全 文 ：收稿日期:2015 － 01 － 16
作者简介:刘婷(1990 －) ，女(汉族) ，辽宁瓦房店人，硕士研究生，E －mail liuting9006 @ 163． com;* 通讯作者:于治
国(1958 －) ，男(汉族) ，山东莱西人，教授，博士生导师，主要从事药物及其制剂质量控制、中药复方药效物质基础
与药物动力学的研究，Tel． 024 － 23986295，E －mail zhiguo － yu@ 163． com。
文章编号:1006 － 2858(2016)01 － 0034 － 08 DOI:10． 14066 / j． cnki． cn21 － 1349 /r． 2016． 01． 006
UPLC －MS /MS法同时测定火炬树茎枝中
没食子酸等 7 种化学成分的含量
刘 婷，李兆琴，赵云丽，于治国*
(沈阳药科大学 药学院，辽宁 沈阳 110016)
摘要:目的 建立同时测定火炬树茎枝中没食子酸、1 － O －没食子酰基 － β － D －葡萄糖、没食子酸
甲酯、黄颜木素、芦丁、槲皮素和 1，2，3，4，6 －五 － O －没食子酰基 － β － D －葡萄糖含量的 UPLC －
MS /MS方法。方法 采用色谱柱为 Thermo Hypersil GOLD C18(50 mm ×2． 1 mm，1． 9 μm)柱，流动相
为乙腈(A)－体积分数 0． 2%甲酸水溶液(B) ，梯度洗脱，流速为 0． 2 mL·min －1，柱温为 30 ℃，选
择离子反应监测(SIR)和多反应监测模式(MRM)用于定量测定。结果 没食子酸、1 － O －没食子
酰基 － β － D －葡萄糖、没食子酸甲酯、黄颜木素、芦丁、槲皮素和 1，2，3，4，6 －五 － O －没食子酰基
－ β － D －葡萄糖的分别在质量浓度 0． 078 ～ 2． 50、0． 135 ～ 4． 32、0． 126 ～ 4． 03、0． 013 ～ 0． 42、0． 013
～ 0． 42、0． 003 ～ 0． 10 和 0． 995 ～ 31． 84 mg·L －1内线性关系良好。7 种成分的平均加样回收率为
98． 6% ～ 102． 6%(RSD ＜ 3%，n = 6)。结论 该方法可为火炬树茎枝的质量控制提供参考依据。
关键词:火炬树;超高效液相色谱 －串联质谱;含量测定
中图分类号:R 917 文献标志码:A
火炬树(Rhus typhina L．)为漆树科盐肤木属
落叶小乔木，原产于北美，20 世纪 70 年代被引进
亚洲。现在中国广泛种植火炬树。火炬树无毒，
其果穗亦被称为“无毒漆果”［1 － 2］，作为药用和食
用，火炬树树叶、树根及树皮均可入药［3 － 4］。火炬
树树叶提取液具有抗氧化作用［5］，对 DPPH 自由
基具有很强的清除作用［6］，对大肠杆菌、黄色葡
萄球菌、绿脓杆菌、木霉和黑曲霉具有明显的抑制
作用［7］。本课题组对火炬树的成分进行系统研
究，从甲醇提取物中分离并鉴定了 4 种没食子酸
及其酯与葡萄糖苷衍生物、3 种黄酮类化合物、色
氨酸和东莨菪苷等 9 种单体化合物。经 DPPH自
由基清除试验(DPPH 法) ，亚铁还原能力试验
(FRAP法) ，β －胡萝卜素亚油酸法(β － carotene
linoleic acid model system)3 种方法试验，火炬树
中总多酚含量(由 Folin － Ciocalteu 比色法测定)
与抗氧化活性具有良好的相关性(相关性系数为
0． 880 ～ 0． 920)。上述化合物中没食子酸类与黄
酮类化合物为多酚类成分，为火炬树的主要抗氧
化活性成分。关于火炬树的成分研究与分析，柳
吉春等［3］测定了火炬树果实中柠檬酸和花青素
的含量但未标明测定方法;于晓光等［4］采用EDTA
络合滴定方法测定了火炬树中单宁的含量。本文
作者采用 UPLC － MS /MS法建立了同时测定火炬
树茎枝中没食子酸、1 － O －没食子酰基 － β － D －
葡萄糖、没食子酸甲酯、黄颜木素、芦丁、槲皮素和
1，2，3，4，6 －五 － O －没食子酰基 － β － D －葡萄
糖共 7 种成分含量的方法，测定的 7 种多酚类化
合物的总含量及加权总含量与样品的抗氧化活性
均呈显著的正相关，提示 7 种多酚类成分为火炬
树茎枝的抗氧化活性的主要药效物质基础，为火
炬树茎枝的质量控制和进一步开发提供依据。7
种成分的化学结构式见图 1。
1 仪器与材料
Waters I － Class UPLC 超高效液相色谱仪、
Waters Xevo TQ － S 质谱仪、Waters UNIFI 工作站
(美国 Waters公司) ，BS110S电子天平(北京赛多
利斯仪器系统有限公司) ，AB135 － S 十万分之一
天平(瑞士 Mettler － Toledo 仪器有限公司) ，
KQ250 E超声波清洗仪(昆山超声仪器有限公
司)。
第 33卷 第 1期
2 0 1 6 年 1 月
沈 阳 药 科 大 学 学 报
