全 文 ：后深入探讨。
致谢:本文实验承北京大学李懋学教授指导。
参考文献
[ 1] 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志 [ M ] .第 72
卷 , 北京:科学出版社 , 1988:238-239.
[ 2] 郭振怀 , 王敏 , 李三星.金银花染色体核型研究 [ J] .河北农
业大学学报 , 1993 , 16 (1):33-35.
[ 3 ] 陈升振 , 陈忠毅 , 黄向旭 , 等.五十种植物的染色体计数
[ J] .广西植物 , 1990 , 10 (1):33-37.
[ 4] 陈瑞阳 , 宋文芹 , 李秀兰, 等 , 中国主要经济植物基因组染色
体图谱 [ M] .第 3册 , 北京:科学出版社 , 2003:97-98.
[ 5] 王飞 , 王冰.忍冬属两种药用植物的染色体核型分析 [ J] .中
药材 , 2005 , 28 (3):168-170.
[ 6] 汪冶 , 梅树模 , 郑丽 , 等.灰毡毛忍冬的染色体及核型分析
[ J] .时珍国医国药 , 2008 , 19 (8):1870-1871.
[ 7] Levan A , Fredga K , Sandberg AA.Nomenclacture for cent ro-
m eric posi tion on chromosme [ J] .Heredi tas , 1964 , 52 (2):
201-220.
[ 8] Kuo SR , Wang TT , H uang TC.Karyotype analy si s of some
formosan gym nosperms [ J] .Taiwania , 1972 , 17 (1):66-
80.
[ 9] S tebbins GL.C hromosome Evolu tion in Higher Plants [ M ] .
London:Edw ard Aronld , 1971:88-105.
[ 10] Arano H .Cytological studies in subfami ly carduoideae (com-
positae)of J apan [ J] .Bot M ag (Tokyo), 1963 , 76 (1):
32-39.
[ 11] 李懋学, 张赞平.作物染色体及其研究技术 [ M ] .北京:中
国农业出版社 , 1986:20.
[ 12] 李懋学 , 张赞平.染色体次缢痕 、 核仁组成区和随体 [ J] .
生物学通报, 1985 , 20 (7):14.
[ 13] 刘焰 , 吴建国 , 肖成汉.金银花花粉母细胞减数分裂过程的
观察 [ J] .华中农业大学学报 , 1996 , 15 (5):500-502.
(收稿日期:2011-03-18;修回日期:2011-04-20)
卷柏中双黄酮类化学成分及卷柏属
该类化合物的核磁共振特征
张红梅1 , 景颖1 , 张国刚1＊ , 于秀妍2 , 薛凤宁1 , 刘虹霞1 , 孙晓亚1 (1.沈阳药科大学中药学院, 沈阳　
110016;2.中国医科大学临床医学院 , 沈阳　110016)
摘要:目的　对卷柏属双黄酮类化合物的核磁共振特征进行归纳。方法　应用核磁共振波谱法对卷柏 [ Se lagine lla
tamariscina (Beauv.)Spring.] 50%乙醇提取物中分离得到的 5 个双黄酮类化合物进行结构鉴定 , 并结合相关文献
对卷柏属双黄酮类化合物的核磁共振特征进行归纳总结。结果　首次初步归纳出卷柏属双黄酮类化合物核磁共振碳
谱和氢谱的特征。结论　通过总结卷柏属双黄酮类化合物的核磁共振特征规律 , 为快速鉴定该类化合物的结构以及
进行核磁数据的归属提供依据。
关键词:卷柏属;卷柏;双黄酮;核磁共振特征
中图分类号:R284.2　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1672-2981 (2011)06-0419-05
doi:10.3969/ j.issn.1672-2981.2011.06.006
Biflavonoids from Selaginella tamariscina and NMR characteristics
ZH ANG Hong-mei1 , JING Ying 1 , ZH ANG Guo-gang1＊ , YU Xiu-yan2 , XUE Feng-ning1 , LIU Hong-x ia1 , SUN
