全 文 ：华西药学杂志W CJ· PS 2009, 24(4)：391 ～ 393
基金项目:全军中医药研发推广项目(2006032001);甘肃省科技攻关项目(2GS054-A43-014-14)
作者简介:尚小飞(1986-),男 ,甘肃平凉 ,正攻读药理学专业的硕士学位。
＊通讯作者(Correspondentauthor), Email:limaox2005@yahoo.com.cn
独一味与糙苏中环烯醚萜苷类成分的比较
尚小飞 1, 2 ,李茂星2 ,樊鹏程 2 ,尉丽力 2 ,张汝学2 ,贾正平 1, 2＊
(1.兰州大学生命科学学院 ,甘肃 兰州 730000;2.兰州军区兰州总医院 ,甘肃 兰州 730050)
摘要:目的 比较独一味与糙苏中的环烯醚萜苷类成分。方法 采用 TLC法鉴别独一味与糙苏药材中的环烯醚萜苷类成
分 , 建立 HPLC法测定其中的 8-乙酰氧基山栀子苷甲酯的含量 。结果 糙苏及独一味均含有大量的环烯醚萜苷类成分 ,两
者根部具有十分相似的薄层色谱图 、地上部分及根部中 8-乙酰氧基山栀子苷甲酯的含量分别为 17.41、0.5、6.81、 8.50 mg·
g-1。结论 独一味根与糙苏根中含有相近的环烯醚萜苷类成分。
关键词:环烯醚萜甘;独一味;糙苏;薄层色谱;高效液相色谱法;8-乙酰氧基山栀子苷甲酯
中图分类号:R917 文献标识码:A 文章编号:1006-0103(2009)04-0391-03
ComparisontheiridoidglycosidesbetweenLamiophlomisrotataandPhlomisumbrosa.
SHANGXiao-fei1, 2 , LIMao-xing2 , FANPeng-cheng2 , WEILi-li2 , ZHANGRu-xue2 , JIAZheng-ping1, 2＊
(1.ColegeofLifeScience, LanzhouUniversity, Lanzhou, Gansu, 730000 P.R.China;2.DepartmentofPharmacy, LanzhouGeneral
HospitalofPLA, Lanzhou, Gansu, 730050 P.R.China)
Abstract:OBJECTIVE TocomparetheiridoidglycosidesbetweenLamiophlomisrotataandPhlomisumbrosa.METHODS Thin
layerchromatography(TLC)wasusedtoidentityiridoidglycosidesbetweenL.rotataandP.umbrosaandHPLCwasusedtodeter-
minethecontentof8-O-acetylshanzhisidemethylesterintherootsandaerialpartsofthesetwomedicinalmaterials.RESULTS L.
rotataandP.umbrosacontainedplentyofiridoidglycosidesandshowedsimilarchromatograms.Thecontentof8-O-acetylshanzhi-
sidemethylesterintheaerialpartsofL.rotataandP.umbrosawere17.42mg·g-1 and0.5 mg·g-1 , 6.81 mg·g-1 and8.50 mg·g-1
intherootsrespectively.CONCLUSION TherootsofL.rotataandP.umbrosacontainsimilariridoidglycosides.
Keywords:Iridoidglycosides;Lamiophlomisrotata;Phlomisumbrosa;TLC;HPLC;8-O-acetylshanzhisidemethylester
CLCnumber:R917 Documentcode:A ArticleID:1006-0103(2009)04-0391-03
独一味 Lamiophlomisrotata(Benth.)Kudo为唇
形科独一味属植物 ,单属单种[ 1] ,其根及全草为传
统藏药 ,具有活血止痛 、化淤止血之功效 ,用于治疗
各种外科手术后的刀口疼痛 、出血 、外伤骨折等 [ 2] 。
随着其制剂的开发 ,其采挖数量剧增 ,资源骤减 [ 3] 。
糙苏 Phlomisumbrosa为唇形科糙苏属植物 ,其根或
地上部分在甘肃 、陕西等地作为陕甘续断等广泛使
用 [ 4] 。独一味与糙苏为近属植物 ,大量文献报道均
含有以山栀子苷为基本母核的环烯醚萜苷类成
分 [ 5] ,具有镇痛 、止血等活性[ 6, 7] 。因此 ,文中首次
将独一味与糙苏不同部位中的环烯醚萜苷进行 TLC
比较 ,并采用 HPLC法测定其中的主要成分 8 -乙
酰氧基山栀子苷甲酯的含量 ,以评估糙苏作为独一
味代用品的可行性。
1 实验部分
1.1 仪器与试药
高效液相色谱系统(美国 Waters)。独一味和
糙苏药材分别采集于甘肃省玛曲县和天水市 ,经兰
州医学院药学系 赵汝能 教授分别鉴定为独一味
Lamiophlomisrotata(Benth.)Kudo和糙苏 Phlomis
