全 文 ：第 24卷 第 2期 贵州大学学报(自然科学版) Vol.24 No.2
2007年　3月 JournalofGuizhouUniversity(NaturalSciences) Mar.2007
文章编号　1000-5269(2007)02-0195-03
几种毛茛属植物中总黄酮的含量测定＊
董　南 , 罗兴发 , 陈良龙
(贵州大学理学院 , 贵州贵阳 550025)
摘　要:采用分光光度法对贵州产 3种毛茛属植物石龙芮 (R.sceleratus), 毛茛 (R.japoni-
cus), 禺毛茛 (R.cantoniensis)的全草及不同部位中的总黄酮含量进行了测定。样品经 75%乙
醇提取 3次 , 芦丁为对照品 , 在 λ=500nm处测定 , 方法的平均回收率为 101.4%, 重现性
RSD=2.26%。该法简便 、 准确 、重现性好 , 适用于毛茛属植物中总黄酮的含量测定 。
关键词:分光光度法;毛茛属;总黄酮;含量测定
中图分类号:O69:R9;R284　　文献标识码:A
　　毛茛属植物在系统分类上属于较为原始但又十分重要的一类植物 。该属植物一般具小毒 , 有清热解
毒的功效 , 在我国资源非常丰富 , 产量大 , 是一类有广泛开发利用前景的药用植物 。毛茛属植物一般含
有黄酮类化合物 [ 1] , 而黄酮类化合物是植物中非常重要的一类次生代谢产物 , 具有降脂 、抗血栓 、抗
心律失常 、 抗氧化等多种生理活性 [ 2] 。总黄酮的含量测定方法有紫外 -可见分光光度法 [ 3] , 荧光分光
光度法 [ 4] , 高效液相色谱法 [ 5]等。为进一步开发利用毛茛属药用植物 , 本文利用分光光度法对贵州产
的 3种毛茛属植物石龙芮 (R.sceleratus), 毛茛 (R.japonicus), 禺毛茛 (R.cantoniensis)的全草及不同
部位中的总黄酮含量进行了测定研究 。
1　材料与方法
1.1　仪器与试剂
UNICO7200型分光光度计 (尤尼柯仪器有限公司);毛茛 , 禺毛茛采自贵阳市郊区和开阳县 , 石龙
芮采自贵阳市郊区 , 由贵阳中医学院陈德媛研究员鉴定 , 所有样品都采自 2006年 6月份 。芦丁对照品
(昆明植物所提供 , 纯度大于 98%);乙醇 、 亚硝酸钠 、硝酸铝 、氢氧化钠均为分析纯。
1.2　方法
1.2.1　对照品溶液的制备:精密称取 100℃干燥恒重的芦丁对照品 10mg, 用甲醇定容于 10mL容量瓶
中 , 配成每 mL含 1mg的对照品溶液。
1.2.2　供试品溶液的制备:称取经 70℃恒温干燥过 18目筛的毛茛粉末 1.0g, 精密称定 , 加 70%乙醇
15mL回流提取 3次 , 时间每次为一小时 。合并提取液 , 过滤 , 在旋转蒸发仪上蒸去多余溶剂后定容于
25mL容量瓶中备用。
2　结果
2.1　芦丁标准曲线的制备
精密吸取芦丁对照品溶液 0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.7mL, 分别置于 10mL容量瓶中 , 各加
70%乙醇至 4mL, 加入 5%亚硝酸钠 1.0mL, 摇匀 , 放置 6min, 加入 10%硝酸铝 0.5mL, 摇匀 , 放置
6min, 加 4% NaOH溶液定容于 10 mL, 放置 15min, 在 500nm处测吸光度 , 绘制浓度 -吸光度标准曲
线 , 求得回归方程:A=1.057C-0.0172, r=0.9995。结果表明芦丁在 10μg/ mL-80μg/ mL范围内线
形关系良好 。
2.2　重现性实验
称取经 70℃恒温干燥过 18目筛的毛茛粉末 0.5g共 4份 , 按照 1.2.2项下的方法进行提取 、制备 。
＊ 收稿日期:2006-12-22
作者简介:董　南 (1969-), 副教授。研究方向:天然产物的提取和分离。
罗兴发 , 陈良龙为本院 2003级本科生。
DOI :10.15958/j.cnki.gdxbzrb.2007.02.022
分别精密量取 1.0mL制备液于 10mL容量瓶中 , 按 2.1项中 “加 70%乙醇至 4mL” 起 , 依法操作 , 测
定吸光度 , 4次测得平均含量的 RSD=2.26%, 说明本测定法的重现性良好 , 实验结果见表 1.1
表 1　重现性实验结果
样品 样品重量(g) 吸光度(A)
黄酮含量
(mg· g-1)
平均值
(mg· g-1)
RSD
(%)
1 0.5008 0.391 19.31
2 0.5008 0.415 20.44 19.64 2.26
3 0.5001 0.392 19.36
4 0.5001 0.394 19.45
2.3　稳定性实验:
称取经 70℃恒温干燥过 18目筛的毛茛粉末 1.0g, 按 1.2.2项下的方法提取及制备供试品溶液 , 并
分别在 0 , 15, 30, 45, 60min测定其吸光度 , 结果表明在 60min内吸光度基本保持不变 , RSD=
3.16%.稳定性实验结果见表 2
表 2　稳定性实验结果
样品 吸光度(A)
0
(min)
15
(min)
30
(min)
45
(min)
60
(min) 平均值 RSD(%)
毛茛 0.592 0.577 0.563 0.550 0.549 0.5662 3.16
2.4　精密度实验
精密称取经 70℃恒温干燥过 18目筛的毛茛粉末 1.0g, 按 1.2.2项下的方法提取及制备供试品溶
液 , 重复测定 4次 , RSD=1.12%
2.5　回收率实验
采用加样回收法 。精密称取已知含量的毛茛粉末 0.5g, 共称 4份 , 折算出样品中所含芦丁的量 ,
加入相当量的芦丁对照品 , 按 1.2.2项下的方法提取及制备供试品溶液 , 测定 , 结果见表 3。结果显示
该法有良好的加样回收率 。
　　　表 3　样品加样回收实验结果
样品 加标准品量(mg)