Xiao-ya1 (1.S chool of T raditional Chinese Materia Medica , Shenyang Pharmaceutical University , S henyang
110016;2.Col lege of Clinical Medicine , China Medical University , Shenyang 110016)
Abstract:Objective　 To summarize the nuclear magne tic resonance(NM R)char acte ristics of biflav onoids from Sela-
ginella.Methods　The structures of 5 biflavonoids isolated fr om 50% ethanol ex tract of Se lagine lla tamariscina w ere
elucida ted by NM R spectra analy sis.The NMR cha racteristics of biflavonoids from S elaginella we re summarized by a-
naly sis of the spectra l da ta and published literatures.Results　The NM R charac te ristics of 1H-NM R and 13C-NM R
spectra o f biflav onoids from S elaginella we re summarized.Conclusion　The NMR cha racteristics of biflavonoids fr om
Selaginella have been repor ted , w hich may provide the ba sis fo r quick structure elucidation and assignment of the NM R
　　作者简介:张红梅 , 女 , 硕士研究生 , E-m ail zh angh ongmei1984@126.com 　　＊通讯作者:张国刚 , 男 , 副教授 , 博士 , 主要从事天
然产物活性成分与中药的新药开发方面的研究 , Tel:(024) 23986511 , E-mail zggth@163.com
419
中南药学 2011年 6月第 9卷第 6期　Cen t ral South Pharmacy.June 2011 , Vol.9 No.6
signals o f such compounds.
Key words:Selaginella;Selaginel la tamariscina;biflav onoids;NM R characteristics
　　卷柏属 (Selaginella)植物属于蕨类植物石松纲卷柏
科 , 为多年生草本植物 , 全世界约有 700 种 , 我国约有 50
种 , 可供药用者有 22 种之多[ 1] 。目前对卷柏属植物的研究
主要集中在深绿卷柏 、 江南卷柏 、 垫状卷柏 、 卷柏。其次藤
卷柏 、 薄叶卷柏为数不多的几种。现代药理及临床研究表
明:卷柏属植物具有防癌 、 治癌 、 抗炎 、 抗病毒 、 镇痛 、 降
血压 、 降血糖和增强人体免疫功能等作用[2-5] 。 对本属植物
的化学成分和药理活性的研究表明 , 双黄酮类化合物为该属
主要的药效成分。本实验在研究卷柏 [ Selaginella tamaris-
cina (Beauv.)Spring.] 活性成分的基础上 , 对所获得的双
黄酮类化合物的核磁共振特征进行了分析 , 总结出核磁共振
波谱法快速鉴定卷柏属中双黄酮类化合物的规律。
1　仪器与材料
BRUKER-ARX-300 型核磁共振仪 (TMS 为内标物 ,
瑞士 Bruker 公司);柱色谱硅胶 (100 ～ 140 目 、 200 ～ 300
目)和薄层色谱硅胶 (青岛海洋化工厂);Sephadex LH -
20 (美国 Amersham Bio sciences 公司);反相 ODS 填料 (日
本 YM C 公司);甲醇 (色谱纯 , 山东禹王实业有限公司),
其余试剂 (分析纯 , 天津康科德试剂厂);水为双重蒸馏水。
药材采自河北安国 , 由沈阳药科大学路金才教授鉴定为卷柏
科卷柏属 植物卷柏 (S elaginella tamariscina (Beauv.)
