全 文 :沙枣果总黄酮的纯化工艺及抗氧化性研究
陈亚1,2,梁琪1,2,*,张炎1,2,杨敏1,2,罗丽1,2
(1.甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃兰州 730070;2.甘肃功能乳品工程实验室,
甘肃兰州 730070)
摘 要:在前期研究超声波辅助提取沙枣果总黄酮的工艺基础上,为探讨沙枣果总黄酮的纯化工艺,选择大孔树脂为
吸附剂来分离纯化沙枣果总黄酮。先进行了大孔树脂的选择试验研究和大孔树脂静态吸附动力学研究,结果表明 AB-8
树脂的吸附量和解吸率都较高,是适于吸附分离沙枣果总黄酮的理想树脂类型。在此基础上,通过 AB-8大孔树脂对沙
枣果总黄酮动态吸附试验、动态洗脱试验确定出沙枣果总黄酮的最佳纯化条件:上样量 70 mL、上样浓度 0.5 mg/mL、
pH4.0、上样流速 1.0 mL/min;使用 4BV用量的 90 %乙醇作为洗脱剂进行洗脱,解析流速为 1.5 mL/min;AB-8大孔树脂
对沙枣果总黄酮的纯化效果较好,纯度为 65.56 %,是粗提黄酮纯度的 2.84倍。并对纯化后的沙枣果总黄酮进行成分鉴
定和抗氧化性能评价,结果表明,沙枣果总黄酮纯化物抗脂质过氧化能力明显强于 VC和 PG,3种自由基抗氧化能力均
强于 PG,弱于 VC。
关键词:沙枣果总黄酮;大孔树脂;纯化;抗氧化性
Purification Process and Oxidation Resistance of Total Flavonoids of Elaeagnus angustifolia L. Fruit
CHEN Ya1,2,LIANG Qi1,2,*,ZHANG Yan1,2,YANG Min1,2,LUO Li1,2
(1. College of Food Science and Engineering,Gansu Agricultural University,Lanzhou 730070,Gansu,China;
2. Functional Dairy Engineering Laboratory in Gansu Province,Lanzhou 730070,Gansu,China)
Abstract:Based on ultrasonic extraction technology of total flavonoids of Elaeagnus angustifolia L. fruit in pre-
vious studies,to study the purification process of total flavonoids Elaeagnus angustifolia L. fruit,macroporous
resin as adsorbent was choosed to purify Elaeagnus angustifolia L. fruit flavonoids. Firstly,the selected test and
adsorption dynamics research of the macroporous resin were conducted,the results showed that both adsorption
and desorption rate of AB-8 resin were higher,and AB-8 resin was an ideal resin types for being suitable for
separating total flavonoids from Elaeagnus angustifolia L.;the best condition of total flavonoids of Elaeagnus an-
gustifolia L. determined by adsorption and elution dynamics experiment of AB-8 resin was:the sample quantity
was 70mL,concentration of the sample solution was 0.5 mg/mL,pH was 4.0,sample flowing rate was 1.0 mL/min.
90 % ethanol of 4 BV was as the elution solvent and the flow rate was 1.5 mL/min.Under above condition,the
purity of flavonoids was higher ,which could reach to 65.56 %,and was rough 2.84 times of crude flavonoids
purity. At last,ingredient and antioxidation of total flavonoids of Elaeagnus angustifolia L. fruit were determined
after being purifed. The results indicated that the anti-lipid peroxidation effect of flavonoids purification was sig-
nificantly stronger than VC and PG,three kinds of free radical oxidation resistance were stronger than the PG,
but weaker than VC.
