全 文 ：革莽皮提取物的抗氧化活性研究
郭艳华 ,胡思前
江汉大学化学与环境工程学院 , 湖北武汉 , 4 3。。 5 6
摘 要 用邻苯三 盼自筑化法 、 F et o n 反应法 、 N a Z反 0 3 一 I: 滴定法研究了革养皮提取 物 的抗氛化 活性 。 结果表
明 : 攀养皮提 取 物 的有 明显 的抗氛化 活性 , 当浓度为 。 . 10 9 / L 时 , 对超氛离子 自由墓 ( O矛 · )的抑制率为
48
.
45 写 , 对握 自由基 ( · O H )的清除率为 6 7 . 52 肠 ,其 。 . 1%提取 物对猪油 的抗氧化效果优 于 。. 0 2% 的抗氛化
剂 B H T , 且其 活性具有荆 t 效应关系 . 攀荞皮提取 物是 一种应用前景广阔的具有抗氛化 活性的天然资深 .
关扭词 攀荞皮提取 物 , 抗筑化活性 , 邻茉三 醉 自饭化法 , F et o n 反 应
植物中的水果 、蔬菜不仅能给人类提供维生素 、
矿物质等一些重要的营养成分 , 同时还具有抗 氧化 、
抗变异 、 防癌 、 提高免疫力 、抗过敏 、 调节血压和胆固
醇等功能 。 其中抗氧化活性对于预防癌症 、 心血管疾
病以及抗衰老有很重要的生理功能川 。 为此 , 近些年
来研究果蔬的抗氧化活性已成为热门课题比 3〕 。
李葬为药食两用的植物球茎闭 , 主要用于食用 。
革莽皮是人们在食用革莽时习惯于丢弃的部分 ,但它
营养丰富 ,故造成浪费 。 作者已对孽算皮色素的提取
工艺和稳定性进行了系统的研究〔 5〕 , 结果表明 : 革莽
皮色素是易于提取 ,且相对稳定的天然色素 . 本文用
邻苯三酚 自氧化法 、 F e t o n 反应法 、 N a Z S Z O 3 一 12 滴定
法 ,进一步研究了擎莽皮 提取物的抗氧化活性 , 为天
然抗氧化剂及抗氧化保健食 品的开发利用提供有用
的信息 。
1 试验部分
1
.
1 材料和仪器
草 莽 皮 ( 武 汉 集 贸 市 场 收 集 ) 。 邻 二 氮 菲 ,
( N H
;
)
Z
F e ( 5 0
.
)
: , 质量 分数 3 0 % 的 H Z O : , 邻苯三
酚 , 三经甲基 甲胺 ( T ir s) , 盐酸 , 2 , 6 一二叔丁基对甲酚
( B H T )
, 以上均为分析纯试剂 。
U V一 2 4 01 紫外可见分 光光度计 ( 日本 岛津 ) ,
7 2 1 可见分光光度计 (上海精密科学仪器有限公 司 ) ,
R E一 5 2 旋转燕发器 ( 上海亚荣生化仪器厂 ) , p H s 一 c2
型精密酸度计 (上海精密科学仪器有限公司 ) 。
1
.
2 实验方法
1
.
2
.
1 革莽皮提取物的制备
将李莽皮洗净 ,晾干 , 粉碎 。 用参考文献〔5」的方
第一作者 : 学士 ,副教授 。
收稿 H期 , 2 0 0 7一 0 7一 12 , 改回日期 : 20 0 7一 0 8一 2 8
法制取李莽皮提取物 , 滤渣用同样方法浸提 2 次 ,抽
滤 ,合并滤液 , 用旋转蒸发器减压浓缩 ,再将浓缩液真
空干燥 ,得棕黄色粉末 ,提取率为 4 . 8 % 。
1
.
2
.
2 李莽皮提取物吸收光语的浏定
准确称取少量革葬皮提取物用体积分数 50 % 的
乙醉配制成 0 . 10 9 / L 的色素乙醇溶液 , 以溶剂为参
比 ,在紫外可 见分光光度计上进行 25 0 ~ 70 0 n m 范
围内的扫描 ,得到李葬皮提取物的吸收光谱图 (见 图
1 )
。
1
.
