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酢浆草提取工艺的研究及总有机酸的测定



全 文 :2015年 第 20期 广 东 化 工
第42卷 总第310期 www.gdchem.com · 135 ·

酢浆草提取工艺的研究及总有机酸的测定
贾纪萍 1,熊玥 2,严宏凤 1,李芳 1,乔勇 1,李正雄 1,赵敏芝 3
(1.江苏农牧科技职业学院,江苏 泰州 225300;
2.江苏省兽药饲料质量检验所,江苏 南京 210036;3.南京理工大学泰州学院,江苏 泰州 225300)

[摘 要]目的:研究酢浆草总有机酸的最佳提取工艺,并建立其测定方法。方法:采用正交试验法,考察料液比、单次回流提取时间、乙醇
浓度和提取次数 4个因素,酢浆草总有机酸采用电位滴定法进行测定。结果:确立了酢浆草总有机酸的提取的最佳工艺为:料液比为 1∶15,单
次回流提取时间为 1 h,乙醇浓度为 75 %,提取次数为 2次。结论:本试验为酢浆草的进一步研究和资源开发利用提供了一定的科学依据。
[关键词]酢浆草;提取工艺;总有机酸;电位滴定
[中图分类号]O65 [文献标识码]A [文章编号]1007-1865(2015)20-0135-02

Extraction Process and Content Determination of Total Organic Acids from Oxalis
Corniculata L

Jia Jiping1, Xiong Yue2, Yan Hongfeng1, Li Fang1, Qiao Yong1, Li Zhengxiong1, Zhao Minzhi3
(1. Jiangsu Agri-animal Husbandry Vocational College, Taizhou 225300;2. Jiangsu Institute of veterinary drug quality inspection, Nanjing
210036;3. Nanjing University of Science and Technology Taizhou College, Taizhou 225300, China)

Abstract: Objective: to study the optimum extracting process of total organic acids from Oxalis Corniculata L and establish a determination method for total
organic acids. Method: by orthogonal experiment, we investigated the effects of 4 factors i.e. concentration of ethanol, ratio of solid to liquid, frequency of extraction
and time of extraction. After the extraction, the determination was done with potential titration. Result: the best extraction conditions were using 75 % (V/V) ethanol
as extractor with the radio of 1∶15, and single reflux extraction lasted 1 h and extracted for 2 times. Conclusion: these results provide certain scientific basis for
further research and development of Oxalis Corniculata L’s efficacy.
Keywords: Oxalis Corniculata L;extracting process;organic acid;potential titration

酢浆草为酢浆草科植物酢浆草的干燥全草,又名为酸浆草、
斑鸠草、酸味草、三叶草,主要分布于华北、华中、华南、江西、
四川和云南等地,是一种极好的地被和盆栽植物[1]。酢浆草全草
均可入药,具有清热解毒、平肝定惊、消炎止痛等功效,鄂西土
家医常用于内服治疗跌打青肿、咽喉肿痛、祛痰平喘、痢疾、黄
疸等;外用治跌打损伤、毒蛇咬伤、湿疹等症[2]。
杨红原等对红花酢浆草提取物进行分离纯化,分离得到 6个
化合物:草酸、酒石酸、苹果酸、柠檬酸等[3]。李胜华[4]对酢浆草
进行结构鉴定得出 10个化合物,为酒石酸、香草酸、木樨草素等。
吴高兵等[5]对酢浆草进行分离、纯化,首次分离鉴定 4个化合物,
分别为对羟基肉桂酸、咖啡酸、槲皮素和没食子酸。
目前未有关于酢浆草中总有机酸含量测定的报道,本文通过
对酢浆草采取不同的提取工艺的优化选择,研究酢浆草药材中总
有机酸的测定方法,以期为酢浆草的进一步开发利用提供相应的
依据。
1 仪器与材料
1.1 仪器
电热恒温水槽(DK-8D),上海汀禾科学仪器公司;超声波清
洗器 (KH5200B),昆山禾创超声仪器有限公司;旋转蒸发器
(RE-3000),上海亚荣生化仪器厂;循环水式真空泵(SHZ-D(Ⅲ)),
上海凌科实业发展有限公司;自动电位滴定仪(ZYT-1),南京科环
分析仪器有限公司;电子天平(YP2001N),上海精密科学仪器有
限公司;高速中药粉碎机(LH-08B),吉首市中诚制药机械厂;pH
计(PHS-3E),上海图新电子科技有限公司。
1.2 样品与试剂
酢浆草(益丰大药房购买,产地江西),无水碳酸钠(基准试剂),
邻苯二甲酸氢钾(基准试剂),无水乙醇(分析纯),甲基红(化学纯),
溴甲酚绿(化学纯),酚酞(化学纯)。
2 方法
酢浆草中含有多种有机酸,其提取物中含有色素,无法采用
酸碱滴定法测定总有机酸的含量,故本课题采用电位滴定法测定
[6,7],于提取物中加入过量氢氧化钠标准溶液,再用盐酸标准溶液
滴定剩余氢氧化钠标准溶液,通过电极电位的突跃来指示反应终
点。
2.1 标准溶液的标定
盐酸标准溶液的标定:以甲基红-溴甲酚绿为指示剂,用基准
无水碳酸钠标定盐酸溶液,标定结果为 0.1141 mol·L-1。
氢氧化钠标准溶液的标定:以酚酞为指示剂,用基准邻苯二
甲酸氢钾标定氢氧化钠溶液,标定结果为 0.1035 mol·L-1。
2.2 提取工艺考察
2.2.1 超声提取
将干燥的酢浆草用高速中药粉碎机打成粉,过五号筛(80目),
混匀。取样品粉末约5 g,精密称定,加入75 %的乙醇溶液75 mL,
振摇使溶解后,超声处理,过滤,蒸干,残渣精密加入氢氧化钠
标准溶液10 mL,超声30 min后用新沸并冷却的蒸馏水分次洗涤至
50 mL容量瓶中,定容摇匀,照电位滴定法测定,用盐酸标准溶
液进行滴定。
2.2.2 回流提取
取样品粉末约5 g,精密称定,加入不同浓度的乙醇溶液,加
热回流,过滤,蒸干,残渣精密加入氢氧化钠标准溶液10 mL,
超声30 min后用新沸并冷却的蒸馏水分次洗涤至50 mL容量瓶中,
定容摇匀,照电位滴定法测定,用盐酸标准溶液进行滴定。
2.3 酢浆草总有机酸的计算
酢浆草中有机酸种类较多,本课题中总有机酸以柠檬酸计算,
计算公式如下:


