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们采用了适用于本品的 ＨＰＬＣ法对蛇床子素的含量
进行了研究［６－８］。曾选择不同色谱条件进行实验，结
果表明，流动相为乙腈－水（６５∶３５）、流速为１．０ｍＬ
时，蛇床子素与其他组分得到较好地分离，且峰形对
称，能准确测得其含量。在实验中，采用甲醇、乙醇２
种不同的溶剂以及不同的溶剂量，选择超声波提取和
回流提取的方法制备供试品溶液。结果表明，甲醇
５０ｍＬ回流提取的含量明显较高，故选择甲醇回流提
取；对回流提取时间的考察：分别选择提取１５，３０，４０
和６０ｍｉｎ，结果提取３０ｍｉｎ时所测得蛇床子素的含
量明显高于１５ｍｉｎ，提取４０ｍｉｎ时所测得蛇床子素
的含量则高于３０ｍｉｎ时的含量，而提取４０ｍｉｎ与提
取６０ｍｉｎ时的含量没有明显差别，故选择４０ｍｉｎ为
最佳提取时间。经过方法学研究，该方法样品处理简
单，测得的结果回收率高，精密度好，可以有效控制制
剂的质量。
参考文献：
［１］　刘冰，熊代琴，艾克拜尔·阿斯良．乳痛宁糖浆的制备
及质量标准［Ｊ］．西北药学杂志，２０１０，２５（５）：１０５－１０７．
［２］　张格，张俊，程璐．紫草解毒软膏质量标准研究［Ｊ］．医
药导报，２０１２，３１（４）：４８６－４８８．
［３］　刘志刚，邓伟杰，孙维峰．复方土茯苓颗粒定性定量方
法研究［Ｊ］．药物分析杂志，２０１１，３（１）：１１９－１２３．
［４］　邹渭洪，付成效，龙宇，等．ＲＰ－ＨＰＬＣ法测定三皮止癣
酊中蛇床子素的含量［Ｊ］．中国药房，２０１２，２３（４７）：
４４８４－４４８５．
［５］　国家药典委员会．中国药典２０１０年版［Ｓ］．一部．北
京：中国医药科技出版社，２０１０：１７．
［６］　李小安，张军科，史关佳，等．ＨＰＬＣ法同时测定阿娜
尔妇洁液中蛇床子素和欧前胡素的含量［Ｊ］．西北药
学杂志，２００８，２３（３）：１３９－１４１．
［７］　李华荣，高逢喜，孙鑫．ＨＰＬＣ法测定妇舒能洗剂中蛇
床子素的含量［Ｊ］．中国药师，２０１０，１３（８）：１１８０－１１８１．
［８］　曹霞，斐周琳．高效液相色谱法测定独活寄生丸中蛇
床子素的含量［Ｊ］．中国实用医药，２０１０，５（９）：３６－３７．
［９］　杨大朋，王海啸，彭延廷，等．蛇床子素对人乳腺癌细
胞增殖、细胞周期及凋亡的影响［Ｊ］．南京师范大学学
报：自然科学版，２０１０，３３（２）：７６－８０．
［１０］　陈蓉，谢梅林．蛇床子素抑制血栓形成及其作用机制
研究［Ｊ］．中国现代医药杂志，２００８，１０（１０）：５０－５２．
（收稿日期：２０１３－０９－０８）
ＨＰＬＣ法测定维药刺山柑种子中没食子酸和芦丁的含量
周　静，美丽万·阿不都热依木＊（新疆医科大学药学院，乌鲁木齐　８３００５４）
摘要：目的　建立刺山柑种子中没食子酸和芦丁的含量测定方法。方法　采用Ｐｈｎｏｍｅｎｅｘ色谱柱（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ），以
乙腈－２ｍＬ·Ｌ－１磷酸溶液为流动相，流速为１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１，检测波长为２５４ｎｍ，梯度洗脱。结果　没食子酸在１．４～１４．０μｇ、
芦丁在１．４～２８．０μｇ范围内呈良好的线性关系，没食子酸平均回收率为９９．９％，ＲＳＤ为２．０％；芦丁平均回收率为１００．６％，
ＲＳＤ为１．３％。　结论　ＨＰＬＣ法测定没食子酸和芦丁的含量，方法简便可行，重复性和分离效果好，可为刺山柑的进一步开发
利用及质量控制提供依据。
关键词：刺山柑；芦丁；没食子酸；高效液相色谱法
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－２４０７．２０１４．０２．００３
中图分类号：Ｒ２８２　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００４－２４０７（２０１４）０２－０１１７－０３
