全 文 ：桃叶鸦葱根中总黄酮的提取工艺
杨辉，王治宝
（河北北方学院药学系，河北张家口 075000）
摘 要：测定桃叶鸦葱根中总黄酮的含量，考察总黄酮抗氧化活性。采用正交设计优化总黄酮提取工艺，采用紫外分
光光度法测定总黄酮含量。采用碘量法测定不同剂量总黄酮对 H2O2的作用，采用分光光度法测定其对·OH的作用。
桃叶鸦葱根中总黄酮含量为 0.929 4 %，相对标准偏差（RSD）=2.87 %（n=3）。桃叶鸦葱总黄酮的体外抗氧化作用具有
一定剂量依赖性，对 H2O2及·OH达到 50 %清除率所需浓度（IC50）分别为浓度为 1.178 g/mL及 2.26×10-2 g/mL。桃叶鸦
葱总黄酮有一定抗氧化作用。
关键词：桃叶鸦葱；总黄酮；正交试验；抗氧化
Study on Extraction of Flavonoids from Scorzonera Sinensis Lipsch
YANG Hui，WANG Zhi-bao
（Pharmacy Department，Hebei North University，Zhangjiakou 075000，Hebei，China）
Abstract：To determine the content of Flavonoid in scorzonera sinensis. To observe Antioxidative activity of
scorzonera sinensis Flavonoid. The best method was chosen to carry on orthogonal design for extraction
technology. UV were used to determine the content of Flavonoid. Iodometric and Spectrophotometry were used to
determine the effects of Flavonoid on H2O2 and·OH. The Flavonoid in scorzonera sinensis was 0.929 4 %，RSD=
2.87 % （n=3）. The IC50 on H2O2 and o OH were 1.178 g/mL and 2.26×10 -2 g/mL. Flavonoid of scorzonera
sinensis has a strong ability to resistance oxidation.
Key words：Scorzonera sinensis； flavonoid； orthogonal design； antioxidative
基金项目：河北省高等学校科学技术研究项目（Z 2013006）
作者简介：杨辉（1972—），男（汉），副教授，硕士，主要从事中药化学
教学科研工作。
食品研究与开发
Food Research And Development
2015年 3月
第 36卷第 5期
DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2015.05.009
菊科植物桃叶鸦葱（Scorzonera sinensis Lipsch）广
泛分布于内蒙古、河北、辽宁等地。具有清热解毒疗疮
的功效。桃叶鸦葱主要有苯丙素、木脂素及其苷、倍半
萜及其苷、三萜及其苷和黄酮等成分[1-3]。研究发现，鸦
葱具有抗肿瘤 [4]、抗炎镇痛 [5]、抗抑郁 [6]等作用。本实
验运用正交设计方案，对桃叶鸦葱总黄酮的提取工
艺进行了优选，采用紫外分光光度法测定了桃叶鸦
葱根中总黄酮含量，并考察了桃叶鸦葱总黄酮体外
抗氧化作用。
1 材料
1.1 样品与试剂
药材桃叶鸦葱采自河北赤城县，由河北北方学院
中药鉴定室赵恒成教授鉴定为桃叶鸦葱（Scorzonera
sinensis Lipsch）。芦丁标准品（中国药品生物制品检定
所）；亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠和乙醇均为国产分
析纯；实验用水为去离子水。
1.2 仪器
UV2100型紫外-可见分光光度计：尤尼柯（上海）
仪器有限公司；BP211D十万分之一电子天平：赛多利
斯科学仪器有限公司；中兴高速万能粉碎机：北京中
兴伟业仪器有限公司。
2 方法
2.1 桃叶鸦葱总黄酮提取
取桃叶鸦葱根洗净，60℃烘干，粉碎为粗粉。精密
称取桃叶鸦葱根粗粉 9份，各 10 g，在单因素分析的基
础上，选用不同浓度的乙醇溶液为提取溶剂，选取料
液比，提取时间，乙醇浓度 3个因素，并各设置 3个水
平，按 L9（34）正交表设计实验方案，采用常温超声波提
取，提取液过滤后，浓缩，定容至 100 mL。水平因素见
分离提取
35
表 1，正交表见表 2。
2.2 含量测定[7]
准确称取芦丁标准品 10.0 mg，置于 100 mL容量
瓶中，加 70 %乙醇，溶解后，定容，摇匀摇匀放置 6 min，
再加 4 %NaOH溶液 4.0 mL，用 70 %乙醇定容，摇匀放
置 15 min，以 70 %乙醇即得标准品溶液。精密吸取标
准品溶液 0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL，分别置于 10 mL容
量瓶中，加 70 %乙醇至 5 mL，加 5 %NaNO2溶液 0.3 mL
摇匀放置 6 min，加 10 %Al（NO3）3溶液 0.3 mL为空白
对照，在 510 nm处测定其吸光度值。以吸光度值 A为
