全 文 ：安徽农学院学报 ,夕; , ( , 乡: 2 ,一 3了
三种毛食科植物提取物及
原白头翁素的活性研究 ’
吴恭谦 张 超
( 安 徽 农 学 院 )
伍越环
( 中国科学技术大学 )
要
采集打破碗 花花 、 毛 芭和 白头翁了种毛茸科植物样品 76 个 , 以 水 、 人 尿 、 乙
醉等作溶 剂 , 用浸泡法 、 蒸馏法和回流苹取法等方法提取 , 进行生物测定 , 结果
表明 : 上述植物提取物具有较低的杀虫活性 , 较高的离体抑菌活性 , 对鱼低毒从
植物 中提取或人工合成的原白头翁素 、 白头翁素 ( 经 u V 、 I R 、 N M R分析 与文献
值符 合 ) 等样品 16 个 。 研 完证明 , 原 白头翁素 , 在水溶液中性质不稳定 , 容易发
生采合反应 , 其聚合物 的生物活 性明显下降 , 但 以 乙醇为溶剂时 , 则较为稳定 。
关键词 : 毛茸科植物 , 原 白头翁素 , 果蝇 、 棉蚜 、 小麦赤霉病菌 。
近十余年来 , 国内外对植物质杀 虫有效成份的研究十分活跃 , 特别是拟除虫菊醋类杀
虫剂的开发成功 , 激发了人们的极大兴趣 。 很多学者对印橄和苦棘等橄科植物 , 喜树 、 三
尖杉 、 苦树 、 铅笔柏 、 葛蒲 、 骆驼蓬草 、 凤眼莲 、 胡椒籽的提取物以 及 从 海 藻中得到的
aP ly ot ix n 等进行了研究 , 认为都具有一定的研究 与实用价值 , 有的甚至被认为可能 发 展
成为 “ 拟除虫菊醋后 ” 杀虫剂 “ 一 ` “ ’ 。
打破碗 花花 、 毛食和白头翁等毛蓖科植物 , 在国内 早 被 当 作 土 农 药 和 中草 药 使
用 ` , ` 一 “ ` ’ , 这类植物虽然已肯定含有生物活性物质 , 但不同种类 , 产地 , 提取 溶 剂 、 提
取 方法以及人工合成 的原 白头翁素 ( P r o t o a n e m o n i n ) 和 白 头 翁 素 ( A n e m o n i n ) 与 生
物活性的关系究竟如何 , 均未见系统资料 。 本研究 目的 , 在确定其有效成份的基础上 , 改
造化学结构 , 合成系列化合物 , 从而为开发新类型的农药提供必要 的理论根据 。 本报道是
研究结果的第一部分 。
材 料 和 方 法
( 一 ) 供试样品及提取 方法
供试样品见表 2和表 2 , 所有样品均保存于冰箱中备用 。
收稿日期 : 19 8 7年 11月 1日
* 中国科学院科学基金资助课题 。 安微农学院葛钟麟教授 、 李彦勇教授对本课题给予指导和支持 。
初稿写成后承蒙华南农业大学赵善欢教授审阅指正 。 参加本研究工作的还有刘 德 贵 , 徐 光 曙 , 丁 春
生 , 丁士敏和花 日茂等 , 谨此一并致谢 。
安 徽 农 学 院 学 报 I夕召夕年
供试的毛菌科植物样品数
`. 甲 `. ~. , ~
一, 一, 尸 . 峪 甲 , ` , .一~一 ~ ` r . , . 一~ 吮 ; 卜之~ 一曰~ 。 , 到 . 臼 . 峭 目尸” , 翻 r . 川 甲 , , , , . 尸 , ~ 一” ? 健 , `二 二阳 , 气 , , r , , 沪, , , 二 曰 , , 写 , , , , 二阳` 胃 , , . ~ `砚 , , , . , , , , , . . . , , . , , .诵` , . , 沪` . . . . . . 叭 , , ,吃 . ,。 胡 J 口 . , . , .喇,自 . , , . , . 门 r ,流 , , 、 , 二尸 , . ,侧 口 , , . . 去 二气 二, , . 一 , , , . . , .
产 地 提 取 有 洛
合计
萃取乙醇回流水蒸汽馏乙醇浸提人尿浸泡清水浸泡合计
植物 “
方 法
安徽省 四川省 陕西省 广西
宁国 款县 黄山 滁县 达县 三台 郭县 灌县 彭山 平利 ’南宁
打破碗花花 7
毛芡 5
白头翁
总计 12
4 1 0 3 7 6 4 53 19 3
5 3
2 4
26 1 0
3 2 5
3
1 5
7 3 0 3
53
11
12
7 6
J上2了O,一刁厅上矛
4
护O
廿
67
气O八U工4
八口山乙J土.上
,O气,Jg
* 学名: 打破碗花花 A n e m o n e h u p e h e n s i s L e 二 o n i n 。
毛 芡 R a n u n e u l u s j a P o n i e u s T h u n b
自 头 翁 P u l s a t i l l a e h i n e s i s ( B u n ` e ) R e g e l .
