全 文 ：卷 柏 炮 制 的 实 验 研 究
广西中医学院 ( 5 3 0 0 01) 陈国佩 林海英 ’
提要 以抑菌作用 ,总黄酮含量 ,勒质含量 ,薄层定性为指标对卷柏的生品 、 焦品 、 炭品进行 比
较 ,为制定卷柏合理炮制工艺提供科学依据。
关键词 卷柏 炮制 总黄酮 T L C
卷柏始载于《神农本草经 》 , 列为上品 ,其
性味辛 、平 。 具有活血通经之功效 。 用于经闭
痛经 ,瘤瘦痞块 ,跌打损伤等症 。 卷柏炭能化
痕止血 ,用于吐血 、 崩漏 、便血 、脱肛等症 。 对
卷柏的生制品 目前未见到系统性实验报道 ,
本文以抑菌作用 , 鞭质 , 总黄酮含量 , 薄层定
性为指标对卷柏的生品 、焦品 、炭品进行实验
比较 。
1 实验材料和仪器
材料 : 本实验用的原药材卷柏购 自南宁
药材站 , 经本院周子静教授鉴定为卷柏科植
物 卷 柏 S e la g1’ n e u a t a m a 月、 i n a (玫 a u v )
SP
r i n g 的干燥全草 。
试剂 : 芦丁对照品 (北京药品生物制品检
定所提供 ) ,硅胶 G (青岛海洋化工厂 ) 。
菌株 (本院微生物教研室提供 ) 。
实验所用试剂均为分析纯 。
仪器 : 7 21 型分光光度计 (上海第三分析
仪器厂 出品 ) , 紫外分析仪 ( 日本岛津 ) 。
2 样品制备
生卷柏 : 取原药材 ,除去残留须根及杂质
洗净 , 切段 ,干燥 ,过 20 目筛 。
焦卷柏 : 取净卷柏段 , 用文火炒至焦黄
色 ,过 20 目筛 ,得率 8 . 3 %
卷柏炭 : 取净卷柏段 , 用中火炒至焦黑色
过 20 目筛 ,得率 57 . 3 3%
3 化学定性
取卷柏生品 、焦品 、炭品粉末各 0 . 19 ,分
别 加乙 醇 10 iln , 加热 s ha n , 过 滤 , 取滤液
1时 , 加镁粉少量与盐酸 2一 3 滴 ,观察反应
结果 。 结果见表 1 。
.
2 0
·
表 1 卷柏化学定性结果
样品 反应结果
生卷柏 深棕红色
焦卷柏 棕红色
炭卷柏 浅棕红色
4 T L C 定性比较
取卷柏生品 , 焦品 、炭品各 0 . 2 9 ,分别加
甲醇 5而 , 密塞振摇 10n 五n , 放置 1 0而 n , 过
滤 ,用毛细管分别吸取各滤液点在同一硅胶
G 薄层板上 , 用醋酸乙酷一 一甲酸— 水 (8,
1
,
1) 为展开剂 ,展开取出晾干 , 喷以三氧
化 铝 试液 , 待 乙 醇挥 于后 , 置 紫外 光 灯
( 3 6 5urn )下观察 , 结果见图。
红色
红黄色
〔卜 一卡一 浅黄色
浅蓝色
浅蓝色
3 2 1
图 卷柏不同炮制品 T L C 图谱
1
. 生卷柏 2 . 焦卷柏 3 . 卷柏炭
5 总黄酮含量测 定
对照液制备 : 精密称取在 1 20 ℃干燥至
恒重的芦丁对照 品 SOm g 置 25 耐 量瓶中 , 加
甲醇溶解后稀释至 刻度 , 摇匀 , 精密吸取
1。而 置 10 耐 量瓶中 , 加水稀释至刻度 , 摇
匀即得 。
, 本院 1 9 90 届毕业生 。
中 成 药
标准曲线制备 :精密吸取对照液 1· 。 ,
2
.
0
,
3
.
0
,
4
.
0
,
5
.
0
,
6
.
0 分别置 2 5m l 量瓶中
各加水至 6时 , 加 5%亚硝酸钠溶液 1耐 混
匀 , 放置 6而 n , 加 10 %硝酸铅溶液 1耐 , 摇
匀 , 放置 6而 n , 加氢氧化钠试液 10 耐 , 再加
水 至刻度 , 放置 1 5m in , 照分 光光度法在
s o o n m 波长处测定吸收度 , 以吸收度为纵坐
标 , 浓度为横坐标 , 绘制标准 曲线 , 在 8一
4 8拼 g 范围内呈线性关系 ,经计算得回归方程
为 : y = 1 0 . 6 0 8 9x 一 0 . 1 0 3 2 , 相 关 系 数 r =
0
.
