全 文 ：用双波长薄层扫描法测定飞龙掌血
根中异茴芹香豆素的含量
胡小刚 , 郭书好 , 李继革 , 李素梅 , 彭寨玉
(暨南大学化学系 , 广东 广州 510632)
[ 关键词] 薄层扫描法; 飞龙掌血根; 异茴芹香豆素
[ 中图分类号] R284.1 [文献标识码] B [文章编号] 1000-9965(2000)03-0089-02
飞龙掌血(Toddalia asiatica Lam.)是芸香科飞龙掌血属植物 , 其水煎剂及药酒有活血化淤 、祛风除湿 、消肿
解毒等功效 ,是传统的活血化淤中草药[ 1].近年研究表明飞龙掌血在治疗心血管疾病方面有崭新的应用前
景[ 2 ～ 5] , 郭书好等[ 4]经研究证明飞龙掌血中心血管活性成分为异茴芹香豆素 , 作者对飞龙掌血根甲醇提取物
中异茴芹香豆素的含量进行了测定 , 建立了飞龙掌血根中异茴芹香豆素的薄层扫描测定方法 ,对飞龙掌血进
一步的研究应用具有重要的意义.
1 仪器与试剂
CS-9301 型双波长飞点式薄层扫描仪(日本岛津);微量定量毛细管(美国 Drummoud 公司);岛津 2537 A 短
波紫外线分析仪;硅胶 GF254(青岛海洋化工厂生产);自制异茴芹香豆素对照品(经四大谱鉴定).
2 测定方法
2.1 测定条件
(1)层析条件 吸附剂:0.1 mol/L 磷酸二氢钠
-0.5%羧甲基纤维素钠盐溶液;自制硅胶 GF254薄层
板(200 mm×200 mm);展开剂:苯-丙酮(9∶1);上行
展开 ,展距为 16 cm;于 254 nm 紫外灯下定位 ,可见异
茴芹香豆素淡紫色斑点(见图 1).
(2)扫描条件 反射式双波长锯齿扫描 ,扫描宽度
8.0 mm ,扫描步距0.10 mm ,扫描光斑 0.4 mm×0.4 mm.
测定波长的选择:将层析后的板置薄层扫描仪中在 200
～ 370 nm范围内测定斑点的吸收光谱, 异茴芹香豆素
在306 nm处有最大吸收, 在370 nm 处吸收最小.所以
选择测定波长λS=306 nm ,参比波长λR=370 nm.
2.2 溶液的制备
供试品溶液:准确称取飞龙掌血根丝状物 10 g ,
置索氏提取器中 , 用甲醇提取至无色(约 7～ 8 h), 过
滤后用旋转蒸发器浓缩 ,浓缩液用甲醇转移至 10 mL
容量瓶中 ,用甲醇定容至 10 mL.
图 1 飞龙掌血根甲醇提取物薄层层析图
1对照品;2、3 、4样品;
a 处为异茴芹香豆素淡紫色斑点
[收稿日期] 1999-10-28
[作者简介] 胡小刚(1975～ ),男 ,江西瑞昌人 ,硕士研究生.
第 21卷第3期
2000年 6月
暨南大学学报 (自然科学版)
Journal of Jinan University(Natural Science)
Vol.21No.3
Jun.2000
对照品溶液:精密称取异茴芹香豆素对照品 ,加甲醇制成 1 mL含有 2.5 mg 的溶液.
2.3 标准曲线的绘制
精密吸取异茴芹香豆素对照品溶液 1、2、3、4、5 μL点样 , 展开 , 测得各点积分值 , 计算回归方程为:Y =
3 178.1X -610.16 , 相关系数 r=0.997.结果表明异茴芹香豆素对照品点样量在 2.5～ 12.5μg范围内 ,浓度与
斑点峰面积积分值呈良好的线性关系 ,因线性方程不过原点 ,故采用外标两点法测定含量.
3 实验结果
3.1 稳定性 、精密度及回收率实验
实验表明 ,异茴芹香豆素各斑点峰面积均在5 h内稳定 , 稳定性较好.板内精密度与板间精密度(RSD)分
别为 3.4%和 3.3%.实验的平均回收率为 100.5%,(n =3), RSD=3.4%.
3.2 样品测定
精密吸取异茴芹香豆素对照品溶液 2、4μL及供试品溶液2μL , 于同一块板上各点3 个样 ,依法操作 , 用外
标两点法测定供品中异茴芹香豆素含量.3 次测定结果分别为 0.379%、0.377%和 0.369%, 平均结果为
0.375%, RSD=1.4%.
4 分析与讨论
在提取中 ,曾做过索氏提取与超声波提取的比较 ,前者提取效率高 , 斑点明显.
香豆素类成分因性质相近 ,很难分离.经反复试验 ,发现展距在 16.0 cm 以上时才能实现良好分离 , 能满
足定量分析的要求.
薄层扫描法具有快速 、简便及可同时测定多个样品的特点 , 因而在天然药物的定量分析 、杂质检查 、成分
研究等多方面有广泛的用途[ 6].用于飞龙掌血根甲醇提取物中异茴芹香豆素的分离和测定甚为适宜.样品
直接用甲醇提取浓缩后即可点样 ,经薄层层析后斑点得到良好分离.紫外定位 , 减少了干扰 , 具有取样量少 ,
操作简单 ,分析快速 、准确等特点.
[参考文献]
[ 1] 《全国中草药汇编》编写组.全国中草药汇编[ M] .北京:人民卫生出版社 , 1978.70.
[ 2] 任先达.飞龙掌血水提物的扩血管作用及原理初探[ J] .暨南大学学报(医学版), 1990 , 11(2):29.
[ 3] 任先达 , 李素梅 , 汪道武等.龙晶一号对离体大鼠主动脉环的作用[ J] .中国病理生理杂志 , 1993 , 9
(2):129.
[ 4] 郭书好 , 任先达 , 李素梅等.飞龙掌血中心血管活性成分的分离与鉴定[ J] .中药材 , 1998 , 21(10):
515.
[ 5] 何小萍 , 任先达.飞龙掌血根水提物对垂体后叶素所致大鼠缺血心肌的保护作用[ J] .中国病理生理杂
志 , 1998 , 14(3):283.
[ 6] 孙毓庆.薄层扫描法及其在药物分析中的应用[ M] .北京:人民卫生出版社 , 1990.10.
90 暨南大学学报(自然科学版) 2000 年