umbrosa,阴凉通风处保存;8-乙酰氧基山栀子苷甲
酯对照品(自制 ,经 MS、NMR确定结构 , HPLC纯度
为 97.5%);乙腈为色谱纯;水为纯化水。
1.2 方法与结果
1.2.1 薄层鉴别 参考文献 [ 2] ,取糙苏及独一味地
上部分和根各 1 g,加入 10 ml乙醇 ,加热回流 15
min,放冷 ,过滤 ,滤液即为供试品溶液 。取适量 8 -
乙酰氧基山栀子苷甲酯对照品 ,加乙醇溶解成对照
品溶液。取供试品溶液和对照品溶液各 30μl,点于
薄层板上 ,以三氯甲烷 -甲醇(4：1)展开 ,取出 、晾
干 ,喷以 5%磷钼酸溶液显色 (图 1)。薄层层析结
果显示 ,独一味及糙苏具有较为相似的薄层色谱图 ,
在与 8-乙酰氧基山栀子苷甲酯对照品相应的位置
上 ,独一味显更深的蓝绿色斑点;糙苏只有根显较深
DOI :10.13375/j.cnki.wcjps.2009.04.003
图 1 独一味 、糙苏薄层色谱图
Fig1 TLCchromatogramsofL.rotataandP.umbrosa
的蓝绿色斑点 ,而地上部分中未见明显斑点 。
1.2.2 色谱条件 色谱柱为 SymmetryC18(150mm×
4.6mm, 5μm);流动相为乙腈 -水(15：85),流速
1.0 ml·min-1;检测波长 234nm;柱温 20℃;进样量
20 μl。在此色谱条件下 ,所有样品与 8 -乙酰氧基
山栀子苷甲酯对照品相同 tR处有良好的色谱峰 ,与
其他组分可达基线分离 , 同时 ,糙苏根与独一味根
具有较为相似的色谱图(图 2)。
图 2 对照品(A)、糙苏地上部分(B)、独一味地上部分(C)、糙苏根(D)和独一味根(E)溶液的 HPLC色谱图
Fig2 HPLCchromatogramsofcontrolsolution(A), theaerialpartsofP.umbrosa(B)andL.rotata(C)andtherootsofP.umbrosa(D)
andL.rotata(E)
1.2.3 溶液的制备 精密称取 2.6 mg50℃干燥至
恒重的 8-乙酰氧基山栀子苷甲酯对照品置 25 ml
量瓶中 ,用注射用水定容 ,得浓度为 140 μg·ml-1的
对照品液 。精密称取 1 g过 20目筛的糙苏地上部
分和根各 3份 ,置 50 ml圆底烧瓶中 ,分别加 35 ml
50%甲醇 , 62℃加热回流 30 min,冷却 ,并以相同溶
剂定容至 50 ml,过滤 ,精密吸取 1.0ml续滤液以流
动相稀释到 25ml,即得供试品溶液。
1.2.4 线性关系的考察 精密吸取对照品溶液 ,以
50%甲醇依次稀释配制成 1.04、2.08、4.16、8.32、
12.48、16.64、20.80 μg·ml-1的对照品梯度溶液 ,分
别进样 20 μl, 以色谱峰面积和浓度进行回归分析 ,
得回归方程为:A=2.085 ×104C+856.27(r=
0.9999),表明 8 -乙酰氧基山栀子苷甲酯的浓度
1.04 ～ 20.80 μg·ml-1与峰面积呈良好的线性关系 。
1.2.5 精密度试验 精密量取 20μl8.32μg·ml-1
对照品溶液 ,重复进样 5次 ,测定 8-乙酰氧基山栀
子苷甲酯峰面积的积分值 。计算 RSD均 <0.24%。
1.2.6 重复性试验 精密称取同一样品 5份 ,测得
其中 8 -乙酰氧基山栀子苷甲酯的含量分别为
8.71、8.08、8.66、8.65、8.51、8.57 mg·g-1 ,平均为
8.50mg·g-1 , RSD=2.89%。
1.2.7 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液 ,分
别在 0、2、4、6、8、24h测定峰面积积的分值。 RSD=
0.49%,表明供试品溶液在 24h内基本稳定 。
1.2.8 加样回收率试验 取适量已知样品含量的
供试品 9份 , 1 ～ 3份加入 8.32 mg对照品 、4 ～ 6份
加入 12.48 mg对照品 、7 ～ 9份加入 16.64 mg对照
品。混匀 ,按 “ 1.2.3”项方法制备供试品溶液 ,再按
“1.2.2”项下杂件测定色谱峰面积 ,计算 8-乙酰氧
基山栀子苷甲酯的含量及加样回收率(表 1)。
表 1 加样回收率试验 (mg, n=9)
Table1 Resultsofrecoverytest(mg, n=9)
No. OriginalAdded Determined Recovery/% X/% RSD/%
1 6.95 8.32 15.89 107.52 103.97 1.59
2 6.95 8.32 15.74 105.65
3 6.95 8.32 15.44 102.10
4 6.95 12.48 19.92 103.91
5 6.95 12.48 19.73 102.44
6 6.95 12.48 19.87 103.56
7 6.95 16.64 24.17 103.52
8 6.95 16.64 24.18 103.58
9 6.95 16.64 24.17 103.49
1.2.9 样品的测定 按 “ 1.2.3”项下方法制备糙
苏供试品溶液 ,照 “ 1.2.2”项色谱条件测定 8-乙酰
