全 文 ：3 讨论
3. 1 与同属其他植物相比，掌叶橐吾药材的性状
显著鉴别特征为:掌状叶 4 ～ 7 裂，裂片 3 ～ 7 深裂，
小裂片边缘具裂齿，叶脉掌状。
3. 2 掌叶橐吾茎横切面显微鉴别特征为:无限外
韧型维管束大小不等，排列成两环。位于每条棱脊
内侧的维管束较大。叶横切面显微鉴别特征为:栅
栏组织 1 列，不通过主脉。主脉向上下凸起，维管束
2 个。根、茎、叶粉末均可见草酸钙针晶，散在或成
束。以上特征具有一定的生药学鉴定意义。
3. 3 根据实地考察，掌叶橐吾资源在宁夏分布比
较丰富。为合理开发、有效利用掌叶橐吾，课题组正
在对该地区习用品进行安全性评价以及深入的化学
成分、药效学研究。
参 考 文 献
［1］林镕，刘尚武 . 中国植物志［M］.第 77(2)卷 . 北京:科
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［3］濮社班，徐德然，张勉，等 . 橐吾属植物中肝毒吡咯里西
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831-835.
收稿日期:2013-03-12
基金项目:湖北省科技攻关计划项目(2006AA301B01)
作者简介:刘义梅(1971-) ，女，博士，副教授，主要从事中药资源及品质研究;E-mail:617656021@ qq. com。
* 通讯作者:陈科力，Tel:027-68890106，E-mail:kelichen@ 126. com。
江南卷柏质量标准研究
刘义梅，王 柯，陈科力*
(湖北中医药大学，湖北 武汉 430065)
摘要 目的:对江南卷柏药材进行生药鉴定研究，以制定其药材的质量标准。方法:观察江南卷柏药材的性状
和显微鉴别特征;以穗花杉双黄酮为对照品进行 TLC色谱研究;采用 HPLC法建立江南卷柏药材的含量测定方法。
结果:TLC法采用硅胶 GF254板，以甲苯-甲酸乙酯-甲酸(5∶ 4∶ 0. 5)为展开剂，FeCl3 乙醇溶液为显色剂，可出现 4 个
清晰的斑点;HPLC法以穗花杉双黄酮为对照品，以乙腈-水(含 3%四氢呋喃和 3%三氟醋酸)为流动相，检测波长
330 nm，经对 3 批药材测定，药材中穗花杉双黄酮含量不少于 0. 4%。结论:江南卷柏药材的显微、TLC鉴别和穗花
杉双黄酮的含量测定等方法准确可靠，可有效控制江南卷柏药材的质量。
关键词 江南卷柏;穗花杉双黄酮;HPLC含量测定;TLC鉴别;显微鉴别
中图分类号:Ｒ282. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2013)09-1430-05
Study on Quality Standard of Selaginella moellendorffii
LIU Yi-mei，WANG Ke，CHEN Ke-li
(Hubei University of Chinese Medicine，Wuhan 430065，China)
Abstract Objective:To study the quality standard of Selaginella moellendorffii. Methods:The macroscopic and microscopic
characteristics were observed，amentoflavone was used as reference substance in the TLC identification and HPLC method was used to
determine the content of amentoflavone. Ｒesults:The TLC method used GF254 taking toluene-ethyl formate-formic acid (5∶ 4∶ 0. 5)as
the developer and ethanol solution of ferric chloride as the chromogenic reagent with the results that it appeared four clear spots. The
HPLC method took amentoflavone as the reference substance，and acetonitrile-water (containing 3% tetrahydrofuran and 3% trifluoro-
acetic acid)as the mobile phase;Detection wavelength was 330 nm. The contents of samples from 3 different batches were determined，
and the lowest content of amentoflavone was 0. 4% . Conclusion:This method is reliable and accurate，which can be used for the quality
control of Selaginella moellendorfii.
