全 文 ：北方园艺 2010(4):167 ～ 169 ·植物保护 ·
微量点滴法测定植物提取物对绣线菊蚜的触杀作用
和玉 华1 , 杨 婧1 , 谢雯颖1 , 和润 喜2
(1.西南林学院 保护生物学学院 ,云南昆明 650224;2.西南林学院 资源学院 ,云南昆明 650224)
摘 要:采用浸提法 ,用95%的乙醇为溶剂 ,提取得到竹柏 、小花八角 、单瓣狗牙花 、灯台树 、
辣蓼等 5种植物材料的提取物。将植物提取物稀释成1 、5 、10倍3个不同的浓度梯度 ,用微量点
滴法在室内对绣线菊蚜进行触杀作用的测定。结果表明:触杀效果由高至低为:辣蓼>竹柏>灯
台树>单瓣狗牙花>小花八角。
关键词:植物提取物;绣线菊蚜;微量点滴法;触杀作用
中图分类号:S 436.8 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2010)04-0167-03
绣线菊蚜(Aphis citricola)属同翅目(Homoptera),
蚜总科(Aphidoidea),是绣线菊 、木瓜 、李 、杏等园林植物
及果树的主要害虫[ 1] 。云南植物资源丰富 ,该试验选取
5种云南南部地区自然分布或人工种植比较广泛的植
物 ,研究这5种植物提取物对绣线菊蚜的杀虫活性 ,为
该害虫的无公害防治及植物资源的开发利用提供依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
第一作者简介:和玉华(1975-), 女, 云南丽江人 ,硕士 ,讲师 ,现主
要从事昆虫学及化学生态学的教学与研究工作。 E-mail:heyu-
hua3@126.com。
基金项目:云南省森林保护学重点学科建设经费资助项目
(500971)。
收稿日期:2009-11-20
1.1.1 提取物的制备 供试植物材料及部位见表 1。
将植物材料带回实验室 ,用清水洗净晾干后 ,放入烘箱
中在 50 ～ 60℃条件下烘干 6 ～ 8 h ,用粉碎机粉碎 ,过 40
目筛。用电子天平称取一定量的植物粉末 ,将其分别放
入广口标本瓶中 ,加入约 3～ 4倍的95%的乙醇浸泡 ,期
间换取 3次乙醇 ,第 1次隔3 d换取 1次乙醇 ,第 2次隔
2 d、第 3次隔 1 d换取 1次乙醇。收集 3次浸出液 ,过
滤 ,45℃下用旋转蒸发仪充分回收乙醇 ,至植物提取液
呈膏状为止。将已经回收过乙醇的植物提取液冷却后
倒入分液漏斗中 ,加入石油醚 ,将其充分混合放置0.5 h ,
萃取植物提取液中的叶绿素 ,25℃下用旋转蒸发仪回收
萃取液中的石油醚。最后将膏状植物提取物装入褐色
的试剂瓶中 ,于 4℃冰箱内保存备用[ 2] 。
1.1.2 供试昆虫 绣线菊蚜采自昆明市昙华寺贴梗海
棠(Chaenomeles lagenaria)和海桐(Pittosporum tobira)
上 ,经人工饲养若干代后待用。
Effects of Nutritional Factors and Culture Conditions on the Growth and
Sporulation of Pilidiumconcavum
DUAN Ya-bing , YU Zhen-zhen , CHEN Yan-li , KANG Ye-bin
(Colleg e of Forestry ,Henan University of Science and Technology , Luoyang , Henan 471003)
Abstract:In order to explore the effects of carbon , nitrogen , temperature , pH and light on the g rowth and sporulation of
Pilidium concavum(Desm.)Hohn.Measured the mycelial g rowth with criss-cross and the sporulation by blood counting
chamber.The results showed that the optimum grown w as PDA , the optimum sporulation w as PYA.The optimum
grown temperature was 25℃, the optimum temperature for sporulation w as 30℃.The optimum grow th pH was 6 , spor-
ulation was a maximum of pH 11.Light had no significant effect on mycelial growth and sporulation.Glucose and yeast
were the most suitable carbon and nitrogen sources for the growth of mycelia and sporulation.