Key words:Elaeagnus angustifolia L. fruit flavonoids;macroporous resin;purification;the oxidation resistance
食品研究与开发
Food Research And Development
2016年 3月
第 37卷第 6期
DOI:10.3969/j.issn.1005-6521.2016.06.028
基金项目:甘肃农业大学青年导师基金(GAU-QNDS-201206)
作者简介:陈亚(1987—),女(汉),硕士研究生,研究方向:乳品微
生物。
*通信作者:梁琪(1969—),女(汉),教授,博士,研究方向:乳品科学
与技术、食品科学、食品品质研究工作。
沙枣(Elaeagnus angustifolia L.)又名银柳、桂香柳、 七里香等,是胡颓子科(Elaeagnaceae)胡颓子属(E-
laeagllt L.)的落叶乔木或灌木,其果实富含各种营养成
分[1-2],研究发现,沙枣果中富含黄酮类化合物,具有抗
氧化、防癌、抗炎、抗过敏、调节机体免疫、内分泌系统
及预防肥胖症、糖尿病等作用,在食品、药品、化妆品
等方面有较大应用价值[3-5],国内外学者已对沙枣的化
工艺技术
120
学成分和药理作用进行了初步研究,但到目前为止,
人们对沙枣中有效成分的开发、生产主要集中于沙枣
多糖,对沙枣黄酮类化合物的开发利用却鲜见报道。
目前沙枣仅有很少部分在民间药用、食用或初步加
工,大部分因无人采摘而造成这一宝贵资源极大浪
费。分离纯化是当前沙枣果研究以及加工中重要环节
和亟须解决的问题。大孔树脂法具有吸附快、容量大、
洗脱率高、可再生等优点[6],因而被广泛用于天然产物
的分离纯化。本研究结合甘肃沙枣的资源优势,在前
期研究响应面法优化沙枣总黄酮超声提取工艺[7]的基
础上,拟筛选出本提取物中总黄酮的大孔树脂纯化条
件,并对纯化后的沙枣果总黄酮进行抗氧化性能评
价,以期为进一步研究沙枣果中黄酮类化合物及产品
开发提供理论参考。
1 材料与方法
1.1 原料与试剂
沙枣果,采自甘肃省酒泉地区,经过清洗、去核、烘
干后备用。
AB-8、S-8、X-5、D101大孔树脂:天津欧瑞生物科
技有限公司;芦丁对照品、DPPH:Sigma 公司;没食子
酸丙酯(PG):梯希爱化成工业发展有限公司;95 %乙
醇、铁氰化钾、三氯乙酸、水杨酸、邻苯三酚等试剂均为
分析纯。
JY96-ⅡN型超声波细胞破碎机:宁波新芝生物科
技股份有限公司;KYC-100B空气恒温摇床:上海新苗
医疗器械制造有限公司。
1.2 方法
1.2.1 沙枣果总黄酮的提取及含量测定[8]
称取 2 g干燥至恒重的沙枣果粉,按 1 ∶ 25.5(g/mL)
料液比加入 70 %的丙酮溶液,水浴 30 min,在 42 ℃下
超声波清洗并提取两次,每次 27 min,合并滤液,浓缩
并干燥,得沙枣果总黄酮粗品。
称取 10.0mg芦丁标准品,用甲醇溶解定容至 50mL
容量瓶,制成浓度为 0.20 mg/mL的标准溶液;分别取
标准溶液 0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL于 10 mL比色管
中,加入 0.3 mL 5 %NaNO2溶液,摇匀放置 6 min后,加
入 0.3 mL 10 % Al(NO3)3溶液,6 min后加入 10 % NaOH
溶液 4 mL,用蒸馏水定容至刻度,摇匀,放置 15 min,
以相应试剂作空白,于 510 nm处测定其吸光度值。以
C标为横坐标,A为纵坐标,绘制标准曲线。同样方法
测定粗黄酮液吸光度,利用回归方程计算沙枣果总黄
酮质量浓度。
1.2.2 大孔树脂的选择[9-11]
通过静态吸附与解吸试验,选 4种极性不同的树
脂(AB-8、S-8、X-5、D101型)对沙枣果总黄酮进行纯
化:取 2 g经预处理的树脂于 50 mL锥形瓶,加入总黄
酮样液 25 mL(浓度为 C0),于摇床上振荡(100 r/min,
30 ℃),12 h后吸取上清液,测定样品中的总黄酮浓度
(C1);将吸附饱和的树脂过滤后用蒸馏水冲洗至解吸
液无色后,加入 95 %的乙醇溶液 25 mL,振荡洗脱
(100 r/min,30℃),12 h后吸取上清液,测定溶液中的