Spring.)的干燥全草 , 标本保存于沈阳药科大学中药学院。
2　提取与分离
卷柏的干燥全草 10 kg , 用 50%的乙醇回流提取 3 次 ,
2 h· 次-1 , 提取液减压浓缩 , 得到棕黄色悬浊液 , 将此悬
浊液以 5 000 r·min-1的速度进行离心 , 得到沉淀 (100 g)。
此沉淀经反复硅胶柱色谱 , 用氯仿-甲醇 (100 ∶1 ～ 1 ∶1)
溶剂系统进行梯度洗脱 , 上 Sephadex LH -20 柱色谱 , 再
经重结晶分别得到化合物 1 (300 mg)、 2 (4 mg)、 3 (8
mg)、 4 (7 mg)、 5 (20 mg)。
3　结构鉴定
根据各种理化数据及波谱学数据 (UV 、 IR、 ESI-
MS 、1H-NM R、13 C-NM R、1H-1H COSY、 HSQC 、 HMBC)
分析 , 5 个双黄酮类化合物分别鉴定为:穗花衫双黄酮
(1)、 红杉双黄酮 (2)、 垫状卷柏双黄酮 (3)、 异柳杉双黄
酮 (4)、 扁柏双黄酮 (5)。 5 个化合物的结构见图 1 , 氢信
号的归属见表 1 , 碳信号的归属见表 2。
图 1　化合物 1～ 5的结构
Fig 1　St ructu re of compound 1-5
表 1　化合物 1～ 5的氢核磁共振波谱数据 (300 MHz , DMSO-d6)
Tab 1　1H-NMR(300 MHz)data for compound 1-5 in DMSO-d6
位置 (position) 化合物 1 (compound 1) 化合物 1(compound 2) 化合物3(compound 3) 化合物 4(compound 4) 化合物 5(compound 5)
3 6.82(1H , s) 6.92(1H , s) 6.91(1H , s) 6.95(1H , s) 6.87(1H , s)
6 6.18(1H , d , J=2.0Hz) 6.35(1H , d , J=2.0Hz) 6.37(1H , d , J=2.0Hz) 6.30(1H , d , J=1.7Hz) 6.21(1H , d , J=1.4Hz)
8 6.45(1H , d , J=2.0Hz) 6.78(1H , d , J=2.0Hz) 6.75(1H , d , J=2.0Hz) 6.87(1H , d , J=1.7Hz) 6.49(1H , d , J=1.4Hz)
2′ 7.99(1H , d , J=2.0Hz) 8.03(1H , d , J=2.0Hz) 8.01(2H , d , J=8.5Hz) 8.01(2H , d , J=8.4Hz) 8.03(2H , d , J=8.7Hz)
3′ 7.02(2H , d , J=8.5Hz) 6.96(2H , d , J=8.4Hz) 7.05(2H , d , J=8.7Hz)
5′ 7.15(1H , d , J=9.3Hz) 7.16(1H , d , J=8.8Hz) 7.02(2H , d , J=8.5Hz) 6.96(2H , d , J=8.4Hz) 7.05(2H , d , J=8.7Hz)
6′ 8.01(1H ,d , J=2.0Hz, 6.9Hz)8.05(1H , d , J=2.0Hz, 8.8Hz) 8.01(2H , d , J=8.5Hz) 8.01(2H , d , J=8.4Hz) 8.03(2H , d , J=8.7Hz)
5-OH 13.09 13.10 12.87 13.11 13.22
7-OH/ OCH3 10.82 3.81 3.85 10.80 10.79
4′-OH 10.55 10.35
3″ 6.78(1H , s) 6.80(1H , s) 6.92(1H , s) 7.13(1H , s) 6.87(1H , s)
6″ 6.39(1H , s) 6.40(1H , s)
8″ 7.11(1H , s) 6.49(1H , s) 6.73(1H , s)
2′″ 7.58(2H , d , J=8.7 Hz) 7.57(2H , d , J=8.6 Hz) 8.01(2H , d , J=8.5 Hz) 8.02(2H , d , J=8.4 Hz) 7.96(2H , d , J=8.7 Hz)
3′″ 6.72(2H , d , J=8.7 Hz) 6.73(2H , d , J=8.6 Hz) 6.94(2H , d , J=8.5 Hz) 7.03(2H , d , J=8.4 Hz) 6.94(2H , d , J=8.7 Hz)