表 2 从植物中提取及合成原 白头翁素等类似物
化合物名称 R f值 溶剂 浓度 ( % )
02
J
IC少八O,一声O尹07
.`
:
八UUnné植物中提取
( 白头翁鲜株 , 水蒸汽蒸馏一一乙醚萃取
一一薄层分析分离各组份 。 )
各组份用47 . 5% 乙醇配成 0 . 2 % 浓度 。 原白
头翁素经 U V . I R . N M R等分析 ,结果与文献值符
合 2 2 )
人工合成
( 采 C . G r u n d m a n n 合 成 法 。 2 “ 白 头 翁
素 , 原白头翁素经U V . I R . N M R等分 析 , 结果
与文献值符合 “ 2 )
X 1
X 2
X 3
原白头翁素
一
x ` 0 . 8 8
自头翁素
原白头翁素
原白头翁素
原白头翁素澳代物
水
水
乙醇
乙酉享
1
.
0
1
.
0
0
.
2 5
0
.
2 5
. 一 , . 、 , 一一一 -一 ~ ~ 一 ~ , . 1 . . ` . . , ~ 之 . 曰二 , , . . . . . . 到 ,口 . 翻 . 侧翔目吕. 帕引 `气呜 . ` , ` . ` . . 曰 . . 曰叫 ,喂 . 阳 门二 . . 司 仁匆 . ` . . 目 . . 曰 叫. . . , . , . 甘一 - . , . . . . 曰 曰 . 岭 ~ . `~ ~ r .~ ~ , ~ 一~一- 一 , `七, . ~ r J 一一 , ” 州 . . . . , . ~一一一 , , . . . . ,( 二 ) 供试生物和测试方法
试虫 : 果蝇系室内人工饲料饲养 ; 赤拟谷盗为配合饲料饲养 ; 棉蚜采 自木挫树越冬干
母所产后代 ; 菜青 虫采 自蔬菜大田 。 从 自然界采得的试 虫 , 均未喷撒过农药 , 并经室内伺
养 ’ ’毛以上方供测试使用 。 果蝇 、 棉蚜或赤拟谷盗各处理刘头以上 , 菜青虫为 20 头 左 右 。
设 J一夕次重复 , 同时设清水或溶剂作对照 。 果 蝇测试 , 除观察 2 4及招小时死亡率外 , 尚观
察对当代成虫或幼 虫的影响 , ( 含生长发育进度 , 各 虫体形态 ) 及对下一代的影 响 。
供试的植物病原菌 , 除小麦白粉病菌采 自大 田小麦植株外 , 皆用最优条件培养 。 抱子
萌发法用新鲜分生抱子 , 每视野 ( 10 x 10 ) 2口个左右 , 傅处理检查抱子耳口个以 上 ; 菌 丝
生长抑制法选 自一定菌龄外缘生长旺盛 的菌丝制作菌碟 , 设 3个重复 , 同时设空白或 溶 剂
为对照 。
小金鱼挑选大小一致 , 健康活泼的个体 , 每样品 `一 s个浓度 , · 每处理 ” 尾 , 重复 2一 3
次 , 置恒温室内一饲养观察 。
第 1期 吴恭谦 等 三 种毛蓖科植物提取 物及 自头 翁素的活性研究
表 了 供试生物和测试方法
式 生 物 测 试 方 法
果蝇D ros o ph il a S p
棉蚜 A ph is gs s oy Pi iGlv o er
菜青虫 Pi eris ra pa eLin n a e us
赤拟谷盗 T rib ol i u ms a etan e u m( H r ebs t)
小麦赤霉病菌G 企b b r e el l z a a e e( s eh w) P et eh
小麦白粉病菌E rys i ph eg rai mn is Ds. a r els
水稻弯抱霉菌 C urv Ul a ri aln a ut e.
水稻白叶枯病菌 Xan th o mon as o ryz a e
金鱼( 一点红)
培养基混药法
药膜法
微量定最喷雾法
液浸法
木雀枝条内吸法
棉苗内吸法
微量定量喷雾法
带毒叶片饲喂法
点滴法
喷雾法( 成虫产卵忌避作用
折叠药纸法
菌丝生长抑制法
抱子萌发法
抱子萌发法
抑菌圈法
去氯自来水 , 饭粒或摸饲喂
结 果
( 一 ) 对昆虫活性的测试结果
I
、 果蝇 、 通过成 虫和 ( 或 ) 幼 虫活性测定证明 , 各样品的原液 , 浓度为含植物 干 样
0
.
10 一 0 . 2 0克 / 毫升 溶剂时 , 触杀或胃毒作用均不明显 , 除对当代成 虫 、 幼虫生长发育速
度及形态无明显的作用外 , 也不影响下一代 。 另外参试的安徽 产打破碗花花 , 毛蓑和 自头
翁之间 ; 水浸泡法 、 乙醇浸提法 、 人尿浸泡法和蒸馏法 、 回流萃 取 法 之 间 , 浸提时间在
64 一 1 1 2小时 ; 提取温度 ( 水浸泡法 ) 在 1 一月 ℃ 、 况℃和幼一 60 ℃ 的范围内均无 差 异 。
打破碗花花苗期全株和落叶期根部的样品间也无差异 。
用打破碗花花水蒸汽蒸馏法及常温下水浸泡 法的提取液对成虫了天的死亡率很低 , 而
.目_能繁衍后代的成虫数量有比对照略多的趋势 ( 表 了 ) 。
表了 打破碗花花两种提取方法提取液对果蝇的影响
提取方法 样 品
( 含量 : 干样克 / 毫升 )
灌县 、 根 ( 0 . 12 )
. 彭山 、 茎叶 ( 0 . 1 2 )
平利 、 叶 ( 0 . 1 2 8 )
孚范县 、 根 ( 0 . 12 )
灌县 、 叶 ( 0 . 12 )
卑巧县 、 叶 ( 0 . 13 8 )
彭山 、 TJ一卜( 0 . 1 23 )
平利 、 叶 ( 0 . 12 1 )
3天后
死亡率 ( % ) 9天
平均 F : 成虫累计数 / 头
1 0天 12天
常温浸泡法 3 . 3
3
.
