全 文 ：文章编号:1673-2995(2008)01-0009-03 ·论　著 ·
越桔提取物对学习记忆障碍小鼠影响的研究
陈　英 ,王强凤 ,阮陈虹 ,娄泗文 ,任　旷＊ ,沈　楠＊ ,范红艳＊　(吉林医药学院 ,吉林 吉林　132013)
摘　要:目的　研究越桔提取物(BEP)对戊巴比妥钠所致小鼠学习记忆获得障碍的影响。方法　取 60只小
鼠随机分为 6组 ,每组 10只 ,分别为正常对照组 、模型组 、人参总皂苷(50mg/kg)组和 BEP(100、200、400 mg/
kg)组。灌胃 21 d后制备学习记忆障碍模型 ,除正常对照组外分别 i.p.15mg/kg戊巴比妥钠 。采用 Moris水
迷宫测定越桔提取物对小鼠学习记忆的影响;然后检测脑组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、和胆
碱脂酶(CHE)的含量及活性。结果　对戊巴比妥钠所致学习记忆获得障碍小鼠 , 100 mg/kgBEP有显著的改
善作用 , 200、400 mg/kgBEP有改善作用 ,而且可减少小鼠脑中 MDA的含量 、提高 SOD及 CHE活性。结论　
BEP对戊巴比妥钠所致小鼠学习记忆获得障碍有改善作用。
关　键　词:越桔提取物;学习记忆;丙二醛;超氧化物歧化酶;胆碱脂酶
中图分类号:R338.64　　　文献标识码:A
Efectsofbilberryextractpowderonlearningandmemoryimpairmentin
mice
CHENYing, WANGQiang-feng, RUANChen-hong, LOUSi-wen, RENKuang＊ , SHENNan＊ , FANHong-yan＊　(Ji-
linMedicalColege, JilinCity, JilinProvince, 132013, China)
Abstract:Objective　TostudytheefectsofBEPonimpairmentoflearningandmemoryinmiceinducedbysodium
pentobarbital.Methods　Sixtymicewererandomlydividedinto6 groups(n=10).Group4 ～ 6weretreatedwithex-
tractedbilberypowder(100, 200, 400mg/kg)byig.eachdayfor21d, whilegroup1 ～ 2weretreatedwithig.normal
salineandgroup3wastreatedwithig.TotalSaponininPanaxGinsen(50mg/kg).Themodeloflearningandmemory
impairmentwasmadebyig.15mg/kgsodiumpentobarbital.Then, efectsofBEPonlearningandmemoryinmicewere
testedbyMoriswater-maze.MicebrainsweredissectedoutafterMorriswater-mazeexperimenttodetectthelevelof
MDA, theactivityofSODandCHE.Results　Thelearningandmemoryabilitiesofmiceimpairedbysodiumpento-
barbitalwereremarkablyimprovedafter100mg/kgBEPtreatment, thelearningandmemoryabilitiesofmiceimpaired
bysodiumpentobarbitalwereimprovedafter200 and400mg/kgBEPtreatment.ThelevelofMDAwasreduced, the
activityofSODandCHEincreasedinmicethatlearningandmemorywasimpairedbysodiumpentobarbital.Conclu-
sion　BEPcanimprovelearningandmemoryabilitiesofthemiceimpairedbysodiumpentobarbital.
Keywords:BEP;learningandmemory;superoxidedismutase;malondialdehyde;cholinesterase
　　越桔类植物属杜鹃花科越桔属 ,含多种活性成
分 ,如维生素 C、E、A及 SOD、熊果甙 、花青苷 、类黄酮
等;其中花青苷含量每 100 g高达 163 mg,因而在抗
衰老 、增强心血管功能 、明目 、消炎抑菌 、增强机体免
疫力及抗癌抗肿瘤等方面发挥着重要作用 [ 1-4] 。
指导教师:任旷 、沈楠 、范红艳.
作者简介:陈　英(1984-),女(汉族),在读本科.
