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铁皮石斛多糖化学修饰及其对免疫活性的影响



全 文 : 
铁皮石斛多糖化学修饰及其对免疫活性的影响
                               
童 微 1,余强 1,李虎 1,崔武卫 1, 2,聂少平 1,*
( 1.南昌大学 食品科学与技术国家重点实验室,江西 南昌 330047;2.加拿大农业与农业食品部圭尔夫
食品研究中心,安大略 圭尔夫 NIG 5C9 )
摘 要:采用水提醇沉法结合冻融手段制备高纯度铁皮石斛多糖,并利用硫酸化、脱乙酰化及羧甲基化修
饰的方法对铁皮石斛多糖进行化学修饰,探讨不同修饰方法对铁皮石斛多糖基于 RAW264.7 巨噬细胞的免
疫活性影响。结果表明,DOP 中性糖含量较高,而糖醛酸及蛋白质含量则较低,分别为 87.37%、3.19%
和 0.51%,羧甲基化及硫酸化显著降低了铁皮石斛多糖的中性糖含量。红外分析结果显示硫酸化、脱
乙酰化及羧甲基化修饰衍生物均已成功制备。高性能凝胶渗透色谱法测定铁皮石斛多糖分子量为 960 Kda,
硫酸化及羧甲基化修饰显著增加了其相对分子质量。体外实验研究发现,硫酸化和脱乙酰化修饰衍生物能
够增强铁皮石斛多糖对 RAW 264.7 巨噬细胞的免疫活性,而羧甲基化修饰则表现为显著的抑制作用,表明
不是所有的官能团接枝改性都可以改善铁皮石斛多糖免疫活性。
关键词:铁皮石斛;多糖;化学修饰;RAW264.7 巨噬细胞;免疫活性

Chemical Modification and Immunoregulatory Activity of Polysaccharides from Dendrobium
Officinale

TONG Wei1, YU Qiang1, LI Hu1, STEVE W. CUI1,2, NIE Shaoping1,* 
(1. State Key Laboratory of Food Science and Technology, Nanchang University, Nanchang 330047, China;
2. Agriculture and Agri-Food Canada, Guelph Food Research Centre, Guelph N1G 5C9, Canada)

Abstract: The polysaccharides from Dendrobium Officinale was obtained by water extraction and alcohol
precipitation combined with freeze-thaw treatments, and the chemical modification were used to uesd Dendrobium
Officinale polysaccharides by sulfation, deacetylation and carboxymethylation were used to modify the. Then the
effects of different modification on the immunomodulatory activity of RAW264.7 macrophages were studied. The
results showed that Dendrobium Officinale polysaccharides has high neutral sugar contents with the low uronic
acids and proteins content, the contents were 87.37%、3.19% and 0.51%, respectively. The neutral sugar contents
of Dendrobium Officinale polysaccharides were significantly reduced by sulfation and carboxymethylation. The
FTIR spectral analysis indicated that sulfation, deacetylation and carboxymethylation derivatives were
successfully prepared.The molecular weight of Dendrobium Officinale polysaccharides measured by
high-performance gel permeation chromatography was 960 Kda, while it was significantly increased by sulfation
and carboxymethylation. It was found that sulfation and deacetylation could enhance  the immunomodulatory
activity of Dendrobium Officinale polysaccharides in vitro, while carboxymethylation significantly decreased the
immunomodulatory activity, indicating that not all the functional groups grafted modification can improve the
1immunomodulatory activity of Dendrobium Officinale polysaccharides.
Keywords: Dendrobium Officinale; Polysaccharide; Chemical modification;  RAW264.7 macrophages;
Immunomodulatory activity
                                                              
收稿日期:2016-06-28
基金项目:江西省主要学科学术和技术带头人资助计划
作者简介:童微(1991—),女,硕士研究生,研究方向为食品化学与分析。E-mail:
tongwei19911123@163.com
*通信作者:聂少平(1978—),男,教授,博士,研究方向为食品化学与分析,食品安全与营养,保健食
品,多糖生物化学。E-mail:spnie@ncu.edu.cn
2016-10-15
网络出版时间:2016-10-20 00:00:10
网络出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/11.2206.TS.20161020.0000.002.html
 
