全 文 ：第 2 3卷 第 6期 中 国 医 科 大 学 学 报
JOU R N AL O F CI N H AME I DU L A CE I V NRI S Y T
V o l
.
2 3 No
.
6
9 9 1 4年
白花前胡甲素对高钾 、 乙酞胆碱预收缩的
离体家兔气管平滑肌的作用
关福兰 金万宝 章新华 赵乃才
(中国医科大学墓础 医学院药理学教研室 )
奥山 激
(日本明治药科大学生药学教室 )
摘要 用离体 家兔气管平 汾肌标本 , 砚察白花前胡甲素对乙耽胆玻及高钾诱
发标本收 编反应的松胎 作用和标本对 ` 耽胆城及 C a a : 的 1 效关 系的影响 。 同时
研 究二药对标本在无钙液 中加入 C a CI : 时单荆 1 ` 跳胆城 诱发标本二个 时相 收缩
反应的形响 。 同时研 究二 药对标本在无钙液 中和 加入 C a a : 时 单荆贡 ` 耽胆碱诱
岌标本二个时相收缩反应的 影响 , 并与维拉帕来进行对比 . 结果表明 , 白花前胡甲
素的作用与维拉帕 来相似 , 对高钾诱发的 气管平清从 收缩反应有 显芳抑制 作用 ,
使标本对 L 跳胆城和 aC CI : 的 1 效反应 曲线右移 , 最大反应降低 , 显等抑制 乙耽胆
城 引起 的 第一时 相依 内 C a卜 性 收 缩 , 对 受体 启动依 外 C a ’ 一 性收缩 作用无 明显形
响 。 实脸结 果提示 , 白花前胡 甲素对 气管平清肌的松弛作用 与抑 制电位依核性钙
通道和细胞 内 C a 卜释放作用有关 。
关扭词 白花前胡 甲素 ; 维拉帕来 . 气管平 清肌 ; 乙耽胆碱
白花前胡甲素 [ ( 士 卜 p r a e r u p t o r in A ,
P d l a 」为 白花前胡根中提出的一种角型毗
喃香 豆 精 ( a n g u l a r 一 t y p e p y r a n o e o u m a r -
i n )
,是 白花前胡丙素 [ ( + ) 一 p r a e r u p t o r i n j
的消旋体〔’ · ’ 二 . 白花前胡石油醚提取物有舒
张气管平滑肌的作用 L’ 一 , Pd l a 有舒张肠管
平滑肌作用和钙拮抗作用 「` 二 , P dl a 对呼吸
系统作用的研究尚未见报道 . 本实验观察
P dl a 对不同条件诱 发的家兔离体气管平
滑肌收缩的影响 , 并与钙拮抗剂维拉帕米
( v e r a p a m i l
,
v e r )进行对 比 。
1 材料与方法
1
.
1 实验药物
P dl a 由 日本明治药科大学 生药学教
室分离鉴定 ; V e r 注射液江苏兴化制药厂
生产 , 乙酞胆碱 ( A e e t y l。 h o l i n e , A e h ) 上海
化学试剂总厂试剂三厂生产 。 Pdl a 用有机
溶剂 P E G 4 O O溶解 ,其它药物用生理盐水
配制 .
1
.
2 实验方法
1
.
2
.
1 标 本 制 备 家 兔 , 体重 2 . 3 ~
.3 k4 g
, 雌雄兼用 。 用木锤击颈部致 昏后 ,
迅速 摘 出气 管 并 将 其置 于通 混 和气体
( 9 5% O
: 十 5% C O Z ) 的 K r e b ` s 一 H e n s e l e it
营养液中 , 将 同一 动物 气管剪成约 3 m m
宽 , 1 . sc m 长的螺旋条标本悬挂于含 l o m l
营养液的浴管中 ( 37 ℃ ,通混合气体 ) 。将气
管平滑肌张力经力位移换能器旧本光电 ,
T B
一
6 l l T ) 及载波放大器旧 本光电 , A P -
62 1G )记 录于平衡记录仪 (上海大华仪器
仪表厂 )上 ,调整前负荷为 29 。
1
.
