全 文 ：前胡丙素对Ang II致离体血管平滑肌细胞肥厚及
胞内钙 、NO 含量和信号转导的影响
饶曼人＊ , 刘宛斌 , 张晓文
(南京医科大学心血管药理研究室 , 江苏 南京 210029)
摘要:目的　前胡丙素(Pra-C)对血管紧张素 II(Ang II)致离体培养大鼠血管平滑肌细胞(SMCs)肥厚模型胞内游
离钙浓度 、NO含量和信号转导的影响。方法　以Ang II刺激 SMCs 形成肥厚模型 ,用倒置显微镜测定 SMCs 面积;用
Fura-2 AM测定单细胞内[ Ca2+] i , Griess法测定NO含量;在 PMA和 ST(PKC 激动剂及抑制剂)、PTX(Gi蛋白敏感毒素)
作用下观察 Pra-C 对 KCl和 NE 所致胞内[ Ca2+] i浓度变化的影响。结果　Pra-C 组 SMCs 细胞面积较肥厚组减小
39.01%, 并接近正常细胞水平;NO含量明显增加;胞内[ Ca2+] i对 KCl和NE 激动的反应明显低于肥厚组。 PMA使肥
厚SMCs [ Ca2+] i升高 ,而 ST 及PTX 则使之降低 , Pra-C 均使之恢复正常。结论　Pra-C 抑制 Ang II 致体外培养细胞
SMCs 肥厚 ,改善肥厚细胞因 PKC 和 Gi蛋白的信号转导改变所致的[ Ca2+] i改变。
关键词:前胡丙素;血管平滑肌;细胞内游离钙;一氧化氮
中图分类号:R282.71;R972　　　文献标识码:A　　　文章编号:0513-4870(2002)01-0005-05
　　高血压时细胞内钙代谢异常及与药物作用的关
系是目前研究的热点 。细胞内信号转导异常导致钙
代谢改变及细胞内钙浓度增高 ,而细胞的钙超载可
进一步影响血管内皮和平滑肌细胞的功能[ 1 ～ 3] 。因
此 ,抗高血压药物降压的同时能否减轻细胞内钙超
载及改善异常信号转导 ,对肥厚的形成和逆转及心
功能恢复有重要影响 。前胡丙素(praeruptorine C ,
Pra-C)是从中药白花前胡中提取的单体成分 ,本室
多年研究证明其有钙拮抗作用[ 4] 。本室曾报道前胡
丙素可逆转肾型高血压(RHR)及自发型高血压
(SHR)大鼠左室肥厚 ,防止缺血及肥厚心肌细胞内
钙升高[ 5 ～ 9] 。由于高血压的主要病理在血管 ,我们
曾报道长期口服前胡丙素能防治 RHR及 SHR大鼠
的血管肥厚 ,降低细胞内钙的升高 ,提高 NO含量 。
本文在离体培养的大鼠血管平滑肌细胞(SMCs),用
Ang II激动形成肥厚模型 ,观察 Pra-C对肥厚细胞的
影响及与蛋白激酶 C(protein kinare C , PKC)系统及
Gi蛋白的关系。
材 料 与 方 法
　　药品与动物　前胡丙素(Pra-C)为白色粉末状 ,
收稿日期:2001-03-18.
基金项目:国家自然科学基金资助项目(39570819).
作者简介:张晓文(1965-),男 ,副研究员 ,博士研究生;
饶曼人(1930-),女 ,教授 ,博士生导师.