5′″ 6.72(2H , d , J=8.7 Hz) 6.73(2H , d , J=8.6 Hz) 6.94(2H , d , J=8.5 Hz) 7.03(2H , d , J=8.4 Hz) 6.94(2H , d , J=8.7 Hz)
6′″ 7.58(2H , d , J=8.7 Hz) 7.57(2H , d , J=8.6 Hz) 8.01(2H , d , J=8.5 Hz) 8.02(2H , d , J=8.4 Hz) 7.96(2H , d , J=8.7 Hz)
5″-OH 12.96 12.96 13.10 12.89 12.90
7″-OH/ OCH 3 10.28 10.81 3.88 3.89 10.80
4′″-OH 10.55 10.29 10.44 10.45 10.38
420
C ent ral S outh Ph arm acy.June 2011 , Vol.9 No.6　中南药学 2011年 6月第 9卷第 6期
表 2　化合物 1～ 5的碳核磁共振波谱数据 (75 MHz , DMSO-d 6)
Tab 2　13C-NMR(75 MHz)data for compound 1-5(75 MHz , DMSO-d6)
位置
(posi tion)
化合物 1
(compound
1)
化合物 2
(com pound
2)
化合物 3
(compound
3)
化合物 4
(compound
4)
化合物 5
(compound
5)
2 164.2 164.2 164.1 164.6 164.3
3 103.1 103.3 104.3 103.9 103.9
4 181.8 182.1 182.1 181.9 181.9
5 161.1 161.2 161.3 161.6 160.8
6 98.7 98.7 98.2 99.1 99.0
7 163.9 165.2 165.4 164.4 163.2
8 94.1 92.8 92.9 94.2 94.7
9 159.6 157.4 157.4 157.5 157.2
10 103.8 104.8 104.9 104.1 104.0
1′ 121.1 121.0 124.9 124.5 124.3
2′ 127.9 128.1 128.7 128.6 128.5
3′ 121.5 120.1 115.3 115.3 115.4
4′ 160.6 159.8 160.8 160.7 161.4
5′ 116.3 116.3 115.3 115.3 115.4
6′ 131.5 131.6 128.7 128.6 128.5
2″ 163.9 163.8 164.6 163.2 164.4
3″ 102.7 102.7 103.0 103.0 102.7
4″ 182.2 182.3 182.3 182.4 182.2
5″ 160.6 161.2 152.4 152.5 153.2
6″ 98.9 98.2 124.9 124.9 124.7
7″ 161.9 161.9 158.2 158.2 157.5
8″ 103.6 104.0 92.3 92.3 94.1
9″ 154.6 154.6 154.3 154.3 153.9
10″ 103.8 103.7 105.4 104.3 104.2
1 120.1 121.5 121.1 121.1 121.2
2 128.3 128.3 128.8 128.8 128.7
3 115.9 115.9 116.1 116.2 116.1
4″ 161.6 160.7 161.6 161.6 161.6
5 115.9 115.9 116.1 116.2 116.1
6 128.3 128.3 128.8 128.8 128.7
7-OCH 3 56.2 56.2
7″-OCH 3 56.9 56.9
4　双黄酮类化合物核磁共振特征
从卷柏属中分离得到的双黄酮类化合物具有独特的 2 个
黄酮母核结构 , 主要由 2 分子芹菜素或其甲醚衍生物聚合而
成 , 也有芹菜素和 2 , 3 双氢芹菜素聚合的 , 结构复杂 , 连
接方式较多。主要有 C-C 和 C-O-C 2 种连接方式。本实验中
分离得到的 5 个双黄酮具有 2种不同的连接方式 , 其主要区
别在于 2 个黄酮母核结构是通过 C-O-C 或 C-C 连接 , 根据