中图分类号:TS201.1 文献标志码:A 文章编号:
铁皮石斛为兰科石斛属多年生附生草本植物,被列为石斛上品,是一种药食两用植物,其茎可直
接食用,亦可将其作为原料进行泡茶、煮粥、煲汤及浸酒,具有益胃生津,滋阴清热等功效[1-3]。此
外,食用铁皮石斛还可以提高机体的健康水平,预防慢性疾病的发生[4]。随着铁皮石斛功效研究的不
断进展,其在食品工业中的应用也得到了迅速的发展。目前,市场上的铁皮石斛产品主要包括铁皮枫
斗、铁皮石斛颗粒冲剂、铁皮石斛花茶、铁皮石斛茶叶及铁皮石斛功能性饮料等产品。
分子修饰是指利用化学、物理和生物学等手段对其结构进行修饰,从而得到具有多样生物活性衍
生物的方法,包括化学、物理及生物三种修饰方法。其中,化学修饰是常用的方法,主要包括硫酸化、
乙酰化、羧甲基化、磷酸化、烷基化、硒化等。在构效关系研究中发现,一些天然多糖本身不具有或
具有较弱的生物活性[5],而活性的发挥与其结构密切相关,因此可以利用化学修饰的方法对多糖进行
衍生以改善其生物活性。例如,硫酸化迷果芹多糖能够有效清除 DPPH、羟基和超氧阴离子自由基,
提高其抗氧化活性[6]。硒化的百合多糖能够显著促进淋巴细胞的增殖,提高鸡外周血淋巴细胞 IL-2、
IL-6 和 IFN-γ mRNA 的表达,从而提高其免疫活性[7]。乌龙茶多糖经硫酸化和乙酰化修饰后其抗氧化
活性均有所提高[8]。
铁皮石斛多糖含有 β-1,4-D-葡甘露聚糖的主链结构,在 β-1,4-D-甘露糖残基的 0-2 位置处连有乙
酰基,是一种天然的乙酰化多糖[4, 9, 10],具有抗肿瘤、增强免疫力、抗氧化等多种功效[11-13],其中免疫
调节活性备受关注[4, 14-16]。近年来研究还发现,铁皮石斛多糖对于机体的肠道免疫和结肠的健康也具
有一定的促进作用[4, 9]。然而,铁皮石斛多糖目前的研究主要集中在其自身结构以及生理活性方面,
对于化学修饰衍生方面的研究报道还较少。铁皮石斛多糖作为一种天然乙酰化多糖,对其进行硫酸化、
脱乙酰化及羧甲基化修饰,并对衍生化多糖的结构特征及其对体外免疫活性的影响进行研究,旨在比
较不同官能团的引入或去除对多糖结构及其免疫活性的影响,从而为铁皮石斛多糖构效关系的研究提
供一定的理论依据,同时也为开发新型多糖及促进铁皮石斛产业的发展的奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂
铁皮石斛干茎由云南金九地生物科技有限公司提供;小鼠巨噬细胞株 RAW264.7 购自于中国科学
院上海生科院细胞资源中心。
DMEM 培养基 美国 Thermo 公司;胎牛血清 以色列 Biological Industries 公司;脂多糖(LPS)
美国 Sigma 公司;耐高温 α-淀粉酶 杰能科(中国)生物工程有限公司;葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、
半乳糖、鼠李糖、木糖、岩藻糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、核糖标准品 美国 Sigma 公司;咔唑 上
海国药集团;牛血清白蛋 美国 AMRESCO 公司;氯磺酸、一氯乙酸 萨恩化学技术(上海)有限公司;
浓硫酸、无水碳酸钠、浓盐酸、氢氧化钠、吡啶、苯酚、正己烷、95%乙醇、无水乙醇等均为国产分
析纯。
1.2 仪器与设备
NICOLET-5700 傅里叶红外光谱仪 美国尼高力仪器公司;流式细胞仪 FACS Calibur 美国 BD
公司;高效分子排阻色谱系统 美国 Brookhaven 公司;TGL-16GA CO2培养箱、Varioskan Flash 全
波长多功能酶标仪 美国 Thermo 公司;超净工作台 吴江市净化设备总厂;倒置显微镜 日本
Olympus 公司;TU-1900 双光束紫外可见分光光度计 北京普析通用有限责任公司。
1.3 方法
1.3.1 铁皮石斛纯多糖的制备
参考文献方法[17],将 50g 铁皮石斛干茎粉碎至 80 目以下,分别依次加入正己烷、95%乙醇溶液,
搅拌各 48h。过滤除去浸泡液,收集残渣,然后加入 4 倍质量的去离子水,于 70℃搅拌提取 3 h,离
心收集上清液,剩余残渣再次进行提取。收集、混合提取所得上清液,真空浓缩后加入乙醇进行沉淀,
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静置过夜离心收集沉淀。所得沉淀再加入去离子水进行复溶,冷冻干燥后得到铁皮石斛粗多糖样品
(Crude polysaccharides of Dendrobium Officinale, DOC)。取 10 g DOC 溶于 1000 mL 去离子水中,70℃
下加热溶解,加入 0.3 mL α-淀粉酶(酶活为 20000 U/mL),酶解 2 h 后冷却至室温,“冻融-离心”4
次,最后一次离心所得上清液进行透析 3 天,然后加入乙醇沉淀,静置过夜,离心收集沉淀,所得样
品经冷冻干燥后得到铁皮石斛纯多糖样品(Purified polysaccharides of Dendrobium Officinale, DOP)。
1.3.2 铁皮石斛 DOP 多糖的化学修饰
1.3.2.1 铁皮石斛 DOP 多糖硫酸化改性
参照文献方法[18, 19],冰浴条件下,将氯磺酸逐滴加入到吡啶中进行反应以制备硫酸酯化试剂,其
中氯磺酸和吡啶的比例为 1:4。将 15mL 硫酸酯化试剂逐滴加入铁皮石斛多糖浓度为 10mg/mL 的甲酰
胺溶液中,60℃反应 2h,然后用 4mol/L NaOH 中和,离心收集上清液并进行透析 72h,真空浓缩后
加入乙醇沉淀,静置过夜离心收集沉淀。所得沉淀用去离子水复溶,冷冻干燥得到硫酸化铁皮石斛多
糖样品(Sulfated DOP,SDOP)。取代度测定采用氯化钡-明胶法[20],以硫酸钾为换算当量,取代度计算
公式如下[21]:

%S02.132
%S62.1DS 

式中:DS 表示取代度;S%表示硫酸基含量。
1.3.2.2 铁皮石斛 DOP 多糖脱乙酰化改性
参考文献方法[22],将50mg样品溶解于20mL去离子水中,冷却至4℃,缓慢加入等体积的冷Na2CO3
溶液(0.2M),4℃下反应 1h。反应结束后,1M HCL 溶液调节 pH 至 4.5,然后进行透析 48h,经真
空浓缩及冷冻干燥后得到脱乙酰化铁皮石斛多糖样品(Deacetylated DOP, DADOP)。采用酸碱滴定法测
定取代度[23],脱乙酰度测定结果按如下公式计算[24]:
100043.0VCVC%A 1100  m  
%100
A
AADS
1
01  
式中,A 为乙酰基含量/%;V0为加入 NaOH 溶液的体积/mL;C0为 NaOH 浓度/(mol/L);V1为消
耗的 HCL 体积/mL,C1为 HCL 浓度/(mol/L);m 为样品质量/g;A1为铁皮石斛纯多糖样品乙酰基总量,
A0为脱乙酰化后乙酰基总量。 
1.3.2.3 铁皮石斛多糖 DOP 羧甲基化改性
参考文献方法[25],将 100mg 样品溶解于 40mL 2.5mol/L NaOH 溶液中,室温搅拌 30min,加入 2.2g
一氯乙酸,50℃反应 3h,反应结束后加入冰醋酸中和,然后进行透析 72h,经真空浓缩及冷冻干燥得
到羧甲基化铁皮石斛多糖样品(Caboxymethylated DOP, CMDOP)。采用经典酸洗法[26]测定取代度。DS
按下式计算[26]:
1000VCVCA 1100  
CMDOPM
 