＊Tel:(025)6663597 , E-mail:zhang-xiao-wen@263.net
由南京中医药研究所植化室提供 ,以聚乙二醇 400
配成 2%浓度 ,4℃避光保存。Ang II ,M199 , ionomysin ,
staurosporine (ST), phorbol 12-myristate 13-acetate
(PMA), pertussis toxin (PTX), Fura-2 AM 均购自
Sigma 公司。 Fura-2 AM , 用 DMSO(Merck)配成 1
mmol·L-1 ,分装后置于-20℃保存。实验用 Spraque-
Dawley (SD)大鼠 ,由江苏省实验动物中心提供 。
　　SMCs的分离培养　取体重(253±15)g的健康
SD大鼠 , ♀♂各半 ,在无菌条件下取出主动脉从弓
至髂总动脉段 ,按文献[ 10] 方法进行分离培养。用
药勺轻轻刮去内皮 ,切割成 2 mm×2 mm 组织块 ,将
组织块贴入灭菌的 25 mL 培养瓶中 ,内膜面贴于瓶
壁上 ,在 37℃, 5%CO2 孵箱中培养 2 h 后加入含青
霉素及链霉素和 10%胎牛血清的M199培养基 ,3 d后
换液 ,4 ～ 6 d后可见动脉片周围细胞形成单层生长 ,
呈明显的极向排列 , “峰和谷”各半 ,将融合的细胞用
0.125%胰蛋白酶进行消化 ,在倒置显微镜下见到细
胞间连接疏松将要脱落时 ,加入含 10%小牛血清的
M199培养基终止消化 ,将含细胞培养液稀释成 3.0×
10
5·mL-1 ,继续分瓶培养传代 ,实验用细胞为 3 ～ 5
代 ,用电子显微镜确认为平滑肌细胞 。
　　Ang II致 SMCs肥厚及细胞大小测定　在 5 mL
培养瓶中 ,用含 0.5%胎牛血清的 M199培养基培养
48 h ,使 SMCs与G0 G1 同步后进行实验。于24孔培
养板中 ,将细胞调成每孔 3×104 ,分为正常(细胞)
·5·药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2002 , 37(1):5-9
DOI :10.16438/j.0513-4870.2002.01.002
组:加等量溶剂;Ang II 组:只加 Ang II 10 nmol·L-1;
Pra-C+Ang II 组:加 Pra-C 10 μmol·L-1和 Ang II 10
nmol·L-1 。培养 4 d后对各组细胞进行计数并测量
大小 ,将待测细胞注入自制细胞池中 ,池底载玻片中
部打一圆孔 ,底部用乳胶粘一盖玻片。在倒置显微
镜闭路电视系统下用 MICC 软件测定细胞长 、宽 ,并
计算面积 。每次测定 10个视野内的全部细胞。
　　NO的测定　参照微盘测定法及蛋白校正法[ 11]
进行亚硝酸测定。使 SMCs同步于 G0 G1 期 ,于 24
孔培养板中 ,将细胞调成每孔 3×104个 ,加Griess试
剂与亚硝酸盐反应 ,于紫外分光光度计 550 nm测其
吸光度的改变 ,作出亚硝酸浓度和蛋白含量的标准
曲线 ,计算培养液中 NO含量 。
　　SMCs单细胞内[ Ca2+] i的测定　参照文献[ 12]
将同步化后的 SMCs细胞 ,用胰蛋白酶消化 ,用培养
基调细胞浓度为每孔 5 ×108·L-1 , 加终浓度为 3
μmol·L-1的 Fura-2 AM , 37℃水浴中孵育 30 min , 用
Hanks液冲洗 5次 ,以防荧光干扰 。于 AR-CM-MIC
阳离子测定系统(SPEX ,美国)中测定单细胞内钙 ,
用软件 DM 3000进行分析 。
　　统计学处理 　所有实验数据均以 x ±s 表示 ,
组间及组内前后差异用 t 检验 。
结 果
1　Ang II诱导的 SMCs肥厚模型制备和前胡丙素
对细胞肥厚的作用
SMCs经Ang II 10 nmol·L-1刺激后 ,细胞数目无
明显增加 ,但其大小变化明显 ,表明本实验所用浓度
的 Ang II 使 SMCs 只肥厚而不增生 。Pra-C 10
μmol·L-1与 Ang II 共同孵育 ,细胞面积明显小于Ang
II组(P <0.001),表明 Pra-C 可以防止 SMCs肥厚 ,
见表1 。
Table 1　Effect of Pra-C on the amount and area of isolated and cultured rat hypertrophied smooth muscle
cells(HSMCs)induced by angiotensin II(Ang II)in vitro
Group Dose Amount cells Length μm Width μm Area μm2
Normal 　- 5.1±0.3 14.5±2.4 2.46±0.28 36±3
Pra-C+Ang II 10μmol·L-1 +10 nmol·L -1 5.20±0.26 15.7±1.4 2.60±0.28 41±4
Ang II 10 nmol·L-1 5.24±0.25 20.1±1.1＊＊＊ 3.33±0.25＊＊＊ 67±4＊＊＊
HSMCs(hypertrophied smooth muscle cells)were induced by angiotensin II(Ang II)10 nmol·L-1 for 4 d;cell area = length×
width;Pra-C 10μmol·L-1 was incubated with HSMCs for 30 min.n =12 , x±s.＊＊＊P<0.001 vs Pra-C +Ang II group
2　前胡丙素对 Ang II致肥厚 SMCs产生 NO的影
响
