全 文 ：·!!·中药新药与临床药理 !#年 #月第 $% 卷第 &期
收稿日期：#$$% & $! & !!
作者介绍：肖建波 ’ !( & )，男，博士研究生，研究方向：天然产物的分离分析。通讯作者：周春山 ’ !*! & )，男，教授，博士生导师，研究方
向：天然产物的分离分析。+,-./：012345678-6,9: !;<= >4,。
基金项目：广西省科技攻关项目（编号 $#<%$## & !?）； 广西省回国人员科技基金项目（编号 桂科回 $$$$$*）。
响，结果表明，超声提取 *$ ,.0 含量达稳定，因此
选择超声提取 *$ ,.0。对流动相的选择，我们尝试
了不同比例的乙腈 &水，及不同柱温对分离的影响，
结果乙腈 &水（@$ A #$），柱温 <$ B时，紫茉莉根
中葫芦巴碱可和其他组分基线分离，且峰形良好。该
法分离效果好，简便、准确，可用于紫茉莉根的初步
质量控制。
参考文献：
C ! D国家中医药管理局《中华本草》编委会 = 中华本草（第二册） CED= 上
海：上海科学技术出版社，!= (*@ & (*=
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力学研究 C F D = 药学学报，#$$<，<@（*）：#( & #@#=
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’编辑：邹元平 )
拳卷地钱挥发油的 !#超临界流体萃取及 $! %&’分析
肖建波，周春山，曹 慧 ’中南大学化学化工学院，长沙 *!$$@< )
摘要：目的 探索拳卷地钱中挥发油 JK#超临界萃取的最佳条件，并对萃取物进行分析。方法 通过正交试验法，
采用超临界流体萃取技术对中药拳卷地钱中挥发油萃取条件进行优化选择，并与系统溶剂萃取制备方法作比较，对
萃取产物进行 LJ & EM和 GHIJ分析。结果 中药拳卷地钱中挥发油最佳萃取条件为：萃取釜压力 !%E H-，萃取温
度 %$ B，改性剂乙醇加入量 <$ ,I，萃取时间 # 8，动态流量 !$ I N 8，以乙醇作为吸收液。通过 LJ & EM分析，共
计分离出 #<个峰，鉴定了其中 !种物质，占总组分的 @#= ;!O。结论 与传统的溶剂萃取法相比较，该方法具有
耗时短，提取完全等优点。
关键词：拳卷地钱；MP+ & JK#；挥发油；正交设计；LJ & EM；GHIJ
中图分类号：Q#@*= ! 文献标识码：R 文章编号：!$$< & (@< ’#$$% )$< & $!! & $*
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·!#· 中药新药与临床药理 !#年 # 月第 $%卷第 & 期
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5 萃取时间 ’ 6
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试验号
地钱又名地衣 : ! ;，广泛分布于全国各地，其药用
始载于《名医别录》，《本草纲目》中谓之“石
衣”，味淡，性凉，归肝经 : # ;，具有清热利湿，解毒
敛疮的功效。资源调查表明广西境内存在 $种地钱科
植物，其中以拳卷地钱为主 : $ ;，民间常用于治疗急性
肝炎。目前国内外对拳卷地钱的研究报道较少， 拳
卷地钱的化学成分主要包括黄酮和挥发油等 : % 9 0 ;。通
过成分预试验，发现拳卷地钱中挥发油以萜类化合物
为主，主要是单萜、倍半萜及其含氧衍生物。超临界
流体萃取是近年来分离领域的高新技术 : 1 9 !, ;，具有萃
取效率高，选择性好，环境污染小，节省时间，后处
理简单的优点。我们采用超临界流体二氧化碳萃取
（<=8 9 2>#）拳卷地钱中挥发油，从温度、压力、
改性剂加入量、萃取时间、动态流量这 + 个因素着
手，采用五因素四水平的正交试验，筛选出最佳萃取
条件，取得了较为满意的实验结果。
! 仪器、材料与试剂
超临界流体萃取器（江苏南通超临界仪器公
司）；2># 气体 ? 7 @ A ?长沙市气体供应站 A；
BC 9 0+/(2 分光光度计 ?上海精密仪器有限公司 A。
D2 9 !0& ’ E)+,,, 型气质联用仪 ?日本 <6F3*GHI 公