这 2 个位置特征的化学位移值可以快速确定双黄酮的连接方
式。1H-NM R谱中大部分氢信号都位于芳香区 [ δH6.20 ～
8.20] , 在该类化合物中低场区的活泼质子信号位于δH13.0
附近可以确定为缔合位羟基 , 为 5-OH 和/或 5-OH 。13C-
NM R谱中低场区明显有 2 个羰基碳信号位于δC182.0 附近 ,
另外还有 28 个芳香碳 , 由以上信息可以推测该化合物为双
黄酮类化合物。以下以具体实例分析卷柏属中双黄酮的 2 种
连接方式的核磁共振特征。
4.1　C-C 连接方式
在该类化合物中 C-C 连接方式主要分成 2 个黄酮母核结
构以 3′-8″, 3′-6″-双芹菜素[ 6] 这 2 种类型 (见图 2)。此类双
黄酮中 2 个黄酮的 A 环质子一般都是 5 , 7-二羟基取代。1 H-
NM R谱中 , 一个黄酮的 B 环为 AA′BB′偶合系统 , 另一个
黄酮的 B 环为 ABX偶合系统。在 C 环中黄酮的 3-H 常常作
为一个尖锐的单峰信号出现在δ6.30 处。例如化合物 1 中 2
个黄酮母核结构是通过 C-C 连接。通过与单黄酮的13 C-
NM R相比较 , 其中 C-8(103.6)移向低场区 , 位移约+
6 , 表明有其他基团相连。1H-NMR谱中 7.58 (2H , d , J =
8.7Hz , H-2 , 6 ), 6.72 (2H , d , J=8.7Hz , H-3 , 5 )
提示为其中一个黄酮 B环对位取代时形成的 AA′BB′偶合系
统。7.15(1H , d , J= 9.3Hz), 8.01(1H , d , J =2.0H z ,
6.9Hz), 7.99(1H , d , J=2.0H z)3 个氢信号为一个黄酮
B 环的 ABX 偶合系统 , 进一步推断 2个单黄酮以 3′-8″连接。
此外还有 3′-6″-双芹菜素型连接方式 , 如罗波斯塔双黄
酮 , 罗波斯塔-4′-甲醚[ 7] 。此类化合物氢谱 , 碳谱数据与 3′-
8″连接方式无明显区别 , 仅在 6″, 8″碳化学位移上有所差
别。文献中[ 7]化合物 II为 3′-6″连接方式的双黄酮 , 其中 C-
6″(103.1), C-8″(94.6)与本实验中化合物 1 比较 , 化合
物 II C-6″向低场位移 , 化合物 1 C-8″向低场位移。由此能够
判断 C-C 连接位置。
7 , 4′-di-O-me thy-2″, 3″-dihydror obustaflavone , 7 , 4′,
7″-tri-O-methy-2″, 3″-dihydro robustaflavone 和以下的 C-O-C
连接方式的 2″, 3″-dihydroisoc ryptomerin 均为芹菜素和二氢
芹菜素以不同的方式连接起来。具体 C-C 连接方式的双黄
酮举例见表 3。
图 2　 C-C连接方式
Fig 2　St ructu re of C-C connection
421
中南药学 2011年 6月第 9卷第 6期　Cen t ral South Pharmacy.June 2011 , Vol.9 No.6
表 3　C-C连接方式双黄酮举例
Tab 3　Biflavonoids of C-C connection
化合物 (compound s) 3′-8″-双芹菜素型双黄酮 R1 R2 R3 R4 文献 (reference)
1 穗花杉双黄酮 (amen tof lavon e) H H H H [ 8]
2 苏铁双黄酮 (sotet suf lavone) Me H H H [ 8]
3 白果素 (bilob et in) H Me H H [ 9]
4 竹柏双黄酮 A (podocarpusf lavone A) H H H Me [ 10]
5 7 , 7″-di-O-methylamen tof lavone Me H Me H [ 11]
6 4′, 7″-di-O-methylamen tof lavone H Me Me H [ 9]
7 银杏双黄酮 (ginkget in) Me Me H H [ 10]
8 橡胶树双黄酮 (heveaflavone) Me H Me Me [ 11]
9 榧双黄酮 (kayaflavone) H Me Me Me [ 10]
10 7 , 4′, 7″, 4′″-t et ra-O-methylam en tof lavone Me Me Me Me [ 12]
3′-6″-双芹菜素型双黄酮
