全 文 ：天山瓦韦总黄酮成分的含量测定
阿衣木姑·阿布拉 ,苏力坦·阿巴白克力＊(新疆大学生命科学与技术学院 , 新疆 乌鲁木齐 830046)
摘要:目的:对天山瓦韦总黄酮成分进行含量测定。方法:以芦丁为标样 , 用分光光度法测定不同溶剂和不同时间条件下的
总黄酮含量。结果:天山瓦韦中黄酮类化合物提取的最佳条件为:75%的乙醇 , 抽提 3.5h ,总黄酮含量为 3.20%。
关键词:天山瓦韦;总黄酮;芦丁;分光光度法
中图分类号:TS201.21　　文献标识码:A　　文章编号:1004-311X(2007)04-0066-02
Quantitative Determination of the Total Content of Flavonoids in the
Phytopreparation Lepisorus albertii Ching
Ayimgul ABLA , Sultan ABABAKRI＊
(College of Life Science and Technology , Xinjiang University , Urumqi 830046 , China)
Abstract:Objective:The study was quantitative determination of the total content of flavonoids in Lepisorus albertii Ching.Methods:Quantita-
tive determination of the total content of flavonoids in the phytopreparation Lepisorus albertii Ching was performed in different solvents and different
time by spectrophotometric technique , using rutin as a standard.Results:The optimum condition for extracting was:75% ethanol as solvent , ex-
tracting time was 3.5hours , and total content of flavonoids was 3.20%.
Key words:Lepisorus albertii Ching;total flavonoids;rutin;spectrophotometric technique
收稿日期:2007-04-13;修回日期:2007-05-24
作者简介:阿衣木姑·阿布拉(1980-)女 ,在读硕士生 ,专业方向:生化
制药 , E-mai l:Ayimgul-80@tom.com;＊通讯作者(Corresponding au-
thor):苏力坦·阿巴白克力(1958-)男 ,副教授 ,硕士生导师 , 研究植物
生理生化 , E-mail:sultan816@163.com , Tel:0991-8582901。
　　天山瓦韦(Lepisorus albertii Ching)属于蕨类植物水龙骨科
(Polypodiaceae)瓦韦属(Lepisorus)植物。天山瓦韦(Lepisorus al-
bertii Ching)富含活性成分如酚类 、黄酮类及甾体与三萜类化合
物等 ,还含有昆虫变态激素:蜕皮松 、蜕皮甾酮 、β -谷甾醇等
特有成分[ 1 ,2] 。天山瓦韦(Lepisorus albertii Ching)具很高的药用
价值 ,全草或叶入药 , 清热利湿 、利尿通淋 ,止血活血 , 常用于
治疗痢疾 , 咳嗽吐血 , 跌打损伤可用于抗菌 、消炎以及心血管
等系统疾病治疗[3] 。在国外 1996 年韩国人报道了从 L.ussu-
riensi 中分离一个新的类黄酮二糖苷黄酮醇(1)和 3-甲基乙醚
葡糖苷槲皮素(quercetin)牡荆素 、荭草苷 、高圣草酚醚葡糖苷
等4 种黄酮[4] 。1999 年又报道了一种新的类固醇糖苷 , 从瓦
韦的 ussuriensis种中被分离 , 并用分光光度和化学方法来鉴定
了它们的结构[ 5] 。在我国 , 瓦韦属的研究主要在瓦韦属植物
的分类学 、地理分布区 、外部形态和内部 解剖等方面。但有关
瓦韦属有效成分分析方面的报道几乎没有。本研究对天山瓦
韦所含的黄酮成分(芦丁)做了初步的定性分析和定量测定 ,
为充分利用这一植物资源提供科学依据。
1　材料与方法[ 6]
1.1　材料
1.1.1　实验材料
2005年 9月在新疆乌鲁木齐米泉林场铁厂镇哈熊沟采
集。并鉴定所采集的标本为水龙骨科瓦韦属植物天山瓦韦地
上部位。
1.1.2　试剂
芦丁对照品;亚硝酸钠 、硝酸铝 、氢氧化钠 、石油醚 、乙醇
等均为分析纯。
1.1.3　仪器