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｒｕｔｉｎ　ｉｎ　Ｃａｐｐａｒｉｓ　ｓｐｉｎｏｓａ　Ｌ．ｓｅｅｄｓ
ｂｙ　ＨＰＬＣ
ＺＨＯＵ　Ｊｉｎｇ，Ｍｅｉｌｉｗａｎ　ＡＢＤＲＹＭ＊（Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｕｒｕｍｑｉ　８３００５４，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ｏｆ　ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｒｕｔｉｎ　ｉｎ　Ｃａｐｐａｒｉｓ　ｓｐｉｎｏｓａ　Ｌ．ｓｅｅｄｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｔｈｅ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ
ｗａｓ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ　ｏｎ　ａ　Ｐｈｎｏｍｅｎｎｅｘ　ＯＤＳ（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ　ｃｏｌｕｍｎ，ｗｉｔｈ　ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ－２ｍＬ·Ｌ
－１　ｐｈｏｓｐｈ－
ｐｒｉｃ　ａｃｉｄ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ａｓ　ｔｈｅ　ｍｏｂｉｌｅ　ｐｈａｓｅ．Ｔｈｅ　ｆｌｏｗ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１，ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ　ｗａｓ　２５４ｎｍ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｏｌｕｍｎ
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｗａｓ　３０℃．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｌｉｎｅａｒ　ｒａｎｇｅｓ　ｏｆ　ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｒｕｔｉｎ　ｗｅｒｅ　１．４－１４．０μｇ，１．４－２８．０μｇ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｃｏｅｆ－
ｆｉｃｉｅｎｔ　０．９９９　５（ｎ＝６），０．９９９　７（ｎ＝７），ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｖｅｒａｇｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ　ｗｅｒｅ　９９．９％（ＲＳＤ＝２．０％），１００．６％（ＲＳＤ＝１．３％），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅ－
ｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｓｉｍｐｌｅ　ａｎｄ　ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ，ａｎｄ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｕｓｅｄ　ｆｏｒ　Ｃ．ｓｐｉｎｏｓａ　Ｌ．ｆｕｒｔｈｅｒ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ａｎｄ
ｑｕａｌｉｔｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｃａｐｐａｒｉｓ　ｓｐｉｎｏｓａ　Ｌ．；ｒｕｔｉｎ；ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ；ＨＰＬＣ
