全 文 ：表 2　蛇床子素的回收率
序
号
已知量
C /mg m l-1
投入量
C /mg m l-1
实测量
C /mg m l-1
回收率
(%) –x±s
1 1. 210 9 0. 036 76 1. 210 05 96. 99
2 1. 210 9 0. 073 52 1. 248 85 97. 23
3 1. 210 9 0. 110 28 1. 272 64 96. 33 97. 06±0. 78
4 1. 210 9 0. 147 04 1. 307 82 96. 31
5 1. 210 9 0. 183 80 1. 372 85 98. 43
2. 10　样品测定 取 5个批次的复方蛇床子洗剂 , 分别按 2. 3法
制备供试品溶液 , 测定 ,计算。结果见表 3。
表 3　5个批次产品的含量测定结果
批号 蛇床子素含量*C /mg
040725 124. 08
041010 121. 09
050112 124. 13
050405 130. 10
050626 127. 15
　　n =3;*为每 100 m l中含量
3　讨论
3. 1　 蛇床子素是蛇床子的活性成分 , 属香豆素类 ,脂溶性较强 ,
溶于甲醇 、乙醇 、氯仿等。实验中应用氯仿提取它的溶出性良好 ,
后用乙醇定容 ,是因为参照《中国药典》方法 ,更趋完善。
3. 2　 蛇床子素的紫外吸收光谱具有很明显的特征吸收峰 ,但受
到蛇床子中其它成分的干扰 , 不宜用紫外分光光度法 , 而采用薄
层层析法能很好地将它们分离。
3. 3　 实验证实 , 其它成分对测定无干扰 , 供试品溶液在 48 h内
是稳定的 ,测定的准确度 、精密度 、重现性 、回收率都较理想。
参考文献:
[ 1 ] 　国家药典委员会. 中国药典 , Ⅰ 部 [ S] .北京:化学工业出版社 ,
2000:256.
[ 2 ] 　孙文基 ,绳金房.天然活性成分简明手册 ,第 1版 [M ] . 北京:中国
医药科技出版社 , 1998:424.
[ 3 ] 　吴立军. 天然药物化学 , 第 4版 [M ] . 北京:人民卫生出版社 ,
2004:110.
收稿日期:2005-07-01;　修订日期:2006-01-20
作者简介:胥秀英 (1965-),女(汉族),四川射洪人 ,现任重庆工学院生物
工程学院副研究员 ,学士学位 ,主要从事天然药物研究与开发工作.
高效液相色谱法测定
萹蓄中金丝桃苷等 3种有效成分的含量
胥秀英 , 郑一敏 , 傅善权 , 王阿丽
(重庆工学院生物工程学院 ,重庆　400050)
摘要:目的 用高效液相色谱法测定萹蓄中金丝桃苷 、槲皮苷与木樨草素的含量。方法 采用 Shim adzu C18柱(150 mm ×
4. 6 mm , 5μm),流动相为甲醇-0. 2%H3PO 4溶液(45∶55),流速 1. 0 m l m in-1 , 检测波长 350 nm ,柱温室温 , 用外标法定
量 , 同时测定萹蓄中金丝桃苷与槲皮苷的含量;再采用 Shim adzu C18柱(150 mm ×4. 6 mm , 5 μm),流动相为甲醇-0. 2%
H3PO4溶液(50∶50), 流速 1. 0 m l m in-1 ,检测波长 254 nm , 柱温室温 , 用外标法定量 ,测定萹蓄中木樨草素的含量。结
果 金丝桃苷的线性范围 0. 50 ～ 2. 50μg, r=0. 999 8 , 回收率为 95. 13%, RSD为 2. 91%;槲皮苷的线性范围 0. 40 ～ 2. 00
μg, r=0. 999 6 ,回收率为 96. 49%, RSD 为 2. 77%;木樨草素的线性范围 0. 0325 ～ 0. 39 μg, r=0. 999 9 , 回收率为
95. 75%, RSD 为 2. 49%。结论 该方法简便 ,快速 ,线性关系良好 , 可作为萹蓄的含量测定。
关键词:萹蓄;　金丝桃苷;　槲皮苷;　木樨草素 ;　高效液相色谱法
中图分类号:R284. 2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2006)04-0563-02
Quantitative Determ ination of Hyperoside and Querc itrin and Luteolin in Polygonum
aviculare by HPLC
XU X iu-y ing, ZH ENG Y i-m in , FU Shan-quan, WANG A-li
(S chool of B ioengineering , Chongqing College of Technology , 400050, Ch ina)
Abstract:Objective The purpose is to de te rm ine the con tent o f hype roside, quercitrin and luteolin in polygonum av iculare by
HPLC.M ethods The ana ly sis of hyperoside and que rc itrin was carried out on Shim adzu C18 column(150 mm ×4. 6 mm , 5 μm).
