全 文 :苦荞醇提物的镇静催眠作用研究
胡一冰 ,赵钢 ,彭镰心 ,邹亮 (成都大学生物产业学院 ,四川成都 610106)
摘要 [目的 ]研究苦荞醇提物的镇静催眠作用 ,为进一步扩大苦荞临床应用奠定基础。 [方法]记录苦荞醇提物对戊巴比妥钠引起的
小鼠睡眠持续时间 、入睡率及小鼠自主活动次数。 [结果]苦荞醇提物能延长戊巴比妥钠阈上剂量引起的小鼠睡眠持续时间 ,增加戊巴
比妥钠阈下剂量引起的小鼠睡眠只数 ,且能明显减少小鼠自主活动次数。 [结论 ]苦荞醇提物具有镇静作用。
关键词 苦荞醇提物;镇静;催眠;小鼠
中图分类号 S865.1+3 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2010)05-02354-02
StudyonSedativeandHypnoticEffectsofTartaryBuckwheatEthanolExtract
HUYi-bingetal (SchoolofBioengineering, ChengduUniversity, Chengdu, Sichuan610106)
Abstract [ Objective] TheaimwastostudythesedativeandhypnoticefectsofTartaryBuckwheatethanolextractandlayafoundationfor
furtherexpandingtheapplicationofTartaryBuckwheat.[ Method] TheefectsofTartaryBuckwheatethanolextractonpentobarbitalsodium
andmicespontaneousactiontimeswererecorded.[ Result] EthanolextractofTartaryBuckwheatcouldprolongmicesleepdurationcausedby
pentobarbitalsodium(suprathresholddosage), increasemicesleepnumbercausedbypentobarbitalsodium(subthresholddosage), andobvi-
ouslyinhibitmicespontaneousactiontimes.[ Conclusion] EthanolextractofTartaryBuckwheathasanfunctionofsedation.
Keywords EthanolextractofTartaryBuckwheat;Sedation;Hypnosis;Mice
基金项目 国家 “十一五 ”科技支撑计划重点项目(2006BAD02B06);四
川省中医药管理局资助项目(2006750)。
作者简介 胡一冰(1974-),女 ,贵州凯里人 , 博士 ,讲师 ,从事疾病动
物模型与中药复方药理研究。
收稿日期 2009-11-09
苦荞麦属蓼科双子叶植物 ,俗称苦荞 ,是一种独特的食
药两用资源作物。我国医书对于苦荞麦的药用多有记载 。
近年来的研究表明 ,苦荞麦的籽粒 、根 、茎 、叶及花中均含有
较多的黄酮类化合物 ,其具有降血糖 、降血脂 、抗氧化 、增强
人体免疫力 、清除自由基等多种活性 ,对糖尿病 、高血压 、高
血脂 、冠心病 、中风等病症有较好的治疗作用。对其醇提物
镇静催眠作用的研究尚未见报道 ,笔者着重研究苦荞醇提物
镇静催眠作用 ,为进一步扩大苦荞临床应用奠定基础 。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 药物。选取一定量颗粒饱满的苦荞带壳种子(采自
四川省凉山彝族自治州)。干燥后适度研碎 , 75%乙醇(固液
比 1∶10), 85℃回流提取 ,提取 2次 ,每次 2h,合并 2次滤液 ,
回收乙醇并浓缩至稠膏状 ,经 80 ℃烘干 ,得苦荞提取物 ,提
取物得率为 6.67%,备用;补脑安神片(武汉健民集团随州药
业有限公司);以上药物均用 0.5%的 CMC-Na配制。
1.1.2 动物。健康昆明种小鼠 ,雄性 ,体重(20±2)g,由四川
省实验动物专委会养殖场提供 ,合格证号为 SCXK(川)2008-
14。
1.1.3 试剂。戊巴比妥钠(上海化学试剂厂)。
1.1.4 仪器。ZZ-6型小鼠自主活动测试仪(成都泰盟科
技有限公司)。
1.2 方法
1.2.1 苦荞醇提物对小鼠戊巴比妥钠催眠时间的影响 [ 1] 。
将 40只雄性小鼠随机分为 4组 ,每组 10只 ,分别为空白对照
组 、苦荞醇提物高剂量组 、苦荞醇提物低剂量组和阳性药物
对照组;试验前 8h禁食不禁水 ,试验时空白对照组给予等体
积的 0.5% CMC-Na,苦荞低剂量组 、高剂量组分别给 0.13、
0.5 g/kg的苦荞醇提物 ,阳性药物对照组给 2.28 g/kg的补
脑安神片;连续给药 7 d,末次给药 30 min后 ,小鼠腹腔注射
戊巴比妥钠 45 mg/kg(由预试验确定),记录睡眠出现和消失
的时间 ,计算睡眠潜伏期(睡眠出现时间—记录开始时间),
睡眠持续时间(睡眠消失时间—睡眠出现时间)。
1.2.2 苦荞醇提物对小鼠戊巴比妥钠阈下催眠剂量的影
