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紫景天对大鼠牙周组织抗氧化作用的影响



全 文 :表1 DC-Ag、DC-CIK对NCIH-446的杀伤效应
  杀伤活性
监测时间  
DC-CIK
(%,x—±s,n=4)
DC-Ag
(%,x—±s,n=4)
2h 62.95±0.0218  57.63±0.0231
6h 73.08±0.0086※ 68.71±0.0021△
13h 77.52±0.0008※ 75.14±0.0003△
24h 84.20±0.0006※ 82.55±0.0005△
35h 88.91±0.0003※ 87.65±0.0002△
48h 91.59±0.0003※ 90.78±0.0006△
  ※P<0.01,与2小时相比,△P<0.01与2小时相比
伤细胞以及CD4+T辅助细胞,在免疫应答反应中
起着重要作用[8]。CIK是一种广谱的抗肿瘤细胞,
它具有杀伤性强,无 MHC限制的特点。本实验选
用抗原负载的DC(DC-Ag)及DC联合CIK对小细
胞肺癌细胞 NCIH-446进行杀伤活性实验,通过
xCELLigence RTCA S16实时无标记细胞功能分析
仪进行实时监测,结果证明,DC-Ag 、DC-CIK 与
NCIH-446在效靶比为50:1时,在共同培养2小时
时就产生了较强的杀伤效果,而且随着培养时间的
延长,杀伤效果不断提高(见图1,表1),维持了对肿
瘤杀伤的持续效应,两种细胞在培养48小时杀伤率
都达到了90%以上,证明了抗原负载的DC及DC
联合CIK对小细胞肺癌强大的杀伤活性。但在同
一时间点两种细胞对NCIH-446的杀伤作用没有明
显差异。
参考文献:
[1]Van Meerbeeck JP,Fennel DA,De Ruysscher DK.Smal-cel
lung cancer[J].Lancet,2011,378(9804):1741.
[2]Dooley AL,Winslow MM,Chiang DY,et al.nuclear factor I/B is
an oncogene in smal cel lung cancer[J].Genes Dev,2011,25
(14):1470.
[3]廖美琳,王慧敏.小细胞肺癌的治疗进展[J].肿瘤,2001,21(6):
399.
[4]赵 鑫,常 颖,刘玉侠,等.培养不同时间CIK细胞免疫表型变
化与其抗肿瘤活性关系的研究[J].中国实验诊断学,2015,19
(9):1455.
[5]于 鸿,刘玉侠.热休克蛋白抗原肽致敏的脐血树突状细胞治疗
肺癌的实验研究[J].中国实用医药,2007,2(35):18.
[6]于 鸿,张 健,刘玉侠,等.抗原致敏的脐血树突状细胞诱导抗
肿瘤效应的体外实验研究[J].中国实验诊断学,2010,14(1):
107.
[7]刘清池,张慧敏,张玉娜,等.DC-CIK细胞清除微小残留白血病
的临床研究[J].中国肿瘤生物治疗杂志,2013,20(4):398.
[8]Gilboa E.DC-based cancer vaccines[J].J China Invest,2007,
117:1195.
(收稿日期:2015-04-11)
基金项目:吉林省科技厅专项项目(20160101080JC);吉林省直卫生
专项项目(CZZR2014010)
*通讯作者
文章编号:1007-4287(2016)10-1629-02
紫景天对大鼠牙周组织抗氧化作用的影响
王晓峰,王 伟*,张天夫,苗 强,袁 琳,刘 聪
(吉林大学中日联谊医院 口腔科,吉林 长春130033)
  牙周炎(Periodontitis)是牙周较深层组织的慢
性破坏性疾病,其特点是牙周支持组织的进行性破
坏,可造成牙周组织的不可逆性损害[1]。有研究发
现[2],在牙周病的发生发展过程中,氧源性自由基在
牙周损伤的分子机制中扮演了重要的角色。本研究
通过分析紫景天对大鼠血清中超氧化物歧化酶
(SOD)和丙二醛(MDA)含量以及谷胱甘肽氧化酶
(GSH-Px)活力的影响,以期阐明紫景天在抗氧化
作用方面预防和治疗牙周病的作用机理。
1 材料和方法
1.1 样品来源及纯度 紫景天原位凝胶剂,浓度分
别为1.0%、0.5%、0.25%,由吉林省中医药科学院
制剂室提供,批号:20120725。阳性对照药复方牙痛
酊,贵州同济堂制药有限公司生产,批号:20120102。
1.2 试剂 南京建成生物工程制品研究所SOD试
剂盒,批 号:20120223;MDA 试 剂 盒,批 号:
20120213;GSH试剂盒,批号:20120213。
1.3 仪器 磨牙机,吉林大学中日联谊医院口腔科
提供。
1.4 建立大鼠实验性牙周炎模型[3,4]  取 Wistar
大鼠60只,体重180-280g,雌雄均等,由吉林大学
基础医学院动物实验中心提供。合格证号:2003-
—9261—中国实验诊断学 2016年10月 第20卷 第10期
0001。取10只为正常对照组,剩余动物以3%水合
氯醛10ml/kg腹腔注射麻醉,剥离上颌牙龈,将4
号无菌丝线先加入到0.5个麦氏单位牙龈卟啉单胞
菌的菌液中2h,双股穿过大鼠第一和第二磨牙间
隙,在颊侧打结3次,再绕过第一磨牙,于腭侧第一
磨牙和第二磨牙间结扎并打结3次,以持续刺激牙
龈。从第3周开始观察牙龈红肿、糜烂、溢脓、探诊
出血等症状,并按国际通用标准评价牙龈指数及龈