司 A。拳卷地钱采自广西自治区靖西湖润乡山沟，原
植物由广西中医学院中药鉴定教研室周子静教授鉴定
为 $%&’(%)*+% ’,)-,./*% D*J 0* 26*KL 的叶状体，样品
（编号 #,,#,##）保存于广西中医学院中药鉴定
室。所用试剂均为分析纯。
方法与结果
# ! 拳卷地钱挥发油的提取方法
# !# ! 溶剂提取法 称取拳卷地钱干燥品 !, L，加
入 1, @乙醇水溶液 !,, 34，提取温度 0, .，时间
,7 + 6，提取 $ 次，过滤，合并滤液，减压蒸馏，回
收乙醇，浓缩至 !,, 34，得拳卷地钱粗提物。
# !# <=8 9 2># 萃取 将拳卷地钱粉碎成粉末，每
次取约 !,7 , L，放入萃取釜内，分离釜 !和分离釜 #
的压力均为 1 ()* ，按正交设计表 ?表 ! A中条件萃
取，以乙醇为吸收液，萃取完全后，定容至 !,,
34，再取 # 34，定容至 +, 34，于紫外 #0! K3处测
吸光度值。
# 正交设计优选 $%& ’ () 萃取条件 我们选用
4!/ ? %+ A正交表，以紫外吸光度值为指标，对萃取压
力、温度、萃取时间、改性剂加入量、动态流量这 +
个因素进行了考察。因素水平表见表 !。
表 ! 因素水平表
# * 正交试验结果 根据 4!/ ? %+ A正交表的实验方
案，按 #7 !7 #萃取和测定方法进行试验，并对正交试
验有关数据进行分析，结果见表 #。由表 #可知各因
素对萜烯类化合物提取率的影响程度依次为 &M5M2M
8M-。萃取釜压力对萜烯类化合物提取率影响最大，
随萃取釜压力的升高，拳卷地钱萜烯类化合物提取率
逐渐增大，但当萃取釜压力达到 !+ ()* 以后，萃取
釜压力升高，萜烯类化合物的提取率反而下降。其次
是提取时间，随提取时间的增加，萜烯类化合物的提
取率逐渐增加。影响最小的是提取温度。实验表明，
&$-!2$5%8# 为最佳提取条件，即萃取压力 !+ ()*，
温度 +, .，改性剂乙醇 $, 34，萃取时间 # 6，动态
流量 !, 4·6 9 !。
表 4!/ ?%+ A正交试验设计表及结果
# + 拳卷地钱挥发油的 ,( ’-$分析
# +# ! 分析条件 采用日本 <6F3*GHI 公司 D2 9
!0& ’ E)+,,, 型气质联用仪， N)+ 毛细管柱 ? /, 3 O
,7 #+ 33A，载气（&P）,7 +, ()*，流速 $07 $ 34 ’
·!#·中药新药与临床药理 !#年 #月第 $% 卷第 &期
$%&，气化温度 ’() *，柱温 +) , ’() *，程序升温
( * - $%&，’#) *持续 # $%&，进样量 ). ! !/，进样
# $%&后进行质谱分析。质谱采用 01电离方式，质量
扫描范围 2) , +()，离子流温度 ’3) *。
! # ! 分析结果 按上述实验条件对拳卷地钱 450 6
78’ 萃取物进行分析，得总离子流图（见图 !），共
计分离出 ’# 个峰。总离子流图中的各峰经质谱扫描
后，通过质谱计算机数据系统检索对各色谱峰加以确
认，鉴定了其中 ! 种物质，相对含量经面积归一化
法计算占总组分的 9’. +! :，结果见表 #。
编号
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成分
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’’. 2
’#. ’#
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对 R4标准的可靠性 - :
2
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9
3
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3
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相对含量 - :
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’. #9
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’. 2!