10 罗波斯塔双黄酮 (robus taf lavone) H H H [ 12]
12 7″-O-meth ylrobus taf lavone H H Me [ 9]
13 4′-O-meth ylrobus taf lavone H Me H [ 3]
14 7 , 4′-di-O-methylrobu staf lavone Me Me H [ 3]
15 7 , 4′-di-O-m ethy-2″, 3″-dihydrorobus taf lavone Me Me H [ 3]
16 7 , 4′, 7″-t ri-O-methy-2″, 3″-dihyd rorobu staf lavone Me Me Me [ 3]
4.2　C-O-C 连接方式
在该类化合物中以 4′-O-6″-双苯醚型[ 6] 连接方式为主
(见图 3)。此类双黄酮中 2个黄酮的A 环质子一般也都是5 ,
7-二羟基取代。1H-NMR 谱中 , 2 个黄酮母核的 B 环由于都
是 4′-氧取代所以构成 2个 AA′BB′偶合系统。例如化合物 5
中两个黄酮母核结构是通过 C-O-C 连接。13 C-NMR 谱中 δ
94.1 , δ94.7 , δ99.0 说明 2 个黄酮母核可能通过 6 位与另
一黄酮母核相连 , 发现其中一个黄酮的 6 位碳向低场位移至
δ124.7 , 说明该双黄酮可能是一个黄酮的 6 位通过 O 和另
一黄酮相连。1H-NM R 谱中 , 根据偶合常数推测 δ8.03
(2H , d , J =8.7H z)和 δ7.05 (2H , d , J =8.7Hz), δ
7.96(2H , d , J =8.7H z)和 δ6.94 (2H , d , J =8.7H z)
构成 2 个 AA′BB′偶合系统;δ6.49 (1H , d , J = 1.4H z)
和δ6.21(1H , d , J = 1.4Hz)为 2 个间位偶合氢 , 还有 3
个单峰δ6.87(1H , s), δ6.87(1H , s), δ6.73(1H , s)。
综合以上信息从而确定该双黄酮是在一个黄酮的 4′位通过 O
和另一黄酮的 6 位相连。具体 C-O-C 连接方式的双黄酮举
例见表 4。
C-O-C连接方式 4-O-6″-双苯醚型图 3　C-O-C连接方式
Fig 3　St ructu re of C-O-C connect ion
　　另外还有 3 , 4 -C-O-C 连接 , 如 delicaflavone[15] 。文
献[ 7] 中 , 化合物 delicaflavone 的氢谱中存在 2 个 AA′BB′偶
合系统和 2 个间位偶合系统 , 与化合物 5 相比多了 1 个间位
偶合系统。另外 , delicaflav one仅有一个单峰氢信号 , 而化
合物 5 中有 3 个单峰氢信号。碳谱中 , delicaflav one和化合
物 5 比较 , C-3 , C-2 和 C-4 分别位移 +27.7 , -7.3 ,
-5.9。以上为 2种 C-O-C 连接方式双黄酮化合物主要区别。
表 4　C-O-C连接方式双黄酮举例
Tab 4　Biflavonoids of C-O-C connection
化合物
(com-
p ounds)
4′-O-6″-双苯醚型双黄酮 R1 R2 R3
文献
(refer-
ence)
17 扁柏双黄酮 (hinokif lavone) H H H [ 8]
18 异柳杉双黄酮 (i socryptomerin) Me H H [ 9]
19 新柳杉双黄酮 (neocry ptom erin) H H Me [ 8]
20 柳杉黄素 B (cryptomerin B) Me Me H [ 13]
21 垫状卷柏双黄酮 (pulvinatabif lavone) Me H Me [ 14]
22 2″, 3″-dih ydroi socryptomerin Me H H [ 9]
　　综上所述 , 对于本属的双黄酮类化合物 , 可以从碳谱 、
氢谱中得到黄酮的连接方式以及取代基的位置等信息 , 大致
判断出化合物的结构。本文利用举例典型代表双黄酮的核磁
波谱特征来概述不同类型双黄酮的核磁波谱特征。卷柏属中
双黄酮具体的信号归属及结构确定还要参考文献 , 综合分析
各种核磁共振谱图的信息进行解析。
参考文献
[ 1] 国家中医药管理局 《中华本草》 编委会.中华本草 [ M] .第 2
册 , 上海:上海科技出版社 , 1999:42-56.
