 号:
200610C1，存放于本所标本室。
1． 1． 2 试剂
对照品盐酸小檗碱，购自中国药品生物制品
检定所，批号 200703;95%乙醇、去离子水。
1． 1． 3 仪器
T6 系列紫外可见分光光度计(北京普析通用
仪器有限责任公司) ;RE 52-86A 型旋转蒸发器
(上海亚荣生化仪器厂)。
2 方法与结果
2． 1 标准曲线的绘制
精密称取盐酸小檗碱 0． 064 8 g，用 95%乙醇
溶解，定容至 100 mL，即 648 μg /mL，精密吸取 0、
1、2、3、4、5、6 mL 于 100 mL 容量瓶中，乙醇定容，
密塞，摇匀。以第 1 份未加盐酸小檗碱的空白溶
液为参比，于 410 nm处测定其吸光度，以吸光度 A
为纵坐标，盐酸小檗碱质量浓度 c 为横坐标作图
(见图 1) ，得回归方程:y = 0． 00825x－ 0． 00200，
R2 = 0． 99979 (n = 7) ，线性范围:6． 48 ～ 38． 88
μg /mL。
图 1 盐酸小檗碱测定的标准曲线
Figure 1 Standard Curve of Berberine hydrochloride
2． 2 供试品溶液的制备
精密称取原料粉末 2． 0 g［过 0． 250 mm(60
目)筛］，置于 250 mL 锥形瓶中，加入约 30 mL
95%乙醇，超声作用 3 次，每次 30 min，冷却，过
滤，残渣以 15 mL 95%乙醇分 3 次洗涤，合并滤液
与洗液用 95%乙醇定容至 50 mL，并取 5 mL 溶液
加到已处理好的氧化铝柱上(玻璃柱内径 10 mm，
10 g中性氧化铝，用 60 mL 95%乙醇预洗) ，用 40
mL 95%乙醇洗脱、过滤、洗涤和定容至 50 mL，做
为供试样品溶液备用［5］。
2． 3 检测波长的确定
取 5． 0 mL盐酸小檗碱对照液，5． 0 mL供试品
溶液，分别置于 50 mL 容量瓶中，95%乙醇定容，
摇匀，以 95%乙醇为参比，在 200 ～ 600 nm 内，分
别对盐酸小檗碱对照液和供试液进行吸光度扫
描，得吸收光谱，对照品和供试液的最大吸收波长
均为 410 nm，故选择 410 nm为实验波长。
2． 4 样品的测定结果
以 95%乙醇为空白，在 410 nm 处测定，本样
品总生物碱含量以盐酸小檗碱计。样品的测试结
果见表 1。
表 1 样品中总生物碱含量测试结果
Table 1 Result of Berberine hydrochloride content
w(总生物碱)/%
1 2 3 平均
RSD /%
0． 98 0． 97 0． 97 0． 97 0． 86
2． 5 稳定性考察
取 1 mL盐酸小檗碱对照液于 50 mL 容量瓶
中，95%乙醇定容至刻度，摇匀。410 nm波长处每
隔 2 h测定该溶液吸光度，结果见表 2。由表 2 中
数据可知，对照品溶液在 18 h内均比较稳定［6］。
表 2 稳定性考察
Table 2 Stability of measurement
盐酸小檗碱质量浓度 /(μg /mL)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 平均
RSD /%
12． 96 12． 02 12． 94 12． 82 12． 89 12． 74 12． 81 12． 76 12． 71 12． 74 2． 20
2． 6 加标回收率实验
称取 5份供试品溶液分别加入定量的盐酸小
檗碱对照品溶液 2 mL，按 2． 2 项下自“加入约 30
mL 95%乙醇，超声作用 3 次． ． ． ． ． ．”起操作，测定
回收率，结果见表 3，在 410 nm处测定样品共 5次，
其结果平均回收率为 101． 70%，RSD为3． 19%。
·02· 云南化工 2012 年第 4 期
表 3 加标回收率实验
Table 3 Recovery of standard addition experiments
样品
编号
加入量
/mg
回收量
/mg
回收率
/%
平均回
收率 /%
RSD /%
1 1． 296 1． 310 101． 08
2 1． 296 1． 299 100． 23
3 1． 296 1． 306 100． 77 101． 70 3． 19
4 1． 296 1． 284 99． 07
5 1． 296 1． 391 107． 33
2． 7 精密度考察
取同一样品供试液，按上述操作进行，连续测
定样品的吸光度 5 次，RSD 为 0． 75 %。可以看
出，用紫外分光光度法测定供试品中总生物碱含
量时，实验重现性好，结果较准确。
3 结论
1)样品提取时也可采用其它溶剂如甲醇等
超声、回流，以超声提取完全。但由于采用乙醇来
洗脱，故采用乙醇提取较好。
2)赛北紫堇的超声提取物复杂，直接用紫外
分光光度法测定时干扰较大，而紫堇属中黄酮类
物质具有较多的羟基，能够与氧化铝产生较强的
吸附作用，不易被乙醇洗脱液洗脱。采用氧化铝
柱后，可以有效地排除其中黄酮类成分的干扰。
3)通过对以盐酸小檗碱为对照品的紫外分光光
度法测定赛北紫堇根部中总生物碱含量的研究表
明:①在 410 nm下，盐酸小檗碱质量浓度为 6． 48 ～
38． 88 μg /mL时，吸光度与质量浓度之间有良好的线
性关系，其相关系数 R2 = 0． 99979(n =7);②对照品
盐酸小檗碱在18 h内均比较稳定，RSD为2． 20%;③
平均加标回收率为 101． 70%，RSD为 3． 19%;④经测
定，样品中总生物碱含量为 0． 97%。因此，紫外分光
光度法测定赛北紫堇中总生物碱含量具有精度高、
稳定性好、简便的特点，是监控赛北紫堇全草尤其是
根部质量的有效方法，为进一步开发其药用功能提
供参考。
参考文献:
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石杉中总生物碱含量［J］． 应用化工，2007，36(5) :
501-502．
Determinafion of the Content of Total Alkaloid in Corydalis Impatiens by UV Spectrophotometric
LI Ji-chang1，LIN Yue-hua1，LONG Qing-ping1，MA Peng-chang1，LI Gan-peng2
(1． Department of Chemical Engineering in Zhongshan Polytechnic，Zhongshan 528404，China;
2． Key Laboratory of Chemistry in Ethnic-medicine Resources，School of Chemistry
＆ Biotechnology，Yunnan University of Nationalities，Kunming 650500，China)
Abstract: The determination was conducted by ultraviolet spectrophotometry photometer under 410
nm ultraviolet radiatio，while the Berberine hydrochloride was selected as contrast substance． The results
showed:the linearity relation between absorbency and content is good when the content is 6． 48 ～ 38． 88 μg /
mL，and the regression equation is y = 0． 00825x ～ 0． 00200，R2 = 0． 99979 (n = 7) ，average complementary
post recovery rate is 101． 70． RSD = 3． 19% ． Ultraviolet spectrophotometry is simple and quick method to de-
termine the content of the total alkaloids in Corydalis impatiens with good stability．
Key words: Corydalis impatiens;Berberine hydrochloride;total alkaloid;UV
·12·2012 年第 4 期 李吉昌等:紫外分光光度法测定赛北紫堇中总生物碱含量