Them obile phase w as me thano l-0. 2%phosphate(45∶55). The flow - ra te w as 1. 0 m l m in-1 and wave - leng th was 350 nm.
Temperature w as room tem pe ra ture. The analysis o f luteo lin w as carried ou t on Shimadzu C18 co lum n(150 mm ×4. 6 mm , 5 μm).
Them ob ile phase w as me thano l-0. 2% phosphate (50∶50). The flow - ra tew as 1. 0 m l m in-1 and wave - leng th w as 254 nm.
Temperature w as room tem pe ra ture. R esu lts The m ethod w as simp le and had a good linear rela tionship. The linear range o f hy-
pero sidew as 0. 50 ～ 2. 50μg and gave a correla tion (r) of 0. 999 8. The recove ry w as 95. 13%. RSD w as 2. 91%. The linear
range o f quercitrin wa s 0. 40 ～ 2. 00μg and gave a co rre la tion(r) o f 0. 999 6. The recovery w as 96. 49%. RSD w as 2. 77%. The
linear range of lu teo lin w as 0. 40 ～ 2. 00 μg and gave a corre lation (r) of 0. 999 6. The recovery w as 95. 75%, RSD 2. 49%.
Conc lu sion The m ethod is easy and fa st to de te rm ine the content o f hyperoside, quercitrin and luteo lin from polygonum aviculare.
Key words:Polygonum aviculare;　H ype roside;　Quercitrin;　Lu teo lin;　HPLC
　　萹蓄 Polygonum av iculare L. 为蓼科植物 , 别名为扁竹 、竹节
草。其味甘 、性平 , 含有槲皮苷 、金丝桃苷 、木樨草素等有效成
分 [ 1] , 有清热利尿与杀虫功能 , 还具有降压 、止血 、抗菌等药理作
用。临床上用于治疗泌尿系统疾病 、肠道系统疾病及糖尿病
等 [ 2] 。文献 [ 3]报道了萹蓄中槲皮素的含量测定方法 , 但未见有
高效液相色谱法测定萹蓄中槲皮苷 、金丝桃苷和木樨草素含量的
报道。 本文采用高效液相色谱法对萹蓄中上述 3个成分的含量
进行了测定。现报道如下。
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LISH IZHEN M EDIC INE AND MATER IA MED ICA RESEARCH 2006 VOL. 17 NO. 4 时珍国医国药 2006年第 17卷第 4期
1　实验仪器与试药
1. 1　仪器 岛津 LC-10A高效液相色谱仪 (LC-10ATVP二元泵 ,
SCL-10AVP控制器 , SPD-10AVP紫外检测器 , CTO-10AVP柱温
箱)。
1. 2　药材 购于重庆市中药材市场 , 由重庆市中药研究院生药
栽培研 究室 李泉 森副 主 任技 师鉴 定 为萹 蓄 Polygonum
avicu lare L. 。
1. 3　槲皮苷 、金丝桃苷 、木樨草素对照品 购于中国药品生物制
品检 定 所 , 批 号 分 别 为 1512-200202 , 111538-200302 和
111520-200201。
2　方法和结果
2. 1　色谱条件与系统适应性实验 参照文献 [ 1]经筛选 , 选用如
下色谱条件:采用 Sh im adzu C18柱 (150 mm ×4. 6 mm , 5 μm),流
动相为甲醇-0. 2%H3PO 4溶液(45∶55), 流速 1. 0 m l m in-1 ,检
测波长 350 nm, 柱温室温 , 用外标法定量 , 同时测定萹蓄中金丝
桃苷与槲皮苷的含量;再用 Shim adzu C18柱(150 mm ×4. 6 mm , 5μm),流动相为甲醇-0. 2%H3PO4溶液 (50∶50), 流速 1. 0 m l
m in-1 ,检测波长 254 nm ,柱温室温 , 用外标法定量 ,测定萹蓄中木
樨草素的含量。
2. 2　对照品及供试品溶液的制备
2. 2. 1　对照品溶液的制备 精密称取槲皮苷 、金丝桃苷与木樨