’. 33
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’. 2+
!. #2
表 ! 拳卷地钱挥发油 T7 6 R4分析结果
图 拳卷地钱挥发油总离子流图
! $ 拳卷地钱挥发油的 %&’(分析
! $ ) 分析条件 分别对超临界萃取产物和溶剂提取
产物进行高效液相色谱分析，色谱条件：;S9!)) 高
效液相色谱仪（;%>?G>&%F 公司）；;S9’))UV 检测
器；色谱柱为 WG>$AJ%B 7!9 柱（ ’() X 2. + $$， (
!$，CA&L>& 4F%<&F< YS
相为乙酸 6甲醇 6乙腈 6磷酸 6水（!) [ ’)) [ !)) [
!) [ ’))）；流速 ). +) $/ - $%&，检测波长 #() &$；
柱温 ’( *；进样量 +. ) !/。
! $ ! 分析结果 对超临界萃取产物和溶剂提取产物
进行高效液相色谱分析，结果表明超临界萃取产物的
色谱图未出现任何色谱峰 N溶剂峰除外 P，而乙醇提取
物则出现 !) 余个较高的色谱峰 N图 ’ P，经鉴别大多
为黄酮类化合物。采用改进的铝盐显色法 \ !! ]进行黄
酮类化合物显色时，发现超临界萃取产物中不含黄酮
类化合物，而乙醇提取物中总黄酮含量较高。
图 # 拳卷地钱乙醇提取物 CQ/7色谱图
* 讨论
系统法是以往经常采用的实验方法之一，但由于
其操作较繁琐，且未考虑到各因素的交叉作用，具有
一定的弊端。如果系统法的设计要考虑因素间的交互
作用，共需几百次实验，显然这是不可能的，而正交
设计法则考虑了各因素间的交互影响，由于因素间的
搭配均匀，不仅能区分每个因素的作用，找出最佳搭
·!#· 中药新药与临床药理 !#年 # 月第 $%卷第 & 期
配，而且还可以考虑因素的联合作用，并大大减少了
试验次数。
超临界流体萃取对于每个条件的选取有其一定的
特点，随着压力的增加，萃取效率随之增加，当压力
超过一定界限时，萃取效率反而下降。当压力一定
时，升高温度会使被萃取的物质挥发增加，其对基体
的解吸附能力增强，扩散增快，从而使萃取效率提
高 $然而，温度升高，超临界流体的密度降低，它的
溶解能力也会相应降低，会导致对样品的萃取能力降
低。因此，对温度的选取也要有一定的范围。对于时
间，不同的生药所采用的条件也是不同的。改性剂的
加入量对提高超临界流体的萃取效率有一定作用，但
改性剂加入量要适当，如果太少，起不到应有的作
用。改性剂浓度过高会改变萃取性质，使萃取主要在
液态下进行，从而使萃取效率下降。
本实验中，我们采用的改性剂是乙醇，这是为了
适应工业生产的需要。因为要做生物活性试验，氯
仿、甲醇等改性剂具有毒性，不宜用于工业生产，故
不将其列入实验范围。
超临界流体萃取产物中萜烯及其含氧衍生物含量
较高，其中 %&’()*+,-’().& 和 /&01). 含量分别达到
!#2 3 4和 562 7 4，另含有多种酯类化合物，含有
机酸很少。与其乙醇提取物相比，不含有黄酮类化合
物，极性较大的成分较少，杂质含量较低，易于后续
倍半萜类化合物的分离纯化和生物活性试验。
参考文献：
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艺 8 E 9 2 中草药，!3，=< ?5 @ ; 3<2
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*1-S*,)’ )P -P.-*)a,’ %! P1)X P))0 X-*1S&Q 8 E 9 2 E2 /+1)X-*)O1 DS,，
!=，=! ?! @ ; !=2
8 !! 9朱华，肖建波，钟世安，等 2 地钱总黄酮含量的测定 8 E 9 2 光谱实
验室，566#，5! ?5 @：=3= A =372
?编辑：邹元平 @
道地药材阳春砂不同居群的 Z>RN分析
徐吉银，丁 平（广州中医药大学中药学院，广州 B!6#6B）
摘要：目的 从 N]>分子水平上探讨阳春砂药材的道地性。方法 对来自不同居群（春湾、蟠龙和云南 =个居群）
的 #个阳春砂仁样品进行 Z>RN分析，得到的条带用 R)UO&’& =2 5和 R+Y.,U软件进行数据处理。结果 得出 =个居
群阳春砂的聚合树状图，表明春湾和蟠龙两个居群的亲缘关系较近，云南居群与春湾、蟠龙两居群的亲缘关系较
远。结论 为从分子水平上探讨道地药材的形成提供客观依据。
关键词：阳春砂；道地性；Z>RN
中图分类号：Z5<#2 ! 文献标识码：> 文章编号：!66= A 3<= ?566B @6= A 6!# A 6=
!#$%&’& ( )*+’**&& (, !#$ %&’’#($ -(+./ ,.(0 1’,,*.*2 3#4’2#2& 4% 5!61
JH E,Y,’，NK]C R,’O（/)..&O& )P R+-1X-SY，CI-’O(+)I H’,V&1Q,*Y )P b/:，CI-’O(+)I B!6#6B）
!4&2.#728 94:*72’;* b) ,’V&Q*,O-*& *+& O&’I,’&’&QQ )P !#$ c,..)QIX [)I12 -* N]> X).&SI.-1 .&V&.2 <*2=(>&
收稿日期：566B A 65 A !#
作者简介：徐吉银（!3< A），男，566= 级硕士研究生，研究方向：中药资源与中药材质量标准研究。\X-,.： *W*YPdPeV&Yf !572 S)X，b&.：
（656）<