全 文 ：下 , 先水解成单糖分子 ,并迅速脱水生成糖醛衍生物 ,糖醛衍生物
再与苯酚形成有色化合物 ,在 490nm处有特征性吸收峰。
目前对黄芪多糖的研究较为充分 ,黄芪多糖粉针剂已作为抗
癌辅助药应用于临床 ,然而针对黄芪多糖的微波辅助提取研究较
少。本实验中比较了加热回流法与微波辅助提取法提取黄芪多
糖 , 发现在黄芪多糖提取率接近的情况下 , 微波辅助提取法较加
热回流提取法的提取时间缩短了将近 8倍。实验中使用单因素
考察法考察了微波功率与提取时间对黄芪多糖的影响 ,初步确定
了提取工艺的参数。在今后的研究还要使用正交设计法考察各
因素协同对黄芪多糖提取的影响 ,并研究微波辅助提取法对黄芪
中其它成分提取的影响。
参考文献:
[ 1 ] 　陈阿琴 ,杨志刚 ,俞颂东 , 等.黄芪多糖药理作用研究进展 [ J] .中
国兽药杂志 , 2005, 39(9):33..
[ 2 ] 　段亚丽 ,谢梅冬.黄芪化学成分及其有效成分黄芪甲苷含量测定
的研究现状 [ J] .中国兽药杂志 , 2005, 39(3):35.
[ 3 ] 　ShaoBM, XuW, DaiH.Astudyontheimmunereceptorsforpolysac-
charidesfromtherootsofAstragalusmembranaceusm, aChineseme-
dicinalherb[ J].BiochemBiophysResCommun, 2004, 20(4):1103.
收稿日期:2007-07-20;　修订日期:2007-11-23
基金项目:国家中医药管理局课题民族项目(04-05ZM01);
广西科技厅攻关项目(桂科攻 0235022-4);
广西教育厅课题(桂教科研 [ 2003] 22号)
作者简介:周吴萍(1979-),女(仫佬族), 广西宜州人, 现任广西工学院讲
师 ,硕士学位 ,主要从事中药成分分析及质量研究工作.
＊通讯作者简介:甄汉深(1950-), 男(汉族),广东台山人 , 现任广西中医
学院教授 ,博士生导师 ,主要从事中药分析 、药物分析工作.
气相色谱 -质谱联用法测定不同
产地苦玄参中有机磷农药残留
周吴萍1 , 岑菲菲 2 , 甄汉深2＊
(1.广西工学院 ,广西 柳州　545006;　2.广西中医学院 ,广西 南宁　530001)
摘要:目的 测定广西不同产地苦玄参中 5种有机磷农药残留量。方法 以混合溶剂超声提取 ,提取物通过活性炭净化后
进行气相色谱-质谱联用(GC-MS)测定。结果 5种农药回收率在 72% ～ 108%之间 , RSD<12%。农药的最低检测限在
0.51 ～ 1.27μg/kg之间 。 5种产地药材中有机磷农药残留均未超过国家标准。结论 GC-MS内标法测定苦玄参药材中的
农药残留 , 方法简便快速 、可靠 、灵敏度高 , 可作为有机磷农药残留的定性定量方法。
关键词:气相色谱 -质谱联用法;　有机磷农药;　苦玄参
中图分类号:R288　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2008)04-0786-02
AnalysisofOrganophosphorousPesticideRemainsinDifferentOriginofPicriafel-terrae
Lour.byGC-MS
ZHOUWu-ping1 ,CENFei-fei2 ,ZHENHan-shen2＊
(1.GuangxiUniversityofTechnology, Liuzhou, Guangxi, 545006, China;2.GuangxiTraditionalChinese
MedicalUniversity, Nanning, Guangxi, 530001, China)Abstract:ObjectiveTodeterminetheresidueoffiveorgarophosphorouspesticidesindiferentoriginofPicriafel-terrae
Lour..MethodsUltrasonicwavewasusedtoextractmulti-pesticides.Aftercleanedupwithactivecarbon, theextractionwas
readyforGC-MSanalysis.ResultsTherecoveriesoffiveorganophosphorouspesticideswerebetween72% ～ 108%, withRSD
<12%.TheLODswereintherangeof0.51 ～ 1.27μg/kg.Theirresiduesoforganophosphoruspesticidesdidntexceednational
standard.ConclusionTheGC-MSmethodhasadvantagesoftimesaving, convenience, sensitivity.Itcanbeusedforqualita-
tiveandquantitativeanalysisofresiduesoforganophosphorouspesticidesinPicriafel-terraeLour.