基金项目：国家自然科学基金资助项目（编号：３０５６１０９０）
作者简介：周静，男，在读硕士研究生
＊通信作者：美丽万·阿不都热依木，女，教授，硕士生导师
　　刺山柑Ｃａｐｐａｒｉｓ　ｓｐｉｎｏｓａ　Ｌ．种子为白花菜科山
柑属植物刺山柑果实中的种子［１］，又名野西瓜、槌果
藤、老鼠瓜、抗旱草等［１］。其味辛苦，性温，具有祛风、
７１１西北药学杂志　２０１４年３月　第２９卷　第２期
ｈｔｔｐ：／／ＸＢＹＺ．ｃｂｐｔ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ
散寒、除湿、止痛、调经、消肿的作用，维吾尔医将其用
于治疗风湿性关节炎和痛风。刺山柑种子中有黄酮
类、生物碱类、脂质和多酚类等化合物。黄酮类以芦
丁和槲皮素为主，多酚类以没食子酸为主。目前，尚
未见关于维药刺山柑中芦丁和没食子酸用 ＨＰＬＣ法
进行含量测定的研究，为了进一步开发和利用其价
值，在原有相关文献报道的基础上［２－６］，本实验建立高
效液相色谱法测定刺山柑中没食子酸和芦丁含量的
方法，目的是为了更好地控制刺山柑的质量，以期为
评价其药用价值提供科学依据。
１　仪器与试药
１．１　仪器　岛津ＬＣ－２０ＡＢ高效液相色谱仪；Ｓｏｌｕ－
ｔｉｏｎ色谱工作站；ＪＡ４００３型电子天平（上海青海仪器
有限公司）；ＤＫ－Ｓ２２型电热恒温水浴锅（上海精密实
验设备有限公司）；ＳＫ８２１０型超声清洗仪器（上海科
导超声仪器有限公司）。
１．２　试药　没食子酸对照品（中国药品生物制品检
定所，批号１１０８３１－２００８０３）；芦丁对照品（中国药品
生物制品检定所，批号１０００８０－２００７０７）；乙腈为色谱
纯；其他试剂均为分析纯；水为屈臣氏蒸馏水。
２　方法与结果
２．１　色谱条件　色谱柱：Ｐｈｎｏｍｅｎｎｅｘ　ＯＤＳ（２５０
ｍｍ×４．６ｍｍ，５μｍ）；流动相：乙腈－２ｍＬ·Ｌ
－１磷酸
溶液（梯度见表１）；流速：１．０ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波长：
２５４ｎｍ；柱温：３０℃；进样量：２０μＬ。见图１。
２．２　对照品溶液的制备　精密称取没食子酸和芦丁
对照品各１４ｍｇ，置于１０ｍＬ量瓶中，加甲醇溶解并
定容，摇匀，作为对照品溶液（每１ｍＬ含没食子酸
１．４ｍｇ，每１ｍＬ含芦丁１．４ｍｇ）。
表１　洗脱梯度
Ｔａｂ．１Ｔｈｅ　ｇｒａｄｉｅｎｔ　ｅｌｕｔｉｏｎ　ｐｒｏｇｒａｍ
时间／ｍｉｎ
乙腈体积
分数／％
２ｍＬ·Ｌ－１磷酸
体积分数／％
０　 ５　 ９５
５　 １０　 ９０
１１　 １８　 ８２
１５．２５　 ２３　 ７７
２０　 ２７　 ７３
２３　 ４０　 ６０
３０　 ４５　 ５５
图１　高效液相色谱图
Ａ．没食子酸；Ｂ．芦丁；Ｃ．样品；１．没食子酸；２．芦丁
Ｆｉｇ．１ＨＰＬＣ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｓ
Ａ．ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ；Ｂ．ｒｕｔｉｎ；Ｃ．ｓａｍｐｌｅ；１．ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ；２．ｒｕｔｉｎ
２．３　供试品溶液的制备　精密称取脱脂刺山柑种子
药材粉末（６０目筛）４．０ｇ，置于１００ｍＬ锥形瓶中，加
入甲醇４０ｍＬ，水浴回流１ｈ，过滤，将滤液蒸至无醇
味，用甲醇溶解，定容至２５ｍＬ量瓶中，摇匀，作为供
试品溶液。
２．４　线性关系考察　分别将没食子酸和芦丁对照品
溶液用０．４５μｍ微孔滤膜过滤，按照上述色谱条件
分别进样１，２，４，６，８，１０和２０μＬ，测定没食子酸、芦
丁吸收峰面积。以对照品进样量Ｘ（μｇ）为横坐标、
信号强度Ｙ 为纵坐标，得没食子酸回归方程：Ｙ＝
３４５　８０８　Ｘ－２１８　５３７，ｒ＝０．９９９　５（ｎ＝６），线性范围
１．４～１４．０μｇ；得芦丁回归方程Ｙ＝８　４５３．６　Ｘ＋