2
.
3 革莽皮提取物抗氧化活性的测 定
1
.
2
.
3
.
1 抑制超氧离子 自由基的测定
采取邻苯三酚 自氧化法 6[, 7〕 。 邻苯 三酚 自氧化
反应速率被抑制的大小显示超氧离子 自由基被革莽
皮提取物清除作用的强弱 。
抑制率 /% 一 (△ A l /△ t一△ A: /△ 。 )/ △ A I△ t X 10 0
△ A , /△ t 为邻苯 三酚 自氧化反 应速率 , △ A Z /
△ t 为加人李莽皮提取物后 的邻苯 三酚 的 自氧化反
应速率 。
取 3 支 10 m L 比色管 , 依次标上 a 、 b 、 c , 各加人
2
.
0 0 m L p H = 9
.
5 0 的 T r i s 一 H C I缓冲溶液 , 在 b 、 e 中
分别加人一定量的李莽皮提取物使其浓度为 0 . 0 1 0 0
g / L
,在 a 、 。 中分别加人新配制的 60 m m ol / L 的邻苯
三酚 0 . 50 m L ,再用 T ir s 一 HCI 缓冲溶液稀释至刻度 .
以 T ir s 一 H C I缓冲溶液为参比 , 在吸收波长 42 0 n m 处
从第 6 m in 开始每隔 30 5 测一次吸光度 A 值 ,测定 6
m in
。 按同样方法分别取革莽皮提取物不 同量进行
实验 ,再按 同样 方法用 常用抗 氧化剂 B H T 进 行实
验 ,计算抑制率 。
1
.
2
.
3
.
2 清除经 自由基的测定
采取 F e n t o n 反应法 [ 8〕 。 F e n t o n 反应产生经 自
由基 : H Z O : + F e Z + = · O H + O H 一 + F e , + , F e Z + 与邻
二氮菲生成红色配合物 , 加人孽葬皮提取物后 , 减弱
1 2 8 1 20D 7 V o l 3 3 N o
.
10 ( T o ta l 2 38 )
DOI : 10. 13995 /j . cnki . 11 -1802 /ts . 2007. 10. 041
了 · H O对 Fe, + F /邻二氮菲 的氧化作 用 , 从而减弱
最大吸收波长处的吸光度 的变化 。
清除率 /纬一华〔 华共x : O。`八 未拐 一八栩 少
A 橱 、 A 未扭 及 A 提 分别为加人 提取物的经 自由基
体系 、 不加 H Z O : 及加人 H : O : 的经 自由基体系的吸
光度值 。
取 5 支 10 m L 比色管 ,编号 l 、 2 、 2 ” 、 3 、 3 # , 向 2 、
3
、
3 # 试管 中分加人 1 . 0 0 m L 1 . 0 0 X 1 0 一 2 m o l / L 邻
二氮菲溶液 , 1 . 0 m L 1 . 0 X 10 一 “ m ol / L 硫酸亚铁
按溶液 , 向 2 、 2 “ 中分别加人一定量 的革莽皮提取物 ,
向 2 、 3 # 中分别加人 0 . 0 6 % H Z O : 溶液 0 . 5 0 m L 。 再
分别在 5 支试管中加人 p H 一 7 . 4 的 T ir s 一 H CI 缓冲
液 2 . 0 m L 。 均用二次蒸馏水定容至 10 . 0 m L , 置于
3 7℃ 水浴中反应 l h , 以 1 中溶液为参比 ,在可见光 区
对 3 中溶液进行扫描 ,得最 大吸收波长 ,并在此波长
下测定吸光度值 。 以 1 中溶液 为参 比 , 分别测定 3 、
3 # 中溶液 的吸光度 , 得 A扭 、 A 未扭 , 以 2 # 中溶液为参
比 ,测定 2 中溶液的吸光度 ,得 A 样 . 按同样方法分
别取革莽皮提取物不同量进行实验 ,再按 同样方法用
常用抗氧化剂 B H T 取不同量代替提取物进行实验 ,
计算清除率 。
1
.
