全 文 ：江西农业学报 2011，23( 3) : 24 ～ 26
Acta Agriculturae Jiangxi
黄波斯菊试管苗开花技术研究
黄志明，刘才文
收稿日期:2010 －12 －20
基金项目:福建省莆田市科技计划资助项目( 2008N11) 。
作者简介:黄志明( 1952─) ，男，福建莆田人，副教授，主要从事花卉组织培养研究。
( 莆田学院 环境与生命科学系，福建 莆田 351100)
摘 要:不同基本培养基对黄波斯菊试管苗成花试验结果表明:黄波斯菊的种子用 0． 1%升汞消毒 8 min的效果最好，成
活率为 92% ;最佳的增殖培养基配方为MS +6 － BA 0． 2 mg /L + NAA 0． 02 mg /L +蔗糖 20 g /L +琼脂 10 g /L;芽苗在 1 /2 MS +
NAA 0． 2 mg /L + PP333 0． 5 mg /L +糖 20 g /L +琼脂 10 g /L培养基中培养，植株表现为矮壮、叶片呈浓绿色、根系发达。取健壮
的植株在改良 MS + PP333 0． 5 mg /L +6 － BA 1． 0 mg /L +糖 20 g /L +琼脂 10 g /L培养基上培养 35 ～45 d后即可开花。
关键词:黄波斯菊;试管苗;开花;培养基
中图分类号: S682． 31 文献标识码: A 文章编号: 1001 －8581( 2011) 03 －0024 －03
Studies on Flowering Technology of Test － tube Plantlets of Cosmos sulfureus
HUANG Zhi － ming，LIU Cai － wen
( Department of Environment ＆ Life Science，Putian University，Putian 351100，China)
Abstract: The flowering technology of test － tube plantlets of Cosmos sulfureus was studied in this paper． The results showed that
disinfecting the seeds of Cosmos sulfureus with 0． 1% HgCl2 for 8 minutes achieved the highest survival percentage ( 92% ) ． The best
proliferation medium was MS + 6 － BA 0． 2 mg /L + NAA 0． 02 mg /L + sucrose 20 g /L + agar 10 g /L． The 1 /2 MS basic medium
supplemented with NAA 0． 2 mg /L，PP333 0． 5 mg /L，sugar 20 g /L and agar 10 g /L was found to be the best for the development of
buds，producing short and strong seedlings with dense green leaves and thick roots． These strong seedlings went into blossom after 35
～45 days’culture on modified MS + PP333 0． 5 mg /L + 6 － BA 1． 0 mg /L + sugar 20 g /L + agar 10 g /L．
Key words: Cosmos sulfureus; Test － tube plantlet; Flowering; Medium
黄波斯菊( Cosmos sulfureus) 为菊科属一年生草本植
物，具有耐贫瘠、分枝较多、单叶对生、喜光、细茎直立的
特性，是国内外常用的景观草花种类之一［1］。广泛应用
于花境、花坛、花丛的栽植，还可用于室内或会场的布置，
制作花篮及插花、花束等。
近几年来，黄波斯菊已成为哈尔滨、长春等我国北
方城市的主要景观植物之一，并逐步向长江流域扩展，需
