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经比较小鼠注射药物前后的粪尿铁总量 , 可知 Fe3O 4
在小鼠体内经肠道排出量高于经肾脏排出量 , 注射药物后
48 h 内累计粪便总排出量不超过给药总量的 25%。
4　讨论
从表 2 可见 , 家兔静脉注射本品后呈双室模型代谢 ,
α β , 说明分布快于消除 , α大表示分布到周边室快。 t1 /2β
为 160 min , 说明本品从血浆中清除亦较快。
Fe3O4 在体内的分布依次为:肝脏 、 脾脏 、 心脏和肾
脏 , 主要是肝脏和脾脏等网状内皮细胞和吞噬细胞较多的脏
器 , 这可能和 Fe3O 4 进入机体体内被网状内皮细胞和吞噬
细胞吞噬有关。
同时可见 Fe3O 4 在体内排泄缓慢 , 可以从粪便和尿液
排出体外。因为磁性微粒在体内可以因磁力的作用相互吸引
成团 , 致使磁粒积蓄于体内的重要脏器造成机体脏器微循环
的障碍和排泄延迟 。 对于排泄的延迟可以通过调磁加速
Fe3O4 在体内的排泄 , 以提高药物的安全性和减少磁粒的
损害[ 5] 。
参考文献
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拳卷地钱中黄酮类化合物的含量测定
曹慧1 , 肖建波1 , 周春山1* , 朱华2 , 黄海滨2 (1. 中南大学化学化工学院 , 长沙　410083;2. 广西中医学院 , 南宁
　530001)
摘要:目的　建立拳卷地钱中黄酮类化合物的含量测定方法。方法　采用改进的铝盐显色分光光度法测定拳卷地钱
总黄酮含量;采用反相高效液相色谱法测定拳卷地钱黄酮类化合物中芹菜素 、 槲皮素和木犀草素的含量。结果　分
光光度法表明:总黄酮含量在 1. 6 ～ 16 μg m L - 1线性关系良好 , 回收率在 97. 6%～ 101. 6%, RSD为 0. 2%;反相
高效液相色谱法表明平均加标回收率 96. 8%～ 101. 1%, RSD 为 0. 7 %～ 1. 5%。结论　方法用于拳卷地钱中黄酮
类化合物含量的测定准确可靠 , 结果令人满意。
关键词:拳卷地钱;黄酮类化合物
中图分类号:R284. 1 R927. 2　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1672 - 2981 (2005) 01 - 0007 - 03
Determination of flavonoids from Marchantia convoluta
Cao H ui1 , Xiao Jian-bo 1 , Zhou Chun-shan1* , Zhu H ua2 , Huang Hai-bin2 (1. Central South University , Chang-
sha　410083;2. Guang xi T raditional Chinese Medicine University , Nanning　530001)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To e stablish methods for determining flavono ids f rom M. convoluta. METHODS　The
contents o f to tal flav onoids in M. convoluta w ere determined through developed visible spectr opho tometr y. The re-
versed phase high perfo rmance liquid chromatog raphy w as set up to determine the contents of flav onoids in M. convolu-
ta. RESULTS　In visible spectrophotome try Bee r’ s law was obeyed w ithin the range of 1. 6 ～ 16 μg m L - 1 and the re-
coveries were w ithin the range of 97. 6%～ 101. 6%, and RSD w as 0. 2%. In HPLC mele tin , cyanidenon and versulin
we re quantitated by calibration cur ve method at 350 nm. The ave rage recovery w as 96. 8 %～ 101. 1%, and RSD was
0. 7%～ 1. 5%. CONCLUSIONS　These methods a re accura te w ith satisfacto ry results.
