全 文 ：　　收稿日期:2007-06-01
作者简介:傅伟昌(1969-), 男 , 副教授 /博士;主要从
事天然食品中功能成分的研究工作。
文章编号:1003-7969(2007)12-0079-04　　　　中图分类号:TQ222　　　　文献标识码:A
癞葡萄籽油脂肪酸组成的 GC/MS分析
傅伟昌 1, 2 ,盘赛昆1, 2 ,顾小红 1 ,汤　坚2 ,蒋再良 3
(1.食品科学与技术国家重点实验室 , 江南大学 , 214122江苏省无锡市蠡湖大道 1800号;
2.江南大学食品学院 , 214122江苏省无锡市蠡湖大道 1800号;
3.江苏省无锡市富仁生物科技有限公司 , 214252江苏省宜兴市)
　　摘要:采用 2-氨基 -2-甲基丙醇(AMP)衍生化 , GC/MS法分析癞葡萄籽油的脂肪酸组成。
测定结果为:软脂酸 1.65%,硬脂酸 31.78%,油酸 5.52%,亚油酸 3.86%,十八碳共轭三烯酸
55.13%,未定出成分 2.07%。癞葡萄籽油的主要成分为十八碳脂肪酸 ,其中十八碳不饱和脂肪酸
占 64.51%。AMP衍生化 GC/MS法可对不饱和脂肪酸双键的位置准确定位 ,将癞葡萄籽油中的 3
种共轭三烯酸的顺反异构体分开 。
关键词:癞葡萄籽油;苦瓜;共轭三烯酸;GC/MS;口恶唑啉衍生物
AnalysisoffattyacidsintheseedoilofMomordica.charantiavar.
abreviataSer.byGC-MS
FUWei-chang1, 2 , PANSai-kun1, 2 , GUXiao-hong1 ,
TANGJian2 , JIANGZai-liang3
(1.StateKeyLaboratoryofFoodScienceandTechnology, JiangnanUniversity, 214122 JiangsuWuxi,
China;2.SchoolofFoodScienceandTechnology, JiangnanUniversity, 214122 JiangsuWuxi, China;
3.WuxiFurenBiologicScienceTechnologyCo., Ltd., 214122 JiangsuYixing, China)
Abstract:Gaschromatographymassspectrometric(GC-MS)methodwasusedtoanalyzethecom-
positionofthefatyacidsintheseedoilofMomordica.charantiavar.abreviataSer.treatedbythederi-
vatizationreagent2-amino-2-methylpropanol(AMP).Fivefatyacidswereidentifiedasfolows:pal-
miticacid1.65%, stearicacid31.78%, oleicacid5.52%, linoleicacid3.86%, conjugatedtrienoic
fatyacidwith18 carbons55.13%, unidentifiedcomposition2.07%.Thefatyacidswith18 carbons
werethemaincompositionintheseedoilofMomordica.charantiavar.abreviataSer., unsaturatedfaty
acidswith18 carbonswere64.51%.AMPderivatization-GC-MScanbeusedtodeterminetheexact
locationofdoublebondsinunsaturatedfatyacids, andseparatethreecisandtransisomersofconjugated
trienoicfatyacidsintheseedoilofMomordica.charantiavar.abreviataSer.