肥厚细胞产生 NO 的能力明显降低 ,降低原水
平40%,前胡丙素组细胞产生NO的能力明显提高 ,
接近对照组 ,说明 Pra-C 不仅能防止 SMCs肥厚 、还
能恢复细胞产生 NO的能力 ,见表 2。
Table 2 　Effect of Pra-C on nitric oxide (NO)
content in isolated and cultured rat hypertrophied
smooth muscle cells(HSMCs)induced by angiotensin
II(Ang II)in vitro
Group Dose NO nmol·mg-1(protein)·d-1
Normal - 6.0±0.5
Pra-C+Ang II 10μmol·L -1+10 nmol·L-1 5.7±0.6
Ang II 10 nmol·L-1 3.6±0.4＊＊＊
HSMCs (hypertrophied smooth muscle cells) were induced by
angiotensin II(Ang II)10 nmol·L-1 for 4 d;Pra-C 10 μmol·L-1
was incubated with HSMCs for 30 min;NO content was measured by
Griess method.n=10 , x±s.＊＊＊P<0.001 vs Pra-C +Ang II
group
3　前胡丙素对 Ang II致肥厚 SMCs [ Ca2+] i稳态的
影响
分别用电压依赖性和受体操纵性激动剂KCl 60
mmol·L-1和 NE 10 μmol·L-1使 Ang II 致肥厚 SMCs
的细胞内[Ca2+] i比正常细胞的增加幅度分别高出
100%和 145%,Pra-C组仅增加了 13%和 19%,均与
正常接近 。可见 Pra-C在肥厚 SMCs对 KCl和 NE两
种激动剂诱导的[ Ca2+] i异常升高均有明显抑制作
用 ,见表 3。
4　前胡丙素对 PMA , ST及 PTX致[ Ca2+] i升高的
影响
将正常细胞及已制备好的肥厚平滑肌细胞
(HSMCs)分为 3组。正常细胞组:加等量溶剂;Pra-C
组:用 Ang II 制备好 的肥厚细胞 加 Pra-C 10
μmol·L-1共同孵育 30 min;肥厚组:用 Ang II 制备好
的肥厚细胞。PMA 0.1μmol·L-1 ,PTX 200 ng·L-1测
定前 2 h 加入 , ST 10 nmol·L-1测定前 5 min 加入。
以上试剂均指终浓度。对 PKC系统激动剂 PMA作
·6· 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2002 , 37(1):5-9
用后 ,KCl和 NE 分别使 HSMCs的[Ca2+] i较正常组
增加了 110.9 nmol·L-1和 232.5 nmol·L-1 。与表 3
中未用 PMA的HSMCs [ Ca2+] i比较 ,KCl和 NE分别
使之增高 32.1 nmol·L-1和 34.3 nmol·L-1 。提示
PKC转导通路激活 ,可显著增加已肥厚的血管平滑
肌细胞内钙。PMA的阻断剂 ST 可以阻滞此通路的
信号转导 。HSMCs在 ST 作用后 ,再用 KCl和NE 激
动 ,其胞内[Ca2+] i较表 3中未用 ST 者分别减低了
64.7 nmol·L-1和 104.2 nmol·L-1 ,说明 PKC 信号转
导受抑制时可以显著减轻肥厚平滑肌的胞内
[Ca2+] i。百日咳毒素(PTX)系作用于 G蛋白中 Gi ,
Gi 为抑制性 蛋白 , 在 PTX 作用后 , HSMCs 的
[Ca2+] i ,在KCl和 NE激动下较表 3中未用 PTX 者
分别减低了56.8 nmol·L-1和 52.5 nmol·L-1 。可见 ,
与Pra-C共同孵育后 ,对 PKC信号系统的激动剂 、抑
制剂及 Gi的影响 ,无论用 KCl或 NE激动均与正常
细胞反应一致 ,说明Pra-C防止Ang II致细胞肥厚作
用与细胞内钙及 PKC 和Gi有关 ,见表 4。
Table 3　Effect of Pra-C on [ Ca2+] i concentration
alteration stimulated by KCl and NE in isolated and
cultured rat hypertrophied smooth muscle cells
(HSMCs)induced by angiotensin II(Ang II)
Group Dose
[ Ca2+] i nmol·L-1
KCl 60mmol·L-1 NE 10μmol·L-1
Normal - 171±5 　174±9
Pra-C 10μmol·L-1 192.3±2.9 208±8
　+Ang II 　+10 nmol·L -1
Ang II 10 nmol·L -1 341±17＊＊＊ 425±14＊＊＊
HSMCs (hypertrophied smooth muscle cells) were induced by
angiotensin II (Ang II) 10 nmol·L-1 for 4 d;[ Ca2+] i was
measured with Fura-2 AM;KCl (60 mmol·L-1) or NE (10
μmol·L-1)were added 5 min before [ Ca2+] i measurement in
vitro;Pra-C 10 μmol·L-1 was incubated with HSMCs for 30 min.