KEY WORDS:Marchantia convoluta ;f lavono ids
　　地钱又名地衣 , 苔藓属植物 , 多生于阴暗潮湿的地
方[ 1] 。地钱的药用始载于 《名医别录》, 《本草纲目》中谓之
“石衣” , 味淡 、 性凉 、 归肝经。有清热利湿 、 解毒敛疮 、 清
心明目之功效。广西 、 贵州有大量野生地钱植物资源 , 经资
　　基金项目:广西壮族自治区科技攻关项目 , 桂科攻 0235022—1B;广西壮族自治区回国人员科技基金项目 , 桂科回 0009004
作者简介:曹慧 (1978～ ), 女 , 硕士生　　E-mail:new fou rth army@163. com 　　*通讯作者:周春山 (1941 ～ ), 男 , 教授 , 博士
生导师, 从事天然产物分离分析方面研究　　
中南药学 2005 年 2 月第 3 卷第 1 期　Centr al South Pharmacy . February 2005 , Vo l. 3 No. 1
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源调查 , 主要为拳卷地钱。目前天然药用植物中黄酮类化合
物的测定方法主要有紫外分光光度法 、 铝盐显色分光光度
法[ 2 ～ 5] 、 梯度洗脱反相高效液相色谱法[ 6]等。本文采用分光
光度法测定拳卷地钱总黄酮含量;采用反相高效液相色谱
法 , 直接对拳卷地钱中主要活性成分芹菜素 、 槲皮素和木犀
草素进行定量分析 , 结果表明方法简便 、 快速 、 准确 , 可用
于拳卷地钱中黄酮类化合物的精确分析。
1　仪器和试药
BT8100 高效液相色谱仪 (Bio tronic公司);BT8200UV
检测器 、 旋转蒸发仪 (上海申科仪器公司)。乙醇 、 石油醚 、
乙酸乙酯等试剂均为 AR 级;硅胶 AR 级 (青岛海洋化工
厂);甲醇和乙腈为色谱纯。芦丁 、 芹菜素 、 槲皮素和木犀
草素对照品 (中国药品生物制品所);药材地钱 [ 广西中医
学院提供 , 经广西中医学院周子静教授鉴定为拳卷地钱
(M. convoluta)] 。
2　实验部分
2. 1　对照品和供试品液的制备
2. 1. 1　对照品溶液的制备　精密称取适量的芹菜素 、 槲皮
素及木犀草素对照品 , 加甲醇制成混合对照品溶液 , 每 1
mL 分别含芹菜素 、 槲皮素 、 木犀草素为 26. 0 、 25. 0 、 30. 0
μg , 即得对照品溶液。精密称取适量的芦丁对照品 , 加甲醇
制成芦丁对照品溶液 , 浓度为 40μg mL - 1。
2. 1. 2　供试品溶液的制备 　准确称取拳卷地钱干燥品
63. 214 4 g , 加入 80%乙醇水溶液 3 000 mL , 每次 1 000
mL , 提取温度 70 ℃, 时间 0. 5 h , 提取次数 3 次 , 过滤 ,
合并滤液 , 减压蒸馏 , 回收乙醇 , 浓缩至 100 mL , 得拳卷
地钱总黄酮提取物。移取该制备液 1. 00 m L于 100 m L容量
瓶中 , 60%乙醇定容至刻度 , 即得拳卷地钱黄酮提取物的供
试品溶液。
2. 2　色谱条件
色谱柱为 Kromasil C18柱 (250 mm ×4. 6 mm , 5 μm ,
Hanbon Science & Techno log y Co. , L td);流动相为乙酸-
甲醇-乙腈-磷酸-水 (10∶200∶100∶10∶200 , v /v);流速
0. 60 mL min - 1 , 检测波长 350 nm;柱温 25 ℃;进样量
6. 0μL。
3　结果与讨论
3. 1　分光光度法测定地钱总黄酮含量
3. 1. 1　测定条件　分别准确移取芦丁标准溶液和拳卷地钱
黄酮提取物的供试品溶液适量于 25 m L 容量瓶中 , 加入
0. 50 mol L - 1NaNO2 溶液1. 00 mL , 摇匀 , 静置 5 min 后 ,
加入 0. 30 mo l L - 1AlCl3 溶液 1. 0 mL , 摇匀 , 加入 1. 00
mol L - 1NaOH 溶液 5. 0 mL , 60%乙醇定容至刻度 , 超声
振荡 1 min , 用 2 cm 比色皿在 525 nm 处测定吸光度。
3. 1. 2　标准曲线的绘制和线性范围的确定　准确移取 40μg
mL - 1芦丁标准溶液 0. 25 、 0. 5、 1. 0、 2. 0 、 3. 0 、 5. 0 、 7. 0 、
9. 0、 10. 0 、 11. 0 、 12. 0 、 13. 0 mL 于 25 m L 容量瓶中 , 按
“3. 1. 1 法” 显色 , 以吸光度 (A) 为纵坐标 , 以芦丁标准溶
液的浓度 (C) 为横坐标绘制曲线 , 发现芦丁标准溶液浓度
在 1. 6～ 16 μg 线性关系良好。
