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擎天树种子不同溶剂浸提液对白菜种子萌发及幼苗生长的影响



全 文 :第 18 期
第 51卷第 18期
2012 年 9 月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol. 51 No.18
Sep.,2012
收稿日期:2011-12-16
基金项目:广西壮族自治区“十一五”林业科学技术研究项目(桂林科字 2010-19);广西壮族自治区研究生教育创新计划资助项目(105931003041)
作者简介:梁 机(1961-),男,广西平南人, 副教授,博士,主要从事林木遗传育种教学与研究工作,(电话)13507868127(电子信箱)
liangjimail@163.com。
擎天树(Parashorea chinensis Wang Hsie)又名
望天树, 为龙脑香科 (Dipterocarpaceae) 柳安属
(Parashorea Kurz)常绿大乔木树种,是我国重要的
珍稀濒危植物 [1],也是我国热带雨林的标志树种之
一,属国家一级保护植物。 其间断地分布在云南省
南部和广西壮族自治区西南部的巴马瑶族自治县、
都安瑶族自治县、那坡县、田阳县及龙州县等地的
局部生境[2]。擎天树具有较高的经济价值,能提取龙
脑香脂;其树干通直圆满,出材率高,是优良的工业
用材树种,可用作桥梁、码头、建筑、车船、家具、室
内装饰材料的生产原料,还可以制作胶合板,具有
很好的发展前景[3,4]。 擎天树的种子没有休眠期,极
易发芽, 在从母体植株上散落时就已开始萌发;有
研究证明擎天树的种子属于极端顽拗性种子,具有
擎天树种子不同溶剂浸提液对白菜种子萌发及
幼苗生长的影响
梁 机 1,黄银珊 1,黄伯高 2,李 婷 1,覃英繁 2,黄 永 2
(1.广西大学林学院,南宁 530005;2.广西林木种苗管理总站,南宁 530022)
摘要:以具有胎萌现象的擎天树种子为材料,采用不同溶剂进行提取,通过生物测定法研究了擎天树种
子不同溶剂浸提液对白菜种子萌发与幼苗生长的影响。 结果表明,擎天树种子不同溶剂浸提液对白菜种
子的发芽与生长均有抑制效应,且随浸提液浓度增大抑制作用增强。 不同溶剂的种子浸提液对白菜种子
萌发与幼苗生长的抑制活性存在差异,其中以乙醚浸提液的抑制活性最强,其他溶剂的浸提液对白菜种
子萌发和幼苗生长也表现出了不同程度地抑制作用,抑制强弱依次为乙醚、水、乙醇、甲醇、丙酮。
关键词:擎天树;溶剂;种子浸提液;白菜;抑制作用;种子萌发
中图分类号:Q949.758.6;S722.1;Q945.78 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2012)18-4031-04
Effect of Different Solvent Extraction of Parashorea chinensis Seeds
on Seed Germination and Early Seedling Growth of Brassica campestris ssp. chinensis
LIANG Ji1,HUANG Yin-shan1,HUANG Bo-gao2,LI Ting1,QIN Ying-fan2,HUANG Yong2
(1. College of Forestry, Guangxi University, Nanning 530005,China;
2. Forest Tree Seed and Stock Master Station of Guangxi, Nanning 530022,China)
Abstract: Parashorea chinensis Wang Hsie seeds with vivipary were extracted by different solvent extractions, and the effects
of different solvent extraction of P. chinensis seeds on seed germination and early seedling growth of Brassica campestris L.
ssp. chinensis (L.) Mak. were studied through biological assay method. The results indicated that there was obvious inhibitory
effect of all crude extracts on the germination and growth of B. campestris ssp. chinensis, and the inhibitory effect became
stronger as the concentration of extraction solution increased. The inhibitory activity on germination and growth of B.
campestris ssp. chinensis differed with different solvent. The crude extracts from ether showed the strongest inhibitory activity;
while other extracts also had inhibitory effect. The inhibitory activity of different solvent extractions ranked from strong to
week as ether, water, alcohol, carbinol, acetone.