m
MVCV
gmg
HClHClNaOH
786
786
OHC
NaOH
OHC
3
C
)/



3 结果与讨论
3.1 超声提取
样品按照 2.2.1方法处理,超声时间分别为 0.5 h,1 h,1.5 h,
2 h,实验结果如图 1:


图 1 超声提取时间对酢浆草总有机酸的影响
Fig.1 Effect of ultrasonic extraction time on total organic acid from
Oxalis Corniculata L

[收稿日期] 2015-08-24
[基金项目] 江苏农牧科技职业学院大学生实践创新训练计划项目(201412806019X)
[作者简介] 贾纪萍(1981-),女,江苏泰州人,硕士,主要研究方向为药物分析。
广 东 化 工 2015年 第 20期
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图 2 单次回流提取时间对酢浆草总有机酸的影响
Fig.2 Effects of Single extraction time on total organic acid titration
from Oxalis Corniculata L

3.2 回流提取
样品按照 2.2.2方法处理,用 75 mL、75 %的乙醇溶解,分别
加热回流 1 h,2 h,3 h,4 h提取一次,实验结果如图 2。
比较图 1、图 2 可知,超声提取虽然操作简便,但是提取效
果不好,故后续试验均采用回流提取。
3.3 正交试验
为了系统考察酢浆草中总酸度测定提取的工艺条件,选用料
液比(A)、单次回流提取时间(B)、乙醇浓度(C)、提取次数(D)作为
考察因素,以酢浆草中总有机酸含量为考察指标,设计 L9(34)的
正交试验,正交试验结果见表 1。
由正交试验结果可知,最佳提取条件为B1A2D2C2,即乙醇浓
度为75 %,料液比1∶15,提取次数为2次,每次提取1小时。在最
佳提取条件下进行试验,酢浆草中总有机酸平均值为10.562 mg/g。
表 1 酢浆草总有机酸正交试验结果
Tab.1 The orthogonal experiment results of total organic acid from Oxalis Corniculata L
试验号
因子
料液比/(g·mL-1) 单次回流提取时间/h 乙醇浓度/% 提取次数/次 试验结果
水平
A B C D 酢浆草中总有机酸/(mg·g-1)
1 1∶10 1 50 1 7.81
2 1∶10 2 75 2 7.05
3 1∶10 3 100 3 6.73
4 1∶15 1 75 3 10.14
5 1∶15 2 100 1 7.21
6 1∶15 3 50 2 9.94
7 1∶20 1 100 2 9.60
8 1∶20 2 50 3 6.82
9 1∶20 3 75 1 8.47
K1 7.197 9.183 8.190 7.830
K2 9.097 7.027 8.553 8.863
K3 8.297 8.380 7.847 7.897
R 1.900 2.156 0.706 1.033

3.4 讨论
实验中发现,使用浓度为50 %的乙醇提取时,过滤的速度缓
慢,几乎无法进行过滤。分析原因可能是酢浆草中的对羟基肉桂
酸、槲皮素等物质不溶于水,易溶于热乙醇且咖啡酸和木犀草素
都是微溶于水的。

参考文献
[1]丁良,李静,杨慧,等.酢浆草的研究概况[J].医学研究与教育,2010,
27(3):77-79.
[2]国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草.第 4册[M].上海:
上海科学技术出版社,1999:717.
[3]杨红原,赵桂兰,王军宪.红花酢浆草化学成分的研究[J].西北药学杂
志,2006,21(4):156-158.
[4]李胜华.黄花酢浆草的化学成分研究[J].中国药学杂志,2013,48(21):
1820-1811.
[5]吴高兵,陈华,姚志云.苗药酢浆草的化学成分研究[J].中国民族医药
杂志,2014,1:25-26.
[6]尹文清,张岩,宋鑫明,等.石柑子总有机酸的提取工艺与含量测定[J].中
药材,2009,32(1):124-126.
[7]朱旭君,杨平平,徐仁扣,等.茶树中总有机酸的自动电位滴定仪测定
方法[J].茶叶科学,2014,32(6):572-576.

(本文文献格式:贾纪萍,熊玥,严宏凤,等.酢浆草提取工艺的
研究及总有机酸的测定[J].广东化工,2015,42(20):135-136)