全 文 ：ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ　ｏｆ　ｃａｒｄｉａｃ　ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｙ［Ｊ］．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ　Ｒｅｓ，２０１０，６１
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ｎａｔａｌ　ｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ　ｍｙｏｃｙｔｅｓ　ａｎｄ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ［Ｊ］．Ｍｏｌ　Ｃｅｌ　Ｂｉｏ－
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［收稿日期］２０１３－１０－２４
［基金项目］山东省优秀中青年科学家科研奖励基金（编号：ＢＳ２００９ＳＷ０４１）和高等学校博士学科点专项科研基金（编号：２０１０３７３１１２０００４）　
［作者简介］刘玉红，女，博士，副教授，研究方向：天然药物活性成分与质量控制，电话：０５３１－８９６２８１７３，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｉｕｙｕｈｏｎｇｗｕ＠１２６．ｃｏｍ
茶藨子木层孔菌多糖硫酸酯的制备与体外抗肿瘤活性
刘玉红　 （山东中医药大学药学院药物化学系，山东 济南２５０３５５）
［摘要］　目的：制备茶藨子木层孔菌多糖硫酸酯，研究其体外的抗肿瘤活性，并与茶藨子木层孔菌多糖比较。方法：采用氯磺
酸－甲酰胺法进行硫酸化，采用 ＭＴＴ法检测对人卵巢癌细胞ＳＫＯＶ－３和人乳腺癌细胞 ＭＤＡ２３１的影响。结果：制备了３种茶
藨子木层孔菌多糖硫酸酯，硫取代度分别为１．４８，１．８３和２．２３，其红外光谱中均具有ＳＯ和Ｃ－Ｏ－Ｓ的伸缩振动峰。茶
藨子木层孔菌多糖对肿瘤细胞无明显的影响，而其硫酸酯可以抑制ＳＫＯＶ－３和 ＭＤＡ２３１细胞的生长。结论：成功制备了没有
降解的３种硫酸酯，茶藨子木层孔菌多糖经硫酸化后对于肿瘤细胞的抑制作用增强。
［关键词］　茶藨子木层孔菌多糖；硫酸化；抗肿瘤
［中图分类号］Ｒ２８５．６　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１－５２１３（２０１４）０７－０５０９－０４　ＤＯＩ：１０．１３２８６／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｈｉｎｈｏｓｐｐｈａｒｍａｃｙｊ．２０１４．０７．０２
Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓ　ｒｉｂｉｓ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｓｕｌｆａｔｅｓ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ
ＬＩＵ　Ｙｕ－ｈｏｎｇ（Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｓｈａｎｄｏｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈａｎｄｏｎｇ　Ｊｉｎａｎ
２５０３５５，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｔｏ　ｐｒｅｐａｒｅ　Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓ　ｒｉｂｉｓ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ　ｓｕｌｆａｔｅｓ（ＰＲＰ－Ｓ）ａｎｄ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅｉｒ　ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ
ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓ　ｒｉｂｉｓ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ（ＰＲＰ）ｉｎ　ｖｉｔｒｏ．ＭＥＴＨＯＤＳ　ＰＲＰ－Ｓ　ｗａｓ　ｐｒｅｐａｒｅｄ　ｂｙ　ｃｈｌｏｒｏｓｕｌｆｏｎｉｃ　ａｃｉｄ－ｆｏｒ－
ｍａｍｉｄｅ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｎ　ｈｕｍａｎ　ｏｖａｒｙ　ｃａｎｃｅｒ　ＳＫＯＶ－３ｃｅｌｓ　ａｎｄ　ｈｕｍａｎ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ＭＤＡ２３１ｃｅｌｓ　ｗｅｒｅ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｉｎ
ｖｉｔｒｏ　ｂｙ　ＭＴＴ　ｍｅｔｈｏｄ．ＲＥＳＵＬＴＳ　Ｔｈｅ　ｄｅｇｒｅｅｓ　ｏｆ　ｓｕｌｆａｔｅ　ｏｆ　ｔｈｒｅｅ　ｓｕｌｆａｔｅｄ　ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ　ｗｅｒｅ　１．４８，１．８３ａｎｄ　２．２３，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．
Ｔｗｏ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ　ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ　ｂａｎｄｓ（ＳＯ　ａｎｄ　Ｃ－Ｏ－Ｓ）ａｐｐｅａｒｅｄ　ｉｎ　ＦＴ－ＩＲ　ｓｐｅｃｔｒａ．ＰＲＰ　ｈａｄ　ｎｏ　ｏｂｖｉｏｕｓ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｎ　ｔｕｍｏｒ
ｃｅｌｓ，ｈｏｗｅｖｅｒ　ＰＲＰ－Ｓ　ｅｘｈｉｂｉｔｅｄ　ｍｕｃｈ　ｓｔｒｏｎｇｅｒ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ａｇａｉｎｓｔ　ＳＫＯＶ－３ａｎｄ　ＭＤＡ２３１ｃｅｌｓ　ｇｒｏｗｔｈ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ　
ＰＲＰ－Ｓ　ｗａｓ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｙ　ｗｉｔｈｏｕｔ　ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ．ＰＲＰ－Ｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｎ　ＳＫ－
ＯＶ－３ｃｅｌｓ　ａｎｄ　ＭＤＡ　２３１ｃｅｌｓ　ｉｎ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｎａｔｉｖｅ　ｎｏｎ－ｓｕｌｆａｔｅｄ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ．
·９０５·中国医院药学杂志２０１４年４月第３４卷第７期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ａｐｒ　２０１４，Ｖｏｌ　３４，Ｎｏ．７
ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ：Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓ　ｒｉｂｉｓ　ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ；ｓｕｌｆａｔｉｏｎ；ａｎｔｉｔｕｍｏｒ
　　一些多糖的活性与其中是否含有某些化学基团