总黄酮浓度(C2)。根据式(1)、(2)、(3)计算各种树脂的
吸附量、吸附率及解吸率。
吸附量 Q/(mg/g)=(C0 - C1)V1C0
× 100 (1)
吸附率 A/% = C0 - C1C0
× 100 (2)
解吸率 B/% = C2V2QM × 100 (3)
式中:Q为吸附量(以湿树脂计),mg/g;C0为吸附
前液体黄酮浓度,mg/mL;C1为吸附后液体黄酮浓度,
mg/mL;C2为解吸液中黄酮浓度,mg/mL;V1为黄酮样
液体积,mL;V2为解吸液体积,mL;M为树脂湿重,g。
1.2.3 大孔树脂纯化沙枣果总黄酮工艺条件优化
1.2.3.1 静态单因素试验
按照 1.2.2静态吸附与解吸试验方法,研究总黄酮
提取样液 pH、初始浓度、洗脱液体积分数对树脂吸附
效果的影响。
1.2.3.2 动态单因素试验
1)上样量对纯化效果的影响[12]
将优选出的树脂装于 1.0 cm×40 cm、体积为 20 mL
柱内(湿法),95 %乙醇洗至无白色浑浊,用蒸馏水洗
至无醇味,将 0.5 mg/mL的黄酮粗提物溶液于柱顶缓
慢注入,每 5 mL收集一管流出液,测吸光度,计算总黄
酮含量,绘制树脂泄漏曲线,确定动态上样量。
2)洗脱液用量对纯化效果的影响
装柱、进样方法同 1),用 90 %乙醇进行洗脱,每
20 mL收集一管,测其吸光度,计算总黄酮浓度,得出
最优洗脱体积。
3)上样流速对纯化效果的影响
在上样浓度 0.5 mg/mL、pH 4.0、最佳上样量、90 %
乙醇洗脱条件下,优选上样流速,其流速设置为 0.5、
1.0、1.5、2.0、2.5 mL/min。
4)洗脱流速对纯化效果的影响
在上样浓度 0.5 mg/mL、上样流速 1.0 mL/min、pH
4.0、90 %乙醇洗脱条件下,优选洗脱流速,其洗脱速度
设置同 3)。
1.2.4 沙枣果总黄酮纯度计算
粗黄酮纯度/% = m2m1
× 100 (4)
陈亚,等:沙枣果总黄酮的纯化工艺及抗氧化性研究工艺技术
121
纯化后黄酮纯度/% = m4m3
× 100 (5)
式中:m1为沙枣粉(2 g)总黄酮粗提液干燥至恒重
得干燥物质量,mg;m2为干燥前粗提物中总黄酮质量,
mg;m3为沙枣粉(2 g)总黄酮纯化液干燥至恒重得产
品质量,mg;m4为干燥前解吸液中总黄酮质量,mg。
1.2.5 沙枣果总黄酮纯化物抗氧化试验
1.2.5.1 还原力测定
参照文献[13]方法进行测定,以 VC、PG作对照,于
700 nm处测其吸光度,重复试验 3次。
1.2.5.2 羟自由基清除率测定
参照文献[14]方法进行测定,吸取不同浓度总黄
酮纯化液 2.0 mL,向其中加 9.0 mmol/L的 FeSO4 2.0 mL、
9.0 mmol/L水杨酸-乙醇溶液 2.0 mL、8.8 mmol/L H2O2
2.0 mL、蒸馏水 2.0 mL,37 ℃水浴 30 min后于 510 nm
波长测吸光度值 Ax,重复试验 3次;以相同质量浓度
的 VC、PG作对照,按式(6)计算清除率:
清除率/% = A0 -(Ax - Ax0)A0
× 100 (6)
式中:A0为空白对照,即用蒸馏水代替黄酮液的
吸光度;Ax0为蒸馏水代替 H2O2的本底吸光度。
1.2.5.3 超氧阴自由基清除率测定
参照文献[15]方法进行测定,即采用邻苯三酚自
氧化法:吸取 pH 8.34、浓度 50 mmol/L的 Tris-HCl溶
液 4.5 mL,不同浓度总黄酮纯化液 1.0 mL,混匀,在
37 ℃水浴 10 min,然后分别加入 6 mmol/L邻苯三酚溶
液 0.5 mL反应 5 min,最后加入浓度 0.1 mol/L盐酸溶
液 1.0 mL终止反应,蒸馏水定容至 10 mL。在 326 nm
处测其吸光度值 Ax,重复试验 3次;以相同质量浓度
的 VC、PG作对照,按式(7)计算清除率:
清除率/% = A0 -(Ax - Ax0)A0
× 100 (7)
式中:A0为空白对照,即用重蒸水代替总黄酮液
的吸光度;Ax0为重蒸水代替邻苯三酚溶液得本底吸
光度。
1.2.5.4 DPPH自由基清除率测定
参照文献[16]方法进行测定,吸取 DPPH 储备液
4.0 mL,不同质量浓度总黄酮纯化液 1.0 mL,混匀,于
室温避光显色 30 min,在 517 nm处测得吸光度值 Ai,