１　１５１．１，ｒ＝０．９９９　７（ｎ＝７），线性范围１．４～２８．０
μｇ。
２．５　精密度实验　取各自对照品溶液，分别连续进
样６次，按上述色谱条件测定峰面积。结果没食子酸
峰面积ＲＳＤ为１．９４％，芦丁峰面积ＲＳＤ为１．７８％。
结果表明，该仪器精密度良好。
２．６　重复性实验　精密称取哈密地区刺山柑种子粉
末６份，按２．３项下方法制备供试品溶液，分别进样
２０μＬ，按上述色谱条件测定峰面积，计算含量。结果
没食子酸含量ＲＳＤ为１．３７％，芦丁峰面积含量ＲＳＤ
为１．９９％。结果表明，该方法重复性良好。
２．７　稳定性实验　精密称取吐鲁番地区的刺山柑种
子粉末，按照２．１．３供试品溶液制备项下制备供试品
溶液，分别在０，４，８，１２和２４ｈ精密量取２０μＬ进
样，按上述色谱条件测定峰面积。结果没食子酸峰面
积ＲＳＤ为２．０２％，芦丁峰面积ＲＳＤ为１．７４％。结
果表明，供试品溶液在２４ｈ内基本稳定。
２．８　加样回收率实验　精密称取已知没食子酸含量
的吐鲁番地区的刺山柑种子粉末２．０ｇ，分别精密加
入各对照品适量，按２．３项下方法制备供试品溶液，
８１１ 西北药学杂志　２０１４年３月　第２９卷　第２期
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按上述色谱条件下测定，并计算回收率。结果没食子
酸平均回收率为９９．９０％，ＲＳＤ为２．０％（ｎ＝６）；芦
丁平均回收率为１００．６％，ＲＳＤ为１．３％（ｎ＝６）。
２．９　样品测定　取不同批次的脱脂刺山柑种子粉
末，分别按２．３项下方法制备供试品溶液，按上述色
谱条件测定，结果见表２。
表２　刺山柑种子中没食子酸和芦丁的含量测定结果
Ｔａｂ．２Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｇａｌｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｒｕｔｉｎ　ｉｎ　Ｃａｐｐａ－
ｒｉｓ　ｓｐｉｎｏｓａ　Ｌ．ｓｅｅｄｓ
样品编号 产地 没食子酸／ｍｇ·ｇ－１ 芦丁／ｍｇ·ｇ－１
１ 伊犁 １．０８　 ８．６８
２ 鄯善 ３．０２　 ９．８１
３ 米泉 １．５９　 ６．０５
４ 吐鲁番 ２．４１　 ７．４３
５ 哈密 ６．５３　 ５．６９
３　讨论
①对芦丁和没食子酸提取溶剂进行考察，分别采
用体积分数４０％，６０％，８０％和９０％乙醇和甲醇进行
提取，然后按照上述色谱条件进行测定。结果表明，
在色谱条件下甲醇提取物的分离比在各体积分数乙
醇提取物的分离效果好，且杂质峰少。
②对提取方法进行考察：ａ．将种子用甲醇冷浸
４８ｈ，过滤，浓缩，用甲醇溶解定容至２５ｍＬ，得供试
品溶液；ｂ．将种子用甲醇加热回流，过滤，蒸干，用甲
醇定容至２５ｍＬ，即得供试品溶液；ｃ．将种子用甲醇
超声提取，过滤，蒸干，用甲醇定容至２５ｍＬ，即得供
试品溶液。比较３种方法含量测定的结果，ｂ比ａ和
ｃ含量高。因此，选用ｂ作为芦丁含量测定供试品溶
液的制备方法。
③考察乙腈－２ｍＬ·Ｌ－１醋酸、乙腈－２ｍＬ·Ｌ－１
磷酸、甲醇－２ｍＬ·Ｌ－１醋酸和甲醇－２ｍＬ·Ｌ－１磷酸
这些流动相系统，结果没食子酸和芦丁在以乙腈－２
ｍＬ·Ｌ－１磷酸为流动相时效果好，峰形好。但没食
子酸和芦丁的极性相差大，梯度洗脱时，流动相梯度
变化较大，常会出现基线漂移的现象，为了稳定基线，
将洗脱时间延长。
参考文献：
［１］　吴征锰，关克俭，王文采，等．西藏植物志：第２卷［Ｍ］．
北京：科学出版社，１９８５：３２２．
［２］　张冉，美丽万·阿不都热依木．荧光光度法测定维药刺
山柑种子中总黄酮含量的研究［Ｊ］．西北药学杂志，
２０１１，２６（２）：９２－９４．
［３］　叶蕻芝，陈鹏程，杨建萍，等．ＨＰＬＣ法测定梅花入骨丹
中的没食子酸和槲皮素含量［Ｊ］．福建中医药大学学报，
２０１１，２１（１）：３５－３９．
［４］　张梅，兰卫，李艳．天山大黄总黄酮超声提取及含量测定
［Ｊ］．西北药学杂志，２００５，２０（２）：６４－６５．
［５］　方雯雯．ＨＰＬＣ法测定桑麻丸中芦丁的含量［Ｊ］．现代中
药研究与实践，２０１０，２４（６）：８０－８１．