n=8 , x±s.＊＊＊P <0.001 vs Pra-C +Ang II group
Table 4 　Effect of Pra-C on [ Ca2+] i concentration alteration stimulated by KCl and NE when
incubated with PMA , ST and PTX in isolated and cultured rat hypertrophied smooth muscle cells
(HSMCs)
Group Dose Activator
[ Ca2+] i nmol·L-1
ST 10 nmol·L-1 PMA 0.1μmol·L-1 PTX 200 ng·L-1
Normal - KCl 170±10 263±14 171±9
NE 173±9 227±21 188.0±0.9
Pra-C+Ang II 10μmol·L-1 +10 nmol·L -1 KCl 163±15 277±14 172±9
NE 173±14 264±34 182±7
Ang II 10 nmol·L -1 KCl 277±14＊＊＊ 373±15＊＊＊ 284±10＊＊＊
NE 321±19＊＊＊ 460±17＊＊＊ 372±9＊＊＊
HSMCs(hypertrophied smooth muscle cells)were induced by angiotensin II(Ang II)10 nmol·L-1 for 4 d;[ Ca2+] i was
measured with Fura-2 AM;PMA(phorbol 12-myristate 13-acetate)0.1 μmol·L-1 , PTX(pertussis toxin)200 ng·L-1 were
incubated 2 h before [ Ca2+] i measurement;ST (staurosporine) 10 nmol·L-1 was incubated 5 min before [ Ca2+] i
measurement;KCl 60 mmol·L-1 or NE 10μmol·L-1 were given 5 min before [ Ca2+] i measurement.n=8 , x±s.＊＊＊P<
0.001 vs Pra-C + Ang II group
讨 论
高血压的形成与心血管局部血管紧张素 II(Ang
II)诱发的血管肥厚有关。文献报道[ 13 , 14] ,与对 SHR
表现为增生不同 ,Ang II在某种浓度下可使体外大
鼠血管平滑肌细胞表现为只肥厚而不增生。本研究
用Ang II诱导离体培养血管平滑肌细胞形成肥厚并
证实细胞无明显增生 ,表现出与整体 RHR 及 SHR
相似的病理生理反应 , 如细胞体积增大 、细胞内
[Ca2+] i显著升高 ,对 KCl及 NE反应更敏感 ,NO 含
量降低 。结果表明 Pra-C 与 Ang II致肥厚 SMCs 共
同孵育 ,可防止细胞肥厚 、阻滞平滑肌细胞内钙升
高 ,使对 KCl与 NE 的反应正常化 ,NO含量与正常
细胞相近。说明 Pra-C 能防止血管肥厚 、降低血管
平滑肌细胞内[ Ca2+] i以及恢复血管对电压依赖性
及受体操纵性钙通道激动剂的异常反应。
胞内[ Ca2+] i升高是 Ang II 诱导细胞肥厚信息
传递的中心环节[ 15～ 17] 。心肌细胞和 VSMC 膜上存
在特异性 Ang II受体 ,Ang II通过活化 AT 受体激活
细胞膜磷脂酶系统 ,生成 IP3 和 DG ,后两者使细胞
内 Ca2+浓度升高及 PKC 活化。而 PKC 活力增高一
方面可导致细胞核酸及蛋白合成增加 、促进肥厚发
生发展 ,另一方面对细胞内许多酶产生磷酸化修饰
作用 ,参与细胞内基因调控 ,进一步影响细胞功能。
因此 ,本文 Pra-C 防止血管肥厚作用与其通过钙拮
抗作用改善钙代谢异常有重要关系。G蛋白又称鸟
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苷酸调节蛋白 ,在受体产生跨膜信号转导中起重要
作用 ,被誉为“分子开关”或“细胞开关” 。本研究用
PKC激动剂 PMA 使肥厚平滑肌细胞[ Ca2+] i显著增
加 ,PKC抑制剂 ST及 G-蛋白族中的抑制性蛋白 Gi ,
则可降低肥厚平滑肌细胞内[ Ca2+] i的升高 ,在与
Pra-C共同孵育时能改善信号转导改变所致胞内
[Ca2+] i异常 ,使其对电压依赖性及受体操纵性钙通
道激动剂异常增高反应减轻 ,接近正常 ,说明 Pra-C
不仅具有钙拮抗剂的作用 ,而且对细胞信号转导亦
产生影响 ,改善钙代谢异常 ,从而对高血压心肌 、血
管肥厚发挥治疗作用 。
NO作为调节心血管 、神经 、免疫的主要细胞信