[ 2] Lee HS , Oh WK , Kim BY , et al.Inhibit ion of phospholipase C
gamma 1 activi ty b y amentof lavone isolated f rom S elag inel la
tamariscina [ J] .Planta Medica , 1996 , 62 (4):293-296.
[ 3] Lin LC , Kuo YC , Chou CJ.Cytotoxic bif lavonoids f rom S elag i-
nel la d elicatu la [ J] .J ournal of Natural Prodou cts , 2000 , 63
(5):627-630.
[ 4] Lin YM , Flavin M T , S chu re R , et al.Antivi ral activi ties of bi-
flavonoids [ J] .Planta Medica , 1999 , 65 (2):120-125.
[ 5] Kuo YC , Sun CM , Tsai WJ , et al.Chinese herbs as modulators
of human mesangial cel l proliferation:Preliminary studies [ J] .
Jou rnal of Laboratory and Clinical Medicine , 1998 , 132 (1):
76-85.
[ 6] 张红伟 , 孙晓飞 , 田景奎.卷柏属植物黄酮类成分研究概况
[ J] .亚太传统医药 , 2007 , 3 (10):63-65.
422
C ent ral S outh Ph arm acy.June 2011 , Vol.9 No.6　中南药学 2011年 6月第 9卷第 6期
[ 7] 范晓磊 , 徐嘉成 , 林幸华 , 等.翠云草中双黄酮类成分研究
[ J] .中国药学杂志 , 2009 , 44 (1):15-19.
[ 8] Okigaw a M , Hw a CW , Kawano N , et al.Biflavones in S elaginella
species [ J] .Phytochemistry , 1971, 10 (12):3286-3287.
[ 9] S ilva GL , C hai H , Gupta MP , et al.Cytotoxic bi flavonoids
f rom S elaginel la wil ldenowi i [ J] .Phytochemist ry , 1995 , 40
(1):129-134.
[ 10] Sun CM , Syu WJ , Huang YT , et al.Selective cytotoxicity of
ginkgetin f rom Selaginel la moellendor f f ii [ J] .Journal of
Natu ral Prodoucts , 1997 , 60 (4):382-384.
[ 11] Lin RC , Skalt sounis AL , Seguin E , et al.Ph enolic Const itu-
ents of S elag inel la d oederlein ii [ J] .Planta Medica , 1994 ,
60 (2):168-170.
[ 12] Qasim M A , Roy SK , Ilyas M.Phenolic con sti tu ents of Selag-
inel laceae [ J] .Indian J ou rnal of Chemist ry , 1985 , 24B (2):
220.
[ 13] Lopez-Seaz.Flavonoids of Sela ginel la selag inides and S elag i-
nel la dent icaluta [ J] .Fi toterpia , 1995 , 669 (2):188.
[ 14] 谭桂山 , 陈立章 , 徐康平 , 等.垫状卷柏的化学成分研究
[ J] .有机化学 , 2004 , 24 (9):1082-1085.
[ 15] Lin LC , C hou C J.Th ree new bif lavonoids f rom selag inel la
delicatula [ J ] .Chinese Ph armaceut ical Journal (Taipei),
2000 , 52 (4):211-218.