Keywords:theseedoilofMomordica.charantiavar.abreviataSer.;bitermelon;conjugatedtrie-
noicfatyacids;GC-MS;oxadiazolinederivative
　　苦瓜又称凉瓜 、锦荔枝 ,葫芦科苦瓜属植物 ,原
产于印度尼西亚 ,我国现全国各地均有种植 。癞葡
萄(Momordicacharantiavar.abreviataSer.)是苦瓜
的一个栽培种 (江苏省优质产品开发服务中心鉴
定),其果实呈纺锤状 ,果面呈不规则尖刺状 ,长约
4cm,宽约 3cm,果重 25 ～ 30 g,未成熟果实呈浅绿
色 ,成熟后为金黄色 。苦瓜 (癞葡萄)其有消暑涤
热 、明目解毒 、抗肿瘤 、降低血糖 、治疗糖尿病的作
用。近年研究表明 , 苦瓜对艾滋病也有治疗作
用[ 1 ～ 4] 。
792007年第 32卷第 12期　　　　　　　　　　　　　中　国　油　脂
图 1　癞葡萄籽油的 GC/MS总离子流图
　　在苦瓜(癞葡萄)的生产加工过程中 ,苦瓜皂
甙 、苦瓜蛋白 、苦瓜肽等药用成分的提取大多采用先
脱脂再水提或醇提的方法 ,油脂成分未予以利用 。
Suzukir等 [ 5]人发现苦瓜果肉含 0.6% ～ 1.2%的共
轭三烯酸 (9t, 11t, 13c, 18∶3),苦瓜籽油含有高达
56%的 α-桐酸 ———一种十八碳的共轭三烯酸(9c,
11t, 13t, 18∶3)。目前国外对苦瓜籽油以及 α-桐酸
的抗结肠肿瘤的活性及机理已做了较多的研究 ,并
肯定了它们的抗肿瘤功效 [ 6 ～ 11] 。苦瓜籽油中的 α-
桐酸虽然没有桐油中的含量高 ,但苦瓜籽油是可食
的 ,而桐油是不可食的。苦瓜籽油作为 α-桐酸的
一种可食的 、大量的来源 ,其药用价值越来越受到关
注 。苦瓜籽油的脂肪酸组成分析已有相关报
道 [ 12 ～ 14] ,本文采用 2-氨基 -2 -甲基丙醇 (2 -
aimo-2-methylpropanol, AMP)衍生化及 GC/MS法
分析癞葡萄籽油的脂肪酸组成 ,结果与已有的苦瓜
籽油的脂肪酸组成报道略有差
异 。
1　材料与方法
1.1　实验原料
癞葡萄籽 ,由江苏省无锡市
富仁生物科技有限公司提供;氯
仿 、甲醇为分析纯;AMP购自美
国 Aldrich公司 。
1.2　癞葡萄籽油的提取
癞葡萄籽阴干后去壳 , 25 g
籽用研钵磨成粉状 ,转入 250 mL
具塞锥形瓶中 ,加 50 mL氯仿 、
100mL甲醇 ,振摇 2 min,再加 50 mL氯仿 、 50 mL
水 ,振摇 2min,用布氏漏斗过滤 ,渣分别用 10mL氯
仿 、20 mL甲醇 、20mL氯仿 -水(1∶1, V/V)顺次洗
涤 ,液体转入分液漏斗静置分层 ,取氯仿层 ,经装有
无水硫酸钠的漏斗过滤 ,滤液用旋转蒸发仪真空下
35℃水浴去除溶剂 ,氮气吹除残余溶剂 ,充氮气于
冰箱中保存备用 [ 15] 。
上述操作保证在暗处并尽可能在氮气保护下进
行 。
1.3　分析方法
1.3.1　样品处理　按参考文献 [ 16]对癞葡萄籽油
进行皂化;再按参考文献 [ 17]进行 AMP衍生化:皂
化后的癞葡萄籽油加入 0.5 mLAMP,于 170℃下加
热衍生化 1 h,冷却后水洗去杂 ,加入 3mL氯仿振摇
1 min,再加入 5 mL水 , 放置分层后取氯仿层于
10 mL具塞试管中 ,加入无水硫酸钠 ,充氮气保存于
冰箱备用。
上述操作保证在暗处并尽可能在氮气保护下进
行。
1.3.2　GC/MS分析 　GC/MS仪为美国 Finnigan
TraceMS。
色谱条件:122 -7032DB-WAX柱 (30 m×
0.25 i.d.), 液膜厚度 0.25 μm;载气 He, 流速
0.8 mL/min;进样量 10 μL,分流比 10∶1;进样口温
度 250℃,接口温度 250℃;起始柱温 180℃, 保留
3min,以 3.0℃/min升至 230℃保留 15.0 min。
质谱条件:电离方式 EI,电子能量 70 eV,接口