使 ,可以激活鸟苷酸环化酶而发挥重要的信息传递
作用 ,文献报道 ,内源性和外源性 NO皆可明显抑制
Ang II 诱导的动脉平滑肌细胞及高血压性心肌肥
厚[ 18 , 19] 。NO抑制细胞增殖和血管重构 、调节血管平
滑肌张力 、保护血管内皮等生理病理作用 ,有利于扩
张血管 、降低血压和改善血管肥厚 。本文研究表明 ,
Pra-C可使 Ang II致肥厚 SMCs NO含量与正常细胞
相近 , 表明其降低 Ang II 致肥厚作用与提高肥厚
SMCs NO产量有关 ,是其降低血管肥厚的重要机制 。
REFERENCES:
[ 1] Williford DJ , Sharma VK , Korth M , et al.Spatial
heterogeneity of intracellular Ca2+ concentration in nonbeating
guinea pig ventricular myocytes.Circ Res [ J] , 1990 , 66(1):
241-248.
[ 2] Naftilan AJ , Pratt RE , Dzau VJ.Induction of platelet derived
growth factor A-chain and c-myc gene expressions by
angiotensin II in cultured rat smooth muscle cells.J Clin
Invest [ J] , 1989 , 83(4):1419-1421.
[ 3] Taubman MB , Berk BC , Izuma S , et al.Angiotensin II
induced c-fos mRNA in aortic smooth muscle cells.J Biol
Chem [ J] , 1989 , 264(1):256-259.
[ 4] Rao MR , Shen XH , Zou X.Effects of praeruptorin C and E
isolated from Qian-hu on swine coronary and guinea-pig atria.
Eur J Pharmacol [ J] , 1988 , 155:293-296.
[ 5] Wang HX , Rao MR, Wang JX , et al. Effects of
praeruptorin C on 45Ca2+ , uptake and cytosolic free Ca2+ in
cultured myocardial cells of neonatal rat.Chin J Pharmacol
Toxicol(中国药理学与毒理学杂志)[ J] , 1995 , 9(1):
184-187.
[ 6] Wu X , Rao MR.Effects of praeruptorin C on isolated guinea-
pig atrium and myocardial compliance in patients.Acta
Pharmacol Sin [ J] , 1990 , 11(3):235-238.
[ 7] Yang JR , Li QP , Rao MR.Protective effects of praeruptorin
C and nifedipine on ischemia-reperfused injury in working rat
hearts.Acta Pharm Sin (药学学报)[ J] , 1992 , 27(10):
729-733.
[ 8] Sun L , Rao MR, Liu PQ.Effects of praeruptorin C on
cardiac dysfunction , myocardial compliance and collagen
content in renovascular hypertensive rats.Acta Pharm Sin
(药学学报)[ J] , 1997 , 32(8):578-582.
[ 9] Sun L , Rao MR , Wang JX , Effects of praeruptorin C on the
intracelluar free calcium in normal and hypertrophied rat
ventricular myocytes.Acta Pharmacol Sin [ J] , 1997 , 18
(3):251-254.
[ 10] Chamley CJ , Campbell G , Ross R.The smooth muscle cell in
culture.Physiol Rev [ J] , 1979 , 59(1):1-61.