草素对照品一定量 , 用甲醇溶解分别制成含槲皮苷 0. 25 g L-1 ,
金丝桃苷 0. 20 g L-1的混合液与木樨草素 0. 0325 g L-1的溶液
, 经 0. 45 μm滤膜滤过 , 滤液作为对照品溶液备用。
2. 2. 2　供试品溶液的制备 取萹蓄药材置 60℃烘箱干燥 8 h,粉
粹 , 分别称取 2. 5 g,加入 20 m l甲醇 ,超声提取 30 m in, 滤过 ,残渣
再按前述方法重复提取 2次。合并提取液 , 在干燥箱烘干 , 然后
称取该提取物一定量 ,用甲醇溶解制成 10 m g m l-1的溶液 , 0. 45
μm滤膜滤过 ,滤液作为供试品溶液备用。
2. 3　金丝桃苷与槲皮苷方法学考察
2. 3. 1　线性关系考察实验 分别精密量取上述含金丝桃苷与槲
皮苷对照品溶液 2, 4, 6, 8, 10μl进样 , 以色谱峰面积(Y)对质量
(X)进行回归 , 金丝桃苷的线性方程为 Y =1. 711 ×106X +
131 863, r=0. 999 8, 线性范围为 0. 50 ～ 2. 50 μg;槲皮苷线性方
程 Y =1. 843×106X +82 103, r=0. 999 6,线性范围为 0. 40 ～ 2. 00
μg。
2. 3. 2　精密度实验 取上述对照品溶液 10μl,连续进样 6次 ,测
得金丝桃苷与槲皮苷的峰面积 RSD 分别为 0. 97%和 1. 03%,表
明仪器进样精密度良好。
2. 3. 3　稳定性实验 取 2. 2. 2供试样品溶液 ,分别在 0, 2, 4, 8,
16 h进样 10 μl, 测定金丝桃苷与槲皮苷的峰面积 RSD 分别为
1. 59%和 1. 76%,表明样品溶液在 16 h内稳定。
2. 3. 4　重现性实验 取同一批药材 , 按供试品制备方法配制 6
份 , 分别进样 10μl, 测定含量 RSD 分别为 2. 76%和 2. 55%, 表明
该方法的重现性较好 。
2. 3. 5　加样回收率实验 取已知含量的药材样品 5份 , 分别加
入与样品量之比约为 1∶1的金丝桃苷与槲皮苷对照品 , 按样品
制备方法和测试条件进行测定 , 计算得回收率分别为 95. 06%,
96. 20%;RSD 分别为 1. 98%, 2. 13%。
2. 4　木樨草素方法学考察
2. 4. 1　线性关系考察实验 分别精密量取上述木樨草素对照品
溶液 1, 2, 4, 8, 12μl进样 , 以色谱峰面积(Y)对质量 (X)进行回
归 , 木樨草素的线性回归方程为 Y =3. 118 5×106X +37 965. 1(r
=0. 999 9),线性范围为 0. 032 5 ～ 0. 39 μg。
2. 4. 2　精密度实验 取上述对照品溶液 10 μl,连续进样 6次 ,
测得木樨草素的峰面积 RSD 为 0. 81%, 表明仪器进样精密度
良好。
2. 4. 3　稳定性实验 取 2. 2. 2供试样品溶液 , 分别在 0, 2, 4, 8,
16 h进样 10 μl, 测定木樨草素的峰面积 RSD为 2. 54%, 表明样
品溶液在 16 h内稳定。
2. 4. 4　重现性实验 取同一批药材 , 按供试品制备方法配制 6
份 , 分别进样 10μl, 测定含量 RSD 为 2. 88%,表明该方法的重现
性较好 。
2. 4. 5　加样回收率实验 取已知含量的药材样品 5份 , 分别加
入与样品量之比约为 1∶1的木樨草素对照品 , 按样品制备方法
和测试条件进行测定 ,计算得回收率为 99. 65%, RSD1. 24%。
2. 5　样品含量测定 分别取供试品溶液 , 进样 10μl测定金丝桃
苷与槲皮苷 、木樨草素峰面积 , 由各线性方程计算其含量结果见
表 1。 金丝桃苷与槲皮苷 、木樨草素对照品及样品图谱见图 1
～ 4。
表 1　萹蓄中金丝桃苷、槲皮苷与木樨草素的含量 g
样品 金丝桃苷 槲皮苷 木樨草素
030916 0. 011 0. 021 0. 0002
040209 0. 013 0. 024 0. 0005
040511 0. 017 0. 030 0. 0003
表中数据为每 100 g中含量
1.金丝桃苷　2.槲皮苷　　　　1.金丝桃苷　　 2.槲皮苷　
图 1　对照品色谱图　　　　图 2　样品色谱图
1木樨草素 　　　　　　1木樨草素
图 3　对照品色谱图　　　　图 4　样品色谱图
3　讨论
金丝桃苷 、槲皮苷与木樨草素是萹蓄中的活性成分 , 该 3个
成分的含量测定迄今未见报道。本实验采用 H PLC法测定了萹
蓄中 3种成分的含量 , 结果表明该方法稳定性和重现性均较好 ,
杂质干扰小 ,是一种较理想的含量测定方法。
参考文献:
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时珍国医国药 2006年第 17卷第 4期 LISH IZHEN MED IC INE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2006 VOL. 17 NO. 4