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海南裸花紫珠地上部分总糖的测定



全 文 :植物生理与生物技术
海南裸花紫珠地上部分总糖的测定
王和飞,张 燕,文 攀,陈川平
(琼州学院 生物科学与技术学院,海南 三亚 572022)
摘 要:利用蒽酮比色法对海南裸花紫珠的野生种和人工林的地上部分总糖进行测定,研究两者间的差异。结果显示,不论是
野生林还是人工林,叶片糖含量都较皮部和木质部高,分别为 11.00%和 10.47%。
关键词:裸花紫珠;总糖;蒽酮比色法
中图分类号:S665.9 文献标识码:A DOI 编码:10.3969/j.issn.1006-6500.2012.01.007
Determination of Total Sugar from the Aerial Part of Callicarpa nudiflora
WHANG He-fei,ZHANG Yan,WEN Pan,CHEN Chuan-ping
(College of Biological Science and Technology,Qiongzhou University,Sanya,Hainan 572022,China)
Abstract: Total sugar from the aerial part of Callicarpa nudiflora in wild forest and plantation was determined by anthrone colorimetry.
The results showed that the sugar content of leaves was higher than bark and xylem, leaf sugar content in wild forest and plantation
reached 11.00% and 10.47%, respectively.
Key words: Callicarpa nudiflora; total sugar; anthrone colorimetry
2012,18(1):28-30天津农业科学 Tianjin Agricultural Sciences
收稿日期:2011-11-01;修订日期:2012-01-11
基金项目:琼州学院 2011 年度科研项目(QYQN201131)
作者简介:王和飞(1977-),男,海南人,讲师,硕士,主要从事作物遗传育种及生化研究 。
裸花紫珠(Callicarpa nudiflora Hook.et Arn),马
鞭草科植物,为海南正致力于大力开发利用的南
药品种之一。植株高 3~4 m为灌木至小乔木,除老
枝外浑身被褐色茸毛,单叶对生,花夏季开放,紫
色或粉红色,果小红色[1]。喜阳光充足和湿润环境,
适应性强,耐寒耐旱,也较耐阴,宜在肥沃、疏松的
腐叶土中生长。紫珠全株可入药,其味苦、微辛,具
有消炎、解毒、收敛止血等功效。可内服外敷,用于
化脓性炎症,急性传染性肝炎,烧伤或烫伤,外伤
出血[2-4]。主治咯血、吐血、便血、创伤出血、跌打瘀
肿、风湿痹痛等症,为民间止血药,是海南常用黎
药之一。目前国内外对紫珠属植物化学成分研究
主要集中在黄酮、萜类、挥发油等成分的分析,对
其可溶性总糖含量的研究未见报道。开展该研究
旨在为裸花紫珠的综合利用提供理论依据。
1 材料和方法
1.1 材 料
栽培种由海南制药厂南繁基地提供,野生种
采自五指山市毛阳镇。材料分为树皮、木质部、叶
片 3类。采集时间为 4月份。
1.2 方 法
1.2.1 样品溶液的制备 将样品放入烘箱内 105
℃烘干后调至 60 ℃烘至恒质量,粉碎过 0.2
mm 筛,称取样品 3 g 于锥形瓶中,加入 80 mL 沸
蒸馏水,放入沸水浴,振动提取 0.5 h 后逐滴加入
25%醋酸铅溶液 10~15 mL 至沉淀出现,并加入
10~15 mL10%磷酸二氢钠溶液,至不再产生沉淀
为止,过滤,残渣用沸蒸馏水反复洗涤并过滤,合
并滤液,冷却至室温,用蒸馏水定容至 100 mL [5-9]。
每个样品各制备 3份,备用。
1.2.2 制作标准曲线 分别取 7 支干净干燥的试
管,按表 1操作。用 1 cm厚度的比色皿,以 1号管
为空白,在 620 nm处迅速测其他各管的光吸收值。
1.2.3 总糖的测定 取 4支试管按表 2操作。操
作过程与 1.2.2 相同,以 1 管为空白,测出 2~4 号
管的 A620nm平均值。
1.2.4 重现性试验 准确称取人工林裸花紫珠
叶片 3 g,按照上述方法测定,检验其结果的稳定
第 1期
表 1 标准曲线制作试验
试剂/mL
试管编号
1 2 3 4 5 6 7
100 μg·mL-1葡萄糖标准液 0 0.10 0.20 0. 30 0.40 0.60 0.80
H2O 1.0 0.90 0.80 0.70 0.60 0.40 0.20
1∶1(mg∶mL)蒽酮试剂 10.0 10.0 10.0 10.0 10.0 10.0 10.0
准确沸水浴 7 min→冰浴冷却
性。
1.2.5 加样回收率试验 按下表 3 操作,测定试
验加样回收率。
2 结果与分析
2.1 标准曲线的绘制
以 2~7 号管溶液含糖量为横坐标,吸光度
(A620nm)为纵坐标,得出含糖量与 A620nm值的相关标
准曲线如图 1。
2.2 不同部分的吸收值
每个样品试验重复 3次,取平均值,结果如图2。
从图 2 可以看出,无论是野生林还是人工林
总糖含量在三者组织中都表现为:叶片>皮>木质
部,其中,野生种和人工林叶片中总糖含量分别达
到 11.00%和 10.47%,分别是皮部、木质部的 3.17
倍、6.21倍和 4.23倍、4.92倍。
2.3 试验方法考察分析
2.3.1 重现性 其结果如表 4。根据表 4 数据显
示,吸光度稳定,RSD=1.76%,表示试验稳定,重
复性良好。
2.3.2 加样回收率 根据试验设置分别测试验材
料水溶性总糖含量,计算加样回收率,数据如表 5。
表 2 总糖测定实验
试剂/mL
试管编号
1 2 3 4
总糖提取液 0.0 1.0 1.0 1.0
H2O 1.0 0.0 0.0 0.0
1∶1(mg∶mL)蒽酮试剂 10.0 10.0 10.0 10.0
准确沸水浴 7 min→冰浴冷却
表 3 回收率试验
测定批次 样品中总糖含量/mg 加入标准葡萄糖含量/mg
1 0.507 0.04
2 0.507 0.10
3 0.507 0.04
4 0.507 0.02
5 0.507 0.08
图 1 葡萄糖的标准曲线
图 2 紫珠各部分总糖含量



