全 文 ：第 26卷 第 8期
2 0 0 9 年 8 月
沈　阳　药　科　大　学　学　报
JournalofShenyangPharmaceuticalUniversity
Vol.26 　No.8
Aug.2009 p.623
收稿日期:2008-10-24
作者简介:王雪(1983-), 女(汉族), 辽宁沈阳人 ,硕士研究生;华会明(1964-), 女(汉族), 辽宁辽阳人 ,教授 ,主要
从事中药及天然产物化学研究 , Tel.024-23986465, E-mailhuimhua@163.com。
文章编号:1006-2858(2009)08-0623-03
卷柏的化学成分
王　雪 , 李占林 , 高亮亮 , 李金楠 , 华会明
(沈阳药科大学 中药学院 , 辽宁 沈阳 110016)
摘要:目的 研究卷柏 [ Selaginellatamariscina(Beauv.)Spring]的化学成分。 方法 采用硅胶柱色
谱 、ODS柱色谱 、制备型 HPLC等手段进行分离纯化 , 并利用波谱学方法鉴定化合物的结构。结果
从卷柏乙醇提取物中分离得到 13个化合物 ,分别鉴定为 3β -羟基 -7α-甲氧基 -24β -乙基 -胆
甾 -5-烯(1)、胆甾醇(2)、β -谷甾醇(3)、海棠果酸(4)、白桦脂酸(5)、5, 4′-二羟基 -7-甲氧
基黄酮(6)、3-methoxychrysazin(7)、穗花杉双黄酮(8)、异柳杉双黄酮(9)、香草酸(10)、对甲氧基
苯甲醛(11)、对羟基苯甲酸(12)、胡萝卜苷(13)。结论 化合物 1-2、4-7、10、 13为本属植物中首
次分离得到的化合物。
关键词:卷柏;化学成分;结构鉴定
中图分类号:R284　　　文献标志码:A
　　中药卷柏为蕨类卷柏科卷柏属植物卷柏
[ Selaginelatamariscina(Beauv.)Spring.]或垫状
卷柏 [ S.pulvinata(Hook.etGrev.)Maxim.]的干
燥全草 ,具有破血散瘀 ,活血止血的功效 ,主治腹
痛 、闭经 、症瘕淋结 ,以及吐血 、便血 、尿血等症。
现代药理及临床研究表明:卷柏具有防癌 、治癌 、
抗炎 、抗病毒 、镇痛 、降血压 、降血糖和增强人体免
疫功能等作用。我国民间多用其降血压及治疗癌
症 [ 1] 。作者对卷柏体积分数为 75%的乙醇溶液
提取物中的化学成分进行研究 ,共分离得到 13个
化合物 ,分别鉴定为 3β -羟基 -7α-甲氧基 -
24β -乙基 -胆甾 -5 -烯 (3β-hydroxy-7α-me-
thoxy-24β-ethyl-cholest-5-ene, 1)、胆甾醇 (choles-
terol, 2)、β -谷甾醇 (β-sitosterol, 3)、海棠果酸
(canophylicacid, 4)、白桦脂酸 (betulinicacid,
5)、5, 4′-二羟基 -7 -甲氧基黄酮 (6)、3-me-
thoxychrysazin(7)、穗花杉双黄酮 (amentofla-
vone, 8)、异柳杉双黄酮(isocryptomerin, 9)、香草
酸(vanilicacid, 10)、对甲氧基苯甲醛(p-anisal-
dehyde, 11)、对羟基苯甲酸 (p-hydroxybenzoic
acid, 12)和胡萝卜苷(daucosterol, 13)。其中化合
物 1-2、4-7、10、13为本属植物中首次分离得到
的化合物。
1　仪器与材料
ARX-300型核磁共振光谱仪 (TMS内标 ,
瑞士 Bruker公司)。
薄层硅胶 、柱色谱硅胶(青岛海洋化工厂)、
SephadexLH-20(美国 GEHealthcare公司),
ODS柱色谱材料(100 μm,日本 YMC公司),其
他所用试剂 、溶剂均为分析纯。
卷柏药材购自辽宁省沈阳市同仁堂药房 ,由
沈阳药科大学中药学院孙启时教授鉴定为卷柏
[ Selaginelatamariscina(Beauv.)Spring]的干燥
全草。
2　提取分离
卷柏干燥全草 20 kg,用体积分数为 75%的
乙醇溶液加热回流提取 3次 ,每次 2 h,提取液合
并 ,浓缩得到浸膏 。将浸膏混悬于适量水中 ,依次
以石油醚 、氯仿 、乙酸乙酯 、正丁醇萃取 ,各萃取 3
次 ,残渣部分依次以氯仿 、甲醇超声提取。将石油
