全 文 ：　　　　 天然产物研究与开发　 　　　　　
Vo1.13　No.5 NATU RAL PRODUCT RESEARCH AND DEVELOPMENT　 　　　　　　　
　
　
　
　
　　收稿日期:2001-06-16　　　修回日期:2001-08-02
　　＊香港特别行政区研究基金委员会资助项目(编号:香港浸会大
学 2044/ 98M)。(T he w ork described in this paper w as fully supported
by a grant f rom the Research Gran ts Council of the Hong Kong special
Administration Region , China Project No.HKBU 2044/ 98M)
　　＊＊通讯联系人(Corresponding author)
香港地钱抗菌化学成分研究＊
夏萍芳　李仲辉
(四川教育学院化学系　成都　610041)
May-Ling So＊＊
(香港浸会大学生物系　香港 九龙塘)
Wing-Hong Chan　Wai-Yeung Wong
(香港浸会大学化学系　香港 九龙塘)
摘　要　利用生物活性试验和1H NM R追踪 ,从香港地钱(Marchantia paleacea Berto l)的乙醇提取物中
简单快速分离具有抗菌活性的三个已知芳香化合物:2-羟基-3 , 7-二甲氧基菲(1), marchantin C(2)和
isoriccardin C(3)。化合物(1)的 NMR测定以及晶体结构对文献值部分 NM R数据进行了修正。
关键词　地钱;生物活性;2-羟基-3 , 7-二甲氧基菲;环状二联苄衍生物;marchantin C;iso riccardin C
　　苔植物具有抗真菌 、抗细菌等生物活性早有报
道[ 1] 。地钱含有多种生物活性成分 ,其中最常见的
是环状二联苄衍生物[ 1 ～ 2] 。这类化合物结构上的
差异不仅表现在羟基数目和位置的不同 ,而且两个
联苄基连接成环的骨架也有多处形式 ,如化合物(2)
～(5)(图 1)。此外 ,芳环 H-3 由于受到芳环 A 的
强烈屏蔽 ,化学位移向高场移动 , δ值在 5 ～ 6之间 ,
该信号为二重峰 J=2 Hz ,这是环状二联苄衍生物
最显著的特征峰。生物活性实验表明 ,香港地钱
(M.paleacea Bertol)的乙醇萃取液(30 μl/disk)对
革兰氏阳性菌(Bacil lus subtil is)呈明显的阳性反
应 ,但不抗革兰氏阴性菌(Escherichia coli)和酵母菌
(Candida albicans)。地钱的萃取物经反相柱层析
(RP-C18)分成 6 个组合 。我们对每一个组分进行
B .Subt il is 活性试验和1H NMR测定 ,发现第二个
组分(H2O-CH3OH 1∶2)活性最强 ,其1H NMR谱 图
中 δ5.5左右的多个峰 , δ2.5 ～ 3.0左右的多重峰
以及 δ6.5 ～ 7.5的多个峰分别与环状二联苄衍生
物的 H-3 , CH2CH2 和 Ph-H 相对应。该组分再进
一步通过柱层析和制备薄板分离得到三个抗 B .