3
3
.
3
0
.
06 5
0
.
1 4
0
.
17
3 9 8
.
04
63 9
.
7 4
1 5 1 1
.
10
39 1 1
.
1 5
7 9 6
.
4 2
7 2 7
.
66
2 4 9
.
00
9 0 7
.
94
1 5天
1 5
.
06
1 5
,
12
2 0
.
93
2 0天
2 1
.
6 0
18
.
9 8
2 5
.
0 8
22
O子认é
4
八`1
8
ùUO矛nU八了2410犯837594J土97Jt了42Jl`11qù汤土1一QJ今4J土月J
.八JO白
八UùJ[nJl,止哎岌.0.0 ,神.4
悦孟1上
水蒸汽蒸馏法
又J 照 1 . 2 < 0 . 1 2 . 3 8 8 . 03 14 . 3 6 19 . 0 8
安 徽 农 学 院 学 报
!了
I 夕 8夕年
扫一破碗花花水蒸汽蒸馏法的清液和残渣 两部份样品的活性比较看出 , 不论是达县或南
宁的植株 。 叶片或根的样品 , 不仅杀 虫活性很低 , 而且每成 虫平均的后代数较对照明显地
增加 , 其中残渣 的水浸液比清液增加量略大 , 达县样品 比南宁样品增加量较高 , 表 5 。
表` 打破碗花花水蒸汽蒸馏法清液和残渣两部份的活性比较*
样 品
( 含量干样克 / 毫升 ) 处理 3天后死亡率 ( % )
平均 F ,成虫累计数 / 每头
12天 15天 2 0天
qé络`O弓`4
.t…,自八6曰勺口jfJ11月. Jl弓Júsn一úó,夕. .…声On甘USú3J土,上达县 、 叶 ( 0
.
1 8 )
达县 、 根 ( 0 . 3 3 )
南宁 、 叶 ( 0 . 17 )
南宁 、 根 ( 0 . 2 0 )
清液
残渣
清液
残渣
清液
残渣
清液
残渣
3
.
3
8 3
15
.
0
8
.
3
3
.
3
5
.
0
3 3
1
.
7 5
< 0
.
1
0
.
1
1
.
3
0
1
.
6 5
.
9
6
.
6
7
.
8
5
.
0 1 0
。
9
1 1
.
1
1 8
.
4
对 照 6 . 7 0 . 23 5 . 7 12 . 1
白头翁植物提取物经层析分离得 s种主要组份 , 各组份配成 0 . 2% 乙醇一水溶液 , 除原
白头翁素有较高的活性外 , 其它 4种化合物 ( 结构 另有报道 ) 和原 白头翁素澳代物均 表 现
较低 的活性 。 见表 6 。
表 6 白头翁植物主要组份及原白头翁素澳代物的活性 比较
样品编号 化合物名称 校正死亡率 ( % )
12小时 24小时
目毖0,沪O才自斗137584n
ùó匕J
S.…勺自沪O口山nù只ù弓山乙U八8 60 6 10一 48 6 0 61 0一 58 60 6 10一 6
86 0 61 0一 7
8 606 1 0一 8
8 50 6 12一 1
X l
X 2
X 3
原白头翁素
X 4
原白头翁素嗅代物
* 对照水及47 . 5% 乙醇 12 及 24 小时的死亡率分别为 5 . 5 . 8 . 3及 13 . 5 , 15 . 3% 。
2
、 棉蚜 、 3种毛莫科植物的鲜株人尿浸泡液 ( 浸泡 7 2小时 ) 和打破碗花花 、 毛莫两种
值物清水浸泡液或乙醇浸提液均表现较低 的活性 , 但打破碗花花 、 白头翁的水 蒸 汽 蒸馏
物 , ,不 论是清液或残渣 , 经有机溶剂萃取一蒸去溶剂的水溶液具有较高的活 性 ( 表 7 ) 。
看来 , 不同提取 法 , 其活性物的含量不尽相等 , 也可能是被提取 物的种类不一致 。
3
、 菜青虫 , 了种毛莫科植物的室温清水 , 卯一 60 ℃温水和室温乙醇浸提液 , 对菜青虫
3或 `龄幼虫的拒食作用不显著 。
打破碗花花和白头翁各浸提液对菜青虫的幼虫生长发育无不良影响 , 还有增加蛹重的
趋势 。
第 z; 攀 }
表 7
提取方法
吴恭谦等 三种毛莫科植物提取 物及白头翁素的活性研究: 、
打破碗花花等不同提取方法对棉蚜的活性比较
样品 含量 *
( 克 /毫升 )
校正死亡率(% )
1 2小时 24 小时4 8 小时
曰ó户 O沪 0 17,.户00自4凡`内乙件白己JO护口目42lb矛0工I曰比j
. .…n,门了nù
J土Uù匕4q口4C1`0曰匀qù,孟6247951的4,习自月了曰飞ù八1ùé1é八`,一占、
清渣
úóJnlù目j八UO白nùno0
`土1占月`,J上,二,1山八一`O乙nùe一1ùēU八”óóǎ1甘U一目人尿浸泡
( 人尿对照
1 2及 24小时
死亡率为 1 3 . 2 5%
和 14 . 4 6多石。
了重复均值 )
1é.勺,自q甘Znó…9CU门了2
清水浸泡
( 清水对照
死亡率为4 . 80 % )
打破破花花 , 全株
茎 、 叶
根
毛蓖 、 全株
茎 、 叶
根
白头翁 , 全株
花
茎 、 叶
根
打破碗花花 , 根
乙醇浸提
( 对照死亡率
为 4 . 8 2%
打破碗花花 , 根
毛莫 , 根
打破碗花花 , 根
水蒸汽蒸馏
( 对照 24及4 8
小时死亡率为
1
.
