全 文 ：2.1.2　供试品的制备 取样品粉末(过 20目筛)各 0.15mg,精密
称定 , 置索氏提取器中 , 加入甲醇 85ml, 加热回流 9h, 提取液置
100ml量瓶中 ,加甲醇至刻度 , 摇匀 ,即得。
2.1.3　线性关系的考察 分别吸取对照品溶液 1, 2, 3, 4, 5 ml,
置 10 ml容量瓶中 , 加甲醇至刻度 , 测定吸光度。以吸光度为纵
坐标 , 以浓度为横坐标 , 绘制标准曲线 , 得回归方程为:Y=
41.717X-0.001 8(r2 =0.999 3), 线性范围为 0.002 33 ～ 0.011
65 mg/ml。
2.1.4　样品的测定 结果见表 1。
2.2　欧前胡素的测定
2.2.1　对照品的制备 精密称取欧前胡素对照品适量 , 加甲醇制
成每毫升含 10μg的溶液 ,即得。
2.2.2　供试品的制备 取样品粉末(过 3号筛)约 0.4 g, 精密称
定 , 置 50 ml量瓶中 , 加甲醇 45ml, 超声处理(功率 300 W, 频率
50Hz)1 h, 取出 ,放冷 , 用甲醇稀释至刻度 ,摇匀 , 取续滤液 ,即得。
2.2.3　线性关系的考察 精密欧前胡素对照品适量 , 加甲醇配
制成 11.6 μg/ml对照品溶液。精密吸取该溶液 1, 2, 4, 6, 8,
10 μl, 分别进样进行测定。以峰面积为纵坐标 、进样量(μg)为横
坐标 , 绘制标准曲线 ,得回归方程为:Y=2500.6X+1.460 9(r2 =
0.999 9),线性范围为 0.023 2 ～ 0.232 μg。
2.2.4　样品的测定 结果见表 1。
3　讨论
根据测定结果可知 ,不同类型的各白芷新型饮片总香豆素含
量在 0.99% ～ 1.4%之间 , 平均为 1.05%, 欧前胡素含量在
0.11% ～ 0.18%之间 , 平均为 0.138%, 传统饮片总香豆素含量
为 0.75%, 欧前胡素含量为 0.07%。为白芷新型饮片质量标准
的制定提供了参考依据。
白芷丁的总香豆素和欧前胡素含量均较高 ,可能是由于选用
的切丁白芷药材根条较小或为粗根尾部。文献报道 ,富含上述成
分的浆汁集中在根的皮部 ,根越细皮部所占的比例越大 [ 4] 。
表 1　白芷饮片中总香豆素 、欧前胡素含量测定结果
样品 干燥方式 总香豆素(%)
欧前胡素
(%)
白芷新型饮片　　横片　　机器切片 烘干 1.04 0.11
　　　　　　　　　　　　专用切片刀 日晒 1.14 0.11
　　　　　　　　　　　　手工切片 烘干 1 1.1 0.14
　　　　　　　　　　　 烘干 2 0.90 0.15
　　　　　　　　　　　 炕干 1 1.06 0.15
　　　　　　　　　　　 炕干 2 0.93 0.183
　　　　　　　　　　　 微波炕干 0.99 0.11
　　　　　　　　纵片　　机器切片 烘干 1.0 0.13
　　　　　　　　切丁　　手工切片 烘干 1.16 0.18
　　　　　　　　　　　 微波烘干 1.2 0.12
白芷传统饮片　　市售商品白芷饮片 0.75 0.07
　　n=3
采用微波干燥方法加工的饮片总香豆素和欧前胡素含量较
低 , 分析原因 ,认为可能与白芷药材的形状有关 , 片子的大小不
均 , 火力难以控制 ,导致有效成分损失 ,尚需进一步优化微波干燥
的工艺 。
参考文献:
[ 1 ] 　国家药典委员会.中国药典 , Ⅰ 部 [ S] .北京:化学工业出版社 ,
2005:69.
[ 2 ] 　钟世红 ,马逾英 ,贾敏如 ,等.川白芷HPLC指纹图谱研究 [ J].世界
科学技术 -中医药现代化 , 2005, 7(6):67.
[ 3 ] 　马逾英 ,钟世红.紫外分光光度法测定川白芷中总香豆素类成分的
含量 [ J] .华西药学杂志 , 2005, 20(2):159.
[ 4 ] 　贾敏如.川芎 、川白芷生产质量管理规范(GAP)的研究 [ M] .成
都:四川科技出版社 , 2007:121.
收稿日期:2010-03-02;　修订日期:2010-08-28
基金项目:国家科技支撑计划(No.2007BAI38B05)
作者简介:赵跃刚(1973-),男(汉族),吉林长春人 ,现任长春中医药大学讲师 ,硕士学位 ,主要从事中药化学及新药开发工作.