重复试验 3次;以相同质量浓度的 VC、PG作对照,按
式(8)计算清除率:
清除率/% = A0 -(Ai - Aj)A0
× 100 (8)
式中:A0为未加黄酮液的 DPPH溶液的吸光度;Aj
为相应质量浓度黄酮液的本底吸光度。
1.2.5.5 对油脂氧化的抑制
参照 GB/T 5538-2005《动植物油脂过氧化值测
定》,取 3个 100 mL的锥形瓶,分别加入 25 g猪油,取
浓度为 0.1 mg/mL 的沙枣果总黄酮纯化物、VC和 PG
溶液各 15 mL分别加入上述猪油中;将锥形瓶放入
60 ℃烘箱,定时取样检测猪油的过氧化值。过氧化值
(POV)计算公式(用过氧化物的毫克当量数表示):
POV/(meq/kg)=(V1 - V2)C × 1 000m (9)
式中:V1为试样用硫代硫酸钠溶液体积,mL;V2
为空白试验用硫代硫酸钠溶液体积,mL;C为硫代硫
酸钠溶液浓度,mol/L;m为试样质量,g。
2 结果与分析
2.1 沙枣果总黄酮含量测定结果
以芦丁为标准品,按 1.2.1所述操作,求得回归方
程 y=9.423 6x-0.002。R2=0.999 7,通过该方程可得沙枣
果总黄酮质量浓度为 0.39 mg/mL。
2.2 静态吸附与解吸结果
试验中选用的 4种吸附脂都是分离黄酮类化合物
的常用树脂,静态吸附及解吸结果见图 1。
由图 1可以看出,各大孔树脂对沙枣果总黄酮均
有一定的吸附与解吸能力,S-8、AB-8对沙枣果总黄
酮的吸附量较高,通过方差分析,二者之间的吸附量
之间不存在显著差异(P>0.05);D101、AB-8沙枣果总
黄酮的解吸率较高,通过方差分析,二者的解吸率之
间存在显著差异(P<0.05);因此,综合考虑吸附量与解
吸率,选择 AB-8进行沙枣果总黄酮纯化试验。
2.3 大孔树脂纯化沙枣果总黄酮工艺条件确定
2.3.1 静态试验结果
2.3.1.1 样液浓度对沙枣果总黄酮纯化效果的影响
样液浓度与 pH对总黄酮吸附效果的影响见图 2。
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
吸
附
量
/(
m
g/
g)
S-8 D101 X-5AB-8
100
80
60
40
20
解
吸
率
/%
吸附量 解吸率
图 1 大孔树脂对沙枣果总黄酮的吸附量和解吸率
Fig.1 Comparison of adsorption rates and desorption rates of
macroporous resins
图中竖线表示标准误(±SE),不同字母表示不同处理之间差异显著
(P<0.05)。
b
b
da
cb
a
a
陈亚,等:沙枣果总黄酮的纯化工艺及抗氧化性研究 工艺技术
122
由图 2-A可知,样液总黄酮浓度随着树脂吸附量
和吸附率的增加而增大,当浓度为 0.5 mg/mL时吸附
量与吸附率均达到峰值,随后吸附率迅速降低,吸附
量基本保持不变。因此选总黄酮粗提液的浓度为
0.5 mg/mL。由图 2-B可以看出,AB-8在偏酸性环境
下的吸附效果优于酸性、中性及碱性环境下的吸附效
果,当 pH 4时,吸附量最高,吸附率最强,过酸或碱性
均不利于总黄酮的吸附,因此 pH 4的总黄酮粗提液吸
附效果最好。
2.3.1.2 洗脱液体积分数对沙枣果总黄酮纯化效果的
影响
洗脱液体积分数对解吸率的影响见图 3。
由图 3可知,当洗脱液体积分数大于 70 %时,解
吸率随体积分数的增大迅速上升;当体积分数为 90 %
时,解吸率达到最大,为 92.3 %;随后急剧下降。因此,
90 %的乙醇溶液解吸效果最好。
2.3.2 动态试验结果
2.3.2.1 上样量对沙枣果总黄酮纯化效果的影响
上样量对沙枣果总黄酮纯化效果的影响见图 4。
由图 4可知,流出液中总黄酮含量随上样体积的
增加而增加,当上样体积为 70 mL时,流出液中总黄酮
的含量与进样液中总黄酮含量基本一致,此时树脂的
吸附量已达到饱和。当继续增加上样液体积时,流出
液中总黄酮含量基本不再变化,泄漏恒定,因此确定
上样液体积为 70 mL。
2.3.2.2 上样流速对沙枣果总黄酮纯化效果的影响
上样流速对吸附效果的影响见图 5。
由图 5可以看出,上样流速过快时,树脂尚未及时
吸附沙枣黄酮,黄酮已随吸附液流出,流出液中黄酮
含量较大、吸附率较低,提前泄漏。因此,慢速有利于
