全 文 ：黄花石蒜!!#$%&’ ()%*( !#$#又称忽地笑#系石蒜科
石蒜属多年生草本植物$ 其鳞茎内含有石蒜碱%伪石蒜碱%加
兰他敏等多种生物碱成分$ 加兰他敏!%&’&()*&+,(是治疗
重症肌无力%小儿麻痹后遗症和老年性痴呆症的特效药 -./#是
目前国际上紧俏药物之一$ 它的植物来源主要是石蒜类植
物$ 然而石蒜类植物为自然分球繁殖植物#繁殖系数低#无法
满足市场需要$ 利用植物组织培养技术#对石蒜类植物进行
离体快速繁殖#可以有效地提高其繁殖系数$ 目前国内对石
蒜!01#&2,&)&的组织培养进行了一些研究 -3456#但关于黄花石
蒜的组织培养还未见报道$
. 材料与方法
.1. 材料
供试材料采自湖南衡山# 经彭菲教授鉴定为黄花石蒜
!+,$%&’ ()%*( 7#8$ 将其置于 5 9的生化培养箱中保存$
.13 方法
.131. 外植体的获取 将黄花石蒜的鳞茎洗净#剥去外层鳞
片#切除根部#切去鳞茎上半部分约 . : 3;3 : <$ 将剩余的带鳞
茎盘的鳞茎置于 =>?酒精中浸泡 5>;@> A#无菌水洗净#再用
>1.@?的升汞灭菌 .3 +,(#无菌水清洗 <;5 遍#将小鳞茎切留
距鳞茎底部 .1>;.1@ B+ 的高度#之后将鳞茎切成带有鳞茎盘
的双鳞片#竖插接种于培养基中$
.1313 培养条件 分暗培养和光照培养两组$ 培养温度均为
!3>C.9#光培养的光照强度为 . 3>>;. @>> ’D#光照时间
为 .3 *&24.$
.131< 培养基 小鳞茎诱导培养基’!号培养基为 EFGHI 5
+J&04.(号培养基为 EFGHI K +J&L4.GMII >1@ +J&04.(#
号培养基为 EFGHI .> +J&04.GMII >1@ +J&04.$ 增殖培养
基’EFGHI @ +J&04.GMII >1@ +J&04.$生根培养基’$号培养
!摘要 目的 探讨黄花石蒜的最佳组织培养条件! 方法 以黄花石蒜的鳞茎为外植体接种于不同激
素组合的培养基上开展组织培养研究! 结果 #.$EFGHI.> +J%04.GMII >1@ +J&04.培养基对小鳞茎的
诱导有明显的促进作用 诱导率为 KN1=?’(3$EFGOHI 3 +J%04.为诱导小鳞茎生根的最佳培养基’(<$暗
培养效果整体优于光培养) 结论 通过组织培养方法快速繁殖黄花石蒜是可行的)
!关键词 黄花石蒜’鳞茎’离体繁殖
!中图分类号P3N313 !文献标识码I !文章编号.>>>4@K<<#3>>K$>.4>>3=4>3
!#$% &’ ()**#+ ,#-#.+ &/
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*P+% Q&.M*+ !,$%&’ ()%*( 7#8g 8S’8g _#U_UJ&),U( &- .&/%$
黄花石蒜的组织培养研究
肖 艳彭 菲王 清刘 军
!湖南中医学院药学院#湖南 长沙 5.>>>5
!收稿日期3>>@4>j4>=
!作者简介肖 艳!.jN.4#女#湖南人#硕士#主要从事生物技术在药用植物研究中的应用研究$
3>>K 年 3 月第 3K 卷第 . 期
R813>>K kU’13K eU1.
湖 南 中 医 学 院 学 报
G&#.’3- &/ ROK F’)JS &/ T#’3’ !
基为 !#$%& ’() *+!,-. !号培养基为 !/01& . *+!,-.