响 [ 1] 。分组及给药同 “1.2.1”。末次给药后 30 min,小鼠腹
腔注射戊巴比妥钠 35 mg/kg(戊巴比妥钠阈下催眠量 ,即
90%~ 100%小鼠不入睡的戊巴比妥钠最大剂量 ,由预试验
确定),观察并记录入睡动物数(注射后 15 min内小鼠翻正
反射消失达 1 min以上者记为入睡),计算各组入睡率 。
1.2.3 苦荞醇提取对小鼠自主活动影响 [ 2] 。分组及给药同
“1.2.1”。末次给药 30min后将小鼠放入小鼠自主活动测定
仪中 ,让其适应 5min,然后开始测定 5min内自主活动次数。
1.3 数据统计方法 数据进行组间 t检验和 X2检验 。
2 结果与分析
2.1 苦荞醇提物对小鼠戊巴比妥钠催眠时间的影响 与空
白对照组相比 ,苦荞醇提物高 、低 2个剂量均能延长戊巴比
妥钠引起的动物睡眠持续时间(表 1)。
表 1 苦荞醇提物对小鼠戊巴比妥钠催眠时间的影响 (n=10)
Table1 EfectsofTartaryBuckwheatethanolextractonhypnosis
timewithpentobarbitalsodium
组别Group
剂量g/kgDose
睡眠潜伏期minSleeplatency
睡眠持续时间minSleepduration
空白对照组Blankcontrolgroup - 8.5±3.0 59.57±20.16
苦荞醇提物低剂量组Low-dosegroupofTartaryBuckwheatethanolextract 0.13 7.8±2.6 79.70±20.89
*
苦荞醇提物高剂量组High-dosegroupofTartaryBuckwheatethanolextract 0.50 6.1±1.5
*
89.42±17.60**
补脑安神片组Bunaoanshenslicegroup 2.28 5.7±2.2 92.83±19.58**
注:*, **分别表示与空白对照相比在 0.05和 0.01水平上差异显
著和极显著。下同。
Note:*, **standforsignificantdiferencesandextremelysignificant
diferencesat0.05, 0.01 levelrespectivelycomparedwithblank
control.Thesameasfolows.
责任编辑 陈秀晨 责任校对 傅真治安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2010, 38(5):2354-2355
2.2 苦荞醇提物对小鼠戊巴比妥钠阈下催眠剂量的影
响 苦荞醇提物高 、低剂量组动物入睡只数及入睡率均高于
空白对照组(表 2)。
表 2 苦荞醇提物对小鼠戊巴比妥钠阈下催眠剂量的影响 (n=10)
Table2 EffectsofTartaryBuckwheatethanolextractonsubthreshold
hypnoticdosewithpentobarbitalsodium
组别Group
剂量g/kgDose
入睡动物只Sleepingnimal
入睡率%Sleeprate
空白对照组Blankcontrolgroup - 1 10
苦荞醇提物低剂量组Low-dosegroupofTartaryBuckwheatethanolextract 0.13 4 40
苦荞醇提物高剂量组High-dosegroupofTartaryBuckwheatethanolextract 0.50 7 70
*
补脑安神片组Bunaoanshenslicegroup 2.28 8 80**
2.3 苦荞醇提物对小鼠自主活动的影响 与空白对照组相
比 ,苦荞醇提物高剂量组能明显减少正常小鼠自主活动的次
数(表 3)。
3 讨论
苦荞具有较高的食用价值 ,历代文献也侧重于食用的记
载 ,药用记载未提及对 “不寐的治疗。通过现代药物研究的
手段发现苦荞主要含黄酮类化合物 ,结合该研究前期镇痛试
验研究 ,推测苦荞具有镇静作用。试验表明 ,苦荞醇提物能
延长戊巴比妥钠阈上剂量引起的小鼠睡眠持续时间 ,增加戊
巴比妥钠阈下剂量引起的小鼠睡眠只数 ,且能明显减少小鼠
自主活动次数 ,说明苦荞具有明显的镇静催眠作用。
表 3 苦荞醇提物对小鼠自主活动次数的影响 (n=10)
Table3 EfectsofTartaryBuckwheatethanolextractonmicesponta-
neousactiontimes
组别Group
剂量g/kgDose
自主活动次数次 /5minSpontaneousactiontimes
空白对照组Blankcontrolgroup - 25.5±7.6
苦荞醇提物低剂量组Low-dosegroupofTartaryBuckwheatethanolextract
0.13 21.2±5.1
苦荞醇提物高剂量组High-dosegroupofTartaryBuckwheatethanolextract
0.50 17.7±3.8**
补脑安神片组Bunaoanshenslicegroup 2.28 17.4±5.0
**
参考文献
[ 1] 陈奇.中药药理研究方法学 [ M] .2版.北京:人民卫生出版社 , 2006:
667.