Journal of Shenyang Pharmaceutical University
Vol． 33 No． 1
Jan． 2016 p． 34
Fig． 1 Chemical structures of gallic acid(1)，1 －O － galloyl － β －D － glucose(2)，methyl gallate(3)，fustin(4)，1，2，3，
4，6 － penta －O － galloyl － β －D － glucose(5)，rutin(6)and quercetin(7)
图 1 没食子酸(1)，1 －O －没食子酰基 － β －D －葡萄糖(2)，没食子酸甲酯(3)，黄颜木素(4)，1 2，3，4，6 －五 － O －没
食子酰基 － β －D －葡萄糖(5)，芦丁(6)和槲皮素(7)的化学结构式
没食子酸、1 － O －没食子酰基 － β － D －葡萄
糖、没食子酸甲酯、黄颜木素、芦丁、槲皮素和 1，
2，3，4，6 －五 － O －没食子酰基 － β － D －葡萄糖
(作者自火炬树茎枝中分离纯化制得，通过
1H － NMR、13C － NMR和 LC － Q － TOF － ESI － MS
等分析并与文献［8 － 14］报道的数据对照鉴定结
构，采用 HPLC峰面积归一化法测定其质量分数
均大于 98%)。甲醇(色谱纯，天津康科德科技有
限公司) ，乙腈(色谱纯，美国 Sigma 公司) ，甲酸
(色谱纯，天津科密欧化学试剂有限公司) ，水(纯
净水，杭州娃哈哈集团有限公司)。
火炬树茎枝收集于辽宁、江苏、河南、河北、山
东地区，植物样本经沈阳药科大学贾景明教授鉴
定为火炬树(Rhus typhina L．)干燥茎枝(基原与
来源见表 1) ，样品经过自然晾干，粉碎成细粉过
0． 45 mm筛，置广口瓶中，密封，于阴凉处贮存备用。
2 方法与结果
2． 1 测定条件
2． 1． 1 色谱条件
色谱柱:Thermo Hypersil GOLD C18(50 mm ×
2． 1 mm，1． 9 μm )柱;流 动 相:乙 腈
(A)－ 体积分数0． 2%甲酸溶液(B) ，梯度洗脱程
Table 1 The herbal and origin of Rhus typhina L．
表 1 火炬树的基原与来源
Series No． Origin Collection date
1 Shengyang，Liaoning 2014 － 08
2 Dalian，Liaoning 2014 － 08
3 Anshan，Liaoning 2014 － 08
4 Jinzhou，Liaoning 2014 － 08
5 Huludao，Liaoning 2014 － 08
6 Yingkou，Liaoning 2014 － 08
7 Suqian，Jiangsu 2014 － 08
8 Baoding，Hebei 2014 － 08
9 Xuchang，Henan 2014 － 08
10 Zaozhuang，Shandong 2014 － 08
Table 2 The program of gradient elution
表 2 流动相梯度洗脱程序
t /min φmobile phase A /% φmobile phase B /%
0 10． 0 90． 0
1． 0 10． 0 90． 0
3． 0 20． 0 80． 0
4． 0 20． 0 80． 0
6． 0 60． 0 40． 0
7． 0 90． 0 10． 0
9． 0 10． 0 90． 0
53第 1 期 刘 婷等:UPLC － MS /MS 法同时测定火炬树茎枝中没食子酸等 7 种化学成分的含量
序见表 2;进样量:1 μL;进样器温度:10 ℃;柱
温:30 ℃;流速:0． 2 mL·min －1。
2． 1． 2 质谱条件
离子源:电喷雾离子源(ESI 源) ;检测方式:
负离子检测;扫描方式:选择反应检测(MRM)和
选择离子检测(SIR) ;毛细管电压:3． 0 kV;脱溶
剂气和锥孔气:氮气;脱溶剂气流量:700 L·h －1;
吹锥孔气流量:150 L·h －1;脱溶剂气温度:
350 ℃;源温度:150 ℃;碰撞气:氩气;碰撞气流
速:0． 13 mL·min －1;检测离子及其他相关参数见
表 3，二级全扫描质谱图见图 2。
Table 3 Parameters of SIR and MRM mode used for determination
表 3 选择反应检测和选择离子检测参数
Constituents
Monitoring
mode
tretention /min
m/z(precursor
ion)/u
m/z(product
ion)/u
V(cone
voltage)/eV
V(collision
voltage)/V
Gallic acid MRM 0． 91 168． 92 125． 08 58 14