2
.
4 对猪油的杭氧化活性测定
取几份不同量 的革莽皮提取物 , 分别加人 50 9
温热猪油 ,搅匀 , 放人 70 ℃烘 箱中强化保存 , 定时搅
拌 ,并交换在恒温箱 中的位置 。 在保存 50 、 70 h 时分
别取样 ,按 照 G B 5 0 0 9 . 37 一 1 9 8 5 方法测定猪油 的过
氧化值 (尸O V 值 ) 。 按 同样的方 法对 B H T 进 行 实
验 。
2 结果 与讨论
2
.
1 草葬皮提取物的吸收光谱
革葬皮提取物的紫外一可见光谱见图 1 。
2 7 0 ~ 2 9 0 n m 有较强的吸收 , 4 0 0 n m 左右有很弱 的吸
收 ,这说明革莽皮提取物抗氧化活性的主要成分不是
花色素及其昔类 , 而是黄酮类化合物图 。
2
.
2 草葬皮提取物对超 叙离子 自由墓的抑制作用
按实验方法 1 . 2 . 3 . 1 进行实验 ,测定结果如表 l
所示 。
表 l 抑制超妞离子自由甚的侧定结果
样品用量
/ m g
.
L 一 1
抑制率
/%
样品用量
/ m g
.
L 一 `
抑制率
/%
0LOO`J,哎éSA一`bCJ.…, .止匕口八ùU11O`通且J件匕Jl合7 0 . 08 0 . 010 0 . 0
1 2 0
.
0
1 4 0
.
0
邝口1工JdoO曰OJó反JO.…nU11,口一匕1,1ù.
0C
U
O.…0工JO,上n乙ó汽」
由表 1 可知 , 革莽皮提取物对 0 牙 · 的抑制率随
着革莽皮提取物浓度的增大而增大 。 当浓度从 70 . 0
m g / L 增加到 8 0 . 0 m g / L 时 , 抑制率发生突增 , 当草
莽皮提取物浓度继续增大时抑制率缓慢增大 。 测定
的 B H T 的用量为 1 0 0 . 0 m g / L , 抑 制率 为 6 1 . 5 2% ,
同样条件下孽莽皮提取 物对超 氧离子 自由基抑制率
是 B H T 的 7 8 . 8% 。
2
.
3 草葬皮提取物对轻 自由墓的清除作用
在 F e , 十 一邻二氮菲溶液 的最大吸收波长 5 10 n m
处 ,测定不同含量的革莽皮提取物清除经 自由基的清
除率见表 2 。
表 2 清除狂自由甚的测定结果
样品用量
/ m g
·
L一 ’
清除率 / 写 样 品用量
/ m g
·
L -
清除率 /%
2 0
。
0 0
4 0
.
0 0
5 0
.
0
2 6
.
4 0
3 7
.
4 3
4 9
.
2 5
8 0
.
0 0
1 0 0
.
0
1 2 0
.
0
6 5
.
7 8
6 7
.
5 2
6 7
.
9 7
姗溯l0ǎ忿侧来叠
0
.屯兀旧【-
2砚】】. 0 3 (犯 J ) 书洲) . 0
波长又 /mn
出加加O 侧洲). 0
图 1 革葬皮提取物的吸收光谱
从图 1 可见 ,可见光区无明显 吸收 , 而在紫外区
由此可知 , 革莽皮提取物对经 自由基 的有 明显
清除作用 。 当革莽皮提取物的浓度 为 0 . 10 9 / L 时 ,
清除轻 自由基 的清除率为 6 7 . 5 2 % 。 同浓度的 B H T
清除经 自由基的清除率为 70 . 4 % , 同等条件下 , 革
莽皮提取物清除经 自由基的清除率是 常用抗氧化剂
B H T 的 9 5 . 9 1% 。 且随着 革莽皮提 取物浓度 的增
大 ,对经 自由基 的清除率增大 ,抗氧活化活性增强 。
2
.