Key words: Parashorea chinensis Wang Hsie; solvent; seed extracts; Brassica campestris L. ssp. chinensis (L.) Mak.; inhibitiory
effect; seed germination
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2012.18.059
湖 北 农 业 科 学 2012 年
胎萌现象 [5,6]。 种子萌发过程是植物生长发育的起
点,大量研究表明,植物内源激素赤霉酸(Gibberellic
acid,GA)和脱落酸(Abscisic acid,ABA)是调控种子
萌发与休眠的重要信号物质,起着不可替代的调节
作用[7,8]。一些学者认为种子内源激素赤霉酸类似物
(GA analogues,GAs) 和 ABA 对种子胎萌有着重要
的作用;GAs 可使种子休眠解除;相反,ABA 却抑制
种子早萌,诱导休眠 [9]。 有试验报道红树植物木榄
[Bruguiera gymnorrhiza (L.)Savigny]的成熟种子和
幼胚轴中的 ABA 含量较低, 而赤霉素(Gibberellic
A3,GA3)含量较高,推测这可能是影响红树植物胎
生现象发生普遍的重要原因之一[10]。 彭业芳等[11]研
究发现, 龙眼 (Dimocarpus longgana Lour.)、 荔枝
(Litchi chinensis Sonn.) 的胎萌现象与其种子内的
ABA 含量有关。 可见植物种子的萌发、休眠与其内
含物质成分及含量密切相关。 目前以作物种子为受
体,利用具有深长休眠特性、种子难以萌发或发芽
率低、发芽时间长、发芽不整齐的林木种子浸提液
来处理作物种子,探讨林木种子中抑制萌发物质的
存在、 确定萌发抑制物对作物种子休眠的作用、以
及对作物种子萌发影响的研究等是比较多的 [12-16],
但用有胎萌现象的林木种子浸提液进行作物种子
生物测定、研究其对作物种子萌发及幼苗生长影响
的试验尚未见报道。 本试验探讨了擎天树种子的不
同溶剂浸提液对白菜 [Brassica campestris L. ssp.
chinensis(L.)Mak.]种子萌发和幼苗生长的影响,旨
在揭示擎天树种子内含物的特性,了解种子中内源
物质与其胎萌现象的关系,为进一步研究擎天树种
子发芽生理机制以及为该珍稀濒危植物种子的萌
发、繁殖和保护提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
擎天树种子于 2010 年 8 月上旬, 采集于广西
壮族自治区田阳县坤平乡坡旺村那要山擎天树天
然林中,在实验室挑选出饱满、胚根伸出约 1 cm 长
的种子,用湿纸包裹后装入密闭的塑料袋中,保存
在 4 ℃的冰箱中,备用。受体植物白菜种子购于南宁
市蔬菜种子市场。
1.2 方法
1.2.1 擎天树种子不同浸提液的制备 浸提液的
制备参照田胜尼等 [14]的方法,分别称取 50.0 g 擎天
树种子 5 份, 研磨后装入广口瓶中, 分别加入 500
mL 的去离子水、95%乙醇、80%甲醇、乙醚、丙酮浸
泡, 封口后放入 4 ℃的冰箱中存放 36 h。 36 h 后取
出,滤除残渣,除水浸提液外,其他有机溶剂浸提液
用旋转蒸发仪旋转蒸干,再用去离子水洗下,并定
容为 500 mL,使每种浸提液中擎天树种子提取物的
质量浓度均为 50 g / 500 mL。然后将擎天树种子浸提
液分别稀释成 0.100、0.075、0.050、0.025 g / mL,以去
离子水为对照,浓度即为 0.000 g / mL(CK),都放在
4 ℃冰箱中保存备用。
1.2.2 种子萌发试验 选取子粒饱满、大小均匀的