1 － O － galloyl － β － D － glucose MRM 0． 70 331． 07 169． 04 29 18
Methyl gallate MRM 2． 10 183． 00 124． 03 5 20
Fustin MRM 3． 48 287． 05 268． 79 5 12
Rutin MRM 3． 73 609． 17 300． 15 16 40
Quercetin MRM 5． 82 301． 05 151． 05 5 20
1，2，3，4，6 － penta － O － galloyl － β － D －
glucose
SIR 4． 13 939． 10
2． 2 溶液的制备
2． 2． 1 对照溶液
取没食子酸、1 － O －没食子酰基 － β － D －
葡萄糖、没食子酸甲酯、黄颜木素、芦丁和槲皮
素、1，2，3，4，6 －五 － O －没食子酰基 － β － D －
葡萄糖适量，精密称定，以甲醇溶解并定量稀释
成质量浓度分别为 387． 5、675． 0、629． 7、64． 1、
62． 5、15． 60 和4 975 mg·L － 1的对照储备溶液;
精密量取上述7 种储备液各 1． 0 mL，置同一 100
mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，制成质量
浓度分别为 3． 88、6． 75、6． 30、0． 64、0． 63、0． 156
和49． 75 mg·L － 1的混合对照储备溶液。于 4 ℃
冰箱保存，备用。精密吸取混合对照储备液
5． 0 mL，置 50 mL 量瓶中，用甲醇稀释至刻度，
摇匀，制成质量浓度分别为 0． 388、0． 675、0．
630、0． 064、0． 063、0． 015 6和 4． 975 mg·L － 1的
混合对照溶液。
2． 2． 2 供试溶液
取火炬树茎枝粉末样品 0． 2 g，精密称定，准
确加入体积分数 70%甲醇溶液 20 mL，称定质量，
于30 ℃超声处理(40 kHz，250 W)30 min，放冷，
再次称定质量。用体积分数 70%甲醇溶液补足
减失的质量，滤过。精密量取续滤液 5 mL，置于
50 mL量瓶中，用体积分数 70%甲醇溶液稀释至
刻度，摇匀，滤液经0． 22 μm微孔滤膜滤过，即得
供试溶液。
2． 3 分析方法确证
2． 3． 1 专属性试验
取火炬树茎枝样品适量，精密称定。按“2．
2． 2”条方法制备供试溶液，在“2． 1”条测定条件
进样分析，获得供试溶液色谱图(图 3B) ;取混合
对照溶液，进样分析，获得相应的混合对照溶液色
谱图(图 3A) ，比较供试溶液色谱图与混合对照溶
液色谱图，结果表明供试溶液色谱中其他色谱峰不
干扰没食子酸、1 － O －没食子酰基 － β － D －葡萄
糖、没食子酸甲酯、黄颜木素、芦丁、槲皮素和 1，2，3，
4，6 －五 －O －没食子酰基 － β －D －葡萄糖的测定。
2． 3． 2 标准曲线绘制与线性范围考察
精密量取混合对照储备溶液 0． 5、1． 0、2． 0、4．
0、8． 0 和 16 mL，分置 25 mL 量瓶中，加体积分数
70%甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，即得系列标准溶
液。分别取不同质量浓度的标准溶液进样分析，以
各待测物峰面积(A)为纵坐标，质量浓度(ρ，mg·
L －1)为横坐标，用加权最小二乘法进行线性回归，
得 7个成分的回归方程。结果表明没食子酸、1 －O
－没食子酰基 － β －D－葡萄糖、没食子酸甲酯、黄
颜木素、芦丁、槲皮素和 1，2，3，4，6 －五 － O －没食
子酰基 － β － D －葡萄糖在 32 倍质量浓度范围内
线性关系良好，所得回归方程参数见表 4。
2． 3． 3 精密度试验
取混合对照溶液，在“2． 1”条件下测定，连续进
样 6次，计算没食子酸、1 －O －没食子酰基 － β －D －
63 沈 阳 药 科 大 学 学 报 第 33 卷
葡萄糖、没食子酸甲酯、黄颜木素、芦丁、槲皮素和 1，
2，3，4，6 －五 －O －没食子酰基 － β －D －葡萄糖峰面
积的 RSD分别为 1． 1%、0． 9%、1． 2%、1． 5%、2． 8%、
3． 1%和 3． 7%，表明色谱系统重复性良好。
Fig． 2 Product ion spectrum of gallic acid(A)，1 －O － galloyl － β －D － glucose(B)，methyl gallate(C)，fustin(D)，ru-
tin(E)and quercetin(F)acquired on negative ion mode
图 2 负离子模式下没食子酸(A)，1 － O －没食子酰基 － β － D －葡萄糖(B)，没食子酸甲酯(C)，黄颜木素(D)，芦丁
(E)和槲皮素(F)的产物离子质谱图
取同一火炬树茎枝样品(河北保定) ，按“2．