［６］　林辉．ＨＰＬＣ法测定地锦草中没食子酸和芦丁的含量
［Ｊ］．中成药，２００９，３１（９）：１４６５－１４６７．
（收稿日期：２０１３－０９－２２）
基金项目：陕西省中医药管理局课题
作者简介：刘丽萍，女，助教，硕士
＊通信作者：乔蓉霞，女，主任药师，硕士
黄芩中有机氯类农药残留检测方法研究
刘丽萍１，宋　莉２，乔蓉霞２＊（１．西安医学高等专科学校，西安　７１０３０９；２．陕西省食品药品检验所，西安　７１００６１）
摘要：目的　建立黄芩中农药多残留量的新检测方法，考察陕西不同地区黄芩药材中１２种农药残留情况。方法　采用ＤＢ－
１７ＭＳ毛细管柱（３０ｍ×０．２５ｍｍ×０．２５μｍ），用气相色谱－质谱串联技术（ＧＣ－ＭＳ）进行目标成分的定量测定。结果　建立了气
相色谱－质谱串联法测定黄芩中农药多残留的方法，通过对陕西省不同地区黄芩药材中农药进行检测，发现尚无超标的农药。结
论　该方法严谨可靠，操作简便，能较准确地反映测定结果，与国家现有标准的方法相比，实验时间短，灵敏度高，减少了人为因
素的影响。
关键词：黄芩；农药残留；ＧＣ－ＭＳ
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－２４０７．２０１４．０２．００４
中图分类号：Ｒ２８２　　　文献标志码：Ａ　　　文章编号：１００４－２４０７（２０１４）０２－０１１９－０４
Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ｏｒｇａｎｏｃｈｌｏｒｉｎｅ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ　ｉｎ　Ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａｒａｄｉｘ
ＬＩＵ　Ｌｉｐｉｎｇ１，ＳＯＮＧ　Ｌｉ　２，ＱＩＡＯ　Ｒｏｎｇｘｉａ２
＊ （１．Ｘｉ′ａｎ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｅｇｅ，Ｘｉ′ａｎ　７１０３０９，Ｃｈｉｎａ；２．Ｓｈａａｎｘｉ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｆｏｒ　Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｄｒｕｇ
Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｘｉ′ａｎ　７１００６１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ａ　ｎｅｗ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｏｒ　１２ｏｒｇａｎｏｃｈｌｏｒｉｎｅ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ　ｉｎ　Ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａ　ｒａｄｉｘ，ａｎｄ　ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｓｉｔ－
ｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ　ｉｎ　Ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａｒａｄｉｘｓ　ｉｎ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｒｅｇｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｓｈａａｎｘｉ　ｐｒｏｖｉｎｃｅ．Ｍｅｔｈｏｄ　ＧＣ－ＭＳ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｌｙ　ｄｅｔｅｒ－
９１１西北药学杂志　２０１４年３月　第２９卷　第２期