Key words Selaginella moellendorffii Hieron.;Amentoflavone;HPLC determination;TLC identification;Microscopic identification
江南卷柏 Selaginella moellendorffii Hieron. 是卷
柏科卷柏属植物，为湖北省常用的民间草药及鄂西
土家族民族药。具有凉血止血、清热利湿的功效;用
于急性黄疸型肝炎、全身浮肿、癌症、肺结核、腹泻、
淋病、小儿惊风、吐血、便血、崩漏、痔疮出血的治疗;
外用治烧烫伤、外伤出血等症〔1，2〕。《广西中药材标
·0341· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 9 期 2013 年 9 月
DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2013.09.021
准》将其作为“石上柏”药材来源之一收载，用于癌
症及多种炎症的治疗〔3〕。1994 年版《上海市中药材
标准》则以“岩柏”之名收载。以本品为原料制成的
岩柏注射液和江南卷柏片可用于各种出血和血小
板、白血球减少及血小板减少性紫癜。江南卷柏所
含化学成分以双黄酮和黄酮苷类为主〔4，5〕，其中含
量较高的穗花杉双黄酮具有抗肿瘤、抗病毒及血管
舒张作用〔6〕。江南卷柏和穗花杉双黄酮具有较强
的抗柯萨奇病毒的活性〔7〕。现有的各种江南卷柏
药材标准中只有性状描述，而卷柏属植物极为类似，
不利于有效控制江南卷柏药材的质量。为此，本文
对江南卷柏药材进行了较系统的生药鉴定研究，为
其质量标准的制定和应用提供依据。
1 材料与仪器
1. 1 材料 实验药材于 2006 年 8 月和 2009 年 9
月采自湖北省宜昌雾渡河和鹤峰、恩施等地，由中南
民族大学万定荣教授鉴定，并经中国科学院植物研
究所张宪春研究员核实，为卷柏科植物江南卷柏
Selaginella moellendorffii Hieron. 的全草。
1. 2 试药 穗花杉双黄酮对照品(实验室自提，经
测定质量分数达到 99%) ;乙腈、四氢呋喃、三氟醋
酸均为色谱纯，甲醇、乙醇、氯仿为分析纯，水为去离
子水。
1. 3 仪器 戴安 P680 高效液相色谱仪，UVD170U
检测器，四元梯度泵，HKZJZ-830171BAF 戴安变色
龙高效液相数据处理系统(美国戴安公司) ;AP-
9908S 过滤器(Automatic Science Lastrument Co.
Ltd. ) ;BP 211D型十万分之一分析天平(德国 Sarto-
riu公司)。
2 方法和结果
2. 1 性状鉴别 取药材观察、测量和记录各部位
的形态特征。茎上的纵棱、叶片形状、叶缘锯齿及孢
子囊穗等形态特征的观察借助放大镜。
本品长 15 ～ 40 cm，枝叶部分略卷缩。地下根
茎横走并有分叉，密生 4 列卵状三角形鳞片状的叶。
主茎略呈圆柱形，直径 1 ～ 2 mm，禾干色或浅黄色;
茎下部不分枝，有卵状三角形的叶螺旋状疏生，贴伏
于主茎上;茎上部 3 ～ 4 回分枝，分枝上的营养叶二
型，背腹各 2 列。腹叶(中叶)疏生，叶多卷曲，淡灰
绿色，展平后，中叶斜卵圆形，锐尖头，基部心形有膜
质白边和微齿;背叶(侧叶)覆瓦状，卵圆状三角形，
短尖头，有齿或下侧全缘。孢子囊穗短，四棱形，生
于小枝端;孢子叶卵状三角形锐尖头，边缘有齿。茎
质地较硬脆，易折断。略具草腥气，味淡、微涩。
2. 2 显微鉴别 制作药材茎中段(距地面约 10
cm)的横切片、茎中部叶的表面片和药材粉末片进
行观察，绘制茎横切面简图和详图、茎中部叶缘细胞
特征图和粉末显微特征图。
2. 2. 1 茎横切面(直径 1 ～ 2 mm) :呈类圆形或两
端略尖的类椭圆形。表皮细胞 1 列，壁较厚。内侧
为数列至 10 余列厚壁细胞;其内为较宽广的皮层薄
壁细胞，排列紧密;内皮层不明显。气室长条形，长
径 820 ～ 1 300 μm，短径 200 ～ 330 μm。横桥多由 5
～ 10 余个莲藕状薄壁细胞单列径向排列而成，个别
由 2 ～ 4 列细胞组成。中柱长条形，被气室环绕;中
图 1 江南卷柏中部茎横切面简图
1. 表皮 2. 厚壁细胞 3. 皮层 4. 内皮层 5. 气室
图 2 江南卷柏中部茎横切面详图(×100)
1. 表皮 2. 厚壁细胞 3. 皮层 4. 内皮层 5. 气室
6. 横桥 7. 中柱鞘 8. 韧皮部 9. 木质部
6. 横桥 7. 中柱鞘 8. 韧皮部 9. 木质部
·1341·Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 9 期 2013 年 9 月
柱鞘为 2 ～ 4 列薄壁细胞;维管束外韧型;木质部长
条形，管胞壁木化。茎由基部至先端，各部细胞的列
