全 文 ：基金项目：吉林省科技厅白求恩基金专项（２０１６０１０１０８０ＪＣ）；吉林省
直卫生专项项目（ＣＺＺＲ２０１４０１０）
＊通讯作者
文章编号：１００７－４２８７（２０１６）０８－１２７４－０２
紫景天总黄酮的分离制备及鉴定研究
王晓峰１，王　伟１＊，张　艳１，牛志多３，刘　新１，苗　强１，刘　聪１，袁　琳１，孔晨飞２＊
（１．吉林大学中日联谊医院 口腔科，吉林 长春１３００３３；２．吉林大学中日联谊医院科学研究中心；３．吉林省中医药科学院）
　　牙周炎是口腔科常见病多发病，是导致牙齿丧
失的主要原因之一。目前主要治疗方法是以局部治
疗为主，药物治疗主要是牙周袋用药。目前牙周袋
用药基本是抗生素制剂，易产生耐药性及菌丛失调
等副作用［１］。
紫景天为景天科多年生草本植物，在东北地区
的长白山具有广泛分布。其主要化学成分为多种黄
酮类化合物和活性多糖等。全草入药，具有收敛止
血、清热解毒及调节免疫功能等功效。此外，紫景天
还能减轻或消除再生障碍性贫血引起的蛋白质代谢
障碍、消肿生肌、抗炎镇痛及促进溃疡愈合［２－４］。我
们前期研究发现其鲜汁制成的制剂对口腔黏膜病有
治疗作用。因此我们采用现代的方法，榨取紫景天
新鲜茎叶的汁液，然后进行有效成分的提取和分离，
为紫景天的开发利用提供理论依据。
１　材料和方法
１．１　材料与试剂　紫景天全草，由吉林省中医药科
学院制剂室提供。韩国英麟高效液相色谱系统：
ＳＰ９３０Ｄ色谱泵、ＵＶ７３０Ｄ紫外检测器，７７２５ｉ手动
进样器，色谱３０００工作站。槲皮素对照品、山柰素
对照品，购于中国药品生物制品检定所。其他试剂
均为色谱纯或分析纯。
１．２　总黄酮的提取
１．２．１　紫景天鲜茎叶捣碎轧炸取汁，取轧炸汁用石
油醚脱脂后，用正丁醇一倍以上，提取２次以上，合
并正丁醇液，回收正丁醇浓缩蒸干、干燥。
１．２．２　紫景天干燥药材，加水煎煮，煎煮液用石油
醚脱脂后，用正丁醇一倍以上，提取２次以上，合并
正丁醇液，回收正丁醇浓缩蒸干、干燥。
１．２．３　紫景天干燥药材，用乙醇（６０％－８０％）一倍
以上，回流提取２次以上，乙醇液回收乙醇浓缩至无
醇味，水液用石油醚脱脂后，用正丁醇一倍以上，提
取２次以上，合并正丁醇液，回收正丁醇浓缩蒸干、
干燥后得总黄酮。
１．３　总黄酮提取物中槲皮素和山柰素的测定
采用高效液相色谱法，具体实验步骤如下：
槲皮素对照品溶液：精密称取槲皮素对照品
４．８４ｍｇ，置１０ｍｌ量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，浓
度为０．４８４ｍｇ／ｍｌ。作为槲皮素对照品母液。
山柰素对照品溶液：精密称取山柰素对照品
８．２２ｍｇ，置１０ｍｌ量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，浓
度为０．８２２ｍｇ／ｍｌ。作为山柰素对照品母液。
混合对照品溶液：精密量取槲皮素对照品母液
０．２ｍｌ、山柰素对照品母液０．１５ｍｌ，置１０ｍｌ量瓶
中，加甲醇至刻度，摇匀，作为槲皮素、山柰素混合对
照品溶液。浓度：槲皮素为９．６８μｇ／ｍｌ、山柰素为
１２．３３μｇ／ｍｌ。
供试品溶液的制备：取样品０．１ｇ，精密称定，置
１００ｍｌ量瓶中，加入甲醇９０ｍｌ，超声处理３０ｍｉｎ，放
冷，加甲醇至刻度，摇匀，离心，精密量取离心液１０
ｍｌ，精密加入盐酸５ｍｌ，置９０℃水浴中加热水解１ｈ，
取出，迅速冷却，转移至５０ｍｌ量瓶中，用甲醇稀释至
刻度，摇匀，即得。精密量取上述样品１．０ｍｌ，置１０
ｍｌ量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，进样测定。
标准曲线的制备：精密吸取槲皮素、山柰素混合
对照品溶液２、４、８、１２、１６μｌ，分别注入液相色谱仪，
测定，以峰面积积分值为纵坐标，以对照品进样量为
横坐标，绘制标准曲线。
２　结果
２．１　参考药典方法，采用高效液相色谱法，供试品
中的槲皮素、山柰素能够得到很好的分离，标准曲线
结果见图１。
２．２　样品测定结果见表１。
表１　样品含量测定结果
序号
槲皮素含量
（％）
山柰素含量
（％）
槲皮素、山柰素
含量总量（％）
１
２
３
平均
３６．２
２９．６
３６．７
３４．１
１６．８
４８．７
３４．０
３３．２
５３．０
７８．３
７０．７
６７．３
　　结果：槲皮素和山柰素的总量超过了５０％。
—４７２１— Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｌａｂ　Ｄｉａｇｎ，Ａｕｇｕｓｔ，２０１６，Ｖｏｌ　２０，Ｎｏ．８
图１　槲皮素、山柰素标准曲线
２．３　本品不同时间的累积释放率见表２和释放曲