黄酮吸附,进样速度越小,吸附总黄酮越多。但流速过
低,会影响生产效率,使生产周期延长,成本增加,因此
选择上样流速为 1.0 mL/min较为适宜。
2.3.2.3 洗脱液用量对沙枣果总黄酮纯化效果的影响
洗脱液用量对解吸效果的影响见图 6。
由图 6可以看出,随着洗脱液用量增大,流出液中
总黄酮含量迅速降低,当洗脱液用量为 4BV(BV表示
柱床体积)时,流出液中总黄酮含量基本趋于零。故当
6.0
4.0
2.0
0.0
吸
附
量
/(
m
g/
g)
0.2 0.3 0.6
浓度/(mg/mL)
0.4
80
70
60
50
解
吸
率
/%
吸附量 解吸率
0.5
A
0.40
0.30
0.20
0.10
吸
附
量
/(
m
g/
g)
3 4 9
pH
5
80
70
60
50
40
解
吸
率
/%
吸附量 解吸率
6 7 8
B
图 2 样液浓度与 pH对总黄酮吸附效果的影响
Fig.2 Effect of sample concentration and pH on the adsorption of
flavonoids
100
85
70
55
40
解
吸
率
/%
50 100
体积分数/%
60 70 80 90
图 3 洗脱液体积分数对解吸率的影响
Fig.3 Effect of ethanol concentration on the desorption of AB-8
0.6
0.4
0.2
0
溶
出
液
黄
酮
含
量
/(
m
g/
m
L)
0 100
上样体积/mL
10 20 30 5040 60 70 80 90
图 4 动态上样量确定
Fig.4 Effect of amount on dynamic sample
图 5 上样流速对吸附效果的影响
Fig.5 Effects of flow rate on the adsorption of AB-8
80
60
40
20
0
吸
附
率
/%
0.5 2.5
上样流速/(mL/min)
1.0 1.5 2.0
陈亚,等:沙枣果总黄酮的纯化工艺及抗氧化性研究工艺技术
123
洗脱液用量为 4 BV时,可将沙枣果总黄酮洗脱干净。
2.3.2.4 洗脱速度对沙枣果总黄酮纯化效果的影响
洗脱流速对解吸效果的影响见图 7。
由图 7可知,洗脱流速在 0.5mL/min~1.5mL/min时,
总黄酮解吸率随流速的增加而增大,在 1.5mL/min时解
吸率达到最大,为 81.2 %,而洗脱流速在 1.5 mL/min~
2.5 mL/min时,解吸率逐渐降低,通过方差分析,不同
洗脱速度下的解吸率存在显著差异(P<0.05),故洗脱
流速确定为 1.5 mL/min。
2.4 沙枣果总黄酮纯度测定结果
按 1.2.1和 1.2.4测定方法计算,沙枣果粗总黄酮
纯度为 23.12 %,经 AB-8树脂纯化后总黄酮纯度为
65.56 %,提高了 2.84倍。
2.5 沙枣果总黄酮纯化物抗氧化能力
2.5.1 还原力测定结果
沙枣果总黄酮纯化物还原能力见图 8。
由图 8可以看出,总黄酮纯化物还原能力随浓度
增大而增强;经方差分析,总黄酮的还原能力显著强
于 PG(P<0.05),浓度在 0.2 mg/mL~1.0 mg/mL范围内,
还原能力大小次序为:VC>总黄酮纯化物>PG。
2.5.2 羟自由基清除率测定结果
沙枣果总黄酮纯化物对羟自由基的清除能力见
图 9。
由图 9可知,随浓度增大,总黄酮纯化物对·OH
清除能力逐渐增强;通过方差分析,总黄酮纯化物的
·OH清除能力介于 VC和 PG之间,但显著强于 PG(P<
0.01)。因此,总黄酮纯化物对·OH清除能力较人工合
成抗氧化剂 PG强,是一种较理想的羟自由基清除剂。
2.5.3 超氧阴离子清除率测定结果
沙枣果总黄酮纯化物对超氧阴离子自由基的清
除能力见图 10。
由图 10可以看出,随着浓度的增大,总黄酮纯化
物对 O2-·清除能力呈显著上升趋势且明显高于 PG
(P<0.01),当浓度为 1.0 mg/mL时,对 O2-·的清除率
(74.4 %)和 VC对超氧自由基的清除率(78.8 %)之间
差异不显著(P>0.05)。因此说明,总黄酮纯化物在一定
浓度下具有较强的清除 O2-·的能力,是一种理想的超
氧自由基清除剂。
2.5.4 DPPH·清除率测定结果