数及其大小逐渐减小。见图 1 和图 2〔8〕。
根据多批药材茎的观察，基本特征与文献〔8〕报
道一致。
2. 2. 2 茎中部叶缘细胞:外侧具三角形刺状细胞，
刺斜向伸出叶缘，刺长 17 ～ 48 μm，有的刺状细胞基
部直接相连。刺状细胞内、叶缘外侧 5 ～ 7 列细胞长
条形，细胞壁增厚，壁孔明显。其内侧的表皮细胞长
梭形，壁呈微波状弯曲，且多见壁孔。见图 3。
图 3 江南卷柏茎中部叶的叶缘细胞(×400)
茎的横切面和表面片中叶缘的细胞组织结构对
江南卷柏与其混伪品的鉴别十分有效。尤其是叶表
面片的制作十分简便，而叶缘细胞的特征对区分江
南卷柏与细叶卷柏、薄叶卷柏十分简便，江南卷柏较
内侧的表皮细胞多角形或长梭形，细胞壁呈微波状
弯曲，而后二者较内侧的表皮细胞长梭形，壁呈深波
状弯曲〔9〕。
2. 2. 3 粉末:表皮细胞多为不规则多角形、不规则
类方形或长条形;气孔不定式，直径 15 ～ 30 μm，副
卫细胞 5 ～ 7 个;梯纹管胞直径约 21 μm;小孢子四
分体、类圆球形，直径 20 ～ 35 μm，表面有颗粒状突
起;木栓细胞常见。见图 4。
2. 3 穗花杉双黄酮的薄层鉴别 取江南卷柏药材
粉末 2 g，加石油醚(60 ～ 90 ℃)40 mL，加热回流 40
min，滤过。取滤渣再加乙酸乙酯 40 mL，加热回流
40 min，滤过，滤液浓缩至 1 mL，作为供试品溶液。
另取江南卷柏对照药材 2 g，同法制成对照药材溶
液。再取穗花杉双黄酮对照品，加甲醇制成每 1 mL
含 0. 5 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法
(2010 年版中国药典一部附录ⅥB)试验，吸取上述
溶液各 2 μL，分别点于同一硅胶 GF254薄层板上，以
甲苯-甲酸乙酯-甲酸(5 ∶ 4 ∶ 0. 5)为展开剂，展开，取
出，晾干，喷以 1%的 FeCl3 乙醇溶液显色后，检视。
供试品色谱中，在与对照药材和对照品相同位置上，
显相同颜色的斑点。见图 5。
图 4 江南卷柏粉末特征图(×400)
1. 叶下表皮细胞 2. 叶上表皮细胞 3. 鳞叶边缘细胞
4. 叶缘细胞 5. 鳞叶上表皮 6. 气孔 7. 木栓细胞
8. 孢子
图 5 江南卷柏薄层色谱图
1. 江南卷柏对照药材 2 . 穗花杉双黄酮对照品 3 ～ 5. 江
南卷柏样品
2. 4 含量测定
2. 4. 1 色谱条件:Diamonsil C18色谱柱(250 mm ×
4. 6 mm，5 μm) ;流动相:乙腈-水(含 3%四氢呋喃
和 3%三氟醋酸) ，A为乙腈，B 为水相，梯度洗脱(0
～ 5 min，25%A;5 ～ 12 min，25% ～ 35% A;12 ～ 17
min，35% ～ 45% A;17 ～ 25 min，45% ～ 50% A;25
·2341· Journal of Chinese Medicinal Materials 第 36 卷第 9 期 2013 年 9 月
～ 40 min，50% ～ 55% A;40 ～ 45 min，55% ～ 70%
A;45 ～ 50 min，70% ～ 100% A;50 ～ 55 min，100%
A;55 ～ 60 min，100% ～25%A) ;流速:1. 0 mL /min;
检测波长:330 nm;进样量:20 μL;柱温:30 ℃。
2. 4. 2 对照品溶液的制备:取穗花杉双黄酮对照
品适量，精密称定，加甲醇制成每 1 mL 含 0. 10 mg
的溶液，即得。
2. 4. 3 供试品溶液的制备:取江南卷柏药材粉末
(过 20 目筛)约 1g，精密称定，置索氏提取器中，加
氯仿适量，加热回流 4 h，取出药材，挥干氯仿，转入
100 mL圆底烧瓶中，精密加入 45 mL 甲醇，水浴回
流提取 2 次，每次 1 h，合并收集提取液，冷至室温
后，用甲醇定容至 100 mL 容量瓶中，摇匀，滤过，再
用 0. 45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
2. 4. 4 标准曲线的制备:配制含穗花杉双黄酮对
照品溶液(0. 10 mg /mL)2. 0、4. 0、6. 0、8. 0 和 10. 0
μL的标准系列溶液，分别按“2. 4. 1”项下色谱条件
下进行测定。以对照品的进样量和穗花杉双黄酮的
峰面积绘制标准曲线，得线性回归方程为 Y =
72． 674X － 1． 9913 (r = 0. 9999)。表明穗花杉双黄
酮在 0. 2 ～ 1. 0 μg范围内线性关系良好。
2. 4. 5 稳定性、精密度、重复性试验:分别按规定
进行 8 h内的稳定性试验、仪器精密度试验和同一
批号 5 份样品的重复性试验，穗花杉双黄酮色谱峰
峰面积 ＲSD值分别为 1. 4%、1. 3%和 3. 3%。