752紫外光栅分光光度计;旋转蒸发仪;索氏提取器;电子
天平。
1.2　实验方法
1.2.1　波长的选择
准确称取20mg芦丁(120℃烘至恒重)置于 100mL容量瓶
中 ,用 95%的乙醇溶解并定容。准确吸取 25ml于 50mL 容量
瓶中 ,用 95%乙醇定容至 50mL。精密吸取 3.0mL加 95%乙醇
使成 5mL。然后分别加入 5% NaNO2 溶液 0.3mL , 摇匀 , 放置
6min ,再加 10% Al(NO3)3 溶液0.3mL , 摇匀 , 放置 6min;加 4%
NaOH溶液 4mL , 用蒸馏水稀释至 10mL , 放置 15～ 20min , 扫描
最佳波长。
1.2.2　标准曲线的制作
上述 50mL 溶液精密吸取 0.0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、
4.0mL、5.0mL分别置 10mL的具塞试管中 , 各加95%乙醇使成
5mL ,然后分别加入 5% NaNO2 溶液 0.3mL, 摇匀 ,放置 6min;再
加 10% Al(NO3)3溶液 0.3mL ,摇匀 , 放置 6min;加 4% NaOH 溶
液 4mL ,用蒸馏水稀释至 10mL ,放置 15 ～ 20min ,在最佳波长处
测定吸光度。
1.2.3　提取溶剂的选择
准确称量样品 5g , 共 5 份 , 分别置于索氏提取器中 , 各加
入 80mL石油醚 , 回流提取到无色为止 , 放冷 , 分别装入索氏提
取器中 ,加入水 、95%、75%的乙醇 、丙酮 、甲醇 ,回流提取到无
色为止(大约 6h),将提取液过滤于 100mL 容量洗涤液过滤于
上述容量瓶中瓶中 , 洗涤 , 并用相应的提取溶剂稀释至刻度。
精密吸取上述提取液 2mL置于 10mL 刻度试管。按 1.2 方法
显色。空白每次取样 2mL。在显色反应之前应要系统检识黄
酮类化合物。
1.2.4　提取时间的选择
精确称取样品 6g , 共 6份 , 各加入 80mL石油醚 , 回流提取
到无色为止 , 放冷 ,分别装入索氏提取器用 80mL 的 75%乙醇
回流提取 2h、2.5h 、3h 、3.5h、4h 、4.5h , 将提取液过滤于 100mL
容量瓶中 ,洗涤 , 洗涤液过滤于上述容量瓶中 , 并用相应的提
取溶剂稀释至刻度。按 1.4 方法显色 ,空白对照同上。测定总
黄酮含量。
2　结果与讨论
2.1　用分光光度法扫描芦丁的最佳波长为 494nm(图 1)
图 1　最佳波长的选择
Figure 1　Selection of optimum wave length
第 17卷第 4 期:66
2007 年 8 月 　　　　　　　　　　　　　　　　
生　物　技　术
BIOTECHNOLOGY
　　　　　　　　　　　　　　　　　Vol.17 , No.4:66
Aug.2007
DOI :10.16519/j.cnki.1004-311x.2007.04.036
2.2　用 1.2.2 方法在 494nm 测定了芦丁的吸光度(表1)
表 1　不同芦丁浓度的吸光度
Table 1　Absorbance of different concentrations of rutin
试管号 1 2 3 4 5 6
体积(mL) 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0
浓度(mg ml) 0.00 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05
吸光度A 0.00 0.090 0.180 0.291 0.389 0.484
　　经统计处理得回归方程:A=9.6114C-0.0016(C 为芦丁
浓度mg/ mL , A为吸光度), r=0.9993 ,由α=0.01 , f=6-2=4 ,
查表 r0.01=0.9172<0.9993 , 故相关显著。
2.3　最佳溶剂的选择
经HCI-Mg反应 , 与碱反应 ,铅盐沉淀反应 AICI3反应检识 ,
从而得知天山瓦韦地上部位有中可能含有黄酮类 、二氢黄酮
类 、黄酮醇类 、二氢黄酮醇类。结果表明:75% 乙醇提取液黄
酮含量较高 。因此本实验用 75% 乙醇作为提取溶剂。 黄酮
含量测定(图 2)。
图 2　最佳溶剂的选择
Figure 2　Selection of optimum solvent
2.4　提取时间的选择
按 1.2.4方法得到结果表明 , 提取时间 3.5h 时黄酮含量
较高(见图 3)。
3　讨论
由检测结果表明 , 天山瓦韦植物地上部位中可能含有黄
酮类 、二氢黄酮类 、黄酮醇类 、二氢黄酮醇类。黄酮类化合物
提取的最佳条件为:75%的乙醇 , 提取 3.5h。总黄酮含量为
3.20%。