用最小二乘法进行回归 , 得到吸光度 (X) 和芦丁标准
溶液的浓度 (Y) 的回归方程:Y =- 0. 030 5+0. 037 5 X ,
相关系数 r=0. 999 7 , RSD=0. 2%, 表明本方法线性关系
良好。
3. 1. 3　显色液的稳定性试验　取 “ 2. 1. 2” 所得的拳卷地钱
总黄酮提取物的供试品溶液适量 , 按 “ 3. 1. 1” 法显色 , 每
隔 5 min测定一次吸光度 , 结果发现显色液在 15 min 内稳
定 , 20 min 后吸光度下降严重 , 故最佳测定时间是显色后
15 min 内。
3. 1. 4　重现性试验　按 “ 3. 1. 2” 重复 5 次测定同一样品 ,
测定结果的相对标准偏差 RSD=1. 1%, 达到一般分光光度
法的要求 , 精密度高。
3. 1. 5　加样回收率试验验　取 “ 2. 1. 2” 所得的拳卷地钱总
黄酮提取物的待测液 1. 0 m L 4 份于 25 mL 容量瓶 , 分别加
入 40 μg m L - 1芦丁标准溶液 1. 0 、 2. 0、 3. 0 、 4. 0 m L , 按
“ 3. 1. 1” 测定 , 计算总黄酮含量和回收率 。结果表明 , 显色
液中总黄酮含量在线性范围 (1. 6 ～ 16 μg m L - 1) 内 , 加
样回收率在 97. 6%～ 101. 6%, 平均加样回收率达 99. 3%,
提示该方法的准确度良好。
3. 2　反相高效液相色谱法测定拳卷地钱中芹菜素 、 槲皮素
和木犀草素的含量
3. 2. 1　色谱条件 　BT8100 高效液相色谱仪 , 色谱柱为
Kromasil C18柱 (250 mm×4. 6 mm , 5 μm , H anbon Science
&Techno lo gy Co , L td);流动相为乙酸-甲醇-乙腈-磷酸-水
=10∶200∶100∶10∶200 (v /v);流速 0. 60 mL min - 1;
检测波长 350 nm;柱温 25 ℃;进样量 6. 0 μL。
3. 2. 2　色谱分离　在拟定的色谱条件下 , 得到芹菜素 、 槲皮
素及木犀草素的标准色谱图 (图 1B) 以及拳卷地钱黄酮提取物
的色谱图 (图1A)。由图1A可见 , 样品中芹菜素、 槲皮素、 木
犀草素与相邻组分的分离度 R f>1. 5 , 达到基线分离。
图 6　拳卷地钱药材样品 (A) 与对照 (B) 高效液相色谱图
1. 槲皮素;2. 木犀草素;3. 芹菜素
3. 2. 3　校准曲线与检测限　分别量取 “ 2. 2. 1” 混合对照品
溶液适量 , 加甲醇稀释制成标准系列进样测定。以标准溶液
浓度 X (mg L - 1) 对色谱峰面积Y 进行线性回归 , 得线性
方程:芹菜素 (0. 4～ 30. 0 mg L - 1) 为Y =- 1 127+7 484
X (r=0. 999 7);槲皮素 (1. 0 ～ 20. 4 mg L - 1) 为 Y =
- 1 204+4 212. 5 X (r=0. 999 2);木犀草素 (0. 6 ～ 26. 8
mg L - 1) 为Y =- 2 986+13 792 X (r=0. 999 5)。
结果表明各组分在各自浓度范围内线性关系良好。
3. 2. 4　精密度试验　在上述色谱条件下 , 对同一对照品溶
液重复进样 5次 , 测得峰面积的 RSD为芹菜素 2. 5%, 槲皮
素 0. 3%, 木犀草素 1. 2% (n=5)。
3. 2. 5　方法重复性　在上述色谱条件下 , 对供试品溶液平
行测定 3 次 , 分别进样 6. 0μL , 同时取混合对照品溶液 6. 0
μL进行测定 , 按外标法测定其含量并计算 RSD , 芹菜素为
Centr al South Pharmacy . February 2005 , Vo l. 3 No. 1　中南药学 2005 年 2 月第 3 卷第 1 期
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2. 8%, 槲皮素为 2. 9%, 木犀草素为 3. 6%。
3. 2. 6　加样回收率试验　取供试品溶液适量 3 份 , 以高 、
中 、 低 3 浓度水平各加入一定量的芹菜素 、 槲皮素和木犀草
素对照品 , 分别进样 6. 0 μL , 同时取相应浓度的对照品溶
液 6. 0 μL进行测定 , 按外标法测定其含量 , 计算加标回收
率和 RSD , 结果平均加样回收率芹菜素为 101. 1% (RSD=
1. 5%), 槲皮素为 97. 5% (RSD =0. 7%), 木犀草素为
96. 8% (RSD=0. 9%)。结果表明该法可用于拳卷地钱黄酮
提取物的分析。
3. 2. 7　实际样品的定量分析　按 “ 2. 2. 2 供试品溶液的制
备” 方法制备供试品溶液 , 在上述色谱条件下 , 分别进样
