全 文 :收稿日期: 2002- 09- 05
基金项目: 福建省教委资助项目 ( JB01099) .
扁蓄总黄酮含量的测定
代容春 何文锦 陈培泉 陈由强 朱锦懋
(福建师范大学生物工程学院 ,福建 福州 350007)
摘 要 以 35%乙醇为提取溶剂 ,聚酰胺吸附提纯 ,芦丁为标准品 ,用分光光度法于 510 nm处测定了扁蓄各部位
的总黄酮含量。 结果表明: 扁蓄全草总黄酮含量为 4. 349% ,根为 7. 115% ,茎为 5. 454% ,叶为 3. 544%。
关键词 扁蓄 ;总黄酮 ;含量测定
Determination of Flavones in Polygonum aviculare L.
Dai Rongchun, He Wenjin, Chen Peiquan, Chen Youqiang, Zhu Jinmao
( Bioengineering Colleg e, Fujian No rmal Univ ersi ty, Fuzhou 350007)
Abst ract: Ex t racted by 35% ethano l, purified by polycapro lactam and the rutin used as a standard
compound, the f lav ones of Polygonum aviculare L. v ar. aviculare was quantitated by
measurement o f abso rbance a t 510 nm. The results show tha t the average content of the w ho le
plant is 4. 349% , the ro ot , 7. 115% , the stem , 5. 454% and the leaves, 3. 544% . This study will
provide scienti fic basis on producing medicinal composition of f lav ones f rom Polygonum av iculare
L. v ar. aviculare.
Key w ords: Polygonum aviculare L; Flavones; Content determination
扁蓄 (Polygonum av iculare L. )异名多茎扁蓄、
异叶扁蓄、乌蓼、扁艹蓄等 ,为蓼科植物 [1 ]。扁蓄植株较
大 (高约 10~ 50 cm ) ,全国各地均有分布 ,特别是福
建省 ,气候适宜 ,常年生长。 全草可入药 ,有清热利
尿、消炎解毒之功效 [ 1, 2]。全草含多种药用有效成分 ,
主要有黄酮类化合物扁蓄甙和槲皮甙。其中扁蓄甙
具有抗病毒、抗炎和利尿降压的作用 ;槲皮甙具有抗
病毒作用 ,可作为抗炎和利尿剂 [3~ 5 ]。现代临床学报
道:扁蓄对非胰岛素依赖性糖尿病患者的治疗是一
种理想的药物 ,疗效显著而持久 ,且无毒副作用 [6 ]。
扁蓄亦是福建省民间常见中草药。因此 ,扁蓄具有极
大的开发利用价值 ,但是长期以来 ,对扁蓄的研究仅
见其所含黄酮类化合物及挥发油的化学成分的报
道 [7, 8 ] ,迄今未见扁蓄总黄酮含量测定的有关研究。
本文将聚酰胺吸附提纯与常用的硝酸铝显色法相结
合 ,测定扁蓄不同部位的总黄酮含量 ,以期为利用扁
蓄生产黄酮类药用成分提供科学根据。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 仪器与设备
752型分光光度计 (上海分析仪器总厂 )、旋转
蒸发仪、恒温水浴锅、砂芯层析柱、索氏抽提装置。
1. 1. 2 试剂
芦丁标样 (上海试剂二厂 )、 5% NaNO2、 10%
Al( NO3 ) 3、 1 mo l /LNaOH、聚酰胺粉 ( 80- 100目 ,
以 70%乙醇预处理 )。
1. 1. 3 材料
扁蓄 ,采自福建省福州市盖山镇。 样品Ⅰ :扁蓄
全草 ;样品Ⅱ :扁蓄根部 ;样品Ⅲ :扁蓄茎部 ;样品Ⅳ :
扁蓄叶部。
1. 2 方法
1. 2. 1 总黄酮的提取及纯化
前期研究表明:扁蓄总黄酮提取的最佳条件为
80℃下 35%乙醇浸提。称取样品干燥粉末 (过 60目
筛 ) 10 g ,加入 100 mL( 10倍量 ) 35%乙醇溶液 , 80℃
第 22卷第 6期
2003年 12月 中 国 野 生 植 物 资 源Chinese W ild Plant Resources Vol. 22. No . 6Dec. 2003
水浴回流 1 h,过滤后滤渣重复浸提 2次。合并滤液 ,
减压浓缩至适量 ,置冰箱中过夜 (使叶绿素沉淀 )。将
浓缩液过滤并定容至 100 mL。准确吸取提取液
5 mL,加 200 mg聚酰胺粉搅匀 ,转移到装有 400 mg
聚酰胺粉的砂芯层析柱中 ,用乙醇梯度洗脱 , 35%乙
醇 ( 20 m L)→ 55%乙醇 ( 20 mL)→ 75%乙醇 ( 20
m L)→ 95%乙醇 ( 20 mL)→无水乙醇 ( 20 m L)。收集
各级洗脱液 ,合并浓缩 ,用 30%乙醇定容至 100 mL,
备测。
1. 2. 2 最大吸收波长的选择