Keywords:GC-MS;　Organophosphoruspesticides;　Picriafel-terraeLour
　　有机磷农药在我国的使用已有三十多年历史 ,其品种和用量
目前仍居各类农药之首 [ 1] 。中药材在未按 GAP要求进行规范化
种植前 , 药农曾有滥施农药的现象 , 致使农田土壤及中药材中农
残含量超标 , 对中药的污染很严重 , 制约了我国中药材产品的质
量 , 严重地影响到用药的安全性。
苦玄参为广西地道药材 ,来源于玄参科植物苦玄参 Picriafel
-terraeLour.的干燥全草 [ 2] ,在广西作药用历史已久 , 也是多种
中成药的原料 , 市场需求量大。为了解苦玄参药材农药污染情
况 , 为中药使用的安全可控提供科学依据 , 以广西特产药材苦玄
参为研究对象 , 用气相色谱 -质谱联用法(GC-MS法)测定苦玄
参药材中有机磷农药残留量。
1　仪器与材料
Agilent6890N/5973N气相色谱 -质谱联用仪(美国安捷伦
公司), HP-5MS(30m×0.25μm×0.32mm)弹性石英毛细管柱
(美国安捷伦公司), AE100型电子分析天平(梅特勒 -托利多仪
器有限公司)。
苦玄参分别采于广西龙州 、梧州 、苍梧 、平乐 、宁明县 ,经广西
中医学院药学院刘寿养副教授鉴定为玄参科植物苦玄参 Picria
fel-terraeLour.)干燥的全草 ,粉碎 , 过 2号筛 ,备用。
丙酮 、石油醚(60 ～ 90℃)均为分析纯(中国医药集团上海化
学试剂公司),重蒸后使用;水为超纯水;活性炭储存于密闭容器
中备用;过滤滤纸用丙酮浸泡 、干燥后使用 ;5种农药标准品乙酰
甲胺磷 、甲拌磷 、杀螟硫磷 、毒死蜱均购自迪马公司 , 纯度 >95%,
甲基 -对硫磷(G23010-92)国标液(农业部环保科研监测所研
制)。内标磷酸三丁酯为分析纯(广东汕头市西陇化工厂)。
2　方法与结果
2.1　色谱条件 进样口温度 250℃, 程序升温:100℃(2 min)※
10℃/min※ 200℃(5 min)※ 2℃/min※ 210℃post280℃(4 min),
接口温度 280℃,载气为 He, 柱流量为 1.0ml/min, 进样方式为脉
冲不分流进样(0.75min后开分流阀), 进样体积为 1μl。
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时珍国医国药 2008年第 19卷第 4期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2008VOL.19NO.4　
质谱条件:电子能量 70ev,气体压力为 0.5 kPa, 质量扫描范
围为 30～ 500amu, 选择离子(SIM)采集各有机磷农药离子碎片。
结果见表 1。
表 1　GC-MS-SIM法测定 5种有机磷农药的开始采集时间和监测离子
农药名称 开始采集时间 t/min 检测离子 /m· z-1
乙酰甲胺磷 4 42, 94, 136＊　
磷酸三丁酯 11.5 155, 211, 99＊　
甲拌磷 12.5 121, 97, 75＊　
甲基 -对硫磷 16 125, 263, 109＊　
杀螟硫磷 17 109, 125, 277＊　
毒死蜱 18 97, 258, 197＊　
　　＊为定量离子
2.2　实验溶液的制备
2.2.1　对照品液的制备 分别精密称取对照品乙酰甲胺磷 10.13
mg,甲拌磷 10.38mg, 杀螟硫磷 10.13 mg, 毒死蜱 10.23 mg,甲基
对硫磷国标液(100 μg/ml)2 ml置 10 ml量瓶中 , 用丙酮定容至
刻度 , 摇匀 , 分别制得乙酰甲胺磷储备液 、甲拌磷储备液 、杀螟硫
磷储备液 、毒死蜱储备液 、甲基对硫磷储备液。
2.2.2　混合母液的制备 精密量取上述乙酰甲胺磷储备液 0.5
ml、杀螟硫磷储备液 0.3ml,甲基对硫磷储备液 8 ml、其余储备液
各 0.2 ml,置 10 ml量瓶中 , 用丙酮稀释至刻度 , 即得混合对照品
母液。
2.2.3　内标液的制备 精密称取磷酸三丁酯 1 mg, 置于 500 ml
量瓶中 , 加丙酮稀释至刻度 , 摇匀 , 得浓度为 2 μg/ml的内标储
备液。
2.2.4　供试品溶液的制备 精密称取苦玄参药材粗粉 2g, 置 100
ml锥形瓶中 , 加入石油醚 -丙酮(2∶1)20 ml, 置冰浴中超声处
理 10min,滤过 , 滤渣及滤器用石油醚 -丙酮(2∶1)10 ml洗涤 ,
合并滤液 , 置 50 ml烧杯中 , 用空气流浓缩至约 15 ml,加入 0.2 g