69 %和 23 . 39 % )
打破碗花花 , 根
毛莫 根
打破碗花花 , 根
34
。
89
2 6
.
5 1
2 8
.
02 4 4
.
9 1
打破碗花花 , 根 4 8 . 6 3 5 9 . 9 9
白头翁
白头翁
全株
全株
0
.
5 0 ( 清 )
0
.
5 0 ( 渣 )
3 5
.
6 1
8 7
.
9 4
5 7
.
12
9 3
.
46
注 : 含量 , 人尿浸泡法为植株鲜重 , 其它提取方法均为干重 。
在刘习底的一组试验中观察到 , 各处理幼虫对绒茧蜂无影响 , 在寄生率 , 寄蜂数 量 和
发育进度 , 羽化后成蜂的飞翔力等项与对照相比较均无明显差别 。 见表 8 。
4
、 赤拟谷盗 , 打破碗花花的汗卜片清水浸泡法和水蒸汽蒸馏法提取液对赤拟谷盗 成 虫
均表现一定的忌避活性 , 尤以后者较为显著 ( 见表 夕 ) 。
( 二 ) 对植物病原菌活性测试的结果
I
、 小麦白粉病菌 , 分生抱子离体培养萌发试验表明 ( 表 1 0 ) 。
①人工合成 的原白头翁素以口. 2 25 %浓度和植物提取液 0 . 1% 均具有抑制抱子 萌发 的
能力 , 其抑制率都在 s0 % 以 下 ; 提取液的不同温度之间差异不明显 。
②不同植物种间的活性趋势为 : ` 毛莫 > 白头翁 》 打破碗花花 ( 2 4及 4 8小 l付 ) 。
2
、 水稻弯抱霉菌 , 琼脂平板离体培养 ( 2 6 士 0 . 5 ℃ ) 抱子萌发测定结果看出 : 合成的
原 白头翁素具有很 强的抑制能力 , 浓度为 2卯 p p m时 , 不论水或乙醇溶剂 , 其抱子 荫 发 校
安 徽 农 学 院 学 报 z, s夕牟
三种毛草科植物提取物对菜青虫活性的影响
( 选择性取食 、 带毒叶片法 )
重复干物编号 样品代号 * * 含量
( g / m l
取食面积
( m m
“
)
拒食率 *
( % )
平均蛹重 羽化期
( m g / 头 ) 月 、 日
绒茧蜂
处理 C K
寄生率
( % )
羽化
始期
nù八曰n以ù日64月峙O口
ù日R一尹O了O矛户勺弓自劝山 J土J,火
nénùUēnù705“698乃山,上,上J土,一…6202
1 98 5
.
5
.
9 ( 3龄幼虫 . 2 4小时 )
打 ( 醇 ) 宁 0 . 20 32 . 6 0 7 4 . 7 0 5 6 . 3 6
打 ( 水 ) 宁 1 0 . 15 53 . 9 6 5 1 . 7 8 /
打 ( 水 ) 宁 : . 0 . 10 36 . 2 0 7 3 . 7 0 5 0 . 8 5
打 ( 醇 、 渗 ) 宁 0 . 12 59 . 6 5 72 . 2 1 17 . 3 9
毛 ( 醇 ) 宁 ; ` 0 . 20 5 1 . 54 7 5 . 6 1 3 1 . 8 3
毛 ( 水 ) 宁 1 0 . 1 5 57 . 35 85 . 9 9 3 3 . 3 1
1 9 85
.
5
.
1 9 ( 5龄幼虫 . 1 2小时 )
毛 ( 水 ) 宁 : 0 . 14 9 3 . 55 8 0 . 1 9 /
毛 ( 水 ) 歇 0 . 14 74 . 88 1 17 . 8 3 36 . 4 5
毛 ( 温水 ) 宁 0 . 14 4 8 . 32 80 . 3 7 3 9 . 8 8
毛 ( 温水 ) 敛 0 . 14 5 1 . 03 7 9 . 4 2 ’ 3 5 . 75
毛 ( 醇 ) 宁 : ` 0 . 13 4 0 . 8 8 5 6 . 64 27 . 82
毛 ( 醇 ) 如二 0 . 1 3 3 8 . 31 7 3 . 04 4 7 . 55
19 85
.
5
.
3 1
.