以 NaNO2、 Al( NO3 ) 3、NaOH为显色剂 ,分别作
各样品 ( I、 II、 III、 IV)提取液以及芦丁标准品的吸收
曲线 ,均在 510 nm处有一强吸收 ,因此选择 510 nm
为测定波长。
1. 2. 3 芦丁浓度与吸光度的关系确定
精确配制 0. 1 mg /mL的芦丁标液 ,分别取 0,
1. 0, 2. 0, 3. 0, 4. 0, 5. 0mL于 6个 10 mL容量瓶中 ,
各加 30%乙醇使成 5 mL,加入 5% NaNO2溶液
0. 3 mL摇匀 ,放置 6 min后 ,加 10% Al( NO3 ) 3溶液
0. 3 mL,摇匀放置 6 min后加入 1 mo l /LNaOH溶
液 4 mL,再加蒸馏水稀释至刻度 ,摇匀 ,放置 15 min
后于 510 nm波长处测定 O. D值 ,以芦丁空白为参
比 ,绘制标准曲线。
1. 2. 4 总黄酮含量的测定
分别吸取 1. 0 mL上述各定容提取液于 10 mL
容量瓶中 ,按标准芦丁—吸光度测定法 ,以样液空白
参比 ,于 510 nm波长下测定 O. D值 ,计算各提取液
中总黄酮含量 ,即得率。计算公式如下:
样品总黄酮含量 (以芦丁计 ) (% )= CV1V310WV2V4
式中 ,C为样液含黄酮量 ( mg ) ;W为称样量 (g ) ;
V1为抽提定容体积 ( mL) ; V2为聚酰胺处理时
取样液体积 ( m L) ; V3为聚酰胺处理后定容体积
( mL) ; V4—显色反应取样液体积 ( mL)。
2 结果与分析
2. 1 标准曲线绘制
以 O. D值对芦丁标准品含量 ( mg /10 mL)作
图 ,标准曲线回归方程为 y= 1. 007x+ 0. 0023, 其
线性范围 0~ 0. 5 mg /10 mL , 相关系数 R= 0. 999
(如图 1)。
芦丁标准品含量 ( mg /10 m L试液 )
图 1 芦丁标准曲线
2. 2 总黄酮含量的测定
各样品总黄酮含量测定结果见表 1。 植株粉末
总黄酮含量平均值为 4. 349% ;根粉末总黄酮含量
最高 ,为 7. 115% ;茎粉末总黄酮含量为 5. 454% ;叶
粉末总黄酮含量为 3. 544% 。
表 1 扁蓄样品总黄酮含量测定结果 (按芦丁计算 )
样品 总黄酮含量 (% )
平均值
(% )
S(% ) CV (% )
4. 351
植株粉末 4. 301 4. 349 0. 048 1. 104
4. 396
7. 215
根粉末 7. 041 7. 115 0. 090 1. 265
7. 088
5. 152
茎粉末 5. 582 5. 454 0. 263 4. 822
5. 628
3. 441
叶粉末 3. 717 3. 544 0. 151 4. 261
3. 473
2. 3 显色稳定性试验
各样品提取液及芦丁标准品显色反应较稳定。
在 45 min内每隔 15 min测定其吸光度 ,吸光度值
均未发生改变。
2. 4 加标回收试验
称取以上样品数份 ,分别添加适量标样 ,按前述
操作进行提取、层析、测定。以加标测得量减去原样
含量 ,除以加标量 ,计算回收率 ,其结果见表 2。平均
回收率为 102. 38% ,标准差为 3. 689% ,相对标准差
为 3. 603%。
67第 6期 代容春等: 扁蓄总黄酮含量的测定
表 2 加标回收试验结果
样品
名称
样品含黄
酮量 ( g )
加标量
( g )
测得黄酮
量 ( g )
回收率
(% )
平均回收
率 (% )
植株粉末 0. 044
0. 044
0. 035
0. 070
0. 081
0. 116
105. 71
102. 86
茎粉末 0. 055
0. 055
0. 035
0. 070
0. 092
0. 124
105. 71
98. 57
叶粉末 0. 035
0. 035
0. 035
0. 070
0. 069
0. 108
97. 14
104. 29
3 结论
利用聚酰胺吸附提纯与常用的硝酸铝显色法相
结合 ,测定扁蓄不同部位的总黄酮含量。结果表明 ,
扁蓄总黄酮含量较高 ,植株粉末总黄酮含量为 4.
349% ;根粉末总黄酮含量为 7. 115% ;茎粉末总黄
酮含量为 5. 454% ;叶粉末总黄酮含量为 3. 544%。
鉴于扁蓄资源丰富 ,黄酮含量高 ,药用价值大 ,可以
大力开发利用其黄酮类药用成分。
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(上接第 8页 )
也可将蕨菜剖开入开水焯一下并浸泡一段时间以去
掉有毒物质 (可加盐 ) ,或通过 1. 5 h的高温水煮毒
力消失 ,其机理有待进一步探讨。
此外 ,蕨的叶中富含单宁 ,不易腐败 ,质地坚实 ,
易通气 ,用它垫厩 ,不但可作厩肥 ,还可减少厩圈病
虫害的孳生 ;也是常绿树苗蔽荫覆盖的极好材料。由
于蕨的根状茎和叶中含有较多的单宁 ,因此可作提
制栲胶的原料。栲胶是皮革工业和鱼网制造业的一
种重要来源。 也可做蒸汽锅炉的软水剂。 其纤维耐
水湿 ,是加工制作缆绳的好材料等。
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68 中 国 野 生 植 物 资 源 第 22卷