醚萃取物 19.5 g、氯仿萃取物 15.5 g和氯仿超声
提取物 221.5 g合并进行硅胶柱色谱 ,石油醚 -
丙酮溶剂系统梯度洗脱。其中石油醚 -丙酮(体
积比为 100∶5)洗脱流份经重结晶得到化合物 3
(2mg);石油醚 -丙酮 (体积比为 100∶7)得到的
流份 ,经 SephadexLH-20凝胶柱色谱 、硅胶柱色
谱 、ODS柱色谱分离得到化合物 2(5 mg)、 10
(3mg)、 5(2 mg);石油醚 -丙酮 (体积比为
100∶9)得到的流份 ,经硅胶柱色谱得到化合物 4
DOI:10.14066/j.cnki.cn21-1349/r.2009.08.011
(2g)、11(5 mg);石油醚 丙酮(体积比为 100∶
15)和石油醚 丙酮(体积比为 100∶25)洗脱的流
份经 SephadexLH 20凝胶柱色谱 、硅胶柱色谱和
ODS开放柱色谱得到化合物 7(8 mg)、6(3 mg)、
1(4mg);石油醚 丙酮(体积比为 100∶50)洗脱的
流份经硅胶柱色谱得到化合物 13(8mg);乙酸乙
酯萃取物 54g和正丁醇萃取物 142g合并进行硅
胶柱色谱 ,氯仿 甲醇溶剂系统梯度洗脱 ,其中氯
仿 甲醇(体积比为 100∶3)洗脱流份经硅胶柱色
谱 , SephadexLH 20凝胶柱色谱得到化合物 5
(2mg)、9(4 g)、8(7 g)、12(5 mg)。
3　结构鉴定
化合物 1:白色粉末 , 体积分数为 10%的
硫酸 乙醇溶液显色呈蓝色 , Liebermann-Burchard
反应阳性 , 提示可能为甾体类成分。 1H-NMR
(300 MHz, CDCl3)谱中 δ5.74 (1H, d, J=
4.1Hz)为双键上的烯氢质子信号;δ3.36(3H, s)
处给出甲氧基质子信号;δ0.94(3H, d, J=
6.4Hz)为与次甲基相连的甲基质子信号;δ0.83
(3H, d, J=6.5 Hz)和 δ0.88(3H, d, J=7.3 Hz)
为异丙基信号;δ0.85(3H, t)为与亚甲基相连的
甲基质子信号 , δ:0.99(3H, s)、 0.67(3H, s)为
2个角甲基质子信号 。将氢谱数据与文献 [ 2]中
数据对照基本一致 ,又将该化合物与对照品共
TLC, 3种溶剂系统展开 Rf均一致 ,故鉴定化合
物 1为 3β 羟基 7α甲氧基 -24β 乙基 胆甾 5
烯(3β-hydroxy-7α-methoxy-24β-ethyl-cholest-5-ene)。
化合物 2:白色针状结晶(氯仿),体积分数为
10%的硫酸 乙醇溶液显色呈紫色 , Liebermann-
Burchard反应阳性 , 提示可能为甾体类成分。
1H-NMR(300 MHz, CDCl3)δ:5.37(1H, t, J=3.0
Hz, H 6)、 3.54(1H, m, H 3)、 1.03(3H, s, 19
Me)、0.94(3H, d, J=1.8 Hz, 21 Me)、0.88(6H,
d, J=6.7 Hz, 26 , 27 Me)、0.70(3H, s, 18 Me)。
13C-NMR(75MHz, CDCl3)δ:140.8(C 5)、121.7
(C6)、71.8(C3)、56.8(C 14)、56.1(C 17)、
50.1(C9)、42.3(C 13)、42.3(C 4)、39.8(C
12)、39.5(C24)、37.2(C 1)、36.5(C 10)、36.2
(C22)、35.8(C 20)、31.9(C 7)、31.9(C 8 )、
31.7(C2)、28.2(C 25)、27.9(C 16)、24.3(C
15)、23.8(C 23)、 22.8(C 27)、 22.5(C 26)、
21.1(C 11)、 19.4(C 19)、 18.7(C 21)、 11.8
(C18)。以上数据与文献 [ 3]中胆甾醇数据对照
基本一致 , 故鉴定化合物 2为胆甾醇 (cholester-
ol)。
化合物 3:无色针状结晶(氯仿),体积分数为
10%的硫酸 乙醇溶液显紫红色 , Liebermann-Bur-
chard反应阳性 ,将该化合物与对照品 β 谷甾醇共
TLC, 3种溶剂系统展开 Rf均一致 ,故鉴定化合
物 3为 β 谷甾醇(β-sitosterol)。