2 实验方法
L .2 2 实验步骤 将家兔气管平滑肌标
.
5 4 9
.
2
.
1 对高钾除极性及 A C h诱发标本收缩
的作用
1 0拼m o l/ LA C h和 4 4 .7m m o l/ LK C I
可使标本张力升高 1 . 5~ 3 . 5 9.图 1 显示
P d la 和 ve r对 A e h和 K e l预收缩标本的
作用 。 虽然用 EG P 4 0的对照实验显示其
本身对上述收缩具有微弱的松驰作用 , 对
高钾诱发张力增加的舒张作用明显大于
A C h 预收缩组 。
八次à公椒知留尼
一次)习余口叮邻
本分组进行 P dl a 和 V e r 的三种实验 。
1
.
2
.
2
.
1 对高钾除极性及 A C h 诱发气管
平滑肌收缩的影响 :
标本在浴管中每 20 m in 换液一次 , 稳
定 hl 以后 , 向浴管内加入 A C h 或 K CI ,使
终浓度分别为 10拜m o l / L 和 4 4 , 7m m o l / L ,
待诱发的收缩反应达高峰后 , 用营养液冲
洗 ,然后每 1 5m i n 换液 , 30m in 后重复加入
A C h 或 K CI , 在 标本反 应稳定后 , 分别加
入 P d l a ( 3 0拌m o l / L ) 或 V e r ( o · 5拜m o l / L ) ,
观察二药的作用 。
L .2 .2 2 对 A C h 及 aC 1C 2 量一效 曲线 的
影响 :
标本反应稳定后 , 向浴管 内累计加入
A C h ( 0
.
0 1~ 3
·
o 拜m o l / L ) , 描记 A C h 的量
一效反应曲线 ,冲洗后向浴管内加入 P dl a ,
使终浓度成 3 0拜m o l , 温育 3 o m i n , 再重复
A C h 的量 一效反应 。 在另一组实验中 , 将标
本置于无 C a Z十高钾营养液中 , 稳定后向浴
管 内累积加入 C a C I : ( 0 . 3 ~ l o om m o l / L ) ,
描记标本对 C a CI : 的量一效 曲线 , 冲洗后 ,
观察 3 0拜m o l / L P d l a 温育 3 o m i n 对 C a C 12
量一效反应的影响 . 用同样方法观察 V e r .o
5拌m ol / L 对 A C h 和 C a CI : 量一效反应的影
响 。
L .2 .2 3 对 A C h 两种收缩成分的影响 :
气管平滑肌标本在正常营养液中稳定
30 m in 后 , 用无钙液 (从正常营养液 中去除
钙 )冲洗并温育 3 Om in 。 加入 A C h 使终浓
度为 1即 m ol / L 。 标本对 A C h 产生迅速短
暂收缩 (第一时相 ) ,在达到最大反应后 ,加
入 C a CI : 2 . om m ol / L , 标本则产 生进一步
持续收缩 (第二时相 ) 。 以此为对照 , 冲洗后
加 入 P d l a 15 拌m o l / L , 3 0拜m o l / L 或 V e r
.0 5拌m ol / L 温育 3 o m in , 再重复二种 时相
的收缩反应 。
日花前胡甲布 . 拟扣不
【二〕 夏钾拍收二口 . 乙砚职 旅理收月图 1 dP l a 和 V e r 对高钾及 A C h 预收编
家兔气管平淆肌标本的抑创作用
二 P < 0 . 01 , 对两种不同报收编抑
制的比较
2
.