温度 250℃,离子源温度 200℃;扫描质量范围 99 ～
634 amu,扫描速率 120次 /min,全扫描方式;四极杆
质量分析器。
2　结果与讨论
癞葡萄籽油用 AMP衍生化后 ,经 GC/MS分析 ,
一共分出 9个峰 ,总离子流图见图 1。
　　脂肪样品的衍生化以甲酯化法最常用 ,配合质
谱图库检索可定性定量多数常见脂肪酸 ,但对具有
特殊双键结构的脂肪酸则因图库中缺少资料而不能
定性 。
AMP衍生化方法是一种杂环化衍生化法 ,杂环
化法不仅可以改善脂肪酸的挥发性 ,使更多的成分
得到分离 ,同时能对双键的位置准确定位 。AMP有
1个氨基和 1个邻位的羟基 ,与脂肪酸(即使是长链
脂肪酸)发生缩合反应 ,生成相应的 2 -烯基 -4, 4
-二甲基口恶唑啉 (2 -alkenyl-4 , 4 -dimethyloxazoline)。
其反应如下:
　　将脂肪酸羧基修改为含氮杂环 ,使其具有较低
的电离能 ,从而减少双键电子在碳链上的迁移 ,从断
裂的碎片离子簇的质荷比差值可以判断双键位置。
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在用杂环化方法衍生化样品时必须保证 AMP适当
图 2　RT=10.18峰的质谱图
图 3　RT=18.22峰的质谱图
过量 ,这样可以防止 N, O-二酰基化合物的产生 。
AMP只在 m/z为 58处显示一个单峰 ,不会因为其
过量而对质谱产生影响;另外反应温度也要足够高 ,
因为反应如在低温下进行 ,会产生少量非完全环化
的 N-酰基中间体 ,导致衍生化产物不纯 ,而严重干
扰图谱 [ 17, 18] 。
癞葡萄籽油的 GC/MS总离子流图上显示的两
个主峰的质谱图见图 2和图 3。
　　按照文献 [ 17]介绍的质谱分析方法 ,脂肪酸杂
环化后 ,经电子轰击 , m/z为 113的基峰是 McLafer-
ty重排离子峰 , m/z为 126峰之后每隔 14 u出现一
个峰表示一个饱和键 ,如果两峰相差 12 u则说明该
键是一不饱和双键。如果在 C(n-1)和 C(n)之间
出现 12 u间距 ,则说明在 C(n)与 C(n+1)之间有
一双键 。按照这一规律 ,分析质谱图所得结果见表
1。
表 1　癞葡萄籽油脂肪酸组成
保留时间(RT, min) 脂肪酸 相对含量(%)
7.46 16∶0软脂酸 1.65
10.18 18∶0硬脂酸 31.21
10.47 18∶1n9(Δ9)油酸 5.52
11.21 18∶2n6(Δ9 , 12)亚油酸 3.86
13.67 18∶0硬脂酸 0.57
17.59 18∶3(Δ9 , 11, 13)共轭三烯酸 0.80
18.22 18∶3(Δ9 , 11 , 13)共轭三烯酸 51.54
19.92 18∶3(Δ9 , 11 , 13)共轭三烯酸 2.79
24.57 未定出 2.07
　注:质量分数按峰面积归一化法计算
　　有报道用硫酸甲酯化 GC法分析苦瓜籽油脂肪
酸组成 ,发现含有约 14%的十九碳三烯酸[ 13] ,按照
该文献介绍的衍生化方法进行了癞葡萄籽油脂肪酸
的 GC/MS分析 ,结果没有发现十九碳三烯酸 ,这与
AMP衍生化法的结果很相近 。
3　结　论
癞葡萄籽油脂肪酸组成较为简单 ,主要成分为
十八碳脂肪酸 ,含量达 96.28%。十八碳的不饱和
脂肪酸 64.51%,共轭三烯酸为其主要成分 ,含量占
总脂肪酸的 55.13%。经 AMP衍生化后 , GC/MS可
将癞葡萄籽油中的 3种十八碳
共轭三烯酸的顺反异构体分开 ,
但不能具体确认 。
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油料方面 6项行业标准通过国家审定
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中心制定的 《大豆热损伤率的测定 》等 6项农业行
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