( 5龄幼虫 . 1 2小时 )
打 ( 醇 ) 欲 0 . 13 95 . 87 11 0 . 05 12 . 8 9
打 ( 7J丈 ) 宁 : 0 . 14 12 5 . 37 一 1 4 7 . 49 1 5 . 0
打 ( 水 ) 欲 D . 14 1 5 6 . 54 13 6 . 15 /
打 ( 温水 ) 宁 0 . 14 1 66 . 2 1 64 , 5 /
打 ( 温水 ) 救 0 . 14 14 1 . 8 1 1 50 . 8 9 6 . 02
打 ( 醇 ) 宁 2 0 . 1 3 13 2 . 74 14 7 . 49 ` 1 0 . 0
自 ( 水 ) 滁 0 . 14 1 04 . 37 13 1 . 6 20 . 6 9
白 ( 温水 ) 滁 0 . 14 14 0 . 1 1 18 8 . 9 2 5 . 8 3
白 ( 醉 ) 滁 0 . 1 3 13 6 . 7 1 1 8 8 . 33 2 7 . 4 1
C K ( 水 )
C K ( 乙 : ;享)
134102
巧 1 . 2 9
1 64
.
1
1 8 0
.
0 8
6
.
3
6
.
3
6
.
3
6
.
3
6
.
3
6
.
3
1 4 7
.
3弓
15 2
.
05
1 6 6
.
9 4
14 7
.
41
6
.
1 2
6
.
1 0
6
.
11
6
.
1 1
7 5
.
0 6
.
2
6
.
3
6
.
30八U
.…ēU曰岛八Unù内了哎曰叮rC3
nUC八“ùné六U八n0ēO山O,曰弓白
心乙口自,目2
口曰月峙目J/ot了八0
2
1)
尹
bnOQ
ù
O尹八,上,占,一11由`上J土口自2
6
.
3
13 7
.
8 0 6
.
1 1 0 6
.
2
* 拒食率 ( % ) - 对舅吐兰键巫盒面咫二丝理卫士兰
.雄皿盒亘鲤对照叶片被取食面积 X 10 0
* * 打 、 毛 、 白分别为打破碗花花 、 毛莫 、 白头翁的缩写 。 以下同。
正抑制率均在” % 以上 ( 托 、 召了和韶号 J个样品依次为” . 4 , 夕8 . 4和 ” . 1% 。 乙醇及 清 水
对照 的袍子萌发抑制率为 子 . 召和 2 . 6 % ) 。 .
3
、 小麦赤霉病菌 , 采用马铃薯琼脂培养 , 2 5 . 5 士 0 .
果表 明 : 了种毛位科植物的水提液均有较高的抑制作用 ,
S
O
c 了2小时 , 菌丝生长抑制测定结
但不同温度提取 , 活性有 差 别 ,
以 常温 ( 2 2℃ ) 下活性为高 。 一般对原菌碟菌丝无杀死能力 , 使其向垂直方向生长 。 从杂
菌污染情况看 , 较高温度 ( 卯一 60 Oc ) 下的提取液 比常温为严重 (表 1 1 ) 。
第 了期 吴恭谦 等 三种毛食科植物提取物及 自头 翁素的活性研 究
一— — 一 .— 一一 ` 一— 一一一 ,一丁 ~一一 一一一 - — 一— - 一一— 一 一—— — 一—表夕 打破碗花花对赤拟谷盗成虫的忌避活性主6天后 4 2 0天后 3 0天后一均数皿一最高数处一旗ù`拱忌避率%忌避率%品产地 处理 对照 处理 对照 对照 忌最 4。 避一 , 、 护 沪刁 斌扮J】L l 习g护 钾、数 队 ( %均数最高数均数最高数均数最高数均数最高数样样品提取法
卑巧县
灌县
彭山县
平利县
22 12
,
3
1 5 10
.
3
9 5
.
3
3
、
2
.
7
15 5
.
7 一 2 3 8 . 3 29 14 . 7 2 7 . 6 16 9 . 0 1 8 1 1 . 0 1 8 . 2
3 1 2 3
.
0 3 8
.
0
0
29 19
.
3 2 2 10
.
0 一 2 8 15 . 0 7 4 . 7 一
4 8 2 7
.
0 6 7
.
0
·
3 4 2 0
.
3 5 7 27
.
0 14
.
1 1 3 1 0
.
3 2 9 1 4
.
7 2 9
.
6
2 6 16
.
7 7 2
.
4 3 2
.
0 1 4 9
.
0 6 3
.
6
、
9 5
.
7 1 2 6
.
3 1 0
.
4
nU勺山
曰勺产O,上月土达县
南宁市
平利县
6 3 1 00 5 3
.
0
1 5 6
.
0n甘nU
`胜ù ,山
0 0
2 0
.
7
2 1
.
0
8
.
0 9 1
.
6
5
.
7 82
.
4 2 0
.
7 19
5
.
3 43
.
7
9
.
3 3 5
.
7
9
.
3 9 2
.
8
0
.
3 7 2
.
3 8 5
.
8
0 12 9
.
3 10 0
1
.
3 17 12
.
3 8 7
.