有密切的关系，而这些化学基团可通过人为的化学
反应来添加和消除。将多糖进行衍生化，如硫酸化、
羧甲基化、乙酰化等，可以改变多糖的电荷性质和空
间构型，从而改变或提高多糖的生物活性。所以，多
糖的结构修饰已成为提高多糖活性和研究多糖构效
关系的有力手段，也是发现和研制多糖类药物的重
要途径。
硫酸酯化多糖或称多糖硫酸酯是多糖大分子链
中单糖分子的某羟基被硫酸根所取代而形成的一类
多功能生理活性物质。除已发现的抗凝作用外，近
年来不断发现硫酸酯化多糖具有其他多种生物活
性，如增强机体免疫功能、抗肿瘤、抗病毒等，使硫酸
酯化多糖的研究成为多糖研究领域内的一个新热
点［１－５］。
茶藨子木层孔菌多糖（ＰＲＰ）为从药用真菌茶藨
子木层孔菌中分离得到的一个葡聚糖，相对分子质
量为８．５９ｋＤａ［６］。为新发现的先导化合物，鉴于多
糖硫酸酯广泛的生物活性，我们对ＰＲＰ进行了硫酸
化结构修饰，并研究了其体外的抗肿瘤活性。
１　材料
１．１　仪器　ＮＥＸＵＳ　４７０ＦＴ－ＩＲ　Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ（美
国尼高力）；５１５型高效液相色谱仪、２４１０示差折光
检测器、Ｕｌｔｒａｈｙｄｒｏｇｅｌ　２５０凝胶色谱柱（美国 Ｗａ－
ｔｅｒｓ公司）；Ｐｅｒｋｉｎ－Ｅｌｍｅｒ　２４００元素分析仪（美国
Ｐｅｒｋｉｎ－Ｅｌｍｅｒ公司）；ＷＺＺ－１自动指示旋光仪（上
海物理光学仪器厂）；ＦＤ－１Ｃ－５５型冷冻干燥机
（北京博医康实验仪器有限公司）；ＣＯ２恒温培养箱
（美国ＴｈｅｒｍｏＦｏｒｍａ公司）；Ｍｏｄｅｌ　６８０型酶联免疫
检测仪（美国Ｂｉｏ－Ｒａｄ公司）。
１．２　试药　无水甲酰胺（北京益利精细化学品有限
公司，批号２００９１００８）；氯磺酸（上海金山亭新化工
试剂厂，批号２０１１０３１２）；５－氟尿嘧啶（５－ＦＵ）（上海
旭东海普药业有限公司，批号２０１１０８０７）；ＲＰＭＩ－
１６４０培养基（Ｇｉｂｃｏ公司）；标准胎牛血清（天津市灏
洋生物制品科技有限责任公司）；噻唑蓝（ＭＴＴ）
（Ｓｉｇｍａ公司）；人卵巢癌细胞ＳＫＯＶ－３和人乳腺癌
细胞 ＭＤＡ２３１（山东大学药理教研室）；茶藨子木层
孔菌采集于济南历城山区，由山东中医药大学生药
学教研室徐凌川教授鉴定。
２　方法
２．１　茶藨子木层孔菌多糖的制备［６］　将茶藨子木
层孔菌粗粉加６倍量水，９０℃提取４次，每次６ｈ。
纱布过滤，滤液合并，减压浓缩至一定体积，加４倍
量无水乙醇，离心，收集沉淀，用胰蛋白酶和Ｓｅｖａｇ
法联合去蛋白后，获得茶藨子木层孔菌总多糖。总
多糖依次用体积分数为５０％和８０％乙醇分级沉淀，
其中８０％乙醇沉淀组分上ＤＥＡＥ－纤维素层析柱，
依次用纯化水和不同浓度的 ＮａＣｌ溶液分步洗脱，
其中纯化水洗脱液上Ｓｕｐｅｒｄｅｘ　３０层析柱，苯酚－硫
酸法检测，收集主要洗脱峰，冷冻干燥，得到茶藨子
木层孔菌多糖纯品（ＰＲＰ）。ＰＲＰ冻干物为白色絮
状固体，无臭，无味，有引湿性，苯酚－硫酸法测得其
中多糖含量为９７．３％。高效凝胶渗透色谱法测定，
示差折光检测ＰＲＰ为单一对称峰，经与系列葡聚糖
标准品对照，测得其相对分子质量为８．５９ｋＤａ。
２．２　茶藨子木层孔菌多糖硫酸酯的制备　采用氯
磺酸－甲酰胺法［７］制备。甲酰胺适量，冰浴搅拌下缓
慢滴加氯磺酸，控制温度２５～３０℃。改变氯磺酸和
甲酰胺的比例分别为１∶４，１∶２和１∶１．５，得３种磺化
试剂。
称取多糖ＰＲＰ样品２００ｍｇ，加入甲酰胺２ｍｌ，
６０℃恒温水浴下搅拌溶解。置于冰浴中，在８０ｒ·
ｍｉｎ－１转速搅拌下缓慢滴加上述磺化试剂２ｍｌ，控
制温度在２５℃左右，滴加速度为８滴／ｍｉｎ。滴加
完毕后于３０℃搅拌反应６ｈ。反应结束后，用饱和
ＮａＯＨ调ｐＨ至中性。加４倍量无水乙醇，产生沉
淀，经１２ｈ后，离心，离心机半径１５ｃｍ，转速为
３　０００ｒ·ｍｉｎ－１，离心１０ｍｉｎ，收集沉淀，用无水乙醇
洗涤，纯化水溶解后超滤（相对分子质量２　０００Ｍｗ）
４８ｈ除盐及小分子，收集脱盐后的样品溶液，用
０．４５μｍ微孔滤膜过滤，冷冻干燥，上述３种磺化试