[ 2] 华桦,宋军 ,赵军宁 ,等.复方丹皮胶囊镇静催眠作用研究 [ J].中药药
理与临床, 2009, 25(3):62-63.
[ 3] LIYL, LIANGH.Studyonsedationofdriedginger[J].AgriculturalSci-
ence&Technology, 2008, 9(4):121-126.
(上接第 2324页)
(C-24), 31.9(C-25), 19.0(C-26), 21.2(C-27), 25.4(C-28),
11.8(C-29)。 MS、 13C-NMR与文献 [ 3]一致 ,确定化合物Ⅳ
为豆甾醇。
2.5 化合物 Ⅴ 无色针晶(DMSO), mp220 ~ 222 ℃。1H-
NMR(400MHz, DMSO-d6 )δ:3.90(3H, s, OCH3), 6.27(1H,
d, J=9.2Hz, H-3), 6.82(1H, s, H-8), 6.89(1H, s, H-5), 7.57
(1H, d, J=9.2 Hz, H-4)。13 C-NMR(400 MHz, DMSO-d6 )δ:
161.4(C-2), 149.9(C-9), 149.6(C-7), 143.9(C-6), 143.3(C-
4), 113.4(C-3), 111.4 (C-10), 107.4(C-5), 103.0(C-8),
56.3(OCH3), 99.4(C-1 ), 72.8(C-2 ), 76.3(C-3 ), 68.2
(C-4 ), 75.7(C-5 ), 59.4(C-6 )。NMR与文献 [ 4]一致 ,经
水解得一苷元 ,其 Ms、IR、及1 H-NMR与文献 [ 5]一致 ,混合后
熔点不下降 ,水解液经纸层析检出苷元为葡萄糖 ,因此确定
化合物Ⅴ为东莨菪苷 。
2.6 化合物 Ⅵ 白色粉末 (DMSO), mp277 ~ 281 ℃。
Libermann-Burchard反应和 Molish反应均呈阳性 ,酸性水解
检出葡萄糖 , TLC遇浓度 5%硫酸乙醇显紫红色。IR(KBr)
νmax:3 411(-OH), 2 934, 2 870, 1 630, 1 462, 1 367, 1 074,
1 025, 796 cm-1。1H-NMR(400 MHz, DMSO-d6 )δ:0.63 ~
3.45 (48H, m), 4.21(2H, d, J=8.0 Hz), 4.87 (3H, d, J=8.0
Hz), 5.12(1H, d, J=8.0 Hz), 5.31 (1H, s)。13 C-NMR(400
MHz, DMSO-d6)δ:140.4 (C-5), 138.0 (C-22), 128.8 (C-
23), 121.2 (C-6), 78.0(C-3), 56.2 (C-14), 55.3 (C-17),
50.6 (C-24), 49.6 (C-9), 45.1 (C-13), 41.7 (C-20), 40.1
(C-12), 39.2(C-4), 38.3(C-1), 36.8(C-10), 31.4(C-25),
31.2 (C-7), 33.3 (C-8), 29.2 (C-2), 28.5 (C-16), 24.9(C-
28), 23.9(C-15), 23.6 (C-21), 22.6 (C-11), 20.9 (C-26),
20.6 (C-27), 19.7 (C-19), 11.8 (C-18), 11.7(C-29), 100.8
(C-1 ), 73.4(C-2 ), 76.9 (C-3 ), 70.0 (C-4 ), 76.7 (C-
5 ), 61.0(C-6 )。NMR与文献 [ 6]一致 ,确定化合物Ⅵ为
豆甾醇 -3-O-葡萄糖苷。
3 结论
目前 ,从废弃烟叶石油醚 -乙醇提取物中得到 6个已知
化合物 。这些化合物均首次从烟叶中分离得到。
参考文献
[ 1] 郑奎玲 ,余丹梅.废弃烟叶的综合利用现状[ J].重庆大学学报, 2004, 27
(3):61-64.
[ 2] KIJIMAHH, SATON, HATANOA, etal.Sterolglucosidesfromprunela
vulgaris[ J].Phytochemistry, 1990, 29(7):2351-2357.
[ 3] 封士兰 ,何兰 ,王敏,等.百合花化学成分的研究 [ J].中国中药杂志,
1994, 19(10):611-612.
[ 4] 杨福全 ,欧庆瑜 ,俞惟乐.驴驴蒿的化学成分研究 [ J] .中国中药杂志,
1994, 19(3):166-167.
[ 5] 杨秀伟.生物碱 [ M].北京:化学工业出版社 , 2005:39-41.
[ 6] 黄敏珠 ,陈海生 ,刘建国,等.中药鬼针草化学成分的研究 [ J].第二军
医大学学报 , 2006, 27(8):888-891.
235538卷 5期 胡一冰等 苦荞醇提物的镇静催眠作用研究