测得量
(mg)
加样回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
1 7.2 7.4 102.8
2 7.5 7.7 102.7 101.4 2.5
3 8.1 7.9 97.5
4 7.4 7.6 102.7
2.6　样品含量测定
分别精密称取经 70℃恒温干燥过 18目筛的毛茛粉末 ,
石龙芮粉末 , 禺毛茛粉末及不同部位的毛茛 、禺毛茛 、 石
龙芮各 1.0g, 每个样品平行称取 2份 , 按 1.2.2项下的方
法提取及制备供试品溶液 , 测定 , 结果见表 4
3　结论与讨论
(1)毛茛属植物含黄酮类物质 , 因此拟用芦丁作为标
准品测定黄酮含量 , 方法简便 , 准确度高 , 重现性好。
　　表 4　样品测定结果 (mg· g-1 , n=2)
样品 产地 部位 总黄酮 /mg· g-1
毛茛 贵阳 全草 14.40
毛茛 贵阳 果实 7.55
毛茛 贵阳 根 15.90
毛茛 贵阳 茎 26.04
禺毛茛 开阳 全草 14.27
禺毛茛 开阳 果实 7.34
禺毛茛 开阳 根 6.58
禺毛茛 开阳 茎 16.04
石龙芮 贵阳 全草 14.96
石龙芮 贵阳 根 2.49
石龙芮 贵阳 茎 26.02
石龙芮 贵阳 果实 12.59
毛茛 开阳 全草 17.62
禺毛茛 贵阳 全草 39.36
(2)对同一贵阳产毛茛样品 , 考察了 95%乙醇 , 70%乙醇为提取溶媒的提取效率 , 结果 95%乙醇提取
总黄酮为 9.85mg/g, 70%乙醇提取总黄酮为 13.94mg/g, 故采用 70%乙醇提取。根据文献报道 [ 6] ,
95%乙醇适合提取甙元 , 60%左右乙醇适合提取甙类 , 是否毛茛属植物中甙类含量高于甙元含量 , 还有
待进一步研究。
(3)从表 3可见 , 毛茛属不同种间总黄酮含量有一定差异 , 不同产地 , 不同部位的的总黄酮含量
也存在差异 , 以茎中的总黄酮含量为高 , 这可为毛茛属植物的利用提供科学依据。
·196· 贵州大学学报 (自然科学版) 第 24卷
参考文献:
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Determinationofflavonoidsinseveralplantsofranunculus
DONGNan, LUOXing-fa, CHENLiang-long
(CollegeofScience, GuizhouUniversity, Guiyang550025, China)
Abstract:TotalFlavonoidscontentindiferentpartsandinthewholeherbofthreeRanunculusplants
(R.sceleratus, R.japonicusandR.cantoniensis)wasdeterminedbySpectrophotometry.Thesesamples
wereextracted3timeswith75% ethanol, quereetinwasusedasstandardandmeasuredat510nmwave-
length.Theaveragerecoverywas101.4% andreproducibilitywas2.26%.Themethodeissimple,
quick, accurateandsensitive.
Keywords:Flavonoids;Ranunculusplants;Spectrophotometry
(上接第 157页)
4　结论
我们给出了强流脉冲电子束材料表面改性的二维温度场物理模型 ,并提出内热源项的处理方法 。采
用有限中心差分法实现温度场的数值模拟 。
根据温度场的模拟结果 ,得到了材料表层最先熔化时刻 0.58μs和熔化深度 1.9μm等 ,并分析了表面
改性区的整体分布特点。模拟过程可以通过控制电子束的能量密度 、脉宽和轰击次数来调整。
参考文献:
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Numericalsimulationofmaterialssurfacemodificationbyhigh
currentpulsedelectronbeam(HCPEB)
LIUXiao-na1 , WANGXiao-gang2
(1.DepartmentofPhysics, GuizhouUniversity, Guiyang, Guizhou550025, China;2.StateKeyLaboratoryof
MaterialsModificationbyLaser, IonandElectronBeams, DalianUniversityofTechnology, Dalian, Liaoning116024, China)
Abstract:BasedonpureAluminum, theaxisymmetricphysicalmodeloftemperaturefieldisestablished
andwemakeuseofcenter-spacecenter-timenumericalmethodtosimulatetwo-dimensionaltemperature
fieldandgaincorelativedistributingofit.Accordingtothenumericalresults, theyshowthemeltedlayer
thicknessandthefirstmeltedtime, etc.
Keywords:HCPEB;temperaturefield;physicalmodel;numericalsimulation
·197·第 2期 董南 等:几种毛茛属植物中总黄酮的含量测定