Keywords:Pilidium concavum;nutritional factors;culture conditions;
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·植物保护· 北方园艺 2010(4):167～ 169
表 1 供试植物名称及供试部位
供试植物 科 、属名 供试部位 来源
竹柏 Podocarpus
nagi
罗汉松科 Podocarpaceae竹柏属
Nageia
茎 、叶 西双版纳普文镇
小花八角 Lllici-
um micranthum
八角科 Llliciaceae八角属 Lllici-
um
茎 、叶 西双版纳普文镇
单瓣狗牙花 Er-
vatamia divaricata
夹竹桃科 Apocynaceae狗牙花属
Ervatamia
茎 、叶 西双版纳普文镇
灯 台 树 Cornus
controversa
山茱萸科 Co rnaceae灯台树属
Echitamine
茎 、叶 西双版纳普文镇
辣蓼 Polygonum
hydropiper
蓼科 Polygonaceae 蓼属 Polygo-
num
茎 、叶 西双版纳普文镇
1.1.3 试剂与仪器 主要试剂:95%乙醇 、丙酮(分析
纯)、甲醇(分析纯)、石油醚(30 ～ 60℃)。主要仪器:粉碎
机、循环水式真空泵、旋转蒸发仪 、分液漏斗。
1.2 试验方法
采用微量点滴法[ 3] 。将各种植物提取液用丙酮稀
释成 1 、5 、10倍 3个浓度梯度。挑选大小基本一致 、健
康、无翅蚜 ,用毛细管将药液点滴在绣线菊蚜前胸背面 ,
每个浓度做 3次重复 ,每个重复点滴20头绣线菊蚜 ,同
时做一对照。将处理后的蚜虫放在有滤纸保湿的培养
皿(直径为12 cm)中 ,用保鲜膜封口并用针刺上多个通
气孔 ,在培养皿上贴上标签 ,于常温下培养。每 24 h观
察1次存活情况 ,记录死亡数 ,观察期间加适量蒸馏水
使滤纸湿润。蚜虫的死亡判断为以毛笔触及足和触角
时完全不动为死亡。死亡率(%)=死亡虫数/总虫数×
100 ,校正死亡率(%)=(对照虫存活率-处理虫存活
率)/对照虫存活率×100。
2 结果与分析
通过方差分析(表 2、3)表明 , F竹柏
度梯度及不同观测时间对绣线菊蚜的校正死亡率均无
显著差异。F小花八角
观测时间对绣线菊蚜的校正死亡率均无显著差异。
F单瓣狗牙花
差异。F单瓣狗牙花>F0.05 ,在时间上有显著差异 ,即不同观
测时间对绣线菊蚜的校正死亡率有显著差异 ,24 h的校
正死亡率最高为 53.48%, 48 h 的校正死亡率最低
为-7.4%。F灯台树
著差异。F灯台树>F0.01 ,时间上有极显著差异 ,即不同观
测时间对绣线菊蚜的校正死亡率有极显著差异 ,24 h的
校正死亡率最高为 56.80%,72 h 的校正死亡率最低
为-18.51%。F辣蓼
F辣蓼>F0.01 ,时间上有极显著差异 ,即不同观测时间对绣
线菊蚜的校正死亡率有极显著差异 ,24 h的校正死亡率最
高为79.53%,72 h的校正死亡率最低为-18.77%。
表 2 5种植物提取物微量点滴法校正死亡率数据分析
植物提取物 浓度 校正死亡率/ %
24 h 48 h 72 h
TA XA
竹柏Podocarpus nagi 1倍液 22.00 16.69 8.31 47.00 15.70
5倍液 27.00 37.50 -8.31 56.19 18.73
10倍液 68.50 -12.50 -10.74 45.26 15.09
TB 117.5 41.59 -10.74 T=148.45
XB 39.17 13.90 -3.58 X=16.51
小花八角Lll icium micranthum 1倍液 29.61 41.69 -24.47 46.83 15.61
5倍液 70.39 -4.19 -4.19 62.01 20.67
10倍液 -24.47 -22.20 -13.33 -60.00 -20.00
TB 75.53 15.30 -41.99 T=48.84
XB 25.18 5.10 14.00 X=5.43
单瓣狗牙花 Ervatamia divaricata 1倍液 41.69 -2.20 -1.94 37.55 12.52
5倍液 41.69 0 0 41.69 13.90
10倍液 77.06 -20.00 -9.82 47.24 15.75
TB 160.44 -22.20 -11.76 T=126.48
XB 53.48 -7.40 -3.92 X=14.05
灯台树Cornus controversa 1倍液 53.72 9.82 -17.80 45.74 15.25
5倍液 46.28 17.65 -15.53 48.40 16.13
10倍液 70.39 1.94 -22.20 50.13 16.71
TB 170.39 29.41 -55.53 T=144.27
XB 56.80 9.80 -18.51 X=16.03
辣蓼Polygonumhydropiper 1倍液 64.89 0 -10.44 54.45 18.15
5倍液 87.74 -12.50 -22.94 52.30 17.43
10倍液 85.95 -12.50 -22.94 50.51 16.84
TB 238.58 -25.0 -56.32 T=157.26
XB 79.53 -8.33 -18.77 X=17.47
