全 文 :越橘叶斑病的药剂筛选
杨丽娜1 , 马千里2 , 张 博3 , 王 雪1 , 高 洁1
1.吉林农业大学农学院 , 长春 130118;2.吉林省和龙市住房和城乡建设局 , 和龙 133500;
3.吉林省和龙市煤炭事业管理局 , 和龙 133500
摘 要:采用生长速率法和抑菌圈法对越橘叶斑病(Cylindrocladium sp.)进行了室内药剂筛选 , 确定金万霉灵
对越橘叶斑病抑制效果最好 ,经过田间药剂筛选确定甲基托布津对越橘叶斑病防治效果最好 , 金万霉灵的防
效次于甲基托布津。
关键词:越橘;叶斑病;杀菌剂
中图分类号:S436.63;S482.2 文献标识码:A 文章编号:1000-5684(2013)04-0463-04
网络出版地址:http://www.cnki.net/kcms/ detail/ 22.1100.S.20130705.1541.007.html
引文格式:杨丽娜 , 马千里 ,张博 , 等.越橘叶斑病的药剂筛选[ J] .吉林农业大学学报 , 2013 , 35(4):463-466.
Studies on the Toxicity of Blueberry Leaf Spot
YANG Li-na1 , MA Qian-li2 , ZHANG Bo3 , WANG Xue1 , GAO Jie1
1.College of Agronomy , J ilin Agricultural University ,Changchun 130118 , China;2.Helong Housing and
Urban-Rural Construction Bureau of Jilin Province , Helong 133500 , China;3.Helong Coal Enterprise
Management Bureau of Jilin Province , Helong 133500 , China
Abstract:Fungicides were screened for the disease with methods of inhibition zone and mycelium growth
rate indoor.The results showed that the inhibition rate of Gold wanmeiling were best to Cylindrocladium
sp..The field experiment showed that the effect of thiophanate methyl was best to Cylindrocladium sp..
The results showed that the control effect of Gold wanmeiling was lower than thiophanate methyl.
Key words:blueberry;Cylindrocladium sp.;bactericide
越橘又名蓝莓(Blueberry),属杜鹃花科越橘
属(Vaccinium)植物 ,为多年生落叶 、常绿灌木或小
灌木 ,主要分布在北美和欧洲[ 1-5] 。该属植物在全
世界有 450种[ 6] ,我国已知有 91种 28个变种 ,主
要分布区是西南 、华南及东北地区[ 7] 。我国自
1981年吉林农业大学首次引种越橘以来 ,山东省
果树研究所 、大连大学现代化农业研究中心越橘
研究所等全国多家科研单位都相继开展了对越橘
的研究 ,为中国越橘产业化发展奠定了坚实的基
础[ 8] 。随着越橘栽培品种的增加和种植面积的扩
大 ,病虫害问题也日益突出 ,而目前对于越橘病虫
害的报道和防治还很有限 ,而且缺乏具体的防治
措施 ,造成越橘的产量降低 ,品质下降 ,所以对于
越橘病虫害的鉴定和防治显得尤为重要。为此 ,
本课题组对其病原菌室内药剂筛选和田间药剂筛
选进行了全面研究 ,以期为越橘叶斑病的综合防
治提供一定的理论依据。
1 材料与方法
1.1 病原菌的分离与纯化
病株采自吉林农业大学蓝莓种植基地 ,采用
常规组织分离法分离发病叶片 ,分离到的菌株经
通讯作者
基金项目:国家科技支撑计划项目(2007BAQ00159-01)
作者简介:杨丽娜 ,女 ,硕士研究生 ,实验师 ,研究方向:植物病害综合治理。
收稿日期:2012-11-09 网络出版时间:2013-07-05 15:41
吉林农业大学学报 2013 ,35(4):463 ~ 466 http:// xuebao.jlau.edu.cn
Journal of Jilin Agricultural University E-mail:jlndxb@vip.sina.com
DOI :10.13327/j .j jlau.2013.04.012
单孢纯化后保存于 PDA斜面上 ,置 4 ℃冰箱中贮
存备用。
1.2 病原菌致病性测定
将分离到的菌株在 PDA斜面上培养 10 d后 ,
取出菌块配成孢子悬液 ,采用针刺法接种到健康
的越橘植株上 ,着重叶的正面 , 25 ℃条件下保湿