1
清水浸泡法蒸汽馏
注 : 忌避率 = B一 A
A 十 B 火 10 0 A为处理滤纸虫数
,
B为对照滤纸虫数。 3重复平均值 。
表 10 植物提取液及合成原白头翁素对小麦白粉病菌袍子萌发测定七
抱子总数 萌发数植物提取温度℃
抑制率 ( % ) 校正死亡率 ( %
打 2 2
5 0一 6 0
2 2
{ 24 ,wtJ 一
~菇一 24 48 一正一矿 一 ` 一丽一 -一而 “ 一 ` -
16 9 1弓 3 1 00 84 _ 4 0 . 8 4 5 . 0 3 0 . 8 3 8 . 5
1 60 1 69 1 0 1 8 3 3 6
.
8
`
5 0
.
9 2 6
.
2 4 5
.
0
1 51 1石 7 7 9 ` 6 3 4 7 . 7 59 . 9 3 8 . 7 5 5 . 1
{ 16 3 16 7 7丁 7 8 5 2 . 8 5 3 . 3 4 4 . 8 4 7 . 3
16 0 16 5 7 4 9 1
、
4 8
.
8 4 8
.
9 4 0
.
1 38
.
3
1 5D 1 56 7 7 7 9 4 2
.
0 4 1
.
5 32
.
2 34
.
7
5 10 4
0 3 0
.
3 4 0
.
2
7 18
.
0
6
` 10产刀,1二式UJ土曰止
* 植物提取方法为清水浸泡法 。 合成原白头翁素采 C . G r u n d m a n n法 ,经 U V . I R . N M R等分析结果
与文献值符合 。
萌发测定为琼脂平板加麦叶浸出液 , 26 士 0 . 5℃ 。 、 .
原 白头翁素的乙醇或水溶液、 , 在 2卯 . OP p示时均完全抑制菌丝的生长 , 而且使菌 碟 上
的原菌 丝消失 。 用 2卯和 Z s p p m两浓度相 比较 , 乙醇溶液比水溶液抑制能力明显提高 。 经显
著性 t 测验 , 两样品的各浓度与抑制率都呈高度 正相关 。 乙醇溶剂样品 P 。 . 。 。 < t < P 。 . 。 , ;
水 溶剂样品为相关极显若 , t < P 。 . 。 , 。 并从作 图法求得原 白头翁素 ( 乙醇溶 依 、 s6 号 样
品. ) 对小麦赤霉病菌的菌丝生长 E C 。 。为久 1 2 p p m 。
子、 水稻 自叶枯病菌 、 原 白头翁素 2卯 P m浓度处理 , 温度 2了. ` 士 口 . 石℃ , 牛 肉蛋 自 陈
培养基 , p H了 . 、 , 不论乙醇或水作溶剂 , 对水稻 白叶枯病菌均完全抑制 , 且 皿内无共它任
何杂菌污染, _ _ · _ ·
安 徽 农 学 院 学 报 I,召夕年
表 2 2 打破碗花花等提取液对小麦赤霉病菌生长的影响
植物产地 提取温度 菌落直径 抑制率
打 宁国 2
( ℃ ) ( m m ) ( % ) r` J 协
10 0
户000
歇县
94
.
8 3
.
滁县
5 0一 60
2 2
5 0一 6 0
22
5 0一 6 0
2
.
1
6
.
4
3
.
9 9 0
.
1
1 0 0
65
.
5
清水对照
1 3
.
6
39
.
34
原菌丝垂直上长 , 无污染
原菌丝垂直上长 , 真菌轻度污染
原菌丝垂直上长 , 无污染
原菌丝垂直上长 , 细菌轻度污染
原菌丝垂直上长 , 真菌严重污染
原菌丝水平扩展 , 真菌污染严重
原菌丝生长茂盛
. 水提液浓度 i 4 Op p m 。 每处理为 18 次重复均值 。
表 1 2 s7 号样品德定性对小安白粉病菌抱子萌发的影响
测定日期
( 月 、 日 )
检查抱子数 校正抑制率 ( % ) 差值 ( % )
12小时 24 4 8
5
.
2 0
5
.
2 8
12 24 4 8 12 2 4 4 8
22
.
6 2弓. 6 4 0 . 2
13
.
6
`
6
.
5 9
.
6 一 8 · 8 一 18 · 8 一 3 0 . 6
O产伪口呀口J上JO了D八6叮了自`.上沪OJU`O产乙内jJl矛O产O
( 三 ) 对金鱼活性测定的结果
用作 图法比较几个植物提取液对金鱼的T L m ( 子召小时 ) , 活性的结果是 : 白头翁 ( 水
蒸汽蒸馏法 ) > 打破碗花花 ( 温水浸泡法 ) > 白头翁 ( 常温水浸法 ) > 毛 蓖 ( 常 温 水 浸
法 ) 。 T L m值依次为 3 1 . 7 2 , 5 3 . 2 0 , 5了7 . 0 , 了了; 召m g / m l ( 即 2 2号 、 召号 、 1 ,号和 z子号 `样
品 ) 。 经 x 艺测验 , 证明其 x “值均远低于 0 . 口`显著标准 , 认为其毒力回归线属正确 。
四 、 原白头翁素稳定性测定的结果
原白头翁素 ( 1 ) 很不稳定 , 室温下容易形成二聚 ( I ) 或多聚 白头翁素 2 “ 。 原 白头
翁素的稳定性与活性变化情况如下 :
工` ,。 。 ` . …’ ! 一嵘 i
1
、 溶剂对原 白头翁素稳定性的影响 , 原 白头翁素以 乃 0 p p m 浓度的 子7 . 5% 乙醇溶液
( s6 号样品 )保存 , 经 ,天后对果蝇的活性皇增高趋势 , 但 同浓度的水溶液 ( s7 号样品 ) 则
活性明显下降 ( 图 1 ) 。
2
、 贮存时间对原 白头翁素水溶液稳定性 的影响 , 打号样品 ZS 0 0P m在 0~ 了℃ 避 光 条
件下 , 贮 存 8天以后 , 抑制小麦白粉病菌分生抱子萌发的活性明显下降 , ` 见表 12 。
该羊错同付则之对小麦赤霉病菌菌丝生 长的影响 , 同样证明经贮存 8天后 , 抑制 力 明
第 1期 吴恭谦等 三种毛食科植物提取物及原 自头翁素的活性研 究 2夕
乙 水’ U V
I 西享 落拉 1背者剑 l` 、 1 .