(收稿日期:2011-01-04;修回日期:2011-04-11)
HPLC-UV法测定人血浆及尿液中比阿培南的浓度
罗芳梅 , 何建群 , 罗丽娜 , 张海龙 , 周彦彬 , 丁劲松＊ (中南大学药学院 , 长沙　410013)
摘要:目的　建立 HPLC-UV 法测定人血浆及尿液中比阿培南的浓度。方法　血浆样品经超滤离心法提取后 , 采用
XB-C18柱分离 , 流动相:乙腈-0.1 mol· L-1醋酸铵缓冲液 (pH 4.6) =3∶97 (v/ v), 流速:1.0 mL ·min -1 , 检
测波长:300 nm , 柱温:40 ℃, 进样量:30 μL;尿样处理方法同血样 , 但以甲醇代替乙腈 , 进样量 20 μL。 结果
　比阿培南与血浆 、 尿液中内源性物质分离度好 , 血药 、 尿药浓度分别在 0.1 ～ 50 、 0.5 ～ 300 mg · L -1与峰面积线
性关系良好 , 定量下限分别为 0.1、 0.5 mg · L -1 , 绝对回收率分别在 90.9%～ 97.3%、 99.1%～ 102.5%, 相对回
收率分别为 102.1%～ 110.1%、 100.3%～ 104.4%, 日内精密度 (RSD)分别 <3.4%、 2.1%, 日间精密度
(RSD)分别<5.7%、 2.8%。均满足生物样本测定要求。结论　所建立方法高效 、 灵敏 、 简捷快速 、 专属性好 、
重现性高 , 可用于比阿培南药动学研究。
关键词:高效液相色谱法;比阿培南;血药浓度;尿药浓度
中图分类号:R969.1 , R927.1　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1672-2981 (2011)06-0423-05
doi:10.3969/ j.issn.1672-2981.2011.06.007
HPLC-UV determination of biapenem in human plasma and urine
LUO Fang-mei , HE Jian-qun , LUO Li-na, ZHANG H ai-long , ZHOU Yan-bin , DING Jin-song ＊ (School of Phar-
maceutical Sciences , Central S outh University , Changsha 410013)
Abstract:Objective　 To establish an HPLC-UV me thod for the determination of biapenem in human plasma and u-
rine.Methods　Af te r ex traction by centrifugation , human pla sma and urine o f biapenem we re separated on XB-C18 co l-
umn (4.6 mm×250 mm , 5 μm)w ith acetonitrile-0.1 mo l· L-1 ammonium ace ta te=3∶97 (v/ v)a s the mobile phase
at 1.0 m L·min -1.The wavelength was 300 nm , the column tempe rature w as 40 ℃, and the injection vo lume w as 30
μL.The method fo r urine samples w as the same as tha t fo r the plasma , except the mobile pha se and injection volume.
Fo r the urine sample s , methanol w as used instead o f acetonitrile and the injection vo lume w as 20μL.Results　Biapen-
em w as w ell separ ated fr om the endogenous impurities o f human plasma and urine w ith no interfe ring pla sama o r urine
peak , and the assay was linear at 0.1-50 and 0.5-300 mg · L -1 with the limit of quantification 0.1 and 0.5 mg· L -1
for biapenem in human plasma and urine , r espectively.The ex traction r ecoveries o f the plasma and urine w ere 90.9%
-97.3% and 99.1%-102.5%, w hile the relative recoverie s we re 102.1%-110.1% and 100.3%-104.4%, respec-
tively.The me thod w as accurate w ith all intr a-day RSD<3.4% and RSD<2.1%, and the inter-day R SD<5.7%,
　　作者简介:罗芳梅 , 女 , 硕士研究生 , 主要从事药物新制剂及其生物有效性评价工作 , E-mail:luofangmei555@163.com 　　＊通讯作
者:丁劲松 , 男 , 副教授 , 主要从事药物新制剂及其生物有效性评价工作 , T el:(0731) 82650367 , E-mai l:dingjs0221@163.com
423
中南药学 2011年 6月第 9卷第 6期　Cen t ral South Pharmacy.June 2011 , Vol.9 No.6