接种部位 3 d ,每天观察发病情况 ,以无菌水接种
为对照处理。
1.3 杀菌剂对病原菌菌丝生长的抑制作用
供试药剂:64%杀毒矾可湿性粉剂[先正达
(中国)投资有限公司] ;60%金万霉灵可湿性粉剂
(江苏蓝丰生物化工股份有限公司),65%俊尔可
湿性粉剂(浙江禾益农化有限公司),53%金雷多
米尔可分散粒剂[先正达(中国)投资有限公司] ,
72%甲霜·锰锌可湿性粉剂(江苏宝灵化工股份有
限公司),50%农利灵水分散粒剂[巴斯夫(中国)
有限公司农化部] ,75%达科宁可湿性粉剂[先正
达(中国)投资有限公司] ,施佳乐 400 g/L 悬浮剂
[拜耳作物科学(中国)有限公司] , 70%甲基托布
津可湿性粉剂(江苏龙灯化学有限公司),10%世
高水分散粒剂[先正达(中国)投资有限公司),
60%氟吗啉·代森锰锌可湿性粉剂(沈阳化工研究
院试验厂),福星 400 g/L 乳油(上海杜邦农化有
限公司),50%翠贝水分散粒剂[巴斯夫(中国)有
限公司] , 阿米西达 250 g/L 悬浮剂[先正达(中
国)投资有限公司] ,凯润250 g/L乳油[巴斯夫(中
国)有限公司] 。
采用生长速率法[ 9]测定抑菌效果 。将 15种
药剂配成 1×10-3 , 1×10-4 , 1×10-5 , 1×10-6 ,
1×10-7 ,1×10-8 mg/L 6个质量浓度的溶液 ,加
入灭菌后冷却至 60 ℃的培养基中分别制成平板 ,
接种直径为 5 mm 的单个菌饼 。设灭菌水为对
照 ,每处理及对照3个平板 ,重复 3次 , 25 ℃培养
120 h 后检查各处理菌的生长情况 。十字交叉测
量菌落直径 ,计算生长抑制率 。
1.4 田间药效试验
1.4.1 供试药剂 70%甲基托布津可湿性粉剂
(江苏龙灯化学有限公司), 60%金万霉灵可湿性
粉剂(江苏蓝丰生物化工股份有限公司), 福星
400 g/L 乳油(上海杜邦农化有限公司), 凯润
250 g/L乳油[巴斯夫(中国)有限公司] 。
1.4.2 试验处理 试验共设 12 个处理 ,同时设
清水为对照(ck),每个处理重复 3 次 ,共计 39个
小区 ,随机排列 。试验处理分别为①70%甲基托
布津可湿性粉剂 500倍液;②70%甲基托布津可
湿性粉剂 600倍液③70%甲基托布津可湿性粉剂
800倍液;④60%金万霉灵可湿性粉剂 500倍液;
⑤60%金万霉灵可湿性粉剂 600倍液;⑥60%金
万霉灵可湿性粉剂 800倍液;⑦福星 400 g/L 乳油
400倍液;⑧福星 400 g/L乳油 8 000倍液;⑨福星
400 g/L乳油1万倍液;⑩凯润 250 g/L 乳油 1 000
倍液; 1凯润 250 g/L 乳油 2 000 倍液; 12凯润
250 g/L乳油3 000倍液; 13喷清水作空白对照 。
1.4.3 施药方法 试验于 2012年 7月 5日在吉
林农业大学蓝莓基地进行 ,于越橘叶斑病的发病
初期进行喷药 ,隔7 d施药 1次 ,共施药3次 ,采用
叶面喷雾的方法施药 。
1.4.4 调查方法 为确切评价各处理药效 ,于
试验喷药前2 , 3 d分别进行调查 。药前调查叶片
均未发病 ,故发病基数为零。供试叶片均进行调
查 ,每株越橘按东 、南 、西 、北 、中 5个方位分别抽
取叶片 ,调查发病情况 ,计算病情指数和相对防治
效果[ 10-12] ,用邓肯新复极差法检验防效的差异显
著水平。
叶片病害分级指标:0级.无病;1级.病斑面
积占整个叶片面积的 5%以下;3级.病斑面积占
整个叶片面积的 6%~ 10%;5级.病斑面积占整
个叶片面积的 11%~ 20%;7级.病斑面积占整个
叶片面积的 21%~ 50%;9级.病斑面积占整个叶
片面积的 50%以上。
病情指数 =∑(各级病叶数×相对级数值)调查总叶数×9 ×
100;
相对防治效果(%)=(1-病情指数对照 )×100。
2 结果与分析
2.1 致病性测定
采用针刺法将菌株孢子悬浮液接种到健康的
越橘植株叶片上进行致病性测定 ,接种 3 d后叶
片出现近圆形病斑 ,病斑与自然发病病斑较相似 ,
对照处理未见发病 ,可以排除接种发病植株的侵
染源来自田间 。从上述接种的发病叶片上再分离
的菌株与原接种菌株形态相同 ,符合判断分离物
为病原菌的柯赫氏法则 ,从而证明原接种菌株为
致病菌。
464 吉林农业大学学报 2013年 8月
Journal of Jilin Agricultural University 2013 , August
2.2 不同杀菌剂的室内毒力测定结果
室内毒力测定结果表明 ,供试药剂对越橘叶
斑病病菌均表现出一定的抑制作用 ,且不同药剂
之间存在明显差异。其中 ,金万霉灵 、甲基托布
津 、达科宁对病原菌的菌丝生长都表现出较强的
抑制作用 ,在生产中可以作为防治越橘叶斑病的
首选药剂 ,施佳乐 、金雷多米尔表现出较差的抑菌
作用(表 1)。
表 1杀菌剂对越橘叶斑病病菌菌丝生长的回归方程及 EC50
Table 1.Regression equation and EC50 of fungicides against Cylindrocladium sp.