白菜种子, 经高锰酸钾溶液浸泡 15 min 消毒后,放
置在垫有双层滤纸的培养皿中, 每个重复 100 粒,
然后添加不同溶剂浸提的不同浓度擎天树种子浸
提液,以浸湿白菜种子为度,每个处理设置 3 个重
复;在光照培养箱中,(25±1) ℃、16 h / d 条件下进行
种子发芽培养,每天检查并记录发芽情况,及时补
充相应的处理液以保持湿润。 到第七天于每个重复
中随机测定 10 株白菜幼苗的高度和主根长度;在
发芽末期,以长出完整的基本幼苗结构的种子为正
常发芽粒,直到连续 5 d 发芽种子数平均不到供试
种子总数的 1 %时统计发芽率。 发芽率为在一定时
间内生成正常幼苗的种子粒数占供试种子总数的
百分率 [17]。 简化活力指数 (Simplied vigor index)
SVI=S×G[18];其中 S 为平均苗长或干重、鲜重,G 为
发芽率(%)。 试验数据应用 Excel 软件和 DPS 软件
进行方差分析与 LSD多重比较分析。
2 结果与分析
2.1 擎天树种子不同溶剂浸提液对白菜种子萌发
的影响
2.1.1 擎天树种子不同溶剂浸提液对白菜种子发
芽率的影响 擎天树种子不同溶剂浸提液对白菜
种子发芽率的影响结果见表 1。从统计结果看,擎天
树种子不同溶剂浸提液均可对白菜种子的发芽率
产生显著的抑制作用(P<0.05),经不同溶剂浸提液
处理的白菜种子发芽率均低于对照,而且同一种溶
剂不同浓度浸提液处理下的白菜种子发芽率随着
浓度的增加呈递减趋势。 不同溶剂浸提液对白菜种
子发芽率的影响是不同的,乙醚浸提液对白菜种子
的萌发抑制作用最显著 , 当乙醚浸提液浓度在
0.100 g / mL 时,白菜种子的发芽率仅为 28.0%,比对
照(CK)降低了 69.3 个百分点;当乙醚浸提液浓度
分别在 0.075、0.050、0.025 g / mL 时, 白菜种子的发
芽率也显著低于对照(P<0.05)。 经去离子水、乙醇、
甲醇、丙酮浸提液处理后的白菜种子发芽率也表现
出不同程度地降低,且发芽率在各浸提液内各浓度
间的差异也达到了显著水平(P<0.05)。与对照相比,
擎天树种子各溶剂浸提液对白菜种子发芽率的抑
制程度由大到小依次为:乙醚、去离子水、乙醇、甲
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第 18 期
醇、丙酮。
2.1.2 擎天树种子不同溶剂浸提液对白菜种子简
化活力指数的影响 简化活力指数包含发芽速率
和幼苗生长势 2 个变量, 它比单独采用发芽指数
(Germination index,GI) 来评价种子活力具有更充
分、更全面的说服力 [18]。 擎天树种子不同溶剂浸提
液对白菜种子简化活力指数的影响结果见表 1。 从
表 1 可见,各溶剂不同浓度浸提液处理均对白菜种
子的简化活力指数产生了显著的抑制作用 (P<
0.05),随着浸提液浓度的增加,白菜种子简化活力
指数呈现递减现象,且浓度越大,简化活力指数越
低,其中乙醚浸提液处理的白菜种子简化活力指数
最低,反映出抑制活性最大;如乙醚浓度为 0.100
g / mL 时,白菜种子的简化活力指数为 0.34,比对照
的 3.17 降低了 2.83;即便是低浓度的乙醚浸提液处
理(0.025 g / mL),白菜种子的简化活力指数也降低
到 1.73,同样表现出显著的抑制效应;并且乙醚浸
提液各浓度处理的简化活力指数均显著低于对照,
明显低于水浸提液和其他有机溶剂浸提液同浓度
处理的简化活力指数。 综合以上分析结果,说明擎
天树种子中存在着抑制白菜种子萌发的物质,但在
不同溶剂处理中,这些物质对白菜种子萌发产生的
抑制作用强弱程度存在差异,这可能是由于不同种
类的抑制物质分别溶于不同的有机溶剂中、或者是
由于各溶剂中所具有的抑制物含量不同所导致的。