S ubt ilis 的化合物 2-羟基-3 , 7-二甲氧基菲(1),
marchantin C(2)和 isoriccardin C(3)。化合物 1
的1H NMR和13C NMR与文献值[ 3]不完全一致:文
献中1H NMR(CDCl3 ,400 MHz)H-6 和 H-8 都为单
峰 。13C NMR(CDCl3 , 100 MHz)145.0 和 147.3 均
注明分别都是二个重迭信号 。而我们测得的重迭信
号是 124.72 和 124.75 , 126.5 和 126.6。改用
Me2CO-d6 作溶剂 ,测定其1H NMR 和13C NMR与
我们用 CDCl3 测定结果相符。化合物(1)的晶体结
构进一步证实了它为 2-羟基-3 , 7-二甲氧基菲(图
1)。
国外对苔的化学成分以及环状二联苄衍生物的
抗菌性报道很多 ,然而有关香港苔的抗菌成分研究
还未见报道 。本实验采用生物活性指导活性成分的
分离 ,是一种简便 、快速 、十分有效的方法 。
1　实验部分
熔点用 MEL-TEMP Ⅱ熔点仪测定(未校正);
NMR用 JEOLEX270和 INVOA-400核磁共振仪测
定;IR用 Nicolet M agna 红外光谱仪测定(KBr 压
片);MS 用 Finnigen MATSSQ-710 型质谱仪测定;
反相柱层析用硅胶 C18(32 ～ 63 μm Merck),柱层析
用硅胶 60(63 ～ 200μm Merck);制备薄板用硅胶 60
GF254M erck;斑点检测用紫外灯(254 nm 和 360
nm)或 30%H2SO4 喷雾 ,然后在 120 ℃下加热显色。
1.1　采样 、提取和生物活性检测
地钱采于香港 Tai Mo shan 山顶 ,经去泥 ,水
洗 ,于烘箱(40 ℃)烘干 ,用液氮冰冻干燥 ,研细 。取
15
DOI :10.16333/j.1001-6880.2001.05.005
5 g 粉末样品用 50 ml 95%EtOH 电动摇摆萃取 24
h ,用 30μl/disk的萃取液作抗微生物活性试验。萃
取液只对革兰氏阳性菌(B .Subti lis)呈阳性反应 ,
其1H NMR表明芳香化合物为主要成分 。
图 1　化合物(1)～ (6)的结构
Fig.1　The structure of compounds(1)～ (6)
1.2　B.Subt ilis 活性试验指导分离[ 7～ 8]
100 g 粉末样品用 95%EtOH(100 ml×2)萃取 ,
经浓缩得黄绿膏状物 2.5 g 。粗提物经反相柱层析
(RP-C18)分成 6个组分 RP1～ 6[H2O ,H 2O-CH3OH(1
∶2),H2O-CH3OH(1∶5),CH3OH , CH3OH-CHCl3(1∶
1), CH3OH-CHCl3(1∶3)] , 其中第二 、第三组分
(RP2 ,RP3)均有活性 。将活性最强 ,主要成分为芳
香化合物的 RP2 通过硅胶柱层析 ,用 CH2Cl2-EtOAc
溶剂系统梯度洗脱 ,得到具有活性的三个组分(frs.
1 ～ 3).Fr.1(35 mg ,CH2Cl2 洗脱)经制备薄板 ,正己
烷-CH2Cl2 1∶8作展开剂 ,再经正己烷-CH2Cl2 重结
晶得无色针状晶体化合物(1)(25 mg)。Fr.2(50
mg , CH2Cl2-EtOAc 15∶1)经 重结晶(正己烷-
CH2Cl2)得白色粉末化合物(2)(42 mg)。Fr.3(25
mg ,CH2Cl2-EtOAc(8∶1)经制备薄板分离(正己烷-
EtOAc展开剂)再经CH2Cl2重结晶得白色粉末化合
物(3)(10 mg)。
1.3　结构鉴定
化合物(1):无色针状结晶 , mp.158 ～ 160 ℃。
B .Subti lis 试验呈较弱阳性反应。EI-MS m/ z :
254.2[ M ] +(100), 239(12), 211(18), 168(8);