氧基山栀子苷甲酯的色谱峰面积 ,根据标准曲线计
算含量(表 2)。结果表明 ,独一味地上部分中 8 -
乙酰氧基山栀子苷甲酯的含量显著高于其根 ,而糙
苏仅在其根中检出较高含量的 8-乙酰氧基山栀子
苷甲酯 ,地上部分含量甚微。
392 华 西 药 学 杂 志 第 24卷
华西药学杂志W CJ· PS 2009, 24(4)：393 ～ 395
表 2 样品含量的测定结果(n=3)
Table2 Resultofdeterminationinsamples(n=3)
Samples Content/mg·g-1 RSD/%
AerialpartsofP.umbrosa 0.5 4.00
AerialpartsofL.rotata 17.41 3.49
RootsofP.umbrosa 8.50 2.89
RootsofL.rotata 6.81 1.47
2 讨论
独一味与糙苏属植物之间存在十分精密的关
系 ,独一味更可能隶属于糙苏属而不单另成属 [ 5] 。
糙苏广泛分布于辽宁 、内蒙古 、河北 、山东 、山西 、陕
西 、甘肃 、四川 、贵州 、广东及湖北等海拔 0.3 ～ 1.5
km的林下 、草坡地带 ,民间常作为中药豨莶草或陕
甘续断使用[ 8] 。文中首次采用 TLC法及 HPLC法
比较分析了其与独一味中的环烯醚萜苷类成分 。研
究结果表明 ,两者均含大量的环烯醚萜苷类成分 ,特
别是糙苏根的薄层色谱与独一味根十分相似 , HPLC
结果也表明糙苏根与独一味根中均有较高含量的
8-乙酰氧基山栀子苷甲酯 。
参考文献:
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收稿日期:2008-11
基金项目:国家支撑计划重大项目(07ZQ026-011)
作者简介:曾锐(1976-),男 ,博士 ,从事药物分析与制剂研究。 Email:mackzeng@gmail.com
HPLC测定芍甘胶囊中的甘草酸和甘草苷
曾 锐 1 ,吴建国 2 ,高宇明1
(1.西南民族大学化环学院民族药物研究所 ,四川 成都 610041;2.雅安三九药业有限公司 , 四川 雅安 625000)
摘要:目的 建立 HPLC测定芍甘胶囊中甘草酸和甘草苷含量的方法。方法 色谱柱为 KromasilC18(250 mm×4.6 mm,
5 μm)。甘草酸单铵盐以甲醇 -0.2mol·l-1醋酸铵溶液 -冰醋酸(65：35：1)为流动相 ,检测波长 250nm,流速 1.0ml·min-1;
甘草苷以乙腈 -0.5%冰醋酸(18：82)为流动相 ,检测波长 276 nm, 流速 1.0 ml·min-1。结果 甘草酸单铵盐和甘草苷的线
性范围分别为 0.52 ～ 2.60、 0.30 ～ 1.50 μg(r=0.9998);平均回收率分别为 98.1%(RSD=1.32%, n=5)、97.0%(RSD=
1.67%, n=5)。结论 所建方法灵敏 、准确 、专属性强 ,可作为芍甘胶囊的质量控制方法。
关键词:高效液相色谱法;甘草酸;甘草苷;芍甘胶囊
中图分类号:R917 文献标识码:A 文章编号:1006-0103(2009)04-0393-03
DeterminationofglycyrrhizinandliquiritininShaogancapsulesbyHPLC
ZENGRui1 , WUJian-guo2 , GAOYu-min1
(1.EthnicPharmaceuticalofSouthwestUniversityforNationalities, Chengdu, Sichuan, 610041 P.R.China;2.YaanThreeNinePhar-
maceuticalCo., Ltd, Yaan, Sichuan, 625000 P.R.China)
Abstract:OBJECTIVE ToestablishanHPLCmethodfordeterminationofglycyrrhizinandliquiritininShaogancapsules.METH-
ODS ThesampleswereseparatedontheODScolumn(250mm×4.6 mm, 5μm)ofKromasil.Glycyrrhizinusedmethanol-0.2mol·
L-1 ammoniumacetate-aceticacid(65：35：1)asmobilephase, thedetectionwavelengthat250 nm, flowrateof1.0 ml·min-1.
Liquiritinusedaeetonitril-0.5%aceticacid(18：82)asmobilephasewithdetectionwavelengthat276 nmandflowrateof1.0 ml·
min-1.RESULTS Ammoniumglycynhizinatoandliquiritinshowedgoodcorrelationintherangesof0.52-2.6μgand0.3-1.5μg
withrvalueof0.9998, respectively.Theaveragerecoverieswere98.1%forammoniumglycynhizinatowithRSDof1.32%(n=5)and