A058.01
A162.0DS 
式中:A 为每克样品消耗 NaOH 物质的量/mmol;V0为加入 NaOH 溶液的体积/mL;C0 为 NaOH
溶液浓度/(mol/L);V1 为消耗 HCL 溶液的体积/mL;C1 为 HCL 溶液浓度/(mol/L);MCMDOP 为羧甲基
化铁皮石斛多糖的质量/mg。
1.3.3 铁皮石斛多糖化学修饰衍生物结构分析
1.3.3.1 红外光谱分析
分别取一定量 DOP、SDOP、DADOP 以及 CMDOP 样品,采用溴化钾压片法制样,然后用傅里
叶红外光谱仪在 400-4000 cm-1范围内进行扫描。
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1.3.3.2 理化性质分析
以甘露糖为标准品,采用苯酚-硫酸法[27]测定总糖含量,测定波长为 490nm。
以半乳糖醛酸为标准品,采用硫酸-咔唑法[28]测定糖醛酸含量,测定波长为 530nm。
以牛血清白蛋白为标准品,采用考马斯亮蓝法[29] 测定蛋白质含量,测定波长为 595nm。
1.3.3.3 相对分子质量
采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)测定相对分子质量[30]。利用 Agilent 1260 HPLC 高效液相色谱
仪进行分析,选用 UltrahydrogelTM线性色谱柱(300 mm × 7.8 mm)以及 RI2410 示差和 DAD2996 紫
外检测器。样品测定的色谱条件为色谱条件:流动相为 0.02% NaN3溶液,流速为 0.6mL/min,检测器
温度和柱温均为 35℃,进样量 20μL。
1.3.4 铁皮石斛多糖 DOP 化学修饰前后免疫活性测定
1.3.4.1 RAW264.7 巨噬细胞增殖效应的测定
采用 CCK-8 法测定细胞增殖作用。将 RAW264.7 细胞按 4×105个/mL 接种于 96 孔细胞培养板中,
分别加入 DOP、SDOP、DADOP 以及 CMDOP 样品(本实验室前期研究表明,DOP 在浓度为 40 µg/mL
时活性最佳,故本研究所用多糖样品均采用终浓度为 40 µg/mL),同时设置 1µg/mL 的 LPS 阳性对照
孔、正常对照(A2)孔及阴性对照(A0)孔,每组均设 6 个复孔。在含 5% CO2的 37℃敷箱中培养 24h,然
后加入 10μL 的 CCK-8 试剂,1.5h 后终止培养,450nm 波长检测 OD 值。细胞增殖率计算如下:
100
AA
AA%
02
01  
细胞增值率
其中 A1:含有细胞、CCK-8 溶液和药物溶液的孔的吸光度值;A0:含有培养基和 CCK-8 溶液而
没有细胞的孔的吸光度值;A2:含有细胞、CCK-8 溶液而没有药物溶液的孔的吸光度值
1.3.4.2 RAW264.7 巨噬细胞吞噬效应的测定
采用 FITC-dextran 法测定细胞的吞噬作用。将 RAW264.7 细胞按每孔 2×106 个/孔接种于 6 孔细
胞培养板中,给药方式同 1.3.4.1。24h 后去上清,PBS 清洗 2 次,收集细胞于 1.5mL EP 管中,离心
去上清,分别加入 100μL PBS,然后分别加入 10μL 1mg/ml FITC-dextran,37℃孵育 1h,用含 2%胎牛
血清的冷 PBS 中止反应,细胞清洗 2 次,0.5mL PBS 重悬,流式细胞仪检测分析。
1.3.5 数据处理
实验数据采用平均值±标准偏差(means ± S.D)表示。应用 SPSS19.0 统计软件进行单因素方差
分析和 t 检验。P < 0.05 表示差异显著,P < 0.01 表示差异极显著。