　　越桔中的花青素抗自由基氧化能力是维生素 C
的 20倍 、维生素 E的 50倍 ,尤其是在体内活性 ,更是
其它抗氧化剂无法比拟的 。其机制可能与其能降低
细胞内活性氧化物水平 、进而抑制神经细胞凋亡有
关 [ 5] 。研究发现越桔对与衰老有关的瞬间失忆症有
明显的改善和预防作用 ,并能够增加记忆力 [ 6] 。
越桔提取物(BEP)是从越桔果实中提取的以越
桔原花青素为主的混合物。目前 ,关于越桔原花青素
—9—第 29卷　第 1期2008年 02月 　　吉　林　医　药　学　院　学　报Journal　of　Jilin　Medical　Colege　　Vol.29　No.1Feb.2008 　　
对小鼠学习记忆损伤的影响尚未见文献报道 ,本研究
观察 BEP对小鼠学习记忆能力的影响 。
1　材料与方法
1.1　材料与仪器
　　BEP(含越桔原华精素 25.52%)购自吉林省宏
久生物科技股份有限公司 ,批号:20061101;戊巴比妥
钠系市售;MDA、SOD、CHE、蛋白质含量检测试剂盒
购自南京建成生物工程研究所;Morris水迷宫。
1.2　动物分组与给药
　　纯种昆明小鼠(吉林医药学院动物实验中心提
供)60只 ,雌雄不限 ,体重为 (22±2)g,随机分为 6
组 ,每组 10只 ,即正常对照组 ,模型组 ,人参总皂苷阳
性对照 组 , BEP 100、 200、 400 mg/kg组 [ 7-8] 。 按
0.02ml/g给小鼠分别灌胃 ,各 BEP组按剂量 ,正常对
照组和模型组为等量生理盐水 ,阳性对照组给 50 mg/
kg人参总皂苷 , 21 d后制备学习记忆障碍模型 。除
正常对照组外 ,各组小鼠于 Moris水迷宫训练的开始
2 d在训练前 30 min按 15 mg/kg静脉注戊巴比妥
钠 。
1.3　水迷宫法检测学习记忆能力
　　灌胃 21 d造模后 ,开始用 Morris水迷宫测试 ,实
验分为定位航行试验和空间探索试验 2个阶段 [ 9] 。
定位航行实验历时 4 d,每只小鼠在每个时段测
试 4次 ,每次从 4个不同的方向放入水中 ,记录小鼠
每次自入水直至找到并爬上平台所需的时间 ,即逃避
潜伏期 ,如 60s找不到平台即记录为 60 s。计算每天
各组 4次逃避潜伏期的平均值 ,以此作为判断小鼠学
习能力的指标。
第 5天撤走平台开始空间探索实验。任选一点
将小鼠放入水中 ,通过电脑测试系统记录小鼠在
1 min内的游泳轨迹 ,测量 1 min内小鼠穿越原平台
位置次数及小鼠在原平台象限的游泳时间 ,以此作为
判断小鼠记忆能力的指标。
1.4　脑中 MDA含量及 SOD、CHE活性测定
　　Moris水迷宫结束后 , 处死小鼠 , 迅速取脑 、称
重 ,冰浴下用生理盐水制成 10%匀浆。用 MDA、
SOD、CHE试剂盒法分别检测脑中 MDA含量及
SOD、CHE活性 ,同时用考马斯亮兰试剂盒检测蛋白
质含量。
1.5　数据处理
　　用统计软件 SPSS11.0进行 t检验处理 。
2　结　果
2.1　BEP对小鼠学习记忆获得障碍的影响
　　逃避潜伏期实验中 ,随着训练天数的增加 ,各实
验组潜伏期均不断缩短 。第 1天除正常对照组 、BEP
400 mg/kg组与模型组相比有差异(P<0.05)外 ,其
它各组与模型组相比无差异;第 2天开始 ,人参总皂
苷组和 BEP100 mg/kg与模型组相比有显著差异
(P<0.01), 其它各组与模型组相比有差异 (P<
0.05),见表 1。其他各组与模型组相比 ,在穿越平台
次数和在原平台游泳时间上都有所增加 ,经统计分析
有差异 ,见表 2。
2.2　BEP对小鼠脑中 MDA含量 、SOD和 CHE恬性
的影响
　　BEP对戊巴比妥钠致学习记忆获得障碍小鼠脑
中 MDA含量 、SOD和 CHE恬性的影响见表 3。表 3
显示 ,模型组中 MDA含量高于正常对照组 , SOD和
CHE活性低于正常对照组 ,经统计分析有差异;与模
型组相比 , BEP的 3个剂量均可拮抗戊巴比妥钠引起
的小鼠脑中 MDA含量的升高及 SOD活性的降低 ,
100及 200 mg/kgBEP可拮抗戊巴比妥钠引起的小
鼠脑中 CHE活性的降低。
表 1　小鼠 Morris水迷宫潜伏期的比较( x±s, s)
组　别 n 第 1天 第 2天 第 3天 第 4天