2． 2”条方法平行制备供试溶液 6 份，在“2． 1”条
件下测定，用峰面积按外标法计算没食子酸、1 －
O －没食子酰基 － β － D －葡萄糖、没食子酸甲酯、
黄颜木素、芦丁、槲皮素和 1，2，3，4，6 －五 － O －
没食子酰基 － β － D －葡萄糖含量的 RSD 分别为
1． 3%、1． 5%、1． 4%、1． 6%、2． 1 %、2． 0 %和 3． 7
%，表明方法重复性良好。
2． 3． 4 溶液稳定性试验
取“2． 3． 3”条新制备的供试溶液，室温放置，
分别于 0、1、2、4、8 和 24 h 在“2． 1”条件下测定，
没食子酸、1 － O －没食子酰基 － β － D －葡萄糖、
没食子酸甲酯、黄颜木素、芦丁、槲皮素和 1，2，3，
4，6 －五 － O －没食子酰基 － β － D －葡萄糖峰面积
的 RSD分别为 1． 5%、1． 5%、2． 2%、1． 8%、2． 2%、2．
9%和 3． 9%，表明供试溶液室温放置 24 h内稳定。
2． 3． 5 回收率试验
精密量取上述 7 种待测物储备溶液各适量，
置同一 25 mL量瓶中，用体积分数 70%甲醇溶液
稀释至刻度，摇匀，制成质量浓度分别为 54． 25、
108． 0、75． 56、2． 56、2． 50、1． 25 和 238． 8 mg·L －1
的没食子酸、1－ O－没食子酰基 － β－ D－葡萄糖、没
73第 1 期 刘 婷等:UPLC － MS /MS 法同时测定火炬树茎枝中没食子酸等 7 种化学成分的含量
1—1，2，3，4，6 － penta － O － galloyl － β － D － glucose;2—Galli acid;3—Methyl gallate;4—Fustin;5—Quercetin;6—1 － O －
galloyl － β － D － glucose;7—Rutin
Fig． 3 Typical chromatograms of reference solution(A)and sample(B)
图 3 对照溶液(A)和供试溶液(B)的典型色谱图
Table 4 Regression equations and linear ranges of 7 compounds in Rhus typhina L．
表 4 回归方程与线性范围
Compound Regression equation ρlinear range /(mg·L
－1) r
Gallic acid A = 8． 87 × 106ρ － 0． 87 × 104 0． 078 － 2． 50 0． 998 0
1 － O － galloyl － β － D － glucose A = 8． 79 × 106ρ + 0． 40 × 106 0． 135 － 4． 32 0． 999 0
Methyl gallate A = 2． 28 × 107ρ － 0． 32 × 106 0． 126 － 4． 03 0． 999 7
Fustin A = 3． 32 × 106ρ + 0． 69 × 102 0． 013 － 0． 42 0． 998 8
Rutin A = 5． 18 × 106ρ + 0． 38 × 104 0． 013 － 0． 42 0． 999 2
Quercetin A = 1． 63 × 107ρ + 0． 25 × 104 0． 003 － 0． 10 0． 999 1
1，2，3，4，6 －penta －O －galloyl －β －D －glucose A = 1． 57 × 106ρ + 0． 49 × 105 0． 995 － 31． 84 0． 995 8
食子酸甲酯、黄颜木素、芦丁、槲皮素和 1，2，3，4，
6 －五 － O －没食子酰基 － β － D －葡萄糖混合参
比溶液。精密称取已知含量的火炬树茎枝样品
(河北保定)6 份，每份约 0． 1 g，分别精密加入混
合参比溶液 2． 5 mL，按“2． 2． 2”条方法操作，在
“2． 1”条件下测定，按外标法以峰面积计算含量，
扣除本底值后计算回收率，结果见表 5。各待测
物的回收率结果在 98． 6% ～ 102． 6%内，且 RSD
值小于 3%，表明本方法具有良好的准确度。
83 沈 阳 药 科 大 学 学 报 第 33 卷
Table 5 The results of recovery test
表 5 加样回收率试验结果
Compound moriginal /μg madded /μg mfounded /μg Recovery /% 珋x /% RSD /%
Gallic acid 144． 7 135． 6 276． 5 97． 2 98． 8 2． 4
144． 3 135． 6 276． 2 97． 3
143． 3 135． 6 280． 8 101． 4
144． 3 135． 6 276． 6 97． 6
143． 7 135． 6 274． 9 96． 8