号培养基为 !/01& 2 *+!,-.#
2 结果
234 小鳞茎的诱导
将带有鳞茎盘的双鳞片接种于#$ $$ %号培养基中%4
周后%双鳞片开始张开# 5’ 6 后%鳞片叶变得肥厚%鳞片叶夹
角处基部凸起膨大# 7’89’ 6后%在两鳞叶夹角处%或在鳞叶近
基部的背面陆续有米粒般大小的白色小鳞茎长出来% 观察统
计小鳞茎的诱导情况见表 .# %号培养基的诱导率为 :;3<=%
明显高于&$$号培养基%且%号培养基诱导出来的小鳞茎长
势较好%直径可达 ’3) >*%高 . >*%呈圆筒状&见图 .’#
232 小鳞茎的增殖培养
将诱导出来的小鳞茎自上向下纵切成 2等份% 转入 !/
1& ) *+!,-./?&& ’3) *+!,-.的增殖培养基中# 培养 2’ 6
后%体积明显增大&见图 2’# 再将增殖了的鳞茎切成 2 等份%
接入新的增殖培养基中增殖%如此循环操作达到增殖的目的#
在光培养条件下%培养 7’ 6 后%鳞茎由原本的白色转为
绿色%抽叶现象严重%鳞茎细长高瘦%而在暗培养条件下%鳞
茎一直保持原来的白色%肥胖矮小%不抽叶%便于作种苗或快
繁材料#
237 生根培养
将鳞茎从基部切下%插入生根培养基中%在暗培养的条
件下%培养 2周后%均能长出根来# ’号培养基上所生的根粗
细不均%根的向地性差!号培养基上根长得肉质粗大%向地
性较好号培养基上根长得较强壮%质地较好%且根的向地
性好&见图 7’#
在光照培养的条件下%7 组培养基上的鳞茎一直未见生
根现象# 可见鳞茎的生根需暗培养#
7 讨论
外植体的取材部位直接影响小鳞茎的诱导# 材料按如前
所述的方法灭菌和培养%结果靠近中心的鳞叶小鳞茎诱导率
较外层鳞叶要高%但正中心的鳞叶小鳞茎诱导率较低# 其原
因可能是(靠近中心的鳞叶比外层鳞叶幼嫩%分生能力较强%
而正中心的鳞叶因为太幼嫩%耐受灭菌能力相对较差#
黄花石蒜在 9 @条件下贮放的时间越长%切割鳞茎时流
出来的黏液就越少%材料培养时%褐化程度有所减轻%这跟何
树兰A2B2.等所报道的现象相同#
我们曾在培养基中加入 ’32= CDC &聚乙烯吡咯烷酮 E-
7’’%褐化现象与对照没有明显的差别# 在今后的实验中%可
考虑增加 CDC 的用量% 或在培养基中加入活性炭等物质%来
缓解石蒜的褐化现象#
黄花石蒜的染菌现象也较严重%经观察分析%该菌可能
为内生菌# 在今后的实验中%可考虑将该菌分离出来%探讨其
产生加兰他敏的可能性#
参考文献!
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济林研究%5’’7%54&9’(H<-HH3
A5F 何树兰%束晓春%姚青菊%等3石蒜的组织培养AGF3江苏林业科技%
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科技%5’’5%55&9’(9)-9;3
A9F 张露%王光萍%曹福亮3石蒜类植物无性繁殖技术AGF3南京林业大学
学报%5’’5%5:&9’(4-)3
表 4 不同培养基配方对小鳞茎的影响
培养
基配方
&
$
%
接种的双
鳞片数
7’
5;
75
诱导出小鳞茎
的双鳞片数
4’
45
55
小鳞茎诱导情况&=’
小鳞茎诱导率为 7737%
小鳞茎较瘦弱
小鳞茎诱导率为 953;%
小鳞茎长势一般
小鳞茎诱导率为 :;3<%
小鳞茎较壮实%长势较好
图 7 鳞茎的生根培养
图 4 小鳞茎的诱导
图 5 鳞茎的繁殖
湖南中医学院学报 5’’: 年第 5: 卷!