化合物 4:无色针状结晶(氯仿 甲醇),体积
分数为 10%的硫酸 乙醇溶液显色呈紫红色 ,
Liebermann-Burchard反应阳性 ,推测该化合物为
甾体或三萜类成分 。 1H-NMR(300MHz, CDCl3)
谱中 δ3.73(1H, brs)为 1个连氧碳上的质子信
号 , δ1.16(3H, d, J=6.9 Hz)为叔碳甲基质子信
号;δ:1.34、 1.24、 1.03、 1.00、 0.85、 0.80(each
3H, s, 6×CH3)为季碳上甲基质子信号;13C-NMR
(75MHz, CDCl3)给出 30个碳信号 ,其中 δ182.3
为羧基碳信号 , δ72.7 为连氧碳信号 , 结合
1H-NMR数据 ,推测其为木栓烷型三萜类化合物。
以上数据与文献 [ 4]中海棠果酸数据对照基本一
致 ,将该化合物与海棠果酸对照品共 TLC, 3种溶
剂系统展开 Rf均一致 ,故鉴定化合物 4为海棠果
酸(canophylicacid)。
化合物 5:无色针状结晶(丙酮),体积分数为
10%的硫酸 乙醇溶液显色呈显紫色 。 1H-NMR
(300 MHz, CDCl3)δ:4.74(1 H, brs, H 29a)、
4.61(1H, brs, H 29b)、3.19(1H, m, H 3)、1.69
(3H, s, 30 CH3)、 1.27(3H, s)、 0.96(3H, s)、
0.94(3H, s)、0.82(3H, s)、0.75(3H, s)。其氢谱
数据与文献 [ 5]中数据对照基本一致 ,将该化合
物与白桦脂酸对照品共 TLC, 3种溶剂系统展开
Rf一致 ,故鉴定化合物 5为白桦脂酸 (betulinic
acid)。
化合物 6:黄色针状结晶(甲醇),体积分数为
10%的硫酸 乙醇溶液显色呈黄色 ,盐酸 镁粉反
应阳性 , 提示可能为黄酮类成分 。 1H-NMR
(300MHz, DMSO-d6)δ:12.97 (1H, s, 5 OH)、
7.97(2H, d, J=8.7 Hz, H 2′, 6′)、 6.94(2H, d,
J=8.7 Hz, H 3′, 5′)、6.78(1H, d, J=2.1 Hz, H
8)、6.38(1H, d, J=2.1 Hz, H 6)、6.86(1H, s, H
3)、3.87(3H, s, 7 OCH3)。将以上氢谱数据与文
献 [ 6]中数据对照基本一致 ,故鉴定化合物 6为
5, 4′二羟基 7甲氧基黄酮。
化合物 7:橙红色针状结晶(氯仿),体积分数
为 10%的硫酸 乙醇溶液显色呈橙黄色 , NaOH溶
624 沈　阳　药　科　大　学　学　报 第 26卷　
液显色为紫色 , 提示可能为羟基蒽醌类成分。
1H-NMR(300 MHz, DMSO-d6)δ:12.06(2H, 1,
8 OH)、7.76(1H, d, J=8.1Hz, H 5)、7.73(1H,
t, J=8.1 Hz, H 6)、 7.55(1H, brs, H 4)、 7.45
(1H, d, J=8.1 Hz, H 7)、7.20(1H, brs, H 2)、
3.57(3H, s, 3 OCH3)。将以上数据与文献 [ 7]中
数据对照基本一致 , 故鉴定化合物 7为 3-me-
thoxychrysazin。
化合物 8:浅黄色粉末 , UV365 nm下呈黄色
荧光 , 254nm下呈暗斑 ,体积分数为 10%的硫酸
乙醇溶液显色呈浅黄色 。 1H-NMR(300MHz, ac-
etone-d6)δ:8.14(1H, d, J=2.4 Hz, H 2′)、8.05
(1H, dd, J=2.4, 8.7 Hz, H 6′)、7.67(2H, d, J=
9.0 Hz, H 2 andH 6 )、 7.25(1H, d, J=
8.7Hz, H 5′)、6.84(2H, d, J=9.0 Hz, H 3 and
H 5 )、6.74 (1 H, s, H 3 orH 3″)、6.68(1H, s,
H 3″orH 3)、6.52(1H, d, J=2.1 Hz, H 8)、
6.45(1H, s, H 6″)、 6.25(1H, d, J=2.1 Hz, H
6)。将以上数据与文献 [ 8]中穗花杉双黄酮数据
对照基本一致 ,故鉴定化合物 8为穗花杉双黄酮