IRυKBrmax cm-1:3542 , 2968 , 2860 , 1610 , 1477 , 1372 ,
1260 ,1102 ,1064 , 1010;1H NMR(CDCl3 , 400 MHz)
δ:7.33(1 H , s ,H-1), 7.90(1 H , s ,H-4),8.41(1 H ,
d , J=8.8 Hz , H-5), 7.23(1 H ,不对称双峰 , H-6),
7.26(1 H ,不对称双峰且包含 CHCl3 ,H-8),7.56(1
H ,d , J=8.8 Hz , H-9), 7.60(1 H , d , J=8.8 Hz , H-
10), 5.85(s , OH), 4.11(d , C3-OMe), 3.96(s , C7-
OM e);13 C NMR(CDCl3 , 100 MHz)和 DEPT δ
111.4(C-1),144.9(C-2),147.2(C-3), 102.0(C-4),
124.75(C-4a),124.3(C-4b), 123.6(C-5),108.4(C-
6), 157.4(C-7), 117.0(C-8), 132.5(C-8a), 124.72
(C-9), 126.6(C-10), 126.5(C-10a), 56.0(OCH3-
3), 55.4(OCH3-7)。上述数据 mp.,MS , IR与文献
值一致 。
化合物(2):白色粉末 , B.S ubti lis 试验呈阳性
反应 。EI-MS m/ z :424.2[ M] +(100), 211(72),
197(26), 107(28);1H NMR(CDCl3 , 270 MHz)δ:
6.61(2 H , H-2 和 H-6), 6.94(2 H , H-3 和 H-5),
2.97 ～ 3.03(4 H , m ,H-7和 H-8),7.02(1 H ,dd , J=
7.6 ,1.6 Hz ,H-10), 7.15(1 H , t , J=7.8 Hz ,H-11),
6.87(1 H ,dd , J=7.8 ,1.6 Hz ,H-12),5.52(1 H ,d , J
=1.89 Hz , H-3′), 6.73(1 H , dd , J=8.1 , 1.89 Hz ,
H-5′),6.88(1 H , d , J=8.1 Hz , H-6′), 2.76 ～ 2.86
(4 H , m , H-7′和 H-8′), 6.58(1 H , H-10′), 6.54(1
H ,dd , J=7.8 ,2.7 Hz ,H-12′), 6.95 ～ 6.98(1 H ,m ,
H-13′), 6.38(1 H , d , J=7.56 Hz ,H-14′), 4.87(s ,
OH), 5.53(s ,OH), 13C NMR和 DEPT(CDCl3 , 67.8
16　　 天然产物研究与开发 Vo1.13　No.5
MHz)δ:152.7▲(C-1), 121.2(C-2), 129.5(C-3),
138.8▲(C-4), 129.5(C-5), 121.2(C-6), 35.4(C-
7), 30.4(C-8), 136.0▲(C-9), 121.9(C-10), 125.9
(C-11), 114.3(C-12), 148.5▲(C-13), 139.5▲(C-
14), 143.3▲(C-1′), 146.0▲(C-2′), 115.5(C-3′),
132.5▲(C-4′), 122.3(C-5′),114.9(C-6′), 34.1(C-
7′), 35.9(C-8′), 142.9▲(C-9′), 115.4(C-10′),
156.6▲(C-11′), 111.9 (C-12′), 128.8 (C-13′),
123.3(C-14′),其中 ▲表苯环上不连氢的碳 。以上
数据与文献值一致[ 4] 。
化合物(3):白色粉末 mp.217 ～ 219 ℃。 B .