143． 4 135． 6 282． 1 102． 3
1 － O － galloyl － β － D － glucose 286． 4 270． 0 551． 0 98． 0 98． 9 1． 0
285． 6 270． 0 553． 4 99． 2
283． 6 270． 0 550． 1 98． 7
285． 6 270． 0 557． 2 100． 6
284． 4 270． 0 551． 2 98． 8
283． 9 270． 0 549． 3 98． 3
Methyl gallate 194． 0 188． 9 378． 9 97． 9 98． 6 1． 4
193． 4 188． 9 379． 1 98． 3
192． 0 188． 9 382． 6 100． 9
193． 4 188． 9 376． 8 97． 1
192． 6 188． 9 380． 6 99． 5
192． 2 188． 9 377． 1 97． 9
Fustin 7． 236 6． 400 13． 74 101． 6 100． 7 1． 2
7． 214 6． 400 13． 67 100． 9
7． 164 6． 400 13． 54 99． 6
7． 214 6． 400 13． 53 98． 7
7． 186 6． 400 13． 70 101． 8
7． 171 6． 400 13． 66 101． 4
Rutin 7． 035 6． 250 13． 19 98． 5 102． 0 2． 0
7． 014 6． 250 13． 38 101． 9
6． 965 6． 250 13． 45 103． 8
7． 014 6． 250 13． 30 100． 6
6． 986 6． 250 13． 46 103． 6
6． 972 6． 250 13． 43 103． 3
Quercetin 2． 784 3． 125 5． 972 102． 0 102． 6 1． 4
2． 776 3． 125 5． 976 102． 4
2． 756 3． 125 5． 975 103． 0
2． 776 3． 125 5． 907 100． 2
2． 764 3． 125 6． 014 104． 0
2． 759 3． 125 6． 015 104． 2
1，2，3，4，6 －penta －O －galloyl －β －D －glucose 596． 0 597． 0 1 170 96． 1 101． 1 3． 0
594． 2 597． 0 1 214 103． 8
590． 0 597． 0 1 205 103． 0
594． 2 597． 0 1 204 102． 1
591． 8 597． 0 1 182 98． 9
590． 6 597． 0 1 203 102． 6
2． 4 样品含量测定
取不同产地的火炬树茎枝样品，按“2． 2． 2”
条方法制备供试溶液，在“2． 1”条件下测定，用峰
面积按外标法计算各成分的含量，结果见表 6。
93第 1 期 刘 婷等:UPLC － MS /MS 法同时测定火炬树茎枝中没食子酸等 7 种化学成分的含量
Table 6 The results of content determination
表 6 样品含量测定结果
Sample
source
w /%
Gallic acid
1 － O － galloyl －
β － D － glucose
Methyl
gallate
Fustin Rutin Quercetin
1，2，3，4，6 － penta －
O － galloyl － β － D －
glucose
wT /%
wWT /%
wDPPH wFRAP wβ － CLA
1 0． 131 0． 328 0． 407 0． 013 4 0． 014 4 0． 000 74 0． 853 1． 748 1． 853 2． 031 1． 093
2 0． 157 0． 330 0． 300 0． 014 2 0． 009 2 0． 001 10 1． 013 1． 825 1． 916 2． 059 1． 221
3 0． 111 0． 232 0． 150 0． 018 7 0． 007 3 0． 001 98 0． 381 0． 902 0． 942 1． 030 0． 509
4 0． 118 0． 319 0． 206 0． 010 0 0． 006 7 0． 002 76 0． 508 1． 170 1． 207 1． 331 0． 683
5 0． 135 0． 219 0． 147 0． 013 0 0． 011 4 0． 002 58 0． 337 0． 865 0． 928 1． 005 0． 459
6 0． 071 0． 257 0． 123 0． 019 6 0． 013 6 0． 004 33 0． 334 0． 823 0． 810 0． 910 0． 463