＊通讯作者简介:刘永宏(1972-),男(汉族),吉林长春人 ,现任中国科学院南海海洋研究所研究员 ,博士学位 ,主要从事天然药物中活性成分的分离研
究工作.
酢浆草药材中总黄酮的含量测定
赵跃刚 1 , 王隶书 2 , 范艳君1 , 刘永宏 3＊
(1.长春中医药大学 ,吉林 长春　130117;　2.吉林省中医药科学院 ,吉林 长春　130012;
3.中国科学院南海海洋研究所 ,广东 广州　510301)
摘要:目的 建立酢浆草药材中总黄酮的含量测定方法。方法 在国内首次以异荭草素为标准品 , 采用分光光度法测定酢
浆草药材中总黄酮的含量。结果 异荭草素在 10.096 ～ 80.768μg/ml范围内呈良好的线性关系;平均回收率(n=6)为
99.8%, RSD为 1.35%。结论 该方法操作简便 、快速 、准确 ,可用于酢浆草药材的含量测定 。
关键词:酢浆草;　总黄酮;　异荭草素
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2011.01.036
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2011)01-0081-02
ComparisonontheContentsoftheTotalFlavonoidinHerbaOxalidisCorniculatae
ZHAOYue-gang1 , WANGLi-shu2 , FANYan-jun1 , LIUYong-hong3＊
(1.ChangchunUniversityofTraditionalChineseMedicinial, Changchun130117, China;2.JilinProvinceA-
cademyofChineseMedicine, Changchun, 130012, China;3.SouthChinaSeaInstituteofOceanology, Chinese
AcademyofTraditionalSciences, Guangzhou, 510301, China)
Abstract:ObjectiveToestablishamethodfordeterminationoftotalflavonoidcontentinHerbaOxalidisCorniculatae.Methods
InChinaforthefirsttimethecontentoftotalflavonoidinHerbaOxalidisCorniculataewasdeterminedbycolorimetricmethodwith
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2011VOL.22NO.1 时珍国医国药 2011年第 22卷第 1期
isoorientinasastandardproduct.ResultsTherewasagoodlinearrelationshipwithintherangeof10.096 ～ 80.768μg/ml.The
averagerecoveries(n=6)was99.8%, withRSDof1.35%.ConclusionTheproposedmethodissimple, rapidandaccurate.It
canbeusedtodeterminethecontentoftotalflavonoidinHerbaOxalidisCorniculatae.
Keywords:HerbaOxalidisCorniculatae;　Totalflavonoid;　Isoorientin
　　酢浆草 OxaliscorniculataL.为酢浆草科植物酢浆草的全草 ,
全草味酸 , 因此也称酸浆草 、酸草 、三叶酸 、酸咪咪等 ,在苗药中被
列为上品。其性味功效为酸 、凉 , 具有清热解毒 、利湿消肿 、清肺
化痰的功效 , 在临床上可用来治疗神经衰弱 、失眠 、肺炎 、扁桃体
炎 、急性肝炎 、小儿上呼吸道感染等多种疾病 [ 1] 。全草主要含黄
酮类物质 、有机酸及脂类物质等。
关于酢浆草的化学和药理方面的研究报道目前还较少 ,而本
课题组在国家科技部的资助下 ,对酢浆草的化学及药理进行了深
入研究 , 在国内首次以异荭草素为标准品 , 采用亚硝酸钠 -硝酸
铝比色法测定了 10批酢浆草药材中总黄酮含量 ,建立了稳定可
靠且重现性好的测定方法 ,以期为酢浆草的进一步开发利用提供
相应的依据。
1　仪器与试药
722型紫外分光光度计(上海第三分析仪器厂);KQ-3200
型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);AUW120D电子分
析天平(日本岛津)。异荭草素对照品由本课题组自制(纯度 >
98%);所用试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2.1　溶液的制备
2.1.1　对照品溶液的制备 精密称取异荭草素对照品 12.62 mg,
置 25 ml容量瓶中 , 加 70%乙醇溶液溶解并稀释至刻度 , 摇匀 ,作
为对照品溶液。
2.1.2　样品溶液的制备 取酢浆草药材粗粉约 1 g, 精密称定 ,
置锥形瓶中 , 加 40 ml70%甲醇溶液超声处理 30 min(功率 120
W, 频率 40 kHz), 滤过 , 滤液蒸干 , 残渣用 70%乙醇溶液适量使
溶解并定量转移至 10 ml容量瓶中 , 加 70%乙醇溶液至刻度 ,摇
匀 , 作为供试样品溶液。
2.2　测定波长的选择 精密吸取 “ 2.1”项下对照品溶液及样品
溶液各 2 ml,分别置 25ml量瓶中 , 各加水至 6 ml, 加 5%亚硝酸
钠溶液 1 ml,混匀 , 放置 6min,加 10%硝酸铝溶液 1 ml,摇匀 ,放
置 6 min, 加入氢氧化钠试液 10 ml,再加水至刻度 , 摇匀 , 放置 15
min,于 370 ～ 700 nm波长范围内扫描 , 结果对照品及样品均在
510nm波长处有最大吸收 ,故确定 510 nm为测定波长。
2.3　标准曲线的绘制 精密吸取 “ 2.1.1”项下对照品溶液 0.