2.2 擎天树种子不同溶剂浸提液处理对白菜幼苗
生长的影响
2.2.1 擎天树种子不同溶剂浸提液对白菜幼苗苗
高生长的影响 擎天树种子不同溶剂浸提液对白
菜幼苗苗高生长的影响结果见图 1。从图 1 可知,经
过不同溶剂浸提液处理的白菜幼苗苗高均显著地
低于对照的苗高(P<0.05),而且各浸提液浓度间也
存在一定的差异。 其中对照的苗高生长最好,幼苗
高度为 2.26 cm。 而浓度为 0.100 g / mL 的各浸提液
处理对白菜幼苗苗高的抑制作用均表现出最强的
抑制效应,并且随着浓度的降低,抑制作用也随之
减弱,如低浓度(0.025 g / mL)的各浸提液处理对白
菜幼苗高度生长的抑制作用最弱。 试验中还观察
到,在 5 种溶剂浸提液的处理中,乙醚浸提液处理
对白菜幼苗高度的抑制作用最显著,其平均苗高比
对照降低了 0.89 cm,仅为对照苗高的 60.6%,且幼
苗子叶大部分发黄,幼苗发育几乎为畸形,并在后
期幼苗腐烂严重。
2.2.2 擎天树种子不同溶剂浸提液对白菜幼苗主
根长度生长的影响 擎天树种子不同溶剂浸提液
对白菜幼苗主根长度生长的影响结果见图 2。 由图
2 可以看出, 各溶剂浸提液不同浓度处理对白菜幼
苗主根长度的影响产生不同的效应,除乙醚浸提液
处理外,其余处理对白菜主根长度指标表现出微弱
的“低促高抑”浓度效应,与对照相比,白菜幼苗主
根长度在水、乙醇、甲醇和丙酮浸提液的 0.025 g / mL
浓度处理下均有不同程度地增大,主根长度分别比
表 1 擎天树种子不同溶剂浸提液各浓度处理
对白菜种子萌发的影响
指标
发芽率//%
简化活力
指数
浓度
g/mL
0.100
0.075
0.050
0.025
0.000(CK)
0.100
0.075
0.050
0.025
0.000(CK)
处理
去离子水
49.7 a
75.0 b
85.7 c
94.0 d
97.3 e
1.17 a
2.01 b
2.37 c
2.71 d
3.17 e
乙醇
54.7 a
71.3 b
94.0 c
95.7 cd
97.3 d
1.25 a
1.76 b
2.45 c
2.72 d
3.17 e
甲醇
79.0 a
89.0 b
91.7 bc
94.0 c
97.3 d
1.52 a
2.19 b
2.61 c
2.74 c
3.17 d
乙醚
28.0 a
45.0 b
79.0 c
82.0 c
97.3 d
0.34 a
0.75 b
1.51 c
1.73 d
3.17 e
丙酮
83.5 a
84.0 a
91.6 b
94.0 b
97.3 c
1.64 a
1.80 a
2.46 b
2.67 c
3.17 d
注:表中同列数据后的英文小写字母表示在 P<0.05 水平上的差
异显著性。
图 1 擎天树种子不同溶剂浸提液处理对白菜幼苗苗高的
影响
2.5
2.0
1.5
1.0
0.5
0.0


//c
m
水 乙醇 甲醇 乙醚 丙酮
溶剂浸提液
0.100 g/mL 0.075 g/mL
0.050 g/mL 0.025 g/mL
CK
aab
abc
bc c
abc
bc
bc
d
a aab
b
c
aab
bc c
d
a b
bcc
d
图 2 擎天树种子不同溶剂浸提液处理对白菜幼苗主根
长度的影响
4.0
3.5
3.0
2.5
2.0
1.5
1.0
0.5
0.0




//c
m
水 乙醇 甲醇 乙醚 丙酮
溶剂浸提液
0.100 g/mL 0.075 g/mL
0.050 g/mL 0.025 g/mL
CK
a
bb
c b
a b
b
d c
a
b
c
d c
a
b c
d
e
a b
c
d c
注: 柱形图上英文小写字母表示在 P<0.05 水平上的差异显著
性,图 2 同。
梁 机等:擎天树种子不同溶剂浸提液对白菜种子萌发及幼苗生长的影响 4033