subti lis 试验呈阳性反应。 EI-MS m / z :424.2
[ M] +(100), 279(10), 211(24), 167(12),149(48);
IRυKBrmax cm-1;3542 , 1608 , 1577 , 1562 , 1512 , 1504 ,
1450 ,1258 ,1218 , 1178;1H NMR(CDCl3 , 270 MHz)
δ:6.84(1 H , m , H-2), 7.08(1 H , dd , J=8.37 , 1.6
Hz ,H-3),7.13(1 H ,dd , J=7.8 , 1.6 Hz ,H-5),6.88
(1 H , m , H-6), 3.10(4 H , m , H-7 和 H-8), 6.76(1
H , m ,H-10),6.92(1 H ,d 7.6 ,H-13),6.63(1 H , m ,
H-14), 5.59(1 H , d 1.89 , H-3′), 6.67(1 H , m , H-
5′),6.82(1 H , d 7.8 , H-6′), 2.25(2 H , m , H-7′),
2.28(2 H , m ,H-8′), 6.86(1 H , m , H-12′), 7.28(1
H , t , J=7.83 Hz , H-13′), 6.70(1 H , m , H-14′),
4.69(s ,OH), 4.75(s ,OH), 5.54(s , OH);13C NMR
和DEPT(CDCl3 , 67.8 MHz)δ:34.5(Ph-CH2),36.1
(Ph-CH2), 36.5(Ph-CH2), 38.0(Ph-CH2), 113.2 ,
114.5 , 114.6 , 116.6 , 117.0▲ , 120.4▲ , 121.52 ,
121.56 , 121.60 , 121.64 , 122.5 , 130.0 , 130.2 ,
130.4 , 130.7 , 133.5▲ , 137.1▲ , 142.8▲ , 143.2▲ ,
143.5▲ ,147.6▲ , 153.1▲ , 153.3▲ , 153.9▲ ,其中▲
表不连氢的碳 ,其余为苯环上连氢的碳 。以上数据
与文献值一致[ 3] 。
参考文献
1 　Asakaw a Y , Biologically active terpenoides and aromatic
compounds from liverwor ts and the inedible mushroom
Cryptopo rus volvatus in “ Bioactive Natur al Products:De-
tection , I solation , and Structural Determination”(coleg ate ,
S.M., Molyneus , R.J.eds), CRC Press , 1993 , Florida , P.
319;Asakawa Y , Toyota M , Matsuda R, Takikawa K , and
Takemoto T , Phy to chemistry , 1983 , 22:1413
2　Asakawa Y , Journ.Hatto ri Bo t.Lab.1984 , 56:215
3　Asakaw a Y , To ri M , Takikawa K , Krishnamr ty H G and
Kantikar S K , phy tochemistry , 1987 , 26(6):1811～ 1816
4　Tori M , Toyo ta M , and Asakaw a Y , Tetrahedron letters ,
1985 , 26:4735
5　Wei H C ,Ma S J , Wu C L , phy tochemistry , 1995 , 39(1):91
～ 97
6　Hashimo to T , Tori M , Asakawa Y , Fukazawa Y , Tetrahe-
dron Letters , 1987 , 28(50):6295～ 6298
7 　 Stephen D , Lo rimer , Nigel B , Per ry and Raymond S
TangNey , J.Nat prod , 1993 , 56(9):1444～ 1450
8　Lorimer , S.D and Per ry , N B , planta Med Letters , 1994 ,
60:386
STUDIES ON THE ANTIMICROBIAL CHEMICAL COMPOSITIONOF
HONG KONG LIVERWORT MARCHANTIA PALEACEA BERTOL
XIA Ping-fang ,LI Zhong-hui
(Department of chemistry Sichuan College Education , Chengdu　610041 , China)
May-Ling So＊＊
(Department of Biology , Hong Kong Baptist University Kow loon Tong ,Hong Kong , China)
Wing-Hong Chan ,Wai-Yeung Wong
(Department of chemistry , Hong Kong Baptist University Kow loon Tong ,Hong Kong , China)
Abstract　From the 95% ethanol ex tract of the Hong Kong liverwo rt Marchant ia paleacea Bertol , guided by
bioactivity directed isolation three known compounds w hich possessed activi ty against the Gram-positive bacteria
Baci llus subti lis.2-hydroxy-3 ,7-dimethoxyphenanthrene(1),marchantin C(2)and iso riccardin C(3)were iso-
lated.The NMR data of comp.1 were revised by X-ray crystallog raphic analysis.
Key words　Marchant ia paleacea Bertol;bioactivity;2-hydroxy-3 ,7-dimethoxyphenanthrene;cyclic bis(biben-
zy ls);marchantin C;iso riccardin C
17Vo1.13　No.5 夏萍芳等:香港地钱抗菌化学成分研究＊