(amentoflavone)。
化合物 9:浅黄色粉末 , UV365 nm下呈黄色
荧光 , 254nm下呈暗斑 ,质量分数为 10%的硫酸
乙醇溶液显色呈浅黄色 ,碘熏显黄色 ,难溶于氯
仿 、甲醇 ,热溶于丙酮 , 易溶于 DMSO。 1H-NMR
(300MHz, DMSO-d6)δ:8.02(2H, d, J=8.7 Hz,
H 2′andH 6′)、8.02(2H, d, J=9.0 Hz, H 2
andH 6 )、7.14(1H, s, H 8″)、7.04(2 H, d, J=
8.7Hz, H 3′andH 5′)、6.97(2H, d, J=9.0 Hz,
H 3 andH 5 )、 6.95 (1H, s, H 3 orH 3″)、
6.87(1H, s, H 3″orH 3)、6.49(1H, brs, H 8)、
6.21(1H, brs, H 6)、3.90(3H, s, 7″OMe)。与
文献中 [ 9]中异柳杉双黄酮(isocryptomerin)数据
对照基本一致 ,故鉴定化合物 9为异柳杉双黄酮。
化合物 10:无色针状结晶(甲醇),碘熏显色 ,
三氯化铁 铁氰化钾反应阳性 ,溴甲酚绿反应阳
性 ,示化合物 10中含酚羟基和羧基 。 1H-NMR
(300MHz, DMSO-d6)δ:12.52(1H, s, COOH)、
9.85(1H, s, 4 OH)、7.45(1H, brd, J=8.7 Hz, H
6)、7.42(1H, brs, H 2)、6.84(1H, d, J=8.7 Hz,
H 5)、3.80(3H, s, 3 OCH3)推测其为香草酸 。将
该化合物与香草酸对照品共 TLC, 3种溶剂系统
展开 Rf均一致 ,故鉴定化合物 10为香草酸 (va-
nilicacid)。
化合物 11:白色针状结晶 (氯仿 ), UV
254nm下呈暗斑。 1H-NMR(300 MHz, DMSO-
d6)δ:10.32(1H, s, CHO)、 7.80(2H, d, J=
6.7Hz, H 2, 6)、6.83(2H, d, J=6.7 Hz, H 3,
5)、3.77(3H, s, OCH3)。将以上的氢谱数据和
文献 [ 10]对照基本一致 ,故鉴定化合物 11为对
甲氧基苯甲醛(p-anisaldehyde)。
化合物 12:白色针状结晶(丙酮),溴甲酚绿
和三氯化铁 铁氰化钾反应均为阳性 ,显示其含有
羧基和酚羟基。 1H-NMR(300 MHz, DMSO-d6)
δ:7.76(2H, d, J=8.8 Hz)、 6.93(2H, d, J=
8.8Hz)为典型的 AA′BB′系统的质子信号 ,即不
同基团对位取代的苯环质子信号 , 又根据 δ:
12.52(1H, s, COOH)、9.85(1H, s, ArOH)信号
推测其为对羟基苯甲酸;与对羟基苯甲酸对照品
共 TLC, 3种溶剂系统 Rf基本一致 ,确证化合物
12为对羟基苯甲酸(p-hydroxybenzoicacid)。
化合物 13:白色粉末 ,质量分数为 10%的硫
酸 乙醇溶液显色呈紫红色 , Liebermann-Burchard
反应及 Molish反应阳性 ,示为甾体苷类或三萜皂
苷类成分 。与胡萝卜苷对照品共 TLC, 3种溶剂
系统展开 Rf基本一致 ,故鉴定化合物 13为胡萝
卜苷(daucosterol)。
参考文献:
[ 1] 江苏新医学院.中药大辞典 [ M] .上海:上海科技出
版社 , 1997:120.
[ 2] PETTITGR, NUMATAA, CRAGGGM, etal.Iso-
lationandstructuresofschleicherastatins1-7 and
schleicheols1 and2 fromtheteakforestmedicinal
treeSchleicheraoleosa[ J] .JNatProd, 2006, 63(1):
72-76.
[ 3] 黄建设 ,李庆欣 , 吴军 , 等.粗吻海龙的化学成分研
究 [ J] .中草药 , 2004, 35(5):485-487.
[ 4] 陈光荣 ,韩长日 , 宋小平 , 等.薄叶红厚壳叶化学成
分研究(Ⅰ )[ J] .林产化学与工业 , 2003, 23(2):
73-76.