求量也越来越大。在传统的园艺栽培中，不仅存在品种
退化和繁殖系数低的问题，而且难以满足市场巨大的需
求。因此，应用现代组织培养技术不仅可以在一定程度
上解决这些问题，还有利于进一步提高黄波斯菊的经济
价值。但是，在对黄波斯菊组织培养的研究中，未发现对
黄波斯菊试管苗开花的研究。试管开花是指用组织培养
的方法，使植物的开花过程在培养容器中完成［2］。多数
研究表明，植物离体成花规律与整体成花规律基本相似，
而组织培养试管成花具有成花率高、重复性好、技术稳定
等优点而被大量用于成花研究［2］。但此研究首先应建
立稳定的组织培养试管成花试验系统，然后在此基础上
开展进一步的研究，对黄波斯菊组织培养试管开花的研
究不仅对成花研究起重要作用，同时也为目前市场上试
管开花的商品化研究提供了更广阔的前景［3，4］。本文通
过对黄波斯菊离体培养技术的研究，探讨了不同基本培
养基对黄波斯菊试管苗成花的影响。
1 材料与方法
1． 1 试验材料 黄波斯菊种子由福建厦门农友种苗有
限公司提供，用于培育无菌苗，取其芽段进行培养。
1． 2 试验方法 种子用 75%酒精浸泡 10 s，再用 0． 1%
升汞消毒不同的时间，无菌水冲洗 3 次。在超净工作台
上接种到MS + BA 1． 0 mg /L + NAA 0． 1 mg /L培养基上，
15 d后统计污染率和种子发芽率。当无菌苗长到 2 cm
以上时，取其中 1 cm芽段接种到采用正交设计方案配制
的 MS附加不同浓度的 6 － BA和 NAA的培养基上，培养
30 d后统计其增殖系数和平均芽高。在继代增殖 2 ～ 3
次后，再用 1 /2 MS培养基附加不同浓度的 PP333和 NAA
进行壮苗生根。取茎粗 0． 5 cm以上的无菌苗，切去根部
并分别接种到 MS、1 /2 MS、改良 MS( 提高 P、K 含量，减
少 N含量) 3 种不同的基本培养基上，并添加 PP333 0． 5
mg /L、6 － BA 1． 0 mg /L的诱导花芽分化培养基进行开花
试验。
培养基中每升添加 20 g蔗糖和 10 g琼脂，培养室条
件为:温度 24 ～26 ℃、光照 12 h /d、光照强度为 1500 lx。
2 结果与分析
2． 1 不同灭菌时间对黄波斯菊种子萌发的影响 设计
5种不同的灭菌时间，对黄波斯菊种子进行灭菌试验( 表
1) 。结果表明:灭菌时间越短，污染率越高，种子死亡率
越低;灭菌时间越长，污染率越低，种子死亡率越高。本
试验的最佳消毒时间为 8 min，萌发率达到 92%。
表 1 灭菌时间对黄波斯菊种子萌发的影响
灭菌时间
( min)
种子数
( 粒)
不萌发种子
( 粒)
染菌数
( 株)
萌发数
( 株)
染菌率
( % )
萌发率
( % )
6 25 0 15 10 60 40
7 25 0 8 17 32 68
8 25 1 1 23 4 92
9 25 11 0 14 0 56
10 25 21 0 4 0 16
2． 2 不同 6 －BA和 NAA浓度对黄波斯菊增殖的影响
将黄波斯菊无菌苗切成含顶芽 1． 0 cm的茎段，在添加
不同浓度的 NAA和 6 － BA的 MS 培养基中培养。接种
30 d后统计芽增殖倍数( 表 2) 。结果表明: BA浓度是影
响黄波斯菊增殖主要因子，其次是 NAA 浓度，而这两者
之间的交互作用几乎为零;而芽增殖的最佳培养基配方
为: MS +6 － BA 0． 2 mg /L + NAA 0． 02 mg /L。
2． 3 不同NAA浓度对黄波斯菊壮苗生根的影响 对试
管苗而言，苗长势的好坏与壮弱，会直接影响其观赏性以
及后期开花。为此，在1 /2 MS培养基中添加不同浓度的
NAA，并研究它们对黄波斯菊试管苗壮苗生根的影响，结
果见表 3。
表 2 6 －BA和 NAA浓度对黄波斯菊增殖的影响
试验号
6 － BA
( mg /L)
NAA
( mg /L) 6 － BA × NAA
芽增殖
( 倍)
1 0． 15 0． 01 1 1． 5
2 0． 15 0． 02 2 1． 8
3 0． 15 0． 03 3 1． 6
4 0． 20 0． 01 2 2． 1
5 0． 20 0． 02 3 2． 7
6 0． 20 0． 03 1 2． 4
7 0． 25 0． 01 3 1． 9