纵坐标，以浓度 C（mg/mL）为横坐标，绘制标准曲线。
根据标准曲线求得桃叶鸦葱总黄酮含量。按下式计算
总黄酮得率。
总黄酮得率 =提取液浓度（mg/mL）×稀释倍数 ×
体积（mL）/称取样品干质量（g）× 1000
2.3 验证实验
分别称取桃叶鸦葱根粗粉 3份，各 10 g，依据所选
最佳条件提取总黄酮并进行含量测定。
2.4 桃叶鸦葱总黄酮体外抗氧化研究
2.4.1 供试样品的制备
取一定量的桃叶鸦葱根粗粉，按照所选最佳条件
提取总黄酮，减压浓缩，定容到每毫升相当于 0.05 g总
黄酮。
2.4.2 对 H2O2的影响
采用碘量法[8]测定。每个样品平行测定 3次，取其
平均值。结果按下式计算：
H2O2清除率 E % =（V1 - V2）/（V1 - V0）× 100 %
式中：V0为阴性对照消耗 Na2S2O3的体积，mL；V1
为阳性对照消耗 Na2S2O3的体积，mL；V2为样品消耗
Na2S2O3的体积，mL。
2.4.3 对·OH的影响
根据文献[9]进行，并稍作修改。每个样品平行测
定 3次，取其平均值。结果按下式计算：
·OH清除率 E % =（A2 - A11）/（A1 - A11）× 100 %
式中：A2为样品的吸光度；A11为溶剂的吸光度；
A1为对照组的吸光度。
3 结果
3.1 正交试验结果
正交试验结果见表 2。
由表 2可知超声提取桃叶鸦葱根中总黄酮的最
佳工艺条件为 A3B2C3，即料液比为 1 ∶ 30 g/mL，乙醇浓
度为 70 %，提取 120 min。方差分析见表 3，表明，从桃
叶鸦葱根中提取总黄酮以乙醇浓度影响最大，其次为
提取时间，料液比影响最小。
3.2 验证实验
验证实验结果表明桃叶鸦葱根中的总黄酮平均
含量为 0.929 4 %（n=3，RSD=2.87 %）。
3.3 桃叶鸦葱总黄酮体外抗氧化作用
对 H2O2及·OH的影响结果见表 4。
由表 4可知，桃叶鸦葱总黄酮对 H2O2有一定的清
除作用，并呈现一定的剂量依赖关系，但清除作用较
弱；桃叶鸦葱总黄酮对·OH有较强的清除作用，并呈
现一定的剂量依赖关系。
表 1 提取工艺正交试验的水平与因素
Table 1 Levels and factors of the orthogonal test
注：以空白项为误差项
水平
因素
A料液比/
（g/mL）
B乙醇
浓度/%
C提取
时间/min
D空白
1 1∶10 60 30 —
2 1∶20 70 60 —
3 1∶30 80 120 —
表 2 L9（34）正交表及实验结果
Table 2 The results of the orthogonal test
试验号 A B C D 提取率/%
1 1 1 1 1 0.700 1
2 1 2 2 2 0.884 6
3 1 3 3 3 0.829 3
4 2 1 2 3 0.774 4
5 2 2 3 1 0.927 9
6 2 3 1 2 0.813 4
7 3 1 3 2 0.827 8
8 3 2 1 3 0.860 3
9 3 3 2 1 0.905 3
K1 0.805 0.767 0.791 0.844
K2 0.839 0.891 0.855 0.842
K3 0.864 0.849 0.862 0.821
Ra 0.059 0.124 0.071 0.023
注：溶剂中乙醇浓度对总黄酮提取率具有显著性影响。
表 3 桃叶鸦葱根中总黄酮提取率方差分析
Table 3 Variance analysis of the flavonoids extraction yield from
the root of scorzonera sinensis
因素 偏差平方和 自由度 F比 F临界值 显著性
料液比 0.005 2 5.000 19
醇浓度 0.024 2 24.000 19 *
提取时间 0.009 2 9.000 19
误差 0.00 2
分离提取杨辉，等：桃叶鸦葱根中总黄酮的提取工艺
36
表 4 桃叶鸦葱总黄酮对 H2O2及·OH的影响
Table 4 The effect of flavonoids of scorzonera sinensis on H2O2
and·OH
4 结论与讨论
本研究采用正交试验探索桃叶鸦葱根中总黄酮
的提取工艺，结果发现采用 30倍量的 70 %乙醇作为
提取溶剂超声辅助提取 120 min，提取率可达到 0.9 %。
优选得到的桃叶鸦葱总黄酮提取工艺简单，具有良好
的稳定性。
桃叶鸦葱安全无毒，为药食两用的植物，本实
验研究发现桃叶鸦葱总黄酮有一定抗氧化作用，为
将桃叶鸦葱开发为抗氧化剂及功能食品提供了一
定的参考。
参考文献：
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国药学杂志,2012,45(10):727
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收稿日期：2014-01-25
组别
总黄酮浓度/
（g/mL）
H2O2的
清除率/%
IC50 /
（g/mL）
·OH 的
清除率/%
IC50 /
（g/mL）
1 0.01 2.51 1.178 12.44 2.26×10-2
2 0.015 3.76 21.76
3 0.02 3.79 30.64
4 0.025 4.02 65.58
5 0.03 5.50 72.13
6 0.04 6.77 81.34
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