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香石竹脉斑驳病毒(CarVMV)鉴定和抗血清制备



全 文 :上海农业学报 1 9 94 , 10 ( l ) : 9 3 ~ 9 5
A c t a A g r io lt
u ar e S h a n gh
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香石竹脉斑驳病毒 ( C a r V M V )鉴定和抗血清制备 ’
张爱平
(上海市园林科学研究所 , 上海 2 0 0 2 3 2)
摘 耍 将纯化鉴定后的香石竹脉斑驳病毒繁殖在美国石竹 卜 , 样品匀浆 , 澄清 ,两轮聚乙二
醉沉淀后 , 翻酸缓冲液重新悬浮 .即为粗提纯的病毒制剂 。 紫外光谱吸收测定 , A 2 60 ~ 29 0 / 2 8 0 为
1
.
12
,制剂纯度 71 % ,病毒含量 2 . 75 m g /m l 。 肌肉注射家兔得到微量沉淀效价 1 : 1 0 24 的抗血清 .
这是国内首次制备出香石竹脉斑驳病毒抗血清。
关. 词 香石竹脉斑驳病毒 ; 鉴定 ;部分提纯 ;抗血清制备
香石竹脉斑驳病毒 ( C a r n a t i o n V e i n M o t t l e V i r u s , C a r V M V ) 在香石竹上时有发生「, · 2〕 ,但国内尚无制备这一病毒抗血清的报道 。 国外有文献介绍过 c ar v M v 的抗血清制备〔 ” 〕 ,未过
由于它在寄主体内含量很低 , 处理过程中又容易凝聚损失 ,所以提纯并不很容易 。 本试验对这
一病毒部分提纯和抗血清制备作了摸索 , 并取得 了基本成功 。 下面简要报道有关结果 。
1
. 材 料 与 方 法
1
.
1 病 . 鉴定 香石竹病毒分离物三次单斑纯化后按常规进行寄主范围与反应测定 、体外
抗性测定和粒体形态观察 。 用英国 Br un t 博士赠送的香石竹病毒抗血清通过微量沉淀法作血
清学检测 。 毒源繁殖在美国石竹 (刀抽 nt h u : ba bar ut , )上 。
1
.
2 部分提纯 参照香石竹斑驳病毒 ( C ar M V )部分提纯方法〔`〕 。 不同之处是 :抽提缓冲液
为 p H 6 . 4 的柠檬酸缓冲液 ( 0 . s m o l , 含 5% s u e r o s e , 0 . o lm o l E D T A , l % P V P 和 0 . 1% T G A ) ;
氯仿和正丁醇各处理 l o m i n ,沉淀用 p H S . 6 的硼酸缓冲液重悬浮 ( oB r a t e B u f f e r 0 . o l m o l , 含
0
.
o l m o l E D T A )

1
.
3 病毒制荆纯度及含 t 用 U V 一 2 10 紫外分光光度计测定 , 根据常规方法计算制度纯
度和病毒含量 s1[ 。
4 抗血清制备 参照 C ar M V 一 A S 制备方法 4[] 。
2
. 结 果 与 分 析
2
.
1 病毒种类鉴定 所研究的香石竹病毒分离物寄主范围有限 ;在览色黎 (hC 而oP od t’u m
a m a ar n t i c o l o r )
、 昆诺蔡 ( C . q u i n ` ) 、 高雪轮 ( S ile n e a , er’a )和美国石竹 ( D . ab r ba t u s )上产生局部褪绿和系统花叶 , 尤其是在后三种寄主上脉斑驳症状非常典型 ,与 C ar V M V 相似 。 体外抗
胜 : D E p l o 一` , T l p 7 o ` ( 〕 , I碑 IV (室温 ) 6d 以 上 , 均与 C a r V M V 相近 。 粒体形态和大 小属于 p o -
yt vi ur s 成员〔司 。 表明本分离物可能是前人报道的 C ar V M V s[] 。 而且 , 微量沉淀反应中 , 与
C ar V M V

A s 呈阳性反应 ,与另外两种香石竹线状病毒 C ar L V 和 C ar N F V 抗血清无反应 。 所
收稿日期 : 1 9 9 5一 0 3一 1 5 初稿 ; 19 9 3一 0 5一 1 1 修改稿 。
L海市青年科学从金资助项目 。

1期 张爱平等 :香石竹脉斑驳病毒 ( C盯 V M V )鉴定和抗血清制备 9 5
I D E N T I F I C A T I O N O F C A R N A T I O N M O T T L E V I R U S A N D
I T S A N T I S E R U M P R E P A R A T I O N
Z h a n g A i p i n g
( S h a n g h a i O rn a m e n t a l 矛I o rt i c u l t u er I n s t i t u te , S h a n g h a i 2 0 0 2 3 2 , hC i n a
.
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a t u s i n o e u l a t e d w i t h e a r n a t i o n v e i n m o t t l e
v i r u s w e r e e o l l e e t e d a n d g r o u n d f i n e l y i n a f o o d b l e n d e r in 2 v o l u m e s o f 0
.
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.
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A s a r s e u l t
,
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v i r u s P r e P a r a t i o n w a s o b t a i n e d a f t e r r e s u s P e n s i o n o f P e l l e t s i n 0
.
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2 4 4 n m
, v ir u s e o n e e n t r a t i o n 15 2
.
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B e e a u s e
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e p r e s e n t a n t i s e r u m i n v i r u s
d e t e e t i o n
.
K e y w o r d s C a r n a t i o n v e i n m o t t le v i r u s ; Id e n t if i e a t io n ; P a r t i a l p u r i f i e a t io n ; A n t i s e r u m
P r e P a r t l o n
现代化“ 绿色食
杨金接 ”
(上海市农业科学院土壤肥料研究所 . 上海
品 ”蔬菜生产基地工程技术概要 ’

(上海市五四农场 .
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2 0 1 1 0 6 ) t 海市奉贤县 2 0 2 1 7 7 )
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科技的高速发展和经济的不断增长 ,给人类带来巨大的效益和方便 ,同时潜在危机也 日益
严重 , 随着生活水平的逐步提高 ,人们对提供高洁 、优质 、 方便 、营养的 “ 绿色食品 ” 蔬菜的要求
日益迫切 。
上海市五四农场 , 位于长江出海口南缘的杭州湾畔 ,土壤 、 水质 、 大气测试结果均达国家卫
收校 11期 : 1 9 9 3 0 2 0 8 。
l) 上海市农科院 红加 :l 作的还 了洲长务模 、 赵水新 、 金福盘 、 王 化等 . 五四农场专加 「作的还有周柞炳 、 黄发祥 、 t1J 惠明 、 阮桂龙 、 徽国平 、
金 j’z 新 、 唐国华竿 ,在此 · 井致谢 。
全文在 19 9 2 年 一2 J1 7~ 一; , 11奈 i闷蜓 补召夕「的 “ 亚太地 试农业 I二程学 术交流 会” 卜1’〔读 一受到 与会 专家的好 i平. 岁卜编入 r 该会议论文
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