2 对 A C h 及 C a CI : 量一效曲线的影响
A C h 和 C a CI : 使标本产生剂量依存
性收缩 , P d la 使标本对 A C h 及 C a a : 的量
效曲线右移反应 ,但最大反应降低 。 V e r 也
显示同样的作用 (图 2 ) 。
尸.月`1.JseFw`esees卜.lrLL50 0
凡` b
对照
5 4
一怡和 l.,L
` 一 一 . 白花偏胡甲素
2 l
一 1二 0 1 / L
二 - - 确 . 拉怕未
图 2 疏 . 一 4和 V e r对家兔气管平洛肌的 A C卜和
C a a : t
一效反应曲线的影晌任士 : )果
.0
结.52
. 3 2对 A C h两种收缩成分的影响
如 图 3所 示 , P d l a 1 5拜m o l / L 及
30 拜m ol L/ 能 显 著 抑 制 在 无 钙 液 中
10拼m ol / L A C h 诱发的第一时相收缩 (依
内钙性收缩 ) , 但对第二时相收缩 (依外钙
性收缩 )作用无 明显影响 。 0 . 5拌m ol / L v er
亦显示相似作用 。
ǎ次)分刃蟒坦
白花前胡甲 t 纷 牲帕米
图 3 P d卜 和 V e r 对家免气管平滑肌的 A C 卜
两种收缩成分的影 响 牙士 : . 尸 <
.0 05
, 价 p < .0 01 为对两种收绷成分
抑制作用的比较
奋气管平滑肌上 M 胆碱受体引起细胞内
I P
3 增加 , I P 3 作用于细胞 内钙贮池 (肌浆
网 )引起细胞内 C a , ’ 释放 。 另一方面 , M 受
体兴奋还引起细胞膜上受体启动钙通道
( r e c e p t o r
一 o p e r a t e d e h a n n e l
,
R O e )开放 ,
使细胞外 C az 十 内流 。 在 除去 C a 1C 2 的无
aC
’ + 液 中 A C h 所致的气管平滑肌标本第
一时相收缩 , 主要是依赖细胞内钙释放 。 在
此基础上 加入 C a CI : 产 生的第二 时相 收
缩 , 主要是细胞外 C a ,十 经 R O C 内流的结
果 8[] 。 P d al 对第一时相收缩反应有比较强
的抑制作用 , 但对第二时相的收缩 抑制作
用很小 , 说明 P dl a 具有抑 制细胞 内 C a , -
释放的作用 ,但对 R O C 的抑制作用轻微 。
本实验结果提示 : P d la 对气管平滑肌的松
弛作用与 V e r 相似 ,其作用机制可考虑为
对高钾诱发收缩反应的较强抑制作用与抑
制 P D C 有关 ; 而对 A C h 诱发 收缩反应的
抑制作用与抑制细胞内 C a卜释放有关 。
参 考 文 献
3 讨 论
实验结果 提示 , P d la 对高钾及 A hC
诱 发的家兔气管平滑 肌有较强的松驰作
用 。尤其对高钾收缩的松驰作用比较强 。高
钾使气管平滑肌膜去极化 , 引起 电位依赖
性钙通道 ( p o t e n t i a l d e p e n d e n t C a ’ 一 e h a n -
n e l
,
P D C )开放 ,钙跨膜内流导致平滑肌收
缩 。 P dl a 对高钾收缩的较强抑制作用 , 提
示其可能具有对 P D C 选择性的阻滞作用 。
从 对 A C h 和 C a 1C 2 量 一效曲线的 影 响来
看 , P dl a 为二者的非竞争性拮抗剂 。 另一
方面 , 已知的钙通道拮抗剂 V e r 亦显示出
其非竞争性的拮抗方式 , 与在血管 平滑肌
和 胃肠道平滑肌标本获得的结果一致〔 5 · ` 〕。
A C h 使平滑肌收缩有细胞外 C a ,一 和
细胞内 C az 十两种成分参与 〔7丑 . A C h 通过兴
1
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报 1 9 7 9 ; 14 ( 8 ) : 4 8 6
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M ec h a
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a e t i o n s o f t r a 盯 s m i t -
t e r s a n d o t h e
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t h m u
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P h y s i o l
R e v 19 7 9 ; 59
:
6 0 6
( 19 9 3
一 0 9一 0 3 收稿 )
5 5 1
第 3 2卷 第 6期
1 94 9年
中 国 医 科 大 学 学 报
JR O U NAO F LC H I NAM E DC A I LU NIV ER S IT Y
V o!
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23 N o
.