线图（图２）。释放速率经拟合，符合一级动力学方
程。
图２　药物释放曲线
表２　累积释放度表
时间 累积释放度
１　 １．１４
３　 ３．５
７　 ５．５４
８　 ６．０
２２　 ９．５９
ｂ　 ２．１８９９
ｍ　 １．０８１９４１５２４
公式 ｙ＝ｂ＊ｍ＾ｘ
３　讨论
在牙周炎的治疗中，主要为控制或消除炎症并
促进组织再生。针对牙周炎病变过程中牙周组织的
破坏和牙槽骨的吸收，阻断炎症因子的作用，研究开
发高效低毒的牙周炎治疗药物为临床治疗牙周炎所
亟需。
　　在最近的报道中，祖国医学在牙周炎防治中的
作用倍受广大研究人员重视，中医药的发掘利用取
得了长足进步。一些中草药的提取物或单体被证实
具有抗炎和直接或间接的抑制破骨细胞分化和功能
的作用［５］。中药具有毒副作用少、价格便宜、标本兼
治的优势，广受关注。但中药有效成分的作用机理
往往不够明晰，不能得到国际上的普遍认可，从而限
制了其在临床上的应用。
在我们的研究工作中，采用长白山野生药材紫
景天作为原料，对其进行了有效成分的提取、分离及
鉴定研究，将为中药提取物在牙周炎临床治疗上的
应用提供理论依据。
参考文献：
［１］Ｃｕｅｓｔａ　ＡＩ，Ｊｅｗｔｕｃｈｏｗｉｃｚ　ＶＭ，Ｂｒｕｓｃａ　ＭＩ，ｅｔ　ａｌ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ　ｓｕｓｃｅｐ－
ｔｉｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ　ｉｓｏｌａｔｅｓ　ｉｎ　ｏｒａｌ　ｍｕｃｏｓａ　ａｎｄ　ｐｏｃｋ－
ｅｔｓ　ｏｆ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｇｉｎｇｉｖｉｔｉｓ－ｐｅｒｉｏｄｏｎｔｉｔｉｓ［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ｏｄｏｎｔｏｌ　Ｌａｔｉ－
ｎｏａｍ，２０１１，２４：３５．
［２］Ｌｉｎ　ＹＣ，Ｌｕｏ　ＨＹ，Ｊｉｎ　ＱＸ．Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖａｎｏｎｅｓ　ｏｆ
Ｓｅｄｕｍ　ｓａｒｍｅｎｔｏｓｕｍ　ｏｎ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｏｆ　ｈｅｐａｔｉｃ　ｓｔｅｌａｔｅ　ｃｅｌｓ　ａｎｄ　ｉｔｓ
ｍｅｃｈａｎｉｓｍ［Ｊ］．Ｚｈｏｎｇｇｕｏ　Ｚｈｏｎｇ　Ｙａｏ　Ｚａ　Ｚｈｉ，２０１５，４０：３２７３．
［３］Ｌｅｅ　ＳＬ，Ｃｈｉｎ　ＴＹ，Ｌａｉ　ＣＬ，ｅｔ　ａｌ．Ｓｅｄｕｍ　ｍｅｘｉｃａｎｕｍ　Ｂｒｉｔｔ．Ｉｎｄｕｃｅｓ
Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｏｆ　Ｐｒｉｍａｒｙ　Ｒａｔ　Ａｃｔｉｖａｔｅｄ　Ｈｅｐａｔｉｃ　Ｓｔｅｌａｔｅ　Ｃｅｌｓ［Ｊ］．
Ｅｖｉｄ　Ｂａｓｅｄ　Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ　Ａｌｔｅｒｎａｔ　Ｍｅｄ，２０１５：１９４３７３．
［４］Ｚｈｏｎｇ　Ｄ，Ｚｈｏｎｇ　Ｚ，Ｗｕ　Ｌ，ｅｔ　ａｌ．Ｔｈｅｒｍａｌ　Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　Ｈｙｐｅｒ－
ａｃｃｕｍｕｌａｔｏｒ　ａｎｄ　Ｆａｔｅ　ｏｆ　Ｈｅａｖｙ　Ｍｅｔａｌｓ　ｄｕｒｉｎｇ　Ｔｈｅｒｍａｌ　Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
ｏｆ　Ｓｅｄｕｍ　ｐｌｕｍｂｉｚｉｎｃｉｃｏｌａ［Ｊ］．Ｉｎｔ　Ｊ　Ｐｈｙｔｏｒｅｍｅｄｉａｔｉｏｎ，２０１５，１７：
７６６．
［５］Ｈｕａｎｇ　ＢＰ，Ｌｉｎ　ＣＨ，Ｃｈｅｎ　ＹＣ，ｅｔ　ａｌ．Ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ
Ｐｅｒｉｌａ　ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓ　ｌｅａｆ　ｅｘｔｒａｃｔ　ｏｎ　ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ－ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ
ＲＡＷ２６４．７ｃｅｌｓ［Ｊ］．Ｍｏｌ　Ｍｅｄ　Ｒｅｐ，２０１４，１０：１０７７．
（收稿日期：２０１６－０２－１６）
—５７２１—中国实验诊断学　２０１６年８月　第２０卷　第８期