9 9 8 8
样品测定 : 取卷柏生品 、 焦品 、 炭品各约
39 于 60 ℃干燥 61 ,精密称定 , 各置索氏提取
器中加 乙醚 10 inl , 加热回流至无色 , 放冷 ,
弃去乙醚 ,再加甲醇 90 iln , 加热回流至无色 ,
移置 10 。耐 量瓶中 , 用 甲醇少量洗涤容器 ,
洗液并入量瓶中 , 加 甲醇稀释至刻度 , 摇匀 ,
精蜜量取 3耐 , 置 25 耐 量瓶中 ,照标准曲线
制 备方法自“ 加水至 6iln ” 起依法测定吸收
度 ,计算总黄酮的含量 ,结果见表 2 。
表 2 卷柏不同炮制品总黄酮含量
样品 含量 ( % )n 一 3 R S D %
生卷柏 1 . 5 8 .1 58
焦卷柏 2 . 24 .2 2 5
卷柏炭 1 · 43 .1 4
加样回收结果 : 取卷柏焦品约 39 , 精密
称定 ,加 15 iln 芦丁溶液 (0 . 4mg / iln )计算结
果 : 回收率平均值为 1 0 . 59 % (n 一 3)
6 揉质含量测 定
取卷柏生品 , 焦品 , 炭品粉末 ( 20 目筛 )
各约 5 9 ,精密称定 , 按 1 9 9 0 年版 《中国中药
典 》揉质含量测定项下进行含量测定 ,结果见
表 3 。
表 3 卷柏不同炮制品鞭质含量测定结果
样品 含量纬 (n 一 4) R S D%
生卷柏 2· 1 1 3· 4 2
焦卷柏 1 . 7 5 2· 7 1
炭卷柏 1 . 4 8 3 · 2 7
7 抑菌试验
取 5 个直径 gc m 的无菌平皿分别加入
1间 试验菌 ,倒入冷却到 SO C的溶化琼脂培
养基 15 耐 中充分混匀 , 待琼脂凝固后 , 用外
一 , 5 5年第 一7卷第 1 2期
径 5~ 的无菌扎孔器在琼脂上等距离打 3个孔 ,并挖出孔内琼脂培养基 ,于每孔中加入
卷柏生品 、 焦品 、 炭品的 10 %的水煎剂 ,置
37 ℃培养 ld 后取出 , 结果仅对绿脓杆菌有抑
制作用 , 结果见表 4 。
表 4 卷柏不同炮制品对绿脓杆菌抑制作用
样品 抑菌环直径大小 (~ )生卷柏 15
焦卷柏 5
森柏澎 只
注 : 本实验所用菌株有 :大肠杆菌 、 伤寒杆菌 、副伤寒杆
菌、 肠炎杆菌 、 奈氏卡他菌、 金黄色葡萄球菌、 痢疾杆菌、绿
脓杆菌
8 讨论
实验结果表明 , 从定性分析角度来看 ,卷
柏不同炮制品化学颜色反应有所区别 ,但区
别不大 。
从 T L c 定性结果来看 ,在同样条件下 ,
生卷柏展开后得到的斑点有 5 个 , 而焦卷柏
只有 4 个 , 其 R f值 与生卷柏一样 ,卷柏炭却
无 。 这是否在炮制时温度升高其成分被破坏
掉 ,有待进一步研究 。
从总黄酮含测结果来看 , 以焦卷柏含量
最高 , 生卷柏次之 , 而卷柏炭含量最少 , 笔者
认为 , 卷柏炒焦后 ,使药物质地变得疏松 ,有
利总黄酮提取 , 而温度过高 (炒炭 )又会使其
总黄酮含量被破坏 。
辣质含量测定结果 : 生品> 焦品> 炭品
可能是加热后拜质成分受到破坏 , 由于炒炭
受热的温度较高 , 使鞭质破坏较多 ,鞭质为收
敛止血成分而传统认为卷柏炒炭后止血作用
比生品强 。 这可能是卷柏中含有另一种止血
成分在炒炭后升高 ,有待进一步探讨 。
抑菌试验表明 , 各卷柏炮制品只对绿脓
杆菌有抑制作用而对其它菌株无抑制作用 .
在测定指标选取上 , 抑菌作用主要考察
卷柏不同炮制品对病原微生物抑制情况 。 蛛
质具有收敛 、抑菌 , 止血作用 ;黄酮类成分具
有减少毛细血管通透性 ,减低血管脆性 ,缩短
流血时间作用 。 因此选择这些指标与卷柏传
统功效相一致 。