8 0． 25 0． 02 1 2． 2
9 0． 25 0． 03 2 1． 8
K1 1． 6 1． 8 2． 0
K2 2． 4 2． 2 1． 9
K3 2． 0 1． 9 2． 1
极差 R 0． 767 0． 400 0． 167
因素主→次 6 － BA→NAA→6 － BA × NAA
最优方案 6 － BA 0． 2 mg /L + NAA 0． 02 mg /L
注:培养基为 MS +琼脂 10 g /L。
表 3 NAA浓度对黄波斯菊壮苗生根培养的影响
NAA浓度
( mg /L)
接种数
( 株)
生根株数
( 株)
生根率
( % )
总生根数
( 条)
平均叶片数
( 片 /株)
平均株高
( cm) 苗生长状况
0 20 4 20 21 3． 2 0． 7 植株矮、茎纤细、叶小黄绿色、生长慢、根系少而短
0． 05 20 9 45 63 5． 7 2． 1 植株较矮、茎纤细、叶小淡绿色、生长速度较慢、根系较少较短
0． 10 20 13 65 81 7． 5 2． 8 植株茎较细、叶较大绿色、生长速度较快、根系较密、较长
0． 15 20 17 85 121 10． 2 3． 9 植株粗壮、叶大浓密绿色、生长速度快、根系发达
0． 20 20 14 70 87 6． 6 3． 0 植株较矮、茎较粗、叶较大绿色、生长速度较快、根系较密、较长
注:培养基为 1 /2 MS + PP333 0． 5 mg /L +蔗糖 20 g /L +琼脂 10 g /L。
由表 3 可以得出，在 NAA 的 5 种浓度中，以 0． 15
mg /L NAA的效果最好，对诱导苗的生根、株高、枝叶的
效果是最好的，其植株粗壮、枝叶浓密绿色，生长速度快，
根系发达( 图 1) 。这种植株适合于试管苗花芽分化和
开花。
图 1 黄波斯菊芽苗的壮苗生根
2． 4 不同基本培养基对黄波斯菊开花率的影响 将经
过壮苗后的植株转接到含有 PP333 0． 5 mg /L、6 － BA 1． 0
mg /L的 4 种不同基本培养基中( 表 4) ，培养 25 ～ 30 d
后，部分植株顶芽开始形成花蕾，10 ～ 15 d 开花( 图 2) 。
在培养室的条件下，花期在 70 ～80 d之间。试验结果表
明:磷、钾含量提高或氮含量减少都可使开花率有所提
高，即改良 MS培养基的开花率为 53． 3%，均比 MS和 1 /
2 MS培养基的开花率高。因此，最佳的开花培养基配方
为改良 MS + PP3330． 5 mg /L +糖 20 g /L +琼脂 10 g /L。
表 4 不同培养基对黄波斯菊试管苗开花的影响
培养基类型 接种数( 株) 开花数( 株) 开花率( % )
MS 30 0 0
1 /2 MS 30 7 23． 3
改良 MS 30 16 53． 3
3 小结与讨论
黄波斯菊作为重要的花卉品种之一，市场的需求量
很大。不仅花朵漂亮能作为观赏花，还具有重要的药用
523 期 黄志明等:黄波斯菊试管苗开花技术研究
价值。本文对试管苗繁殖和开花技术进行了研究，但仍
有很多机理尚未明了［5］。相信组织培养未来在我国会
有更大的发展，在农业、制药业、加工业等方面将会发挥
更大的作用，创造出更大的经济效益。
图 2 黄波斯菊试管苗的开花
组织培养应用于试管花卉生产，可制成清洁、美观、无
须管理的玻璃瓶花卉，成为美化居室的一种商品，同时产
生较高的经济效益［4］。目前，世界各国对花卉生物技术展
开了广泛的研究，给花卉产业注入了巨大的活力，试管花
卉必将受到消费者的青睐，因而具有广阔的发展前景。
通过对黄波斯菊的组织培养的研究，笔者认为，要
做好黄波斯菊的试管苗培育，必须注意以下几个方面的
工作: ( 1) 种子的选取和消毒的彻底性是试验成功的关
键。无菌技术包括植物材料( 外植体) 的消毒灭菌和培
养基消毒灭菌。对试验材料进行表面灭菌时，一方面要
考虑植物材料的耐受能力，另一方面还要考虑药剂的消
毒效果，不同材料、不同药剂，甚至不同器官应区别对待。
本试验选用饱满健康的种子为试验材料得出最佳的消毒
方案: 0． 1%升汞灭菌 8 min。( 2) NAA能促进细胞分裂、
诱导愈伤组织的形成，6 － BA 可促进细胞分裂和生根
等［6 ～8］，培养基中的生长素和细胞分裂素的比率合适与