剂分别获得３种不同硫酸化程度的茶藨子木层孔菌
多糖硫酸酯 ＰＲＰ－Ｓ１、ＰＲＰ－Ｓ２ 和 ＰＲＰ－Ｓ３ （简称
ＰＲＰ－Ｓ）。
２．３　纯度鉴别与分子量测定　采用高效凝胶渗透
色谱法（ＨＰＧＰＣ）。流动相为２．８４％硫酸钠水溶液，
样品浓度为１０ｍｇ·ｍｌ－１，进样量２５μｌ，流速０．５ｍｌ
·ｍｉｎ－１。标准品为系列标准右旋糖酐，相对分子质
量１８０，２　５００，４　６００，７　１００，１０　０００，２１　４００Ｄａ。
２．４　硫酸基取代度测定　采用元素分析法测定［８］。
设硫酸化衍生物中Ｓ的取代度为ＤＳ（指平均每个单
糖残基上所取代的Ｓ的个数），则 ＤＳ＝（１２×６×
Ｓ％）／（３２×Ｃ％），Ｓ％和Ｃ％分别代表Ｓ和Ｃ元素
的相对百分含量。
２．５　旋光度测定　配制１ｍｇ·ｍｌ－１的水溶液，于自
·０１５· 中国医院药学杂志２０１４年４月第３４卷第７期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ａｐｒ　２０１４，Ｖｏｌ　３４，Ｎｏ．７
动指示旋光仪上测定旋光度，计算比旋度［α］ｔＤ＝
１００α
ｌｃ
。［α］：比旋度；Ｄ：钠光谱的Ｄ 线；ｔ：测定时的
温度；ｌ：测定管长度，ｄｍ；ｃ：每１００ｍｌ溶液中含有被
测物的重量（ｇ）。
２．６　红外光谱分析　以 ＫＢｒ压片，在４　０００～５００
ｃｍ－１范围内对其进行红外光谱扫描。
２．７　体外抗肿瘤活性测定　采用 ＭＴＴ法进行测
定［９－１０］。取对数生长期的肿瘤细胞（本实验选择人
卵巢癌ＳＫＯＶ－３和人乳腺癌 ＭＤＡ２３１两种细胞
株），胰酶消化收集细胞，用含１０％胎牛血清的ＲＭ－
ＰＩ－１６４０培养基调整细胞浓度，计数，以每孔２．５×
１０４个细胞接种于９６孔培养板中，每孔体积１８０μｌ，
３７℃，５％ＣＯ２培养箱培养２４ｈ后，加入２０μｌ不同
浓度（１００，２５０，５００μｍｏｌ·Ｌ
－１）的样品溶液，使终浓
度分别为１０，２５，５０μｍｏｌ·Ｌ
－１，ＰＲＰ－Ｓ１、ＰＲＰ－Ｓ２和
ＰＲＰ－Ｓ３均设置以上３种浓度。同时设空白对照组
（加２０μｌ培养液）、阳性对照组（５－ＦＵ，加２０μｌ，质
量浓度２５０μｇ·ｍｌ
－１），每一浓度６个复孔。培养４４
ｈ后，吸弃上清，加入８０μｌ新鲜培养液，然后每孔加
入５ｍｇ·ｍｌ－１的 ＭＴＴ　２０μｌ，继续培养４ｈ，仔细吸
去上清，每孔加入１５０μｌ二甲亚砜，轻轻振荡以使
甲瓒完全溶解，用酶联免疫检测仪测吸光值（测定波
长５７０ｎｍ，参比波长６３０ｎｍ）。
细胞抑制率（％）＝（１－
实验孔平均值
对照孔平均值
）×１００％
３　结果
３．１　ＰＲＰ－Ｓ的制备和特征　通过改变磺化试剂中
氯磺酸与甲酰胺的比例，成功制备获得了３种不同
硫酸基取代度的ＰＲＰ－Ｓ（ＰＲＰ－Ｓ１、ＰＲＰ－Ｓ２和ＰＲＰ－
Ｓ３），以所得产品ＰＲＰ－Ｓ的质量除以反应所投物料
ＰＲＰ的质量计算产率，结果见表１。经 ＨＰＧＰＣ测
定，以示差折光监测器检测，ＰＲＰ－Ｓ均出现一个单
一的对称峰，说明其均一性良好。通过与标准相对
分子质量的葡聚糖比较，测得ＰＲＰ－Ｓ１、ＰＲＰ－Ｓ２和
ＰＲＰ－Ｓ３的平均相对分子质量分别为１９．９７，２１．８５
和２３．３１ｋＤａ；元素分析结果测定硫酸基的取代度
分别为１．４８，１．８３和２．２３，说明在硫酸化过程中，多
糖基本没有出现降解。
３．２　ＰＲＰ－Ｓ的红外光谱分析　ＰＲＰ－Ｓ的红外光谱
见图１，与ＰＲＰ相比，ＰＲＰ－Ｓ１、ＰＲＰ－Ｓ２和 ＰＲＰ－Ｓ３
在１　２５４ｃｍ－１和８１１ｃｍ－１处均明显的多出了２个
峰，分别为ＳＯ和Ｃ－Ｏ－Ｓ的伸缩振动峰，说明
经过硫酸化反应，硫酸根已经结合在糖链上［１１－１２］。
并且随着硫酸化程度的提高，１　２５４ｃｍ－１处的Ｓ
Ｏ峰有强度增加的趋势。
图１　ＰＲＰ与ＰＲＰ－Ｓ的红外光谱
Ａ．ＰＲＰ；Ｂ．ＰＲＰ－Ｓ１；Ｃ．ＰＲＰ－Ｓ２；Ｄ．ＰＲＰ－Ｓ３
Ｆｉｇ　１　ＩＲ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　ＰＲＰ　ａｎｄ　ＰＲＰ－Ｓ
Ａ．ＰＲＰ；Ｂ．ＰＲＰ－Ｓ１；Ｃ．ＰＲＰ－Ｓ２；Ｄ．ＰＲＰ－Ｓ３
