全 文 ：竹节参总皂苷对不同时间段脑出血模型
大鼠脑损伤的保护作用
闵 静1，严菊华1，敖明章2
(1. 湖北职业技术学院医学院，湖北 孝感 432000;2. 华中科技大学生命科学与技术学院)
摘要:目的 研究竹节参总皂苷(TSPJ)对脑出血大鼠脑损伤不同时间段的影响。方法 采用胶原酶法制备
脑出血动物模型，将 48 只大鼠随机分为假手术组、模型组、TSPJ低、高剂量组共 4 组 ，每组 12 只;造模后 6h灌
胃给药，每 12h 1 次，于造模后 12、72h测各组大鼠脑组织含水量，超氧化物歧化酶、丙二醛含量，IL-6、TNF-α水
平。结果 与模型组比较，72h高剂量 TSPJ组脑组织含水量减少，超氧化物歧化酶活性增高，丙二醛含量下降，
IL-6、TNF-α水平下降，12h时 TSPJ高剂量组超氧化物歧化酶活性增高，TNF-α 下降;丙二醛、IL-6 含量变化不
明显。结论 TSPJ能减轻出血性脑损伤，对受损脑组织发挥保护作用，且有时间依赖性。
关键词:竹节参总皂苷;脑出血;脑水含量
中图分类号:Ｒ965. 1 文献标识码:A 文章编号:2095-4646(2014)03-0194-03
Effect of Total Saponins from Panax Japonicus on Brain Injury
in Different Time of Ｒats after Intracerebral Hemorrhage
MIN Jing，YAN Ju-hua，AO Ming-zhang
(Medical School，Hubei Polytechnic Institute，Xiaogan Hubei 432000，China)
ABSTＲACT:Objective To study the effect of total saponins from Panax japonicus(TSPJ)on brain injury
in different time of rats after intracerebral hemorrhage (IHC)． Methods The rat model of IHC was established
with collagen． 48 rats were randomly divided into sham operation control group，model group，TSPJ 100mg /kg
and 200mg /kg groups． Ｒats were administrated 6 h after IHC，once every 12 h． Brain water content，SOD ac-
tivity and ，MDA，IL-6，TNF-αlevels were determined at 12 h and 72 h after IHC，respectively． Ｒesults Compare
with model group，brain water content，MDA，IL-6 and TNF-αlevels were decreased，and SOD was increased in
TSPJ 200mg /kg group at 72 h after IHC． At 12 h after modeling，only SOD was increased． Conclusion TSPJ
can decrease brain water content and，MDA，IL-6，TNF-α levels of ICH rats at 72 h，increase SOD activity，and
protect the damaged brain tissue after ICH．
KEY WOＲDS:Total saponins of panax japonicas;Intracerebral hemorrhage;Brain water content
脑出血(intracerebral hemorrhage，ICH)是一种
急症重症，严重威胁人们的健康;脑出血后血凝块
回缩，血脑脊液屏障的破坏，血肿周围缺血，组织
炎症反应等因素都可造成脑组织的水肿，从而引
起功能障碍［1］。竹节参总皂苷(total saponins of
panax japonicus，TSPJ)具有活血化瘀作用，本实验
通过观察 12h 和 72h 两个时间段 TSPJ 对脑出血
大鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛
(MDA)及 IL-6、TNF-α含量的影响，研究其不同时
间段的效果及机理。
1 材料与方法
1． 1 实验动物
健康雄性 SD 大鼠，体质量为 240 ～ 280g，清
洁级，由湖北省动物实验中心提供，合格证号:
SCXK(鄂)2011 ～ 012;分组:大鼠随机分为 4 组，
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假手术组、模型组、TSPJ 低剂量组(100mg /kg)、
TSPJ高剂量组(200mg /kg) ，每组 12 只，分别观察
术后 12、72h 两个时间点各项指标。TSPJ 组术后
6h灌胃给药，假手术组及模型对照组灌胃等量生
理盐水，以后 12h /次 TSPJ 组灌胃给药，而假手术
组及模型对照组灌胃等量生理盐水，各组饲养条
件相同。
1． 2 药品与仪器
竹节三七样品采自湖北恩施，采用醇提取法，
精确称取样品 50mg，定容于 50ml 容量瓶，精确吸
取样品液 2ml，置 50ml容量瓶中定容，摇匀。由华
中科技大学生命科学院天然产物实验室通过标准
品检测，TSPJ净含量为 33． 3%，用前配成悬浊液，
置 4℃ 冰箱保存备用。Ⅶ型胶原酶，美国 Sigma
公司产品;注射用尿激酶(批号 03290，南京南大
药业有限责任公司) ，配制成 200 IU / L 的溶液;
SOD试剂盒、MDA 试剂盒(上海恒远生化试剂有
限公司) ;IL-6、TNF-α 试剂盒，北京福瑞生物工程
有限公司。仪器:大鼠脑立体定位仪，微量注射仪
购于北京智鼠多宝生物科技有限责任公司;电子
天平(SAＲTOＲ2US，BP211D) ，德国生产;GF-D200
半自动生化分析仪(山东高密彩虹分析仪器有限
公司) ，8021 离心机(上海手术器械厂) ;752 分光
光度仪(上海精密仪器仪表有限公司)。
1． 3 模型制备
参照 Ｒosenberg 等［2］的方法，根据包新民大
鼠脑立体定位图谱［3］确定尾状核的位置:术前禁
食，自由饮水，大鼠经戊巴比妥 (0． 1ml /100g)腹
腔麻醉俯卧位固定于立体定位仪上，据图谱调整
立体定位仪于注射点，头皮正中常规消毒后矢状
位切开约 1． 5cm，暴露前囟点，用骨钻钻颅打孔
(直径约 1mm) ，用微量进样器吸取胶原酶 2ml，迅
速插入已钻好孔内，进针 5mm，注射时间不少于
15min，留针 10min 后缓慢退针，钻孔用骨蜡封
闭，局部消毒后，缝合皮肤，假手术组注射 2ml 的
生理盐水，手术过程同出血组。
1． 4 检测方法
1． 4． 1 脑组织含水量测定
分别于术后第 12h 及第 72h，过量麻醉大鼠，
快速断头取脑组织，用滤纸吸干脑表面液体和血
迹，小塑料封口袋密闭全脑，电子天平称湿重，然
后放入 80℃烤箱中，72h 后称干重。脑含水量计
算公式:［(湿重 －干重)/湿重］× 100%。
1． 4． 2 SOD活性、MDA含量测定
各组动物再分两组分别于术后第 12h 及第
72h，过量麻醉大鼠，快速断头取脑组织，微冻硬后
取出，置薄膜隔开的干冰上，分离出血侧皮质及基
底节，4℃下用预冷的匀浆介质制备成 10%的脑匀
浆置 3000r /min离心 15min后，取上清液按试剂盒
方法操作。SOD 活性测定:通过黄嘌呤及黄嘌呤
氧化酶反应系统产生超氧阴离子自由基，进而氧
化羟胺形成亚硝酸盐，在 550nm处测其吸光度，通
过公式计算。MDA含量的测定:通过过氧化脂质
降解产物中的 MDA可与硫代巴比妥酸缩合，形成
红色产物，在 532nm测吸光度。
1． 4． 3 IL-6、TNF-α测定
分别于术后第 12h 及第 72h 手术，取脑匀浆
上清液，按放免试剂盒说明书，加入分离剂后充分
混匀，放室温 20min，离心，吸上清，生化分析仪上
测放射性，以 B /T 计算 NSB、SO 结合百分率，以
B /B0 计算标准及待测样品结合百分率，并查出样
品值。
1． 5 统计方法
以 SPSS 17． 0 统计分析，数据以 珋x ± s表示，各
组间比较采用 t检验，P ＜ 0. 05 为差异有统计学意
义。
2 结 果
2． 1 TSPJ对脑水肿的影响
从表 1 可见，12h 时 TSPJ 组脑出血后的脑组
织含水量无明显影响，72h 时高剂量组 TSPJ 组脑
出血后的脑组织含水量减少，和模型组比较有显
著性差异(P ＜ 0． 05)。
表 1 TSPJ对大鼠脑组织含水量影响 (珋x ± s，%)
组别 剂量(mg /kg) n 12h 72h
假手术组
模型组
TSPJ低剂量组
TSPJ高剂量组
/
/
50
100
12
12
12
12
0． 72 ± 0． 03
0． 77 ± 0． 05*
0． 77 ± 0． 05
0． 76 ± 0． 06
0． 72 ± 0． 01
0． 75 ± 0． 01*
0． 75 ± 0． 01
0． 74 ± 0． 02△
与假手术组比较，* P ＜0． 01;与模型组比较，△P ＜0． 05
2． 2 TSPJ 对大鼠脑组织 SOD 活性、MDA 含量的
影响