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北方园艺 2010(4):167 ～ 169 ·植物保护 ·
表 3 5种植物提取物微量点滴法方差分析
植物提取物 方差来源 SS DF MS F F0.05 F0.01
竹柏Podocarpus nagi SSA 22.99 2 11.50 0.0025 6.94 18.00
SSB 2 768.50 2 1 384.25 0.30 6.94 18.00
SSe 18 228.43 4 4 557.11
小花八角 Lllicium micranthum SSA 2 947.72 2 1 473.85 1.49 6.94 18.00
SSB 2 302.30 2 1 151.15 1.16 6.94 18.00
SSe 3 957.70 4 989.43
单瓣狗牙花 Ervatamia divaricata SSA 15.76 2 7.88 0.03 6.94 18.00
SSB 7 013.24 2 3 506.62 12.60 6.94 18.00
SSe 1 112.92 4 278.23
灯台树 Cornus controversa SSA 3.26 2 1.63 0.01 6.94 18.00
SSB 8 681.11 2 4 340.56 38.16 6.94 18.00
SSe 447.99 4 112.00
辣蓼Polygonumhydropiper SSA 2.59 2 1.30 0.01 6.94 18.00
SSB 17 491.26 2 8 745.63 66.17 6.94 18.00
SSe 28.69 4 132.17
3 结果与讨论
方差分析表明 ,5种植物提取物的 3个浓度梯度对
绣线菊蚜的校正死亡率都无显著差异 ,平均校正死亡率
最高为 17.48%,说明该方法中 5种植物对绣线菊蚜的
触杀效果都不好;在时间上 ,竹柏 、小花八角的提取物对
绣线菊蚜的校正死亡率在时间上均无显著差异;单瓣狗
牙花的校正死亡率在时间上有差异 ,24 h内其校正死亡
率达 53.48%;灯台树 、辣蓼的校正死亡率在时间上均有
极显著差异 ,灯台树24 h内其校正死亡率达 56.80%,辣
蓼24 h内其校正死亡率达79.53%。
触杀效果辣蓼>竹柏>灯台树>单瓣狗牙花>小
花八角 ,辣蓼的平均校正死亡率为17.48%,小花八角的
平均校正死亡率为 5.43%。观测时间上 ,5种植物提取
物对绣线菊蚜的触杀效果在 24 h内达最高;3个浓度梯
度上 ,竹柏 、小花八角2种植物5倍液的提取物触杀效果
较 1倍 、10倍液好 ,单瓣狗牙花和灯台树2种植物10倍
液的提取物触杀效果较其它2个浓度好 ,辣蓼提取物的
1倍液触杀效果比 5倍 、10倍液好 ,其机制需进一步
研究。
参考文献
[ 1] 张广学,钟铁森.中国经济昆虫志.同翅目.蚜虫类[M] .北京:科学出
版社, 1983:230-231.
[ 2] 和玉华,孟梦.植物提取物对甘蓝蚜影响的研究[ J] .北方园艺 , 2009
(3):55-58.
[ 3] 曾宪儒.植物提取物对蔬菜害虫的生物活性筛选及其活性组分作用
机理研究[ D] .南宁:广西大学, 2005:9.
The Contact Toxicity of Plant Extracts on Aphis citricola byMicro-drip
HE Yu-hua1 , YANG Jing1 , XIE Wen-ying1 ,HE Rui-xi2
(1.College Conservation Biology of Southwest Forestry University , Kunming , Yunnan 650224;2.Resources Co llege of Southwest Forestry
University , Kunming , Yunnan 650224)
Abstract:Using 95%alcohol , the plant ex tracts of Podocarpus nagi , Llliciummicranthum , Ervatamia divaricata ,Cor-
nus controversa and Polygonum hydropiper were extracted.Every kind of extracts was diluted to three concentrations:1 ,
5 , and 10 times.The bioassays of contact toxicity were tested by micro-drip on Aphiscitricola in laboratory.The contact
toxicity of the 5 kinds of plant extracts on A.ci tricola were Polygonum hydropiper>Podocarpus nagi>Cornus contro-
versa>Ervatamia divaricata>Ll licium micranthum.
Keywords:plant extracts;Aphis citricola;micro-drip;contact toxicity
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