7 0． 059 0． 144 0． 244 0． 019 1 0． 013 1 0． 001 23 0． 533 1． 013 1． 074 1． 175 0． 660
8 0． 144 0． 285 0． 193 0． 007 2 0． 007 0 0． 002 77 0． 593 1． 232 1． 298 1． 401 0． 752
9 0． 068 0． 175 0． 059 0． 045 9 0． 009 4 0． 006 52 0． 266 0． 630 0． 614 0． 683 0． 350
10 0． 101 0． 279 0． 184 0． 016 8 0． 017 9 0． 001 73 0． 458 1． 058 1． 081 1． 195 0． 613
Mean 0． 110 0． 257 0． 201 0． 017 8 0． 011 0 0． 002 57 0． 528
SD 0． 034 0． 064 0． 098 0． 010 7 0． 003 7 0． 001 73 0． 239
RSD /% 31． 1 25． 0 48． 6 60． 0 33． 8 67． 5 45． 3
wT—Add the contents of seven compounds together;wWT—Add the contents of seven compounds × weighting coefficient to-
gether;wDPPH—Add the contents of seven compounds × weighting coefficient determined by DPPH assay together;wFRAP—Add the
contents of seven compounds × weighting coefficient determined by FRAP assay together;wβ － CLA—Add the contents of seven com-
pounds × weighting coefficient determined by β － carotene linoleic acid model system together
并计算各成分的加权总含量(相当于 1，2，3，4，6
－五 － O －没食子酰基 － β － D －葡萄糖的抗氧化
活性)与抗氧化活性测定结果(采用经修改后的
文献［1，15］方法测定)的相关性，结果见表 7。
Table 7 Correlation coefficient between the total content
of seven compounds，the weighted total phenolic contents
and the different antioxidant activity
表 7 7 种多酚类化合物的总含量及加权总含量与不同
抗氧化活性试验结果的相关系数
w
r
DPPH radical FRAP value
β － Carotene linoleic
acid model system
wT 0． 819a 0． 821a 0． 786a
wDPPH 0． 835a
wFRAP 0． 836a
wβ － CAL 0． 813a
a—P ＜ 0． 01，significance level
3 讨论
a．质谱条件的优化。没食子酸、1 －O －没食子
酰基 － β －D －葡萄糖、没食子酸甲酯、黄颜木素、芦
丁、槲皮素和 1，2，3，4，6 －五 －O －没食子酰基 － β －
D －葡萄糖在 ESI离子源负离子检测模式下有
Table 8 Relative antioxidant capacity of seven com-
pounds
表 8 7 种化合物的相对抗氧化活性
Compound
DPPH
radical
FRAP
value
β － Carotene linoleic
acid model system
Gallic acid 1． 78 1． 54 0． 00
1 － O － galloyl － β － D －
glucose
0． 64 0． 92 0． 34
Methyl gallate 1． 33 1． 60 0． 31
Fustin 0． 58 0． 87 0． 09
Rutin 0． 50 0． 74 0． 00
Quercetin 0． 88 1． 44 0． 22
1，2，3，4，6 －penta －O －
galloyl －β －D －glucose
1． 00 1． 00 1． 00
较好的响应，主要生成［M － H］－准分子离子峰，
分别为 m/z 168． 92、331． 07、183． 0、287． 05、609．
17、301． 05 和 939． 10，而以上 7 个成分在正离子
检测模式下生成的［M + H］+、［M + Na］+响应均
较差，故作者选择负离子检测模式下生成的［M －
H］－为检测离子。离子在 SIR模式下的绝对响应
值高于 MRM模式，但是由于 MRM模式具有更高