[ 5] 冯玲 ,沈月毛.滑桃树茎皮的化学成分 [ J] .天然产
物研究与开发 , 2005, 17(3):294-297.
[ 6] 金向群 ,严铭铭 , 黄恩喜 , 等.土鳖虫脂溶性成分的
研究 [ J] .中国中药杂志 , 1993, 18(6):355-356.
[ 7] COTABB, DEOLIVEIRAAB, GUIMARAESK
G, etal.ChemistryandantifungalactivityofXyris
species(Xyridaceae):anewanthraquinonefromXyris
pilosa[ J] .BiochemSystEcol, 2004, 32(4):391 -
397. (下转至第 647页)
625第 8期 王　雪等:卷柏的化学成分
WEIYuan-yuan1 , XUFeng2 , CHENXia2 , CHENXiao-wei1 , ZHANGGuo-gang3
(1.DepartmentofBiologicalandChemicalEngineering, GuangxiUniversityofTechnology, Liuzhou,
545006, China;2.SchoolofPharmacy, ShenyangPharmaceuticalUniversity, Shenyang110016, China;3.
SchoolofTraditionalChineseMateriaMedica, ShenyangPharmaceuticalUniversity, Shenyang110016, Chi-
na)
Abstract:ObjectiveTostudytheantitussiveandexpectorantefectsoftheflavonoidofCortexMori
(FCM).MethodsThecoughmodelswereinducedbyammoniaandSO2 inmice, respectively.Theexcreto-
ryamountofsputumwasdeterminedbyphenolsulfonphthaleinexcretionmethodinmiceandtheliquidex-
cretionquantityoftheairwayinrats, respectively.ResultsThelatencyofcoughinducedbyammoniaand
SO2 inmicewassignificantlyprolongedbyFCM 125 mg·kg-1 andthenumberofcoughwassignificantly
diminishedbyFCM 125 mg·kg-1inammoniainducedmicemodelandFCM 250 mg·kg-1 inSO2 induced
micemodel, respectively.Thephenolsulfonphthaleinexcretionquantityoftrachealinmiceandtheliquidse-
cretionfromtheairwayinratswereincreasedbyFCM 125 mg·kg-1 and180 mg·kg-1 , respectively.
ConclusionFCMhasantitusiveandexpectoranteffect.
Keywords:CortexMori;flavonoid;antitussive;expectorant
(上接第 625页)
[ 8] MARKHAMKR, FRANKEA, MOLLOYBPJ, etal.
FlavonoidprofilesofNewZealandLibocedrusandrelat-
edgenera[ J] .Phytochemistry, 1990, 29(2):501-
507.
[ 9] SILVAGL, CHAIH, GUPTAMP, etal.Cytotoxicbi-
flavonoidsfrom Selaginelawilldenowi[ J] .Phyto-
chemistry, 1995, 40(1):129-134.
[ 10] SadtlerResearchLaboratoriesInc.NuclearMagnetic
ResonanceSpectra[ M] .TheUnitedStatesofAmeri-
ca:SadtlerResearchLaboratoriesInc, 1969:126M.
ChemicalconstituentsofSelaginela tamariscina
(Beauv.)Spring
WANGXue, LIZhan-lin, GAOLiang-liang, LIJin-nan, HUAHui-ming
(SchoolofTraditionalChineseMateriaMedica, ShenyangPharmaceuticalUniversity, Shenyang110016,
China)
Abstract:ObjectiveTostudythechemicalconstituentsofSelaginelatamariscina(Beauv.)Spring.Meth-
odsThecompoundswereisolatedbysilicagel, ODScolumnchromatography, andpreparativeHPLCandi-
dentifiedbymeansofthephysico-chemicalandspectraldata.ResultsThirteencompoundswereisolated
fromthe75%(φ)ethanolextractandidentifiedas3β-hydroxy-7α-methoxy-24β-ethyl-cholest-5-ene(1),
cholesterol(2), β-sitosterol(3), canophylicacid(4), betulinicacid(5), 5, 4′-dihydroxy-7-methoxyflavone
(6), 3-methoxychrysazin(7), amentoflavone(8), isocryptomerin(9), vanilicacid(10), p-anisaldehyde
(11), p-hydroxybenzoicacid(12)anddaucosterol(13).ConclusionsCompounds1-2, 4-7, 10and13 are
isolatedfromthisgenusforthefirsttime.
Keywords:Selaginelatamariscina(Beauv.)Spring;chemicalconstituent;structuralidentification
647第 8期 韦媛媛等:桑白皮总黄酮的镇咳祛痰作用