A
表 4 总糖重现性考察结果分析
样品号 1 2 3 4 5
吸光度 0.302 1 0.302 3 0.302 2 0.301 9 0.301 8
RSD/% 1.76
表 5 总糖加样回收率试验结果分析
测定
批次
样品中
总糖含量
/mg
加入标准
葡萄糖
含量/mg
测得
总糖含量
/mg
回收率
/%
平均值
/%
1 0.507 0.04 0.511 100 99.542
2 0.507 0.1 0.599 98.68
3 0.507 0.04 0.509 99.61
4 0.507 0.02 0.514 100.59
5 0.507 0.08 0.509 98.83
王和飞等:海南裸花紫珠地上部分总糖的测定


/%
叶 木质部 皮
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第 18卷天津农业科学
3 讨 论
药用植物中, 多糖类化合物是其中非常重要
的成分,研究表明,多糖在增强免疫能力、抑菌、调
节血糖、抗氧化、抗病毒、抗疲劳、抑制肿瘤生长、
延缓衰老等方面具有众多药理功能, 且无毒副作
用[10]。因此从植物中提取具有生物活性的多糖,已
成为近年来的研究热点。本试验采用蒽酮比色测
定紫珠总糖含量,因该方法操作简单、方便准确性
高,糖含量在 30 μg左右就可以测定。
笔者还分别对不同季节的野生林和人工林的
上述各组织进行总糖的测定,其数据差异不大,各
组织间的总糖含量规律一致。试验数据显示海南
裸花紫珠野生种总糖的含量要略大于栽培种,但
差异并不大,基本处在一致的水平。从某个意义上
讲,人工林完全达到野生林的糖分含量,可以通过
人工育苗进行大规模的人工种植,其有效糖分成
分没有减少。一方面通过扩大人工林的种植面积,
减轻野生资源的压力,另一方面人工林由于人为
的施肥、管理,在相同的时间里可以获得更高的产
量,同时也可以缩短砍伐的间隔。所以本研究对海
南紫珠大规模开发利用,进一步挖掘紫珠药用价
值提供了理论参考。
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