2 结果与分析

2.1 铁皮石斛多糖化学修饰前后的理化性质分析
铁皮石斛多糖化学修饰前后理化性质结果总结于表 1。结果表明,DOP 糖含量较高,为 87.37%,
而糖醛酸及蛋白质含量则较低,分别为、3.19%和 0.51%。脱乙酰化修饰对其理化性质无显著改变,
而羧甲基化及硫酸化显著降低了铁皮石斛多糖的中性糖含量,这与陈奕等[31, 32]的研究结果一致,表明
该现象可能与硫酸化及羧甲基化反应时的酸性环境而引起的多糖降解及官能团的引入有关。
2.2 化学取代度及得率
SDOP、DADOP 以及 CMDOP 取代度及得率总结于表 1。从表 1 可知,硫酸化铁皮石斛多糖取
代度较高,为 1.13,但得率较低,仅为 59.37%。羧甲基化得率虽高,但其取代度较低,测定结果为
0.52。脱乙酰化铁皮石斛多糖脱乙酰度为 0.75,其得率为 71.31%。
表 1 铁皮石斛多糖化学修饰衍生物取代度、得率及化学成分分析
Table 1 The degree of substitution、yield and chemical composition of chemical modification polysaccharides
from Dendrobium officinale
样品 色泽 得率/% b 中性糖/%a 糖醛酸/%a 蛋白质/%a 取代度 a 分子量 a/KDa
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DOP 白色 - 87.37 ± 0.84 3.19 ± 0.03 0.51 ± 0.02 - 960
SDOP 白色 59.37 81.88 ± 0.32 2.79 ± 0.05 0.16 ± 0.02 1.13 ± 0.03 1820
CMDOP 白色 117.96 54.46 ± 0.50 2.60 ± 0.07 0.21 ± 0.03 0.52 ± 0.01 2090
DADOP 淡黄色 71.31 84.28 ± 0.42 2.78 ± 0.05 0.59 ± 0.01 0.75 ± 0.02 830
注:a:所有实验重复三次,取平均值 ± SD;b:得率表示所得提取物重量占原料干重的百分比。
2.3 红外光谱分析
从图 1 可知,DOP,SDOP,DADOP 和 CMDOP 在 3430 cm-1,2930cm-1和 2372cm-1附近均有吸
收,其中,3430 cm-1附近的宽吸收峰是糖类的 O-H 伸缩振动,2930cm-1和 2372cm-1附近的吸收峰分
别为糖类 C-H 的伸缩振动及变角振动,表明 DOP 及其衍生产物均具有多糖的特征吸收峰。与 DOP
相比,SDOP 在 1258 cm-1 和 811 cm-1处产生了明显的吸收峰,其中 1258 cm-1处为 S=O 伸缩振动的特
征吸收峰,811 cm-1处为 S-O-C 伸缩振动的特征吸收峰[31],表明 SDOP 为 DOP 硫酸化衍生产物。与
DOP相比,DADOP在 1735 cm-1和 1245 cm-1波段处吸收峰均发生显著变化,其中 1735 cm-1和 1247 cm-1
波段附近的吸收峰分别为乙酰基的羰基的 C=O 和 C-O 伸缩振动[32], 表明 DADOP 为 DOP 脱乙酰化
衍生物。与 DOP 相比,CMDOP 在 1603 cm-1,1415 cm-1和 1320cm-1波段处均产生了明显的吸收峰,
其中 1603 cm-1和 1320cm-1 波段附近处分别为羧基(COO‾)的 C=O 非对称伸缩振动和对称伸缩振动
的特征吸收峰,1415 cm-1波段附近处为甲基的 C-H 的变角振动吸收峰[33],表明 CMDOP 为 DOP 羧甲
基化衍生物。
4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500
2372.2 1247.5


Wavenunbers(cm-1)
811.51258.2
SDOP
1735.3
DADOP
DOP
3430.1
2930.5
CMDOP
1603.2
1415.4
1320.2

图 1 铁皮石斛多糖及其化学修饰衍生物的红外光谱分析
Fig.1 Infrared spectrum analysis of polysaccharides and chemical modification polysaccharides
from Dendrobium officinale
2.4 相对分子质量测定
利用 HPGPC 法检测 SDOP、DADOP 和 CMDOP 的相对分子质量分布,测定结果总结于表 1。根
据各标准葡聚糖得到标准曲线,计算得出 DOP、SDOP、DADOP、CMDOP 相对分子质量分别为 0.96
× 106、1.82 × 106、0.83 × 106、2.09 × 106 Da。此外,观察 SDOP、DADOP 和 CMDOP 的检测信号发
现,SDOP 和 DADOP 均主要为单一峰,CMDOP 则具有三个峰,表明羧甲基化修饰过程中 DOP 发生
了较强烈的降解。