模型组与假手术组各时间段大鼠脑组织
SOD 活性、MDA 含量差异极显著(P ＜ 0． 01) ;
与模型组比较，TSPJ高剂量组 12h 时 SOD 活性
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有明显差异(P ＜ 0． 05) ，MDA 含量无明显差
异，72h 高剂量 TSPJ 组 SOD 活性增高，差异极
显著(P ＜ 0． 01) ，MDA 含量下降，差异性显著
(P ＜ 0． 05) ，见表 2。
表 2 TSPJ对大鼠 SOD活性及 MDA含量的影响 (珋x ± s)
组别 n
SOD(u /ml) MDA(nmol /ml)
12h 72h 12h 72h
假手术组
模型组
TSPJ低剂量组
TSPJ高剂量组
12
12
12
12
45． 11 ± 3． 25
33． 66 ± 3． 52*
34． 86 ± 5． 22
38． 88 ± 5． 52#
44． 42 ± 3． 35
31． 35 ± 3． 25*
33． 76 ± 5． 23
42． 01 ± 5． 44##
4． 08 ± 1． 11
5． 49 ± 0． 58*
5． 53 ± 1． 36
5． 50 ± 0． 88
4． 11 ± 0． 21
5． 49 ± 0． 39*
4． 89 ± 1． 19#
4． 95 ± 0． 96#
与假手术组比较，* P ＜ 0． 01;与模型组比较，#P ＜ 0． 05、##P ＜ 0． 01
2． 3 TSPJ对大鼠脑组织中 IL-6、TNF-α含量的影
响
与假手术组比较，模型组大鼠 IL-6、TNF-α 水
平增高，差异有非常显著性(P ＜ 0． 01) ;与模型组
比较，12h时低剂量组 IL-6 无明显差异，高剂量组
TNF-α有差异(P ＜ 0． 05) ，72h 时高剂量 TSPJ 组
大鼠 IL-6、TNF-α水平下降(P ＜ 0． 05) ，见表 3。
表 3 TSPJ对大鼠 IL-6、TNF-α含量的影响 (珋x ± s)
组别 n
IL-6(ng /ml) TNF-α(ng /ml)
12h 72h 12h 72h
假手术组
模型组
TSPJ低剂量组
TSPJ高剂量组
12
12
12
12
2． 45 ± 0． 28
3． 29 ± 0． 36*
3． 15 ± 0． 69
3． 11 ± 0． 58
2． 43 ± 0． 11
3． 50 ± 0． 05*
3． 28 ± 0． 14
3． 09 ± 0． 06△
1． 69 ± 0． 07
2． 51 ± 0． 06*
2． 43 ± 0． 24
2． 08 ± 0． 11△
1． 66 ± 0． 09
2． 45 ± 0． 11*
2． 43 ± 0． 13
2． 03 ± 0． 11△
与假手术组比较，* P ＜ 0． 01;与模型组比较，△P ＜ 0． 05
3 讨 论
在脑出血的病理发展过程中，脑组织的继发
性损伤是脑出血病情加重、预后不良的主要因
素［4］。出血性脑损伤的炎性反应，由白细胞粘附
血管壁，血-脑屏障遭破坏，炎性细胞侵入脑实质
等组成。脑出血时炎性因子表达增加，增加脑水
肿、血管壁通透性、炎细胞浸润。IL-6 介导白细胞
与内皮细胞粘附，TNF-α 能促进中性粒细胞浸润
并释放蛋白水解酶，与神经元损害密切相关［5］。
实验中可以看出 TSPJ 组脑出血后的脑组织含水
量减少，与模型组有显著性差异(P ＜ 0． 05) ;并且
72h时 TSPJ组大鼠脑组织丙二醛含量降低(P ＜
0． 05) ，超氧化物歧化酶的活力增高，高剂量 TSPJ
组极明显(P ＜ 0． 01) ，72h 时高剂量 TSPJ 组 IL-6、
TNF-α水平明显下降，与模型组有显著性差异(P
＜ 0． 05) ，推测脑出血 12h 内，血肿中的红细胞破
裂或被吞噬细胞吞噬，含铁血黄素游离，炎细胞浸
润，炎症反应较明显，脑出血第 72h 血肿经循环吸
收清除，炎性细胞数量逐渐减少，炎症因子减少，
所以此时血肿变小，炎症反应减轻，超氧化物歧化
酶的活力增高，丙二醛降低，IL-6、TNF-α水平明显
下降。因而 72h 时效果明显除与药物作用有关
外，还与疾病不同发展阶段有关，所以药物治疗和
研究还要考虑不同时间段病变区别及对药效的影
响。总而言之，TSPJ 能在一定程度上减少损伤时
自由基生成，抑制脂质过氧化反应，增加体内自由
基清除剂如超氧化物歧化酶，减少炎症因子，从而
对颅脑损伤有一定保护作用。
参考文献:
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学，2008，28(2):35
(收稿日期:2013-12-29)
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