2. 4. 6 加样回收率试验:精密称取 6 份已知含量
的样品粉末各 0. 5 g，分别准确加入一定量的穗花杉
双黄酮对照品，按按“2. 4. 3”项下方法制备供试品
溶液并测定含量，计算回收率。结果见表 1。
表 1 加样回收率试验结果
编号 取样量/g
含量
/mg
加入量
/mg
测得总
含量 /mg
回收率
/%
1 0. 5036 2. 120 2. 0 4. 112 99. 8
2 0. 5012 2. 100 2. 0 4. 126 100. 4
3 0. 5084 2. 158 2. 0 4. 010 96. 4
4 0. 4993 2. 102 2. 0 4. 085 99. 6
5 0. 5027 2. 116 2. 0 4. 046 98. 3
6 0. 5064 2. 132 2. 0 4. 235 102. 0
ＲSD /% 100. 12
2. 4. 7 样品测定及含量限度的确定:按上述供试
品溶液的制备方法和测定条件，测定了 3 批不同采
收时间的药材中穗花杉双黄酮的含量。结果见表
2。根据 3 批样品含量测定结果，暂定本品含穗花杉
双黄酮不得少于 0. 30%。
表 2 3 批江南卷柏药材中穗花杉双黄酮的
含量测定结果(n =3)
样品编号 采收时间 含量 /%
1 2009. 10 0. 51
2 2006. 9 0. 40
3 2008. 10 0. 55
3 小结与讨论
本文观察了江南卷柏药材的显微特征，证实茎
的横切面组织结构和茎中部叶的叶缘细胞特征能与
其同属多种近缘药用植物区别开，对江南卷柏与其
混伪品的鉴别十分有效〔8，9〕。其中，叶表面片的制
作十分简便，在叶缘细胞特征中江南卷柏较内侧的
表皮细胞细胞壁呈微波状弯曲，而其近缘植物细叶
卷柏、薄叶卷柏较内侧的表皮细胞壁呈深波状弯曲，
该特征可以作为药材鉴别的重要依据。江南卷柏由
于是全草类药材，制作粉末片存在均匀性和稳定性
等问题，粉末特征仅可作为参考依据，粉末特征中，
叶缘细胞特征仍然是重要依据。
本文建立了江南卷柏药材和所含主要成分穗花
杉双黄酮的 TLC鉴别方法和 HPLC测定穗花杉双黄
酮含量的方法，并对 3 批江南卷柏药材进行了检测，
规定了穗花杉双黄酮的含量限度。该方法经考察，
精密度、重复性和加样回收率等各项指标都达到要
求，可有效控制江南卷柏药材的质量。另外，在含量
分析方法的研究中，曾分别用石油醚、乙醚、氯仿进
行索氏提取除杂，结果表明，氯仿提取能除去较多亲
脂性杂质。
参 考 文 献
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收稿日期:2013-03-25
基金项目:江西省教育厅资助项目(12750) ;江西科技师范大学校级科研项目(Ky2012zy17)
作者简介:周斌(1970-) ，男，博士，副教授，主要从事中药质量研究;Tel:15870664871，E-mail:tju_zhoubin@ 163. com。
中药山蜡梅叶质量标准研究
周 斌，李梦杰，王 平，程 丹，李 洁，崔小弟
(江西科技师范大学药学院，江西 南昌 330013)
摘要 目的:建立山蜡梅叶的质量标准。方法:采用二次展开薄层色谱法同时鉴别桉油精、β-石竹烯、芳樟醇、
东莨菪内酯、滨蒿内酯，显色剂为 1%香草醛硫酸溶液，烘烤温度为 110℃;采用 HPLC法同时测定东莨菪内酯、异嗪
皮啶、滨蒿内酯、芦丁的含量，使用依利特 Hypersil ODS2(250 mm × 4. 6 mm，5 μm)色谱柱，流动相为乙腈-水，梯度
洗脱，流速 1. 0 mL / min，检测波长 344 nm，柱温为 40 ℃。结果:TLC 色谱中 5 个化合物的斑点清晰，特征明显。
HPLC法中东莨菪内酯在 5. 665 ～ 56. 65 μg / mL 浓度范围内线性关系良好，r = 0. 9999，平均回收率为 97. 06%，
ＲSD为 1. 27%(n = 6) ;异嗪皮啶在 2. 4312 ～ 24. 312 μg / mL 范围线性关系良好，r = 0. 9999，平均回收率为
102. 86%，ＲSD为 0. 93%(n = 6) ;滨蒿内酯在 2. 444 ～ 24. 44 μg / mL 范围线性良好，r = 0. 9999，平均回收率为
102. 18%，ＲSD为 1. 81% (n = 6) ;芦丁在 9. 012 ～ 90. 12 μg / mL 范围线性良好，r = 0. 9992，平均回收率为
104. 44%，ＲSD为 4. 2%(n = 6)。结论:该方法操作简便，结果准确，重复性好，可用来控制山蜡梅叶的质量。
关键词 山蜡梅;薄层色谱法;高效液相色谱法;东莨菪内酯;滨蒿内酯;芦丁
中图分类号:Ｒ282. 5 文献标识码:A 文章编号:1001-4454(2013)09-1434-03