2.5 铁皮石斛多糖 DOP 化学修饰前后免疫活性测定
2.5.1 化学修饰衍生物对 RAW264.7 巨噬细胞增殖的影响
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CCK-8 实验结果(表 2)显示,与正常对照组相比,DOP、SDOP 和 DADOP 组均能显著促进
RAW264.7 细胞的增殖,且差异极显著(P < 0.01),而 CMDOP 则无显著差异,表明 DOP、SDOP、
DADOP 及 CMDOP 均无明显的细胞毒性作用。与 DOP 相比,SDOP 能够显著促进 RAW264.7 巨噬细
胞的增殖(P < 0.05),而 DADOP 及 CMDOP 均无明显促进作用,这可能与 SDOP 具有较高的硫酸取
代度有关[34]。其中,CMDOP 显著抑制了细胞的增殖作用(P < 0.01),推测这可能与 DOP 在羧甲基
化修饰过程中发生的强烈降解及相对分子质量显著增加有关。
表 2 化学修饰衍生物对 RAW264.7 细胞增殖的影响
Table 2 Effects of chemical modification polysaccharides from Dendrobium officinale on the proliferation in RAW264.7 cells
组分 剂量/mg·L- 1 增值率/%
NC - 100
DOP 40 147.55 ± 2.84 **
DADOP 40 151.61 ± 5.51**
SDOP 40 152.99 ± 2.96**,Δ
CMDOP 40 107.44 ± 3.67ΔΔ
LPS 1 181.83 ± 5.49**,ΔΔ
注:NC:正常对照组;**::与正常对照组相比,差异极显著,P < 0.01;Δ:与 DOP 组相比,差异显著,P < 0.05:
ΔΔ:与 DOP 组相比,差异极显著, P < 0.01。
2.5.2 化学修饰衍生物对 RAW264.7 巨噬细胞吞噬效应的影响
FITC-dextran 实验结果(图 2)表明,SDOP 和 CMDOP 对于 RAW264.7 巨噬细胞吞噬作用结
果与增殖作用相一致,分别能够显著的促进(P < 0.01)及抑制(P < 0.01)RAW264.7 巨噬细胞吞噬
作用,表明硫酸化修饰能够增强铁皮石斛多糖的免疫活性,而羧甲基化则抑制其活性的发挥。DADOP
细胞吞噬实验结果显示其能显著的增强 RAW264.7 细胞的吞噬作用(P < 0.05),表明脱乙酰化修饰能
够在一定程度上增强铁皮石斛多糖免疫活性。
(A)







 




 
 
 
 
 
 
 
 
LPS CMDOPSDOP
DADOP DOPNC
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(B)
NC DOP SDOP DADOP CMDOP LPS
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100









Ph
ag
oc
yt
os
is(
M
FI
v
al
ue
)
 
**::与正常对照组相比,差异极显著,P < 0.01;Δ:与 DOP 组相比,差异显著,P < 0.05:
ΔΔ:与 DOP 组相比,差异极显著, P < 0.01。
图 2 化学修饰衍生物对 RAW264.7 细胞吞噬 FITC-dextran 的影响。(A)吞噬能力。(B)平均荧光强度(MFI)。
Fig 2 Effects of chemical modification polysaccharides from Dendrobium officinale on the phagocytosis of FITC-dextran in
RAW264.7 cells。

3 结论
1)理化性质分析表明 DOP 糖含量较高,为 87,37%,而糖醛酸及蛋白质含量则较低,分别为 3.19%
和 0.51%。脱乙酰化修饰对其理化性质无显著改变,而羧甲基化及硫酸化则显著降低铁皮石斛多糖的
中性糖含量。
2)红外光谱分析表明成功制备出 3 种不同修饰方法的铁皮石斛多糖衍生物,其硫酸化取代度、
脱乙酰度及羧甲基化取代度分别为 1.13 ± 0.03、0.75 ± 0.02 和 0.52 ± 0.01,得率分别为 59.37%、71.31%
和 117.96%。
3)HPGPC 分析表明 DOP、SDOP、DADOP 和 CMDOP 相对分子质量分别为 0.96 × 106、1.82 × 106、
0.83 × 106、2.09 × 106 Da,其中 SDOP 和 CMDOP 相对分子质量发生显著变化。
4)体外细胞实验表明,硫酸化和脱乙酰化修饰能够增强铁皮石斛多糖的免疫活性,而羧基化修
饰降低了铁皮石斛多糖的免疫活性,与王雪松[35]的结果一致,表明不是所有的官能团接枝改性都会增
强其免疫活性的发挥。
本研究为铁皮石斛多糖今后的衍生化修饰以及提高免疫力方面提供了一定理论基础,但如何获得
高活性多糖衍生物以及修饰后铁皮石斛多糖的免疫调节机制还尚未明确,有待于进一步的深入研究。
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