沙枣果总黄酮纯化物对 DPPH自由基的清除能力
见图 11。
2.0
1.5
1.0
0.5
0.0流
出
液
黄
酮
含
量
/(
m
g/
m
L)
1 6
洗脱液用量/BV
2 3 4 5
图 6 洗脱液用量对解吸效果的影响
Fig.6 The influence of eluent consumption on desorption
图 7 洗脱流速对解吸效果的影响
Fig.7 The influence of elution flow rate on desorption
90
80
70
60
50
解
吸
率
/%
0.5 2.5
流速/(mL/min)
1.0 1.5 2.0
1.0
0.8
0.6
0.4
0.2
0.0
吸
光
度
0.0 1.0
浓度/(mg/mL)
0.2 0.4 0.6 0.8
VCPG总黄酮
图 8 沙枣果总黄酮纯化物还原能力测定
Fig.8 Reduction activity of purified flavonoid
图 9 沙枣果总黄酮纯化物对羟自由基的清除能力
Fig.9 The·OH radical scavenging capacity of purified flavonoids
100
80
60
40
20
0
清
除
率
/%
1.0
浓度/(mg/mL)
0.2 0.4 0.6 0.8
VC PG总黄酮
85
65
45
25
5
清
除
率
/%
1.0
浓度/(mg/mL)
0.2 0.4 0.6 0.8
VC PG总黄酮
图 10 沙枣果总黄酮纯化物对超氧阴离子自由基的清除能力
Fig.10 The O2-·radical scavenging capacity of purified flavonoids
陈亚,等:沙枣果总黄酮的纯化工艺及抗氧化性研究 工艺技术
124
由图 11可知,总黄酮纯化物对 DPPH·清除能力
随着浓度的增大而逐渐增强,说明增加总黄酮纯化物
浓度可以提高对 DPPH·的清除率,当浓度为 1.0 mg/mL
时,沙枣果总黄酮纯化物对 DPPH·的清除率(80.1 %)
和 VC对 DPPH·的清除率(83.1 %)之间差异不显著
(P>0.05),说明沙枣果总黄酮纯化物对 DPPH·具有很
好的清除效果。
2.5.5 抑制油脂的氧化结果
沙枣果总黄酮纯化物抗油脂氧化能力见图 12。
由图 12可以看出,总黄酮纯化物、VC和 PG都可
以抑制油脂的氧化,过氧化值随着油脂氧化时间的延
长而逐渐增大,根据方差分析,总黄酮纯化物与 VC、PG
的过氧化值之间存在极显著差异(P<0.01),说明总黄
酮纯化物具有很强的抑制油脂氧化的能力。
3 结论
1)4种大孔树脂中,AB-8吸附量和解吸率都较高,
是理想的适用于沙枣果总黄酮分离的树脂类型。
2)在上样量 70 mL、上样浓度 0.5 mg/mL、pH 4.0、
上样流速 1.0 mL/min、4 BV 90 %乙醇溶液为解吸液、
1.5 mL/min流速进行洗脱的条件下,AB-8对沙枣果总
黄酮的纯化效果较好,纯度为 65.56 %,是粗提黄酮纯
度的 2.84倍。
3)在一定浓度条件下,沙枣果总黄酮纯化物对
3种自由基的清除能力大小为:·DPPH>O2-·>·OH;沙
枣果总黄酮纯化物抗脂质过氧化能力明显强于 VC和
PG。
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收稿日期:2014-12-22
90
70
50
30
10
清
除
率
/%
1.0
浓度/(mg/mL)
0.2 0.4 0.6 0.8
VC PG总黄酮
图 11 沙枣果总黄酮纯化物对 DPPH自由基的清除能力
Fig.11 The DPPH radical scavenging capacity of purified
flavonoids
图 12 沙枣果总黄酮纯化物抗油脂氧化能力
Fig.12 The antioxidant effect of purified flavonoids to oil
13
9
5
1
过
氧
化
值
/(
m
eq
/k
g)
0 7
时间/d
1 3 5
VC PG总黄酮
陈亚,等:沙枣果总黄酮的纯化工艺及抗氧化性研究工艺技术
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