[ 11] Green LC , Wagner DA , Glogowski J.Analysis of nitrate ,
nitric, and [ 15N] nitrate in biological fluids.Anal Biochem
[ J] , 1982 , 126(1):131-138.
[ 12] Grynkiewicz G , Poenie M , Tsien RY.A new generation of
Ca2+ indicators with greatly improved fluorescenen properties.
J Biol Chem [ J] , 1985 , 260(6):3440-3450.
[ 13] Owens GK , Schwartz SM.Vascular smooth muscle cell
hypertrophy and hyperploidy in the Goldblatt hypertensive rat.
Circ Res [ J] , 1983 , 53:491-501.
[ 14] Snyder SH , Bredt DS.Biological role of nitric oxide.Sci Am
[ J] , 1992 , 267(5):28-35.
[ 15] Kruse HJ , Bauriedel G , Heimerd J , et al.Role of L-type
calcium channel on stimulated calcium influx and on
proliferative activity of human coronary smooth muscle cells.
J Cardiovasc Pharmacol [ J] , 1994 , 24(2):328-332.
[ 16] Simon G , Altman S. Subpressor angiotensin II is a
bifunctional growth factor of vascular muscle in rats.J
Hypertens [ J] , 1992 , 10(10):1165-1171.
[ 17] Kuriyama H , Kitamura K , Nabata H.Pharmacological and
physiological significance of ion channels and factors that
modulate them in vascular tissues.Pharmacol Rev [ J] ,
1995 , 47(3):431-452.
[ 18] Dubey RK , Jackson EK , Luscher TF.Nitric oxide inhibits
angiotensin II-induced migration of rat aortic smooth muscle
cell.J Clin Invest [ J] , 1995 , 96:141-149.
[ 19] Zhan CD , Wang TH , Pan JY.The effect of endogenous nitric
oxide on hypertensive cardiac hypertrophy.Chin J Appl
Physiol(中国应用生理学杂志)[ J] , 1999 , 15:100 -
103.
·8· 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2002 , 37(1):5-9
EFFECTS OF PRAERUPTORIN C ON CELL HYPERTROPHY ,
INTRACELLULAR [ Ca2+] i , NITRICOXIDE AND SIGNAL
TRANSDUCTION IN ISOLATED HYPERTROPHIED RAT
SMOOTH MUSCLE CELLS INDUCED BY ANGIOTENSIN II
RAO Man-ren , LIU Wan-bin , ZHANG Xiao-wen
(Department of Cardiovascular Pharmacology , Nanjing Medical University , Nanjing 210029 , China)
ABSTRACT:AIM 　To investigate the effects of praeruptorin C (Pra-C) on smooth muscle cell (SMC)
hypertrophy , intracellular calcium([Ca2+] i), nitric oxide(NO)content and influence on cellular signal transduction in
isolated cultured rat smooth muscle cell (SMC).METHODS　Hypertrophied smooth muscle cells (HSMCs)were
induced by angiotensin II(Ang II), cell area was measured under inverted microscope.Nitric oxide(NO)concentration
was measured using Griess method.[ Ca2+] i was measured using Fura-2 AM.The responses to [ Ca2+] i elevation
stimulated by KCl(60 mmol·L-1 or norepinephrine (10 μmmol·L-1)were observed by incubation with phorbol 12-
myristate 13-acetate(PMA), staurosporine (ST), the agonist and inhibitor of protein kinase C (PKC), and pertussis
toxin(PTX), the sensitive toxin of Gi.RESULTS　The cell area of SMCs were decreased by 39.01%(P<0.001)
andNO content of SMCs were significantly increased in Pra-C +Ang II group.In presence of 60 mmol·L-1 KCl or 10
μmol·L-1 NE , [ Ca2+] i of SMCs in Pra-C +Ang II group was significantly decreased than that of Ang II group(P<
0.001)and closed to the normal group.Incubation of SMCs with PMA , ST and PTX , [ Ca2+] i of SMCs in Ang II group
was increased by PMA and decreased by ST and PTX , but that of Pra-C +Ang II group was similar to the normal group.
CONCLUSION　These findings suggest that Pra-C can reduce vascular hypertrophy in isolated rat HSMCs , and this is
associated with improvment of SMCs [ Ca2+] i level , NO content and cellular signal transdution of PKC and Gi.
KEYWORDS:praeruptorin C;vascular smooth muscle;[ Ca2+] i;nitric oxide
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