沟出血指数。于给药后第15天,以3%水合氯醛10
ml/kg腹腔注射麻醉,腹主动脉取血,测量血清中的
SOD、GSH-Px、MDA。
1.5 检测方法 (1)血清SOD活力测定:采用亚硝
酸盐法;(2)血清 MDA的测定:采用硫代巴比妥酸
法;(3)血清GSH-Px活力测定:采用硫代二硝基苯
甲酸直接法。
2 结果
由表1结果可见,模型组血清中SOD、GSH-Px
含量比对照组明显降低,MDA含量明显升高,紫景
天总黄酮1.0%、0.5%和复方牙痛酊均可明显升高
大鼠血清中SOD、GSH-Px含量,降低 MDA含量。
表明紫景天总黄酮及复方牙痛酊均可明显减轻对大
鼠实验性牙周炎的损伤程度,对实验性牙周炎具有
一定的治疗作用。
表1 紫景天总黄酮给药对实验性牙周炎大鼠血清中SOD、GSH-Px、MDA的影响(n=8,x—±s)
组别
剂量
(ml/只)
超氧化物歧化酶
SOD(U/ml)
谷胱甘肽过氧化物酶
GSH-Px(U/ml)
丙二醛
MDA(nmol/L)
正常对照组 - 103.90±3.948*** 196.20±6.735** 3.741±0.691***
模型对照组 - 91.10±4.102  157.27±31.48  8.928±1.003
复方牙痛酊 0.5  99.84±6.377** 190.34±5.101* 6.231±1.099***
1.0%紫景天总黄酮 0.5  99.11±5.112** 188.48±5.834* 6.570±1.015**
0.5%紫景天总黄酮 0.5  93.77±5.626  187.55±15.81* 7.133±0.778**
0.25%紫景天总黄酮 0.5  92.17±5.201  182.70±19.69  7.949±1.495
  注:与模型对照组比较 *P<0.05;**P<0.01;***P<0.001。
3 讨论
牙周炎的主要病理变化之一是牙槽骨吸收。目
前牙周炎的治疗手段主要为控制或消除炎症并促进
牙周组织再生。临床上牙周炎的药物治疗主要是针
对菌斑细菌使用抗生素治疗,如甲硝哇、替硝哇等。
这类药物虽然有较好的疗效,但长期应用易导致菌
群失调,细菌耐药性增加,以及胃肠道刺激性等毒副
作用[5]。因此,针对牙周炎病变过程中牙周组织的
破坏和牙槽骨的吸收,阻断炎症因子的作用,研究开
发高效低毒的牙周炎治疗药物为临床治疗牙周炎所
亟需。中药具有毒副作用少、价格便宜、标本兼治的
优势,广受关注。
我们前期实验成功建立了实验性牙周炎动物模
型,已经证明紫景天治疗性给药可明显减轻“实验性
牙周炎”大鼠牙龈指数、龈沟出血指数。体外抑菌实
验结果表明,紫景天对牙龈卟啉菌、放线共生放线杆
菌、产黑色素拟杆菌均有较好的抑菌作用,即对牙周
炎易感菌有明显的抑制作用。可见,紫景天原位凝
胶剂对牙周炎具有“标本兼治”的治疗作用,同时未
见明显的毒副作用。
有研究证明,在牙周病的发生发展过程中,正是
氧化应激反应参与了牙周炎的致病机制[6]。本实验
发现,紫景天原位凝胶剂可显著提高SOD、GSH-Px
的活性,降低可间接反应细胞损伤程度的脂质过氧
化物分解产物 MDA的含量。证明紫景天黄酮具有
清除氧自由基的抗氧化作用,对牙周组织可以起到
保护作用。
参考文献:
[1]Otom-Corgel J,Pucher JJ,Rethman MP,et al.State of the sci-
ence:chronic periodontitis and systemic health[J].J Evid Based
Dent Pract,2012,12(3):20.
[2]Waddington RJ,Moseley R,Embery G.Reactive oxygen species:a
potential role in the pathogenesis of periodontal diseases[J].Oral
Dis,2000,6(3):138.
[3]车彦海,李桂英,赵令君,等.综合方法建立牙周炎动物模型的效
果评价[J].吉林大学学报,2006,32(6):1119.
[4]Xie R,Kuijpers-Jagtman AM,Maltha JC.Inflammatory responses
in two commonly used rat models for c tooth movement:compari-
son with ligature-induced petiodontitis[J].Arch Oral Biol,2011,
56:159.
[5]Cuesta AI,Jewtuchowicz VM,Brusca MI,et al.Antibiotic suscep-
tibility of Staphylococcus aureus isolates in oral mucosa and pock-
ets of patients with gingivitis-periodontitis[J].Acta Odontol Lati-
noam,2011,24:35.
[6]Nibali L,Donos N.Periodontitis and redox status:a review[J].
Curr Pharm Des,2013,19(15):2687.
(收稿日期:2015-06-16)
—0361— Chin J Lab Diagn,October,2016,Vol 20,No.10