4 攀葬皮提取物对猪油的抗权化活性测定
N a
2
5
2
0
3 一
I
: 滴定法是通过过氧化物的生成量评
价食品抗氧化剂抗氧化能力最常用的方法 。
按 1 . 2 . 3 实验 , 将加人不同量 的革莽皮提取物的
猪油在 70 ℃ 恒温烘箱中保存 50 、 70 h 时不 同浓度革一{,”
莽皮提取物对猪油的抗氧化 活性 的 尸 O V值分别列
人表 3、 表 4,并与抗氧化剂 B H T 比较 。
表 3 50 b 时不同浓度草葬皮提取物
对猪油的抗舰化活性
浓度 /% 李葬皮提取物 B H T空白 些
1
.
0
全卫互
3 8
.
0
0
.
0 2 0
.
0 2
PO V /m g
·
k g 一 ` 5 2
.
5 4 3
.
1 2 0
.
0
基的抑 制率为 48 . 45 % , 是常用抗氧化剂 B H T 的
78
.
80 %
。 革葬皮提取物的抗氧化活性随着浓度的增
大而增强 。 实际上 当李莽皮提取物的浓度很小仅为
0
.
10 9 / L 时 , 清除 自由基的能力 已相当显著 。
( 3) 草葬皮提取物有阻断猪油脂质过氧化作用 ,
其 0 . 1%提取物对猪油的抗氧化效果优于 0 . 02 %的
食品抗氧化剂 B H T ,且其活性具有剂量效应关系 。
衰 4 7O h 时不同浓度单葬皮提取物对猪油的抗级化活性 参 考 文 做
浓度 /% 草莽皮提取物 B H T
P〔) V / m g · k g 一 1
空白
12 0
.
2 兴 全卫兰8 2 . 0 色卫兰9 0 . 巨 0 。 0 24 2。 5
由表 3 、 表 4 可知 , 随着革莽皮提取物浓度的增
大 ,对猪油的抗氧化能力增强 。 当革葬皮提取物在猪
油中的添加量为 0 . 1%时 ,其抗氧化能力优于 0 . 02 %
抗氧化剂 B H T , 但添加量为 0 . 02 肠时 , 却不 如同浓
度的 B H T 。
3 结 论
( 1) 革葬皮色素含量高 ,提取方法简单 ,提取率达
4
.
8%
。
(2 ) 实验结果表 明 : 草莽皮提取物有较强的抗
氧化活性 。 当萃莽皮提取物的浓度为 0 . 10 9 / L 时 ,
革葬皮提取物对经 自由基的清除率 为 67 . 52 % , 是同
浓度常用 抗氧 化剂 B H T 的 9 5 . 9 1写 ; 对 O牙 · 自由
1 R i e r E v a n s C
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M il l
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2 3 6
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G u o Y a n h u a
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A B S T R A C T A刀 t io 元d a n t a e t i vi t y o f e xt ar e t o f lE ceo h
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.
K e y w o dr s e x t r a c t o f e l e o e h a r i s t u b e r o s a p e e l
, a n t i o x id a n t a e t i v i t y
,
p y r o g a l l o l a u t o x id a t i o n m e t h o d
,
f e t o n
T e a C t l o n
三项饮料产晶标准在京顺利通过审定
2。。 7 年 9 月 27 一 28 日 , 中国饮料工业协会和全 国食标 委饮料分 委会共 同组织 了《茶饮料 》国家标准 、 《含乳饮料 》
国家标准 、 《植物蛋 白饮料 豆奶 ( 豆浆 )和豆 奶饮料 》行 业标准 3 项标准 的审定会 。 3 项标准均由中国饮料 工 业协会技术
工作 委员会牵头起草 , 目前 , 技术工作 委 员会 已完成包括这 3 项标准及 《饮料通 则 》 、 《 浓缩苹果 浊汁 》 、 《 植物 蛋 白饮料
攻策诊撼璐准
杏仁薄 》 、 《植物蛋 白饮料 椰子汁及 复原椰 子汁 》 、 《碳酸饮料 》在内的 8 项 国家 、 行业标准 。
1 3 0 } 2 0 7 v o l
.
3 3 N o , 0 (丁o ta l 2 38 )