Study on Quality Standard of Chimonanthus nitens Leaf
ZHOU Bin，LI Meng-jie，WANG Ping，CHENG Dan，LI Jie，CUI Xiao-di
(School of Pharmacy，Jiangxi Science and Technology Normal University，Nanchang 330013，China)
Abstract Objective:To set up the quality standard of Chimonanthus nitens leaf. Methods:Five compounds were identified by
double-development thin layer chromatography，the plate was colorized with 1% vanillin-H2SO4 solution and warmed up in 110 ℃;The
content of four compounds was determined by HPLC，the chromatography separation was performed on the Elite hypersil ODS2(250 mm
×4. 6 mm，5 μm)column with gradient elution. The mixture of acetonitrile and water as the mobile phase at a flow rate of 1. 0 mL /min
was used，the detection wavelength was 344 nm and the column temperature was set at 40 ℃ . Ｒesults:The TLC identification was
highly specific and spots were clear. In HPLC method，the calibration curve was linear in the range of 5. 665 ～ 56. 65 μg / mL for sco-
poletin (r = 0. 9999) ，the average recovery was 97. 06% and ＲSD was 1. 27%;The calibration curve was linear in the range of 2. 4312
～ 24. 312 μg /mL for isofraxidin (r = 0. 9999) ，the average recovery was 102. 86% and ＲSD% was 0. 93%;The calibration curve
presented a linear range from 2. 444 ～ 24. 44 μg / mL for scoparone (r = 0. 9999) ，the average recovery was 102. 18% and ＲSD was
1. 81% . The standard curve presented a linear range from 9. 012 ～ 90. 12 μg /mL for rutin (r = 0. 9992) ，the average recovery was
104. 44% and ＲSD was 4. 2% . Conclusion:These methods are reproducible，sensitive and simple and can be used to control the quali-
ty of Chimonanthus nitens leaf.
Key words Chimonanthus nitens Oliv.;TLC;HPLC;Scopoletin;Scoparone;Ｒutin
山蜡梅 Chimonanthus nitens Oliv. 为我国特有的
蜡梅科蜡梅属植物，药用部位为其干燥叶，是江西道
地药材。主要分布于江西德兴、婺源和安徽徽州一
带山区，当地民间习惯用来泡茶治疗感冒。药理研
究表明，山蜡梅叶具有清凉排毒、防治感冒、防暑解
暑等作用〔1〕，其化学成分主要有挥发油、生物碱、黄
酮、香豆素等〔2，3〕。目前对山蜡梅及其制剂的质量
控制研究报道很少〔4〕，为了更好地控制山蜡梅药材
及其制剂的质量，本文首次采用二次展开薄层色谱
法定性鉴别 3 个萜类化合物和 2 个香豆素类化合
物，采用 HPLC法同时定量测定 4 种化合物的含量，
包括 3 个香豆素类和 1 个黄酮类化合物，为进一步
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