３．３　ＰＲＰ－Ｓ的体外抗肿瘤作用　不同浓度的ＰＲＰ
体外对人卵巢癌细胞 ＳＫＯＶ－３和人乳腺癌细胞
ＭＤＡ２３１的增殖无明显的影响，其硫酸化衍生物
ＰＲＰ－Ｓ对这两种肿瘤细胞株均表现出了明显的抑
制作用，按所述公式计算抑制率结果见表２。ＰＲＰ－
Ｓ１、ＰＲＰ－Ｓ２和ＰＲＰ－Ｓ３在实验浓度下对２种肿瘤细
胞的抑制均具有显著性意义，并且呈现剂量依赖性。
从表２中还可以看出，随着硫酸化程度的提高，
ＰＲＰ－Ｓ对肿瘤细胞的抑制作用呈递升的趋势。说
明ＰＲＰ经硫酸化后，对肿瘤细胞的直接杀伤作用明
显提高。
表２　ＰＲＰ－Ｓ体外对肿瘤细胞的抑制率（％）
Ｔａｂ　２　Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ＰＲＰ－Ｓ　ａｇａｉｎｓｔ　ｔｕｍｏｒ　ｃｅｌｓ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ
（％）
细胞株 样品浓度／ｍｍｏｌ·Ｌ－１　ＰＲＰ－Ｓ１ ＰＲＰ－Ｓ２ ＰＲＰ－Ｓ３　５－ＦＵ
ＳＫＯＶ－３　 １０　 １７．８　 ２５．７　 ２８．９　 ４８．５
２５　 １６．３　 ２９．２　 ３４．３
５０　 ２１．７　 ３０．７　 ４０．４
ＭＤＡ２３１　 １０　 １３．１　 ２８．９　 ３２．９　 ５７．１
２５　 ２４．２　 ３３．４　 ３９．８
５０　 ２９．０　 ３７．９　 ４５．４
表１　ＰＲＰ－Ｓ的特征
Ｔａｂ　１　Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　ＰＲＰ－Ｓ
产品 氯磺酸∶甲酰胺 产率／％ 相对分子质量／ｋＤａ 比旋度／°
元素分析／％
Ｃ　 Ｈ　 Ｓ
取代度
ＰＲＰ－Ｓ１　 １∶４　 １２８　 １９．９７ ＋２．６０　 １９．３９　 ３．６３　 １２．７９　 １．４８
ＰＲＰ－Ｓ２　 １∶２　 １４７　 ２１．８５ －２．５４　 １７．０６　 ３．２２　 １３．８７　 １．８３
ＰＲＰ－Ｓ３　 １∶１．５　 １５９　 ２３．３１ －３．９７　 １４．７８　 ３．２０　 １６．６３　 ２．２３
·１１５·中国医院药学杂志２０１４年４月第３４卷第７期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ａｐｒ　２０１４，Ｖｏｌ　３４，Ｎｏ．７
４　讨论
相对分子质量对多糖的生物活性具有一定的影
响。用氯磺酸－吡啶法进行硫酸化时，多糖的降解经
常发生［１３－１４］。有研究［１５］报道，反应温度是影响多糖
降解的重要因素，并且一个合适的反应溶剂可以阻
止降解的发生。本实验成功制备得到了ＰＲＰ的硫
酸酯衍生物而没有降解，可能与选用甲酰胺作为溶
剂、并且反应温度比较温和（３０℃）有关。
多糖经硫酸化后，阴离子的引入导致空间结构
的变化，可以影响多糖的活性或产生新的活性。
ＰＲＰ对肿瘤细胞无明显的影响，而经硫酸化后可以
显著抑制肿瘤细胞的生长，说明硫酸基的引入可以
导致多糖ＰＲＰ体外抗肿瘤活性的产生，其体内的抗
肿瘤作用实验正在进一步研究中。
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［收稿日期］２０１３－０９－０４
［基金项目］广东省自然科学基金项目（编号：Ｓ２０１２０４０００６８６９）；广东省医学科研基金项目（广东省卫生厅 Ａ２０１２２７３）；广州市科技计划项目
［穗科信字（２０１３）１６６号，２０１３Ｊ４１００１０２］　［作者简介］罗江秀，女，本科，主管药师，电话：０７５５－２７５４８７１３，Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｕｏｊｉａｎｇｘｉｕ１９７５＠１６３．ｃｏｍ　
［通讯作者］夏承来，副教授，博士，硕士研究生导师，研究方向：抗炎免疫药理学，电话：０２０－８１２９２７０９，Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｉａｃｈｅｎｇｌａｉ＠１２６．ｃｏｍ