5, 1, 2, 3 , 4 ml分别置 25 ml量瓶中 , 各加水至 6 ml, 加 5%亚
硝酸钠溶液 1 ml, 混匀 , 放置 6 min, 加 10%硝酸铝溶液 1 ml,
摇匀 , 放置 6 min, 加入氢氧化钠试液 10 ml, 再加水至刻度 , 摇
匀 , 放置 15 min。以相应试剂为空白 , 于 510 nm波长处测定
吸光度 。以取样浓度为横坐标 , 吸光度为纵坐标 , 绘制标准曲
线 , 回归方程为 Y=0.011X-0.000 3, r=0.999 6 , 线性范围
为 10.096 ～ 80.768 μg/ml。
2.4　稳定性实验 取供试品溶液 2 ml, 按 “ 2.2”项下方法操作 ,
对同一显色后的供试液每隔一段时间测定 1次吸光度 ,结果吸光
度在 1.5 h内无明显差异(RSD=1.16%, n=6),表明显色后的
供试液在 1.5 h内稳定性良好。
2.5　重复性实验 分别取酢浆草药材约 1 g6份 , 精密称定 , 按
“ 2.7”项下方法操作 , 测定吸光度 , 结果总黄酮平均含量为
0.43%, RSD为 1.66% (n=6),表明本方法重复性良好。
2.6　回收率实验 在已知含量的酢浆草药材粉末中 , 加入一定量
的异荭草素对照品 ,按供试品溶液制备方法制备 , 显色 ,测定吸光
度 , 计算回收率。结果见表 1。
表 1　酢浆草药材总黄酮回收率测定结果
样品称量
m/g
样品含量
m/mg
加入对照品量
m/mg
测得量
m/mg
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
1.018 9 4.39 4.67 9.05 99.8
1.007 4 4.34 4.72 9.14 101.7
0.998 3 4.28 4.46 8.76 100.4 99.8 1.35
1.054 3 4.54 4.49 8.92 97.6
0.996 9 4.30 4.46 8.73 99.3
1.023 5 4.41 4.82 9.23 100.0
　　n=6
由表 1结果可知 , 酢浆草药材的平均回收率为 99.8%, 且
RSD小于 2%, 故认为用此方法测定酢浆草药材中总黄酮含量完
全可行 。
2.7　样品含量测定 取十批酢浆草药材粉末各约 1 g,精密称定,
按照 “ 2.1.2”项下样品溶液制备方法操作, 制得样品溶液 ,按 “ 2.3”
项下方法显色, 测定吸光度 ,计算总黄酮含量。结果见表 2。
表 2　十批酢浆草药材中总黄酮含量测定结果
批次 含量(%)
1 2 x
1 0.436 0.427 0.431
2 0.553 0.565 0.559
3 0.355 0.367 0.361
4 0.501 0.509 0.505
5 0.479 0.468 0.473
6 0.231 0.241 0.236
7 0.420 0.433 0.426
8 0.678 0.682 0.680
9 0.533 0.520 0.527
10 0.437 0.447 0.442
3　讨论
曾比较过用 50%乙醇 、70%乙醇 、50%甲醇 、70%甲醇 4种溶
剂提取酢浆草药材 , 结果发现以 70%甲醇为溶剂总黄酮含量最
高 , 故选择用 70%甲醇作提取溶剂。
本实验对 10个不同批次的酢浆草药材进行总黄酮含量测
定 , 含量范围在 0.2% ～ 0.7%之间 , 而黄酮类化合物在抗菌 、抗
炎 、抗毒素等方面作用显著 [ 2] , 因此在用药时有必要对总黄酮含
量进行监测 ,以保证用药安全及有效。
参考文献:
[ 1 ] 　汪　毅 ,李朝斗 ,杨卫平 ,等.草药彩色图集 [ M] .贵阳:贵州科学技
术出版社 , 2001:324.
[ 2 ] 　吴立军.中药化学 [ M] .北京:中国医药科技出版社 , 2000:103.
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时珍国医国药 2011年第 22卷第 1期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2011VOL.22NO.1