:……“ ’ “` {’ 。
}目
2 0 5/29 / 52 0 5/9 2
2 4小 时
5/2 0 5/9 2 5了 2 0 5/29
4 8
,
J
. 日寸
图 1 原白头翁素2 5 0Op p m 的不同溶剂对
果蝇活性的稳定性
幻N双叭公门日口
36样。如35样口如
ó州óé日ùOJ一2
.
校正死亡率
显下降 。 2 . 5 0 p P m和 0 . 2 5 p p m的差值分别为 一 5 . 了
和 一 2夕 . 5% 。
白头翁植物提取 物经贮存一定时间后 ( 贮存
条件同前 ) , 生物活性亦明显下降 , 见图 2 。 这些
结果表明 , 合成的或植物提取 的原 白头翁素 , 经
贮存后容易发生聚合作用形成白头翁素 , 后者的
活性较之前者明显降低 。 生测活性结果与朱 胃远
等紫外光谱测 定结果一致 ` 2 2 ) 。
讨 论 和 结 论
( 一 ) 杀虫活性 : 三种毛莫科植物提取液和
合成白头翁素 , 对果蝇 、 棉蚜 、 菜青 虫和赤拟谷
盗等组成的生物筛测定表明 , 杀虫活性均较低 ,
甚至 出 现 对 害虫生长发育的良好影响 。 显然与
《 中国土农药志 》 ’ ` 和《土农药及生物防治》 ` “ 上
防治棉蚜 , 菜青虫等高效的记载完全不一致 。 合
成的原白头翁素水 溶液在 Z s o p p m 以上浓度方显
较高杀虫活性 。 原白头翁素 在 鲜 株 中含量约为
0
.
18 %
, 照此推算 , 实用中需量很大 ; 而且原 白
头翁素容 易聚合成 白头翁素 , 聚合物的活性显著
降低 。 因此农业生产中应用值得怀疑 。
( 二 ) 杀菌活性 : 毛蓖科植物浸出液对植物
病原菌离体活性试验及防病效果过法 有 不 少报
道 , 指出打破碗花花对小麦叶锈病菌夏袍子 、 小
麦杆锈病菌 , 马铃薯晚疫病菌 ( ` ” ` “ ’ 2 ` ) , 白
头翁对马铃薯晚疫病 、 山芋黑斑病 和 稻 瘟 病菌
等 ` 么 ` ’ , 都有较高的活性或防效 。 从我们试验结
果看 , 打破碗花花 、 毛莫和白头翁的植物清水提
取物以及合成的原白翁头素 , 对小麦白粉病菌分
生抱子只有较低 的抑 制萌发力 ( < 50 % ) , 对小
麦赤霉病菌菌丝生长具有较高的抑制率 。 原 白头
~ 5 0色
公
LL
_ 性 耳 田 } 1 1 1 双 闷
3 /2碍 5/ 2 0 324/ 5了2〕 3 /24 三/ 2。 习: 二 二/花
2 4 小 时 4 已小 灯
图2 植物中提取的原白头翁素对果蝇的
活性 ( 9 00 P p m , 0一 3℃避光 、 贮存 56夭 )
翁素的水或乙醇溶剂 , Z S 0p pm浓度对水稻弯抱霉菌抱子萌发抑制力都很强 ( > 夕8 % ) 。
原 白头翁素 2 50 , o p pm 对小麦赤霉病菌不仅抑制其菌丝扩展 , 而且使原菌碟上 菌 丝 萎
缩 。 了种毛莫科植物的乙醇提取液抑制菌丝生长的能力虽然不强 , 但可抑制真菌或细 菌 性
的杂菌 , 而水溶液则杂菌污染严重 。 这说明 , 乙醇或水溶液的活性物质 有 差 异 。 Z SOP pm
的原 白头翁素 , 可完全抑制水稻 白叶枯病菌 , 且培养血内无杂菌污 染 。 这种对水稻弯抱霖
菌 、 水稻 白叶枯病菌和小麦赤霉病菌的作用 , 国内未见报道 , 有进一步研究 的必要 。
( 三 ’ ) 金鱼活性 ; 其毒性属于低毒类 , T场值
花为 5了 . 1 0, 毛蕊为 1了7召. 口。 在 白头翁的各种提取法中 , 水蒸汽蒸馏法的活性明显地 高 于
清水浸泡法 。
参 考 文 献
〔 1 〕赵善欢 : 19 8 3 , 农药 , 8 3 ( 6 ) , 2 8一 2 9 。
〔 2 〕 A n d r e w C o x : 1 9 81 , I n t e r n a t i o n a l P e s t C o 口 t r o l 2 3 ( 3 ) , 68一 7 0 。
〔 3 〕湖南林科所 : 19 78 , 昆虫学报 , 2 1 ( 1 ) , I D8一 1 12 。
( 4 〕印万芬 : 19 8 6 , 林产化学与工业 , 6 ( 1 ) . 3 6一 37 。
( 5 〕赵善欢等 : 19 8 4 , 昆虫学报 , 27 ( 3 ) , 24 1一 7 。
〔 6 〕赵善欢等 : 1 98 6 , 植物保护学报 , 13 ( 2 ) , 1 16。
〔7 〕邓福孝等 : 19 8 5 , 植物学报 , 2 7 ( 5 ) , 5 16一9 。
〔8 〕 5 . S i g h a m o n g , e t a l : 1 98 4 I n t e r n a t i o n a l P e s t C o n t r o l . 2 6 ( 6 ) , 1 56一 7。
〔9 〕 S a x e n a , B . P . e t a l : 1 97 7 N a t u r e ( I o n d a n ) , 7 72 7 0 ( 5 6 37 ) , 5 12一 3 。
〔1 0 〕 J a m i l K a i s e r , e t a l : 19 8 4 I n t e 丘a t i o n a l P e s t C o n t r o l 26 ( 4 ) , 1 0 6一 8 。