杀菌剂
Fungicide
回归方程
Rregression equation
相关系数
Correlation coef ficient
EC50/(μg·mL -1)
杀毒矾
Sandofan
Y =6.809-0.162 6X 0.906 76 666.69
金万霉灵
Diethofencarb·Carbendazim Y =8.121 0-0.231 8X 0.981 29 1.42
俊尔
Toshi ji
Y =9.595 1-0.493 0X 0.971 10 89.48
世高
Difenoconazole
Y =0.963 0-0.099 0X 0.962 98 192 414.66
甲霜·锰锌
Ridomil-MZ Y =7.745 0-0.338 9X 0.940 10 303.37
农利灵
Vinclozolin
Y =7.790 0-0.341 2X 0.845 31 281.11
达科宁
Dacotech
Y =6.243 7-0.119 4X 0.285 03 29.99
施佳乐
Pyrimethanil
Y=50.123-0.116 9X 0.932 71 900 152.12
甲基托布津
Thiophonate-methyl Y =7.407 9-0.216 1X 0.870 10 14.48
金雷多米尔
Ridomi l mz gold
Y =5.401 1-0.108 7X 0.942 59 25 018.92
氟吗啉·代森锰锌
Fluoride marin mancozeb
Y =5.848 4-0.146 9X 0.882 42 3 101.34
福星
Flusilazole
Y =6.490 7-0.169 8X 0.960 60 152.99
翠贝
Kresoxim-methyl Y =5.580 7-0.097 5X 0.974 85 2 589.47
凯润
Pyraclostrobin
Y =6.712 0-0.206 9X 0.974 73 254.50
阿米西达
Azoxystrobin
Y =6.164 9-0.144 3X 0.970 75 312.58
2.3 4种杀菌剂对越橘叶斑病的防治效果
由表 2可以看出 ,4种药剂对越橘叶斑病都有
较好的防治效果 ,其中 70%甲基托布津可湿性粉
剂在 800倍液时对越橘叶斑病的相对防治效果最
好 ,达到了 89.63%;其次是凯润 250 g/L乳油的相
对防治效果为 80.25%~ 83.20%;60%金万霉灵
可湿性粉剂 的相对防治 效果为 65.48% ~
76.75%;福星 400 g/L 乳油的相对防治效果为
75.74%~ 79.78%,各药剂之间防治效果差异显著
(P<0.05),均极显著高于清水对照(P <0.01)。
表 2 越橘叶斑病的田间防效试验结果
Table 2.Field trials to Cylindrocladium sp.
处理
Treatment
总叶数
Total leaf number
病叶数
Diseased leaves
病叶率/ %
Diseased leaf rate
病情指数
Disease index
相对防治效果/ %
Control effect
1 739 191 24.51 7.02 84.17abB
2 699 174 69.51 10.92 75.38abcAB
3 868 162 18.52 4.60 89.63aA
4 811 171 20.78 6.70 76.75abcAB
465杨丽娜等:越橘叶斑病的药剂筛选
吉林农业大学学报 Journal of Jilin Agricultural University
续表 2
处理
Treatment
总叶数
Total leaf number
病叶数
Disease leaves
病叶率/ %
Diseased leaf rate
病情指数
Diseased index
相对防治效果/ %
Control effect
5 555 173 30.11 13.46 69.65bcAB
6 857 285 51.00 15.31 65.48cB
7 695 218 29.79 8.97 79.78abcAB
8 671 203 30.15 10.31 76.76abcAB
9 817 259 31.97 10.76 75.74abcAB
10 715 174 24.34 7.46 83.20abAB
11 790 177 22.41 6.09 86.27abAB
12 694 175 25.22 8.76 80.25abcAB
ck 920 56 82.17 44.35
注:同列数据上标不同小写字母表示差异显著(P<0.05),大写字母表示差异极显著(P<0.01)
Note:The different letters denote significant difference(P<0.05), the different capital letter denote extremely significant difference(P<0.01)
3 结 论
室内毒力测定结果表明 ,金万霉灵 、凯润 、福
星和甲基托布津对越橘叶斑病抑制效果都较好。
这些药剂均是国外在生产上推广的低毒 、低残留
的新药剂或应用较广的药剂 ,未见在越橘上应用
的报道。根据室内毒力测定结果并结合生产上常
用药剂 ,选取 70%甲基托布津可湿性粉剂 、60%
金万霉灵可湿性粉剂 、福星 400 g/L 乳油和凯润
250 g/L乳油这 4种药剂进行田间药效试验 ,结果
显示甲基托布津的防治效果最好 ,其次是凯润 、福
星 、金万霉灵 ,与室内毒力测定结果有一些差异 ,
可能是由于气候因素的影响 ,在试验剂量下对越
橘生长无不良影响 ,建议在生产上推广使用。
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(责任编辑:赵立华)
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