图 3　提取时间的选择
Figure 3　Selection of optimum extract ing time
3.1　按参考文献[ 7]与同一科(水龙骨科)植植物与天山瓦韦
所含的总黄酮相比 , 总黄酮含量差异不大。
3.2　在国内外 ,这方面的研究主要集中在水龙骨科的系统学
分类 , 分类学研究和结构等方面的研究。而在瓦韦属化学成
分 、药理学方面的研究几乎没有。 这需要我们对瓦韦属化学
成分 、药理学方面进一步更深刻研究。
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心草中总黄酮含量的测定及其提取工艺研究
买合布白·阿不都热依木 ,艾克白尔 ,库尔班尼莎 ,阿不都拉·阿巴斯＊(新疆大学生命科学与技术学院 , 新疆 乌鲁木齐 830046)
摘要:目的:测定心草中的总黄酮含量并确定其提取条件。方法:采用分光光度法测定 、乙醇浸提法提取心草中的总黄酮。
结果:浸提的最佳条件是:A3B1C3D2 , 即用 20 倍 50%乙醇在 70℃下进行 6h , 总黄酮含量为 15.675%。 平均加样回收率为 97.
67%。结论:心草中的总黄酮含量较高 , 此方法简便 、快速 、重现性好 , 可作为检测心草中黄酮含量的一种手段。
关键词:心草;总黄酮;分光光度法;乙醇浸提法
中图分类号:TS207.3　　文献标识码:A　　文章编号:1004-311X(2007)04-0067-03
Determination and Extraction Studing of the Content of Total Flavones
in Pleurospermum lindleyanum
Mahbuba ABDUREYIM ,Akbar ,Kurbannisa ,Abdulla ABBAS＊(Life Sciences and Technology College of Xinjiang University , Urumqi 830046 , China)
Abstract:Objective:Determine the content of total flavones in Pleurospermum lindleyanum and confirm the extraction condition.Methods:Spec-
trophotometric determination , Ethanol immersion extraction was used to extract flavonoid compounds.Results:The optimum condition of extraction
was 70℃and 1:20 of 70% ethanol extract 6h.the flavones content was 15.675% at optimum condition.and the recovery rate was 97.67% re-
spectively.Conclusion:The flavones content of Pleurospermum lindleyanum was quite high and the method is simple , repid , reproducible and
suitable for the determination of total flavones in Pleurospermum lindleyanum.
Key words:Pleurospermum lindleyanum ;total flavones;spectrophotometry;ethanol immersion
收稿日期:2007-02-19;修回日期:2007-04-16
作者简介:买合布白·阿不都热依木(1983-),女 ,硕士生 , 从事植物有
效成分分析 , E-mail:mahbubam @126.com;＊通讯作者:阿不都拉·阿
巴斯(1951-),男 ,教授 ,博士生导师 ,从事资源植物学研究 , E-mail:
abdulla@xju.edu.cn。
　　心草又名天山梭子芹[ Pleurospermum lindleyanum(Lipsky)B.
Fedt sch.] 为伞形科(Umbelliferae)多年生草本植物。全草入药 ,
用于治疗肝炎 、高血压 、冠心病 、神经性头痛 、暑热 、高山型头
痛 、各种高山反应及胆 、肾结石等[ 1] 。黄酮类化合物是广泛存
在于自然界的一大类化合物 。作为一种功能成分 , 具有增强
第 17卷第 4 期:67
2007 年 8 月 　　　　　　　　　　　　　　　　
生　物　技　术
BIOTECHNOLOGY
　　　　　　　　　　　　　　　　　Vol.17 , No.4:67
Aug.2007