( 1 1 ) 中国土农药志编委会: 19 59 , 中国土农药志 , P . 34 一 40 , 科学出版社。
( 12 〕全国供销合作总社农资局 : 19 7 9 , 土农药及生物防治 , P . 4 , 36 , 化工出版社 。
〔 13 〕刘寿山丰编 : 19 7 9 , 中药研究文献摘要 ( 19 6 2一 19 7 2 ) , 科学出版社 。
( 14 〕中国科学院昆虫所 : 1 95 9 , 昆虫知识 , 59 ( 1 ) , 7一 16 ; 59 ( 1 0 ) , 3 3 1一 5 , 3 2 6一 8
〔 15 〕北京大学生物系昆虫室等 : 19 60 , 北京大学学报 ( 自然科学 ) 60 ( 2 ) , 195一 20 9 。
( 16 〕安微省农业厅技术指导处 : 1 95 8 , 中国农报 , 58 ( 17 ) , 3 3一 3 5。
( 1 7 〕曹松年等: 19 62 , 中华医学杂志 , 48 ( 1 2 ) , 7 8 1一 6。
( 18 〕南京药学院 《 中草药理学 》 编写组 : 19 7 6 , 中草药学 ( 中 ) , 江苏人民出版社 ;
〔 19 〕吴葆杰主编 : 1 9 83 , 中草药药理学 , 人民卫生出版社 。
( 20 〕王俗生主编 : 19 83 , 中药药理与应用 , 人民卫生出版社 。
〔 2 1 〕宋本竟 : 198 6 , 辽宁农业科学 , 8 6 ( 1 ) , 3 4 。
〔 2 2 〕朱胃远等 : 19 87 , 中国科学技术大学学报 , 17 ( 3 ) , 3 36一 34 2 。
〔 2 3 〕 C G r u n d m a n n , 19 55 , J . A m C h e m S o e , 7 7 , 23 33 。
〔 2 4 〕中国农科院植保所 : 19 5 9 , 农业科学通讯 , 59 ( 9 ) , 297一 3 00 。
第I 期 吴恭谦等 三 种毛蓖科植物提取物及原白头翁素的活性研究色3 1
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w e r e e o l l e e t e d
.
U s i n g w a t e r
,
h u m a n u r i n e a n d a l e o h o l a s s o l v e n t s
,
t h e y w e r e
e x t r a e t e d b y s o a k
, d i s t i l l a t i o n a n d s o o n
.
B i o a s s a y r e s u l t s i n d i e a t ht
a t t h e
e x t r a e t 15 o f v e r y l o w i n s e e t i e id a l a e t i v i t y a n d v e r y h i g h i n v i t r o f u n g i s t a t i e
a e t i v i t y a n d l o w t o x i e i t y t o f i s h
.
S i x t e e n P r o t o a n e m o n i n a n d a n e m o n i n s a m P l e s w e r e e x t r鱿长 d f了 o m 止 e
p l a n t s 而 d s y n t h e s i s e d . I t w a 。 d e m o n s t r a t e a t h a t t h e i : s t r u 。 t u r e s a e e o记 e d w i t h
t h e r e e o r d s i n r e f e r e n e e s b y a n a l y s i s e s o f U V
.
IR
.
N M R
.
T h e r e s u l七s s u g g e s t
t h a t P r o t a n e m o n i n 15 u n s t a b l e i n w a t e r a n d e a s y t o P o l y m e r ez
, a n d t h e a e t i一
v i t i e s o f t h e s u b s e q u e n t p o l y m e r s a r e d i s t i n e t l y d e e r e a s e d w h i l e p r o t o a n e m o n i n
15 s t a b l e i n a l e o h o l s o l u t i o n
.
K E Y WO R D S
: R a n u e u la e e a e P l a n t s P r o t o a n e m o n i n
,
Q r o s o P h i l a s P
,
A P h i s
g o s s y p i i lG
o v e r , G i b b e r e l l a z e a e ( S
e h w ) P e t e h
,