6. 0μL , 同时取相应浓度的对照品溶液 6. 0 μL 进样测定 ,
按外标法测定其含量 , 结果见表 1。
表 1　样品测定结果
样品种类 测定含量(%)
1 2 3
平均含量(%) RSD(%)
芹菜素 0. 004 5 0. 004 8 0. 004 9 0. 004 7 2. 8
木犀草素 0. 003 4 0. 003 6 0. 003 6 0. 003 5 2. 8
槲皮素 0. 007 7 0. 008 5 0. 008 2 0. 008 1 3. 6
4　结论
本文建立了拳卷地钱总黄酮含量的测定方法 , 最佳测定
时间是显色后 15 min 内 , 回收率在 97. 6%～ 101. 6%, 平均
加标回收率达99. 3%, 精密度高 (RSD=1. 1%, n=5)。该
法操作简便 、 快速 、 精密度高 , 可用于拳卷地钱提取物中总
黄酮含量的测定。并建立了拳卷地钱中芹菜素 、 槲皮素和木
犀草素的含量测定方法 , 采用标准曲线法对实际样品中的芹
菜素 、 槲皮素和木犀草素进行定量分析。实验结果表明:本
方法平均加标回收率 96. 8%～ 101. 1%, 相对标准偏差
0. 7%～ 1. 5%, 该法可用于拳卷地钱黄酮提取物的精确分析。
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化橘红中香豆素类成分薄层色谱指纹图谱研究
陈志霞1 , 林励2 , 孙冬梅3 (1. 广东省药品检验所 , 广州　510180;2. 广州中医药大学 , 广州　510405;3. 广东省中医研
究所 , 广州　510095)
摘要:目的　对化橘红中香豆素类成分进行薄层色谱分析 , 建立能区别不同品种化橘红药材的薄层色谱指纹图谱。
方法　以佛手内酯和异欧前胡素为对照品 , 建立 10 个样品的 T LC 指纹图谱。结果　不同品种化橘红的图谱存在较
大的差异。结论　方法简便可靠 , 重现性好 , 适用于化橘红药材的质量控制与鉴定。
关键词:化橘红;香豆素类成分;薄层色谱;指纹图谱
中图分类号:R927. 1　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1672 - 2981 (2005) 01 - 0009 - 03
TLC fingerprints of coumarins in Exocarpium citri grandis
Chen Zhi-xia1 , Lin L i2 , Sun Dong-mei3 (1. Guangdong P rov incial Institute f or Drug Control , Guangzhou 　
510180;2. Guangzhou University of TCM , Guangzhou　510405;3. Guangdong P rovincial Institute f or Chinese
Medicine , Guangz hou　510095)
ABSTRACT:OBJECTIVE　Couma rin compounds in E xocar pium citri grandis (ECG) we re analyzed to establish the
T LC fingerprint of coumarins to identify various specie s of ECG. METHODS　TLC finge rprints o f ten samples w ere
established with be rgapten and isoimpera to r as standard materials. RESULTS　The fingerprints of various species of
ECG had obvious diffe rences. CONCLUSIONS　The method is simple and reliable with a good reproducibility. I t could
be used to identify va rious specie s o f ECG.
KEY WORDS:Exocarpi um citri grandis;coumarin;T LC;fingerprint
　　基金项目:广东省科技计划项目 (A301020101)
作者简介:陈志霞 (1975～ ), 女, 硕士 , 主要从事中药质量标准研究　　Tel:(020) 81863096　　E-mail:chenzhixia_ w h@msn. com
中南药学 2005 年 2 月第 3 卷第 1 期　Centr al South Pharmacy . February 2005 , Vo l. 3 No. 1