活性炭 ,放置 5 min,振摇数次 , 直至颜色变浅 , 滤过 , 用提取溶剂
洗涤滤渣及滤器 , 合并滤液 , 在滤液中精密加入 20 μl内标储备
液 , 用氮气吹干 , 再精密加入丙酮 2ml溶解 ,备用。
2.3 　标准曲线与检测限 分别精密吸取混合对照品母液 0.07,
0.1, 0.5, 1, 1.5 ml置 2 ml量瓶中 , 逐个精密加入内标储备液 20
μl,用丙酮稀释至刻度并摇匀。分别取 1μl进样 ,按上述色谱 -
质谱条件进行测定 ,每种浓度的标准品液连续进样 2次。以各农
药定量离子峰面积与内标定量离子峰面积的比值为纵坐标(Y),
标准品的进样量为横坐标(X), 进行线性回归 , 制作标准工作曲
线。以信噪比(S/N)=3为衡量指标 , 考察 5种农药的检测限。
结果见图 1和表 2。
图 1　农药与内标物的总离子流图
表 2　各农药标准曲线 、相关系数 、线性范围以及最小检出限
农药名称 保留时间 t/min 线性方程 Y r 线性范围 m/μg 检出限 C/μg· kg-1
乙酰甲胺磷 9.94 5.400×10-2X-1.35×10-2 0.992 1.75～ 37.95 1.27
甲拌磷 13.01 3.830×10-1X-4.72×10-2 0.998 0.73～ 15.57 0.52
甲基对硫磷 16.36 4.580×10-2X-8.07×10-3 0.996 0.56～ 12.0 0.56
杀螟硫磷 17.63 4.125×10-2X-1.16×10-2 0.997 1.06～ 22.79 0.76
毒死蜱 18.68 2.605×10-1X-3.94×10-2 0.992 0.72～ 15.35 0.51
2.4　精密度实验 取制作标准曲线中间浓度的对照品溶液 , 连续
进样 5次 ,按 “ 2.1”色谱条件分别测定农药峰面积与内标峰面积 ,
计算其比值 , 得到乙酰甲胺磷 、甲拌磷 、甲基对硫磷 、杀螟硫磷 、毒
死蜱的 RSD分别为 5.5%, 1.9%, 4.5%, 4.2%, 3.1%。
2.5　加样回收率 精密称取同一产地苦玄参药材粉末 10份 ,每 5
份分别精密加入混合农药对照品溶液 0.1, 0.5 ml, 混匀 , 挥干。
按上述样品处理及测定方法操作 , 计算加样回收率。 结果见
表 3。
表 3　 5种有机磷农药的添加回收率
农药
名称
原有量
m/μg
水平 1
加入量 m/μg 平均回收率(%) RSD(%)
水平 2
加入量 m/μg 平均回收率(%) RSD(%)
乙酰甲胺磷 0 5.065 85.57 12.0 25.33 91.51 6.1
甲拌磷 0 2.076 90.17 5.8 10.38 88.34 3.3
甲基对硫磷 0 1.6 72.25 3.8 8.00 75.80 2.5
杀螟硫磷 0 3.039 84.70 8.3 15.20 108.35 8.6
毒死蜱 0 2.046 89.25 3.9 10.23 90.34 5.0
　　n=5
2.6　样品农药残留量测定 采用上述方法对 5个产地苦玄参的
有机磷农药残留量进行测定 ,结果均未检出有机磷农药。
3　讨论
用 GC-MS内标测定方法同时测定 5种有机磷农药 , MS检
测器选择性较高 , 在对农药的定性定量方面是其他检测器无法相
比的。内标法克服了 GC-MS外标法中进样量 、样品分析过程仪
器状态不稳定引起的响应值变化等系统误差 ,重复性好。
在广西 5个产地的苦玄参药材中没有检出有机磷农药残留 ,
但这并不能说明种植过程中没有使用过有机磷农药 ,由于有机磷
农药化学结构中多含有酯键 ,不稳定 , 易受热 、酸 、碱影响而降解 ,
不易长期残留 , 故在药材中检出较少 [ 3 , 4] 。但在一些药材产区 ,
由于农药的滥用 、误用或采收时间不当 [ 5] ,均有可能造成有机磷
农药的残留。因此 , 仍应建立其测定方法 , 以保证中药材在使用
时有机磷农药不超标。
参考文献:
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[ 2 ] 　广西壮族自治区卫生厅.广西中药材标准 [ S].南宁:广西科学技术
出版社 , 1992:225.
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药学学报 , 2002, 18(1):56.
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2008VOL.19NO.4 时珍国医国药 2008年第 19卷第 4期