的信噪比(S /N) ，因此其检测灵敏度通常高于
SIR模式。但是当溶剂背景干扰不显著或子离子
04 沈 阳 药 科 大 学 学 报 第 33 卷
不稳定时，SIR模式灵敏度会高于 MRM模式。作
者考察了 1，2，3，4，6 －五 － O －没食子酰基 － β －
D －葡萄糖在 SIR和 MRM模式下的检测灵敏度，
结果发现，在定量下限浓度处 SIR模式要比 MRM
模式有更高的信噪比。推测可能是在该分析条件
下系统的背景噪音对 1，2，3，4，6 －五 － O －没食
子酰基 － β － D －葡萄糖检测灵敏度影响不显著，
或在该系统条件下 1，2，3，4，6 －五 － O －没食子
酰基 － β － D － 葡萄糖的子离子不稳定，使其在
MRM模式的检测灵敏度降低。因此本实验作者
采用 SIR模式检测 1，2，3，4，6 －五 － O －没食子
酰基 － β － D －葡萄糖。
b．色谱条件的优化。作者考察了甲醇 －体积
分数 0． 1%甲酸水溶液，甲醇 －体积分数 0． 2%甲
酸水溶液，乙腈 －体积分数 0． 1%甲酸水溶液，乙
腈 － 体 积 分 数 0． 2% 甲 酸 水 溶 液，乙
腈 － 10 mmol·L －1 醋 酸 铵 水 溶 液， 乙
腈 － 10 mmol·L －1甲酸铵水溶液流动相系统，结果
发现，相对于甲醇 －水系统，使用乙腈 －水系统
时，组分响应较好，各组分都能得到较好的分离，
采用乙腈 － 0． 2%甲酸水溶液作为流动相时，各组
分响应比采用乙腈 － 0． 1% 甲酸水溶液及乙
腈 － 10 mmol·L －1醋酸铵水溶液好。因此选取乙
腈 － 0． 2%甲酸水溶液作为流动相。
c．由含量测定结果(表 6)可知:作者测定的
7 种多酚类化合物的含量差异极大，其中 1，2，3，
4，6 －五 － O －没食子酰基 － β － D －葡萄糖含量
最高，平均质量分数为(0． 528 ± 0． 239)%;槲皮
素含量最低，平均质量分数为(2． 57 ± 1． 73)×
10 －5，二者相差 200 余倍;各种成分的含量波动亦
较大，RSD为 25． 0% ～ 67． 5%。分别以 10 批样
品中7 种成分总含量及以各化合物的相对抗氧化
活性为权重系数(以 1，2，3，4，6 －五 － O －没食子
酰基 － β － D －葡萄糖为基准，计算各化合物的相
对抗氧化活性，数据见表 8)的加权总含量(即各
组分含量分别乘以各自的权重系数后加和)与样
品的抗氧化活性进行相关分析，结果显示，作者测
定的 7 种多酚类化合物的总含量及加权总含量与
样品的抗氧化活性均呈显著的正相关(数据见表
7) ，提示7 种多酚类成分为火炬树茎枝的抗氧化
活性的主要药效物质基础。
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(下转至第 45 页)
14第 1 期 刘 婷等:UPLC － MS /MS 法同时测定火炬树茎枝中没食子酸等 7 种化学成分的含量
Determination of heavy metals in Euphorbia
pekinensis Rupr． by graphite furnace atomic
absorption spectrometry
WU Ai － hua1，2，ZHANG Lan － zhen2，ZHANG Gui － zhen3，CHEN Shi － ling1*
(1． Center for Reproductive Medicine，Department of Gynecology and Obstetrics，Nanfang Hospital，
Southern Medical Universiry，Guangzhou 510515，China;2． Institute of Gynecology and Obstetrics，Second
Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University，Guangzhou 510260，China;3． Institute of Traditional
Chinese Medicine，Second Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University，Guangzhou 510260，China)
Abstract:Objective To determine the content of heavy metals such as Pb，Cu，Cd，Cr，Ag and Co presented
in Euphorbia pekinensis Rupr． Methods Wet digestion was adopted to treat E． pekinensis samples and the