正常对照组 10 43.21±7.35＊ 34.70±9.76＊ 23.20±8.72＊ 16.74±4.72＊
模型组 9 53.02±3.78 51.16±8.10 42.53±14.51 30.82±10.50
人参总皂苷组 10 48.98±5.22 　 32.23±5.83＊＊ 20.50±4.85＊＊ 　 12.91±2.64＊＊
BEP100mg/kg组 10 49.10±5.24 　 36.73±7.24＊＊ 20.11±7.77＊＊ 　 15.20±3.93＊＊
BEP200mg/kg组 10 55.21±3.00 38.75±9.20＊ 25.59±12.70＊ 15.77±3.89＊
BEP400mg/kg组 10 40.81±9.63＊ 　 33.40±8.72＊＊ 24.79±7.41＊ 16.80±9.75＊
　　与模型组比较 , ＊:P<0.05, ＊＊:P<0.01
—10— 吉林医药学院学报　2008年 02月　第 29卷
3　讨　论
　　学习记忆过程伴随着复杂的神经生理和生化变
化 ,中枢神经递质在信息的获得 、储存 、保持及再现等
学习记忆过程中起着重要作用。机体在正常代谢中 ,
产生许多自由基 ,它们可诱发机体内不饱和脂肪酸的
一系列脂质氧化连锁反应 ,造成生物膜结构和功能损
伤 ,还会使 DNA发生氧化破坏或交联 ,使核酸变性 ,
扰乱 DNA的正常复制与转录 ,加速细胞的衰老。同
时 ,机体内又存在着自由基防御系统 ,如超氧化物歧
化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、GSH-Px等 ,保护机
体免受损伤[ 10-11] 。
表 2　小鼠穿越平台次数和在原平台游泳时间( x±s, n=10)
组　别 穿越平台次数(次) 在原平台游泳时间(S)
正常对照组 1.88±1.05＊ 　 24.60±1.97＊＊
模型组 0.75±0.59 17.81±3.56
人参总皂苷组 　 1.92±0.69＊＊ 22.10±2.91＊
BEP100mg组 2.30±1.07＊ 　 27.02±3.77＊＊
BEP200mg组 1.88±1.64＊ 　 27.03±4.41＊＊
BEP400mg组 2.22±1.14＊ 24.31±0.80＊
　　与模型组比较 , ＊:P<0.05, ＊＊:P<0.01
表 3　BEP对学习记忆获得障碍小鼠脑中 MDA含量 、SOD和 CHE恬性的影响( x±s, n=10)
组　别 MDA(nmol/mgprot) SOD(U/mgprot) CHE(U/mgprot)
正常对照组 0.760±0.143＊ 79.896±17.169＊ 14.423±2.171＊
模型组 1.065±0.271 58.935±10.516 10.362±3.160
人参总皂苷组 0.675±0.153＊ 81.875±9.559＊ 11.117±2.486
BEP100mg/kg组 　 0.666±0.057＊＊ 115.086±20.730＊＊ 14.922±4.331＊
BEP200mg/kg组 0.725±0.131＊ 141.996±17.582＊＊ 16.267±5.386＊
BEP400mg/kg组 0.778±0.076＊ 112.331±16.986＊＊ 12.654±1.530
　　　　　　　　　与模型组比较 , ＊:P<0.05, ＊＊:P<0.01
　　本实验结果表明 , BEP对戊巴比妥钠所致学习记
忆获得障碍型小鼠在 Moris水迷宫的测试中 ,可缩短
逃避潜伏期 ,增加在原平台所在象限的游泳时间和穿
越原平台的次数 ,提示 BEP对戊巴比妥钠所致小鼠
学习记忆障碍有改善作用;BEP能降低戊巴比妥钠所
致学习记忆障碍小鼠脑中的 MDA含量 ,不同程度升
高戊巴比妥钠所致学习记忆障碍小鼠脑中 SOD、CHE
活性。本研究结果提示 BEP具有改善小鼠学习记忆
能力的作用 ,这可能与越桔中原花青素具有提高小鼠
脑内抗氧化能力以及提高小鼠脑内胆碱能神经元的
功能有关 ,关于其确切的作用机制 ,有待进一步研究 。
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(收稿日期:2007-10-16)　　
—11—第 1期　陈　英 , 等.越桔提取物对学习记忆障碍小鼠影响的研究