否是决定生芽和壮苗生根的关键。提高细胞分裂素的质
量浓度，有利于芽的形成;提高生长素质量浓度，有利于
根的形成。以 MS为基本培养基添加不同的细胞分裂素
和生长素组合来看，最佳的增殖培养基为 MS + 6 － BA
0． 2 mg /L + NAA 0． 02 mg /L +蔗糖 20 g /L +琼脂 10 g /
L。从不同浓度的 NAA 对黄波斯菊的壮苗生根情况来
看，最佳的壮苗生根培养基为 1 /2 MS + NAA 0． 15 mg /L
+ PP333 0． 5 mg /L +糖 20 g /L +琼脂 10 g /L。( 3) 最佳的
开花培养基配方为改良 MS + PP333 0． 5 mg /L + 6 － BA
1． 0 mg /L +糖 20 g /L +琼脂 10 g /L。
参考文献:
［1］华夏．波斯菊花木盆景［J］．花卉园艺，2003( 5) : 18．
［2］房立晶，白志川，刘世尧．试管开花生物技术研究概况［J］．南
方农业，2007( 3) : 72 ～74．
［3］桂仁意．石竹试管苗成花调控及其机理［J］．南京林业大学学
报，2000，24( 4) : 28 ～31．
［4］何建锋，余沛涛．何氏凤仙试管苗诱导开花［J］．上海师范大学
学报，1998，27( 3) : 89 ～90．
［5］潘瑞炽．植物组织培养［J］．植物生理，2001，10( 3) : 256 ～257．
［6］王蒂．细胞工程学［M］．北京:中国农业出版社，2007: 40 ～41．
［7］潘永飞，戴忠良，潘叶飞，等．不同播种期对波斯菊观赏价值的
影响［J］．江西农业学报，2009，21( 4) : 45 ～47．
［8］金研铭，徐惠风，李艳．阿特拉津和汞胁迫对波斯菊种子萌发
及生长的影响［J］．安徽农业科学，2010，38( 7) :
櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗櫗
3384 ～3385．
(上接第 23页)
3． 4 红叶石楠的节水灌溉水平 由蒸散规律可得，灌溉
水平 3、灌溉水平 4的总蒸散量、最高总蒸散量与灌溉水
平 1差异达到显著水平;由植物长势分析可得，第一阶段
灌溉水平 2 ～灌溉水平 4可以满足红叶石楠的观赏要求
而减少养护次数，第二阶段灌溉水平 3、灌溉水平 4 可以
满足要求。因此综合可得，红叶石楠的节水灌溉水平为
灌溉水平 3、灌溉水平 4。
参考文献:
［1］郭安军，屠梅曾．城市水资源可持续消费对策研究［J］．消费经
济，2002，18( 3) : 13 ～15．
［2］沈小倩，李彦清，张茂红．城市水资源可持续利用的思考［J］．
东北水利水电，2002，20( 1) : 29 ～30．
［3］刘九庆．植物需水状况的精密诊断分析技术［J］．森林工程，
2004，20( 5) : 22 ～24．
［4］袁小环，段留生，孙璐，等． 4种宿根花卉北京地区水分蒸散规
律与节水灌溉［J］．中国农业大学学报，2007，12( 6) : 1 ～5．
［5］胡继超，张佳宝，冯杰．蒸散的测定和模拟计算研究进展［J］．
土壤，2004，36( 5) : 492 ～497．
［6］王笑影．农田蒸散实测方法研究进展［J］．农业系统科学与综
合研究，2004，20( 1) : 27 ～30．
［7］赵炳祥，陈佐忠，胡林，等．草坪蒸散研究进展［J］．生态学报，
2003，23( 1) : 148 ～157．
［8］张萌，秦俊，刘庆华，等．可移动式垂直绿化栽培介质研究［J］．
江西农业学报，2009，21( 1) : 35 ～39．
［9］胡林，边秀举．草坪科学与管理［M］．北京:中国农业大学出版
社，2009: 125 ～128．
［10］Allen R G，Pereira L S，Raes D，et al． Crop evapotranspiration
guidelines for computing crop waterrequirements［R］． Rome:
FAO Irrigation and Drainage Paper，1998: 56．
［11］赵燕东，章军富，尹伟伦，等．按植物需求精准节水灌溉自动
调控系统的研究［J］．节水灌溉，2009( 1) : 11 ～14．
62 江 西 农 业 学 报 23 卷