蒲公英对Ｌｅｗｉｓ肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织干扰素－γ表达的影响
罗江秀１，钟超１，夏承来２　 （１．深圳市光明新区人民医院药剂科，广东 深圳５１８１０６，２．广州医科大学附属第三医院药学
部，广东 广州５１０１５０）
［摘要］　目的：研究蒲公英对Ｌｅｗｉｓ肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织干扰素－γ（ＩＦＮ－γ）表达的影响。方法：建立肺癌荷瘤小鼠动物模
型，处死小鼠，采用 Ｗｅｓｔｅｒ　ｂｌｏｔ和ＲＴ－ＰＣＲ研究不同质量浓度（０，３１．３，６２．５，１２５，２５０，５００ｍｇ·ｍｌ－１）的蒲公英以及５００ｍｇ·
ｍｌ－１蒲公英在不同时间（０，１２，２４，４８ｈ）对肺癌组织ＩＦＮ－γ表达的影响。结果：随着蒲公英质量浓度和作用时间的增加，肺癌
组织ＩＦＮ－γ表达降低。结论：蒲公英对Ｌｅｗｉｓ肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织ＩＦＮ－γ表达呈现明显的时效－量效关系，提示蒲公英对
Ｌｅｗｉｓ肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织的抑制作用和ＩＦＮ－γ有关。
［关键词］　蒲公英；干扰素－γ；Ｌｅｗｉｓ肺癌荷瘤小鼠；肺癌
［中图分类号］Ｒ２８５．５　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１－５２１３（２０１４）０７－０５１２－０４　ＤＯＩ：１０．１３２８６／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｈｉｎｈｏｓｐｐｈａｒｍａｃｙｊ．２０１４．０７．０３
Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｄａｎｄｅｌｉｏｎ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＩＦＮ－γｉｎ　ｔｈｅ　Ｌｅｗｉｓ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｓ　ｏｆ　ｍｉｃｅ
ＬＵＯ　Ｊｉａｎｇ－ｘｉｕ１，ＺＨＯＮＧ　Ｃｈａｏ１，ＸＩＡ　Ｃｈｅｎｇ－ｌａｉ　２（１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ　ｏｆ　Ｇｕａｎｇｍｉｎｇ　Ｎｅｗ　Ｄｉｓｔｒｉｃｔ　Ｐｅｏｐｌｅ’ｓ
Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　Ｓｈｅｎｚｈｅｎ　５１８１０６，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｔｈｅ　Ｔｈｉｒｄ　ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ　Ｍｅｄｉｃａｌ
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ　Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ　５１０１５０，Ｃｈｉｎａ）
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ　Ｉｄｅｎｔｉｆｙ　ｔｈｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｄａｎｄｅｌｉｏｎ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＩＦＮ－γｉｎ　ｔｈｅ　Ｌｅｗｉｓ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｓ　ｏｆ　ｍｉｃｅ．
·２１５· 中国医院药学杂志２０１４年４月第３４卷第７期Ｃｈｉｎ　Ｈｏｓｐ　Ｐｈａｒｍ　Ｊ，Ａｐｒ　２０１４，Ｖｏｌ　３４，Ｎｏ．７