6
1 9 94
T he f f Ee e ts or Pe r r au P t or in A on the C on tr ae tin o of is ol a teT dr ae七 e al
S m othM
uc slep e rv i ou sly In dc ueb dy H三 g h Kn ad Ae e ty lc h ol in e
Gu an F u l an
,
J i n W
a , : b a o
,
Z h a n g X i n h u a
, e t a l
(块 p t . o f P h a mr a e o lo g y )
P
r a e r u p t o r in A (dP l
a ) 15 a n e f f e e t iv e e o m p o n e n t e x t r a e t e d fr o m C h i n e s e t r a d i t io n a l h e r b
”
Q i
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即 .
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e s t u d ie d it s e t t e e t s o n t h e t r a e h e a】 s m o o t h m u s e l e is o l a t e d f r o m r a b b i t s . T h e s e e f f e e t s w e r e
e o m P a r e d w i t h t h o s e e x e r t e d b y v e r a P a m il
.
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e r e s im ila r
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a x e d t h e p r e e o n t r a e t io n in d u e e d
b y d e p o l a r iz e d e o n e e n t r a t io n o f K C I ( h ig h K ) m o r e e f f e e t iv e l y t h a n t h a t b y a e e t y le h o l in e ( A C h
,
1 0
拌m o l / L ) . T h e d o s e 一 r e s p o n s e e u r v e t o C a C I: a n d A C h w e r e s h if t e d t o t h e r i g h t a n d t h e m a x im a l r e -
s p o n s e w
a s d e p r e s s e d b y Pd l a
.
P d l a i n h i b i t e d t h e e o n t r a e t il e r e s p o n s e t o A C h ( 1 0 严m o l / L ) in aC
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T h e s e r e s u l t s s u g g e s t e d t h a t t h e m e e h a n i s m o f t h e r e la x in g e f fe e t o f P d l a o n t r a e h e a l s m o o t h
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e o f r a b b it s w a s t h r o u g h b l o e k in g t h e p o t e n t i a l刁 e p e n d e n t C a e h a n n e l ( P IX二) a n d i n h ib it in g t h e r e -
l
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f C a f r o m in t r a e e l l u l a r C a
一 s t o r e
.
K e y w o r ds P d l
a , v e r a p a m i l , t r a e h e a s m o o t h m u s e le ; a e e t y le h o li n e
M
a n or y 染色变法在法医病理切片中的应用
陈怀芳 汪 德文
(法医病理教研室 )
关锐词 M al or y 染 色 ;法 医 ; 病理
M
o
lo yr 染色法的变法很多 。 法 医病理材料
多用福尔马林固定 . 为获得满意的染色效果 ,对
M
o
lo yr 氏染色法进了改进 ,结果满意 。
l 材料与方法
1
.
1 材料 :法医尸体解剖案例的病理切片及科研
动物切片 . 用 10 肠福尔马林固定 ,常规石蜡包埋
切片 ,厚度 7拌m 。
1
.
2 染液的配制 :酸性复红 3 9 ,苯胺兰 19 ,桔黄
G 3 g
,磷钥酸 1 9 , 蒸馏水 20 m l ,配制后放置 2h4
后使用 。
1
.
3 染色步骤 : 切片常规脱蜡水洗 , 3%重铬酸钾
水溶液媒染 4 一 2h4 ,燕馏水洗 2 次 , M al or y 氏染
液 内 3~ s m in ,蒸馏水洗 . 96 %酒精分化约 1~
·
5 5 2
·
Zim n
, 显微镜下观察分化程度 ,常规脱水 , 二 甲苯
透明 ,树胶封片 .
1
.
4 结果 : 胶原纤维及粘液染成蓝色 , 肌组织染
成红色 ,血液大部分染成黄色 , 少部分染成红色 ,
弹性纤维染成鲜艳的玫瑰红色 。
2 讨 论
此种方法在法医尸体解剖鉴定中可以观察病
变的演变过程及组织损伤程度 . 在教学中应用也
很普遍 ,如组死 ,索沟 ,索痕的鉴定 ,各种组织的出
血及挫伤等鉴别诊断 。 本法的特点是不受固定液
的限制 ,操作简单 ,染色效果稳定 ,染液能长期在
室温下保存 . ( . 考文献从啥 )
( 19 9 4
一 0 5
一 10 收稿 )