content of Pb，Cu，Cd，Cr，Ag and Co in E． pekinensis was measured by using graphite furnace atomic
absorption spectrometry． Results All of the six types of heavy metals had been detected in 6 batches of E．
pekinensis． The content of Pb，Cu，Cd，Cr，Ag and Co were in the range of 1． 7 × 10 －7 － 5． 1 × 10 －7，1． 1 ×
10 －5 － 1． 4 × 10 －5，1． 2 × 10 －7 － 3． 5 × 10 －7，7． 6 × 10 －6 － 8． 5 × 10 －6，1． 5 × 10 －8 － 2． 6 × 10 －8，and 2． 0 ×
10 －7 － 4． 0 × 10 －7，respectively． Conclusions This method is suitable for the limit control for the content of
Pb，Cu，Cd，Cr，Ag and Co in E． pekinensis．
Key words: graphite furnace atomic absorption spectrometry; Euphorbia pekinensis Rupr．;
heavy metal;
wet digestion
(上接第 41 页)
Simultaneous determination of seven chemical
constituents in Rhus typhina L． stem by UPLC －MS/MS
LIU Ting，LI Zhao － qin，ZHAO Yun － li，YU Zhi － guo*
(School of Pharmacy，Shenyang Pharmaceutical University，Shenyang 110016，China)
Abstract:Objective To develop an UPLC － MS /MS method for simultaneous determination of gallic acid，
1 －O － galloyl － β －D － glucose，methyl gallate，fustin，rutin，quercetin and 1，2，3，4，6 － penta －O － galloyl －
β －D － glucose in Rhus typhina L． stem．Methods Separation was achieved on a Thermo Hypersil GOLD C18
column(50 mm ×2． 1 mm，1． 9 μm)with a gradient of acetonotrile and 0． 2% formic acid aqueous solution at
a flow rate of 0． 20 mL·min －1 ． Quantitation was carried out in selected ion recording mode and multiple
reaction monitoring(MRM)mode，and the column temperature was 30 ℃． Results A calibration curve for gal-
lic acid，1 －O － galloyl － β －D － glucose，methyl gallate，fustin，rutin，quercetin and 1，2，3，4，6 － penta － O －
galloyl － β －D － glucose，over the range 0． 078 － 2． 50，0． 135 － 4． 32，0． 126 － 4． 03，0． 013 － 0． 42，0． 013 － 0．
42，0． 003 －0． 10 and 0． 995 －31． 84 mg·L －1 was established，respectively． The average recoveries of the seven
compounds varied from 98． 6% －102． 6% with the relative standard deviation ＜3% ． Conclusions The method
is accurate and reliable，and can be used for the quality control of Rhus typhina L． stem．
Key words:Rhus typhina L．;UPLC － MS /MS;content determination
54第 1 期 吴爱华等:石墨炉原子吸收光谱法测定京大戟中重金属的含量