湖 北 农 业 科 学 2012 年
对照增加 0.18、0.18、0.25、0.18 cm。 但浸提液浓度达
到 0.050、0.075、0.100 g / mL 时, 则主根长度的生长
表现为降低,且浸提液浓度在 0.100 g / mL 时根长都
显著低于对照(P<0.05)。 说明低浓度的水、乙醇、甲
醇和丙酮浸提液对白菜幼苗根系具促进作用,而高
浓度的浸提液阻碍了幼苗根系生长, 这与田旭平
等 [19]报道的圆柏[Sabina chinensis(L.)Ant.]果实水
浸提液对植物种子萌发和幼苗生长影响的研究结
果相类似。 但在乙醚浸提液处理下的白菜幼苗主根
长度并没有出现“低促高抑”的浓度效应,而是随着
浓度的降低,抑制作用也随之减弱。 在 5 种溶剂浸
提液的处理中,乙醚浸提液的处理对白菜幼苗的主
根长度抑制作用最强,其平均主根长度比对照降低
了 0.94 cm。
3 小结与讨论
擎天树种子不同溶剂浸提液处理对白菜种子
的发芽和幼苗高度生长均表现为抑制作用,抑制效
应随着浸提液浓度的升高而逐渐增强,说明擎天树
种子中存在着活性较强的内源抑制物质。 采用不同
溶剂对擎天树种子进行提取,生物测定结果显示其
抑制活性不同, 其中以乙醚浸提液的抑制活性最
强,其他溶剂的浸提液对白菜种子萌发和幼苗生长
也表现出不同程度地抑制作用,抑制强弱依次为乙
醚、水、乙醇、甲醇、丙酮,表明擎天树种子内存在的
抑制物质很可能非单一物质,而是由极性不同的物
质所组成的,说明擎天树种子中的抑制物质成分是
复杂多样的。
目前,从种子不同部位分离出的与萌发和生长
有关的抑制物质有脱落酸、醛类、酚类、有机酸、亚
胺、生物碱、香豆素等 [20],至于擎天树种子中存在哪
些种类的抑制物质未见有研究报道。 有学者研究了
桃叶卫矛 (Euonymus bungeanus Maxim.)[12]、 栝楼
(Trichosanthes kirilowii Maxim.) [13]、 南方红豆杉
(Taxus chinensis var. mairei Cheng et L.K Fu)[14]、辽
东桤木 (Alnus sibirica Fisch. ex Turcz.)[15]、 返魂草
(Aster tataricus L. f)[16]等植物种子不同溶剂的浸提
液对不同作物种子萌发和幼苗生长的影响,认为引
起植物种子休眠的主要原因之一是植物种子中含
有多种类型的抑制物质造成的。 笔者以极易发芽、
没有休眠期、且具胎萌现象的擎天树种子浸提液进
行试验的研究结果表明,擎天树种子不同溶剂的浸
提液对受试白菜种子的萌发及幼苗生长均可产生
抑制影响,可以推断擎天树种子浸提液中含有的某
些化学成分能够抑制其他植物(作物)种子发芽。 在
对龙眼和荔枝 [11]、夏栎(Quercus robur L.)[21]等顽拗
性种子植物在幼年发育过程中 ABA 含量及敏感性
变化的研究中发现,种子在发育过程中 ABA含量先
上升,达到高峰后迅速下降,种子生理成熟特别是
果实采收时则可降低到最低水平;同时,随着种子
的发育成熟, 种子及其胚轴对外源 ABA 的敏感性
也在不断下降。 王洁等[10]比较了红树植物木榄的不
同繁殖器官如花蕾、种子、幼胚轴、成熟胚轴中 ABA
和 GA3 含量的变化, 发现成熟种子和幼胚轴中的
ABA 含量较低,而 GA3 含量较高,推测这可能是影
响红树植物胎生现象普遍发生的重要原因之一。 本
试验中擎天树种子虽有胎萌现象,但从其提取液进
行的生物测定结果看,并不表现出有利于促进白菜
种子萌发与生长的现象,反而显示其种子内有对受
试种子的萌发及幼苗生长产生抑制影响的物质存
在。 种子胎萌是一个比较复杂的过程,它不仅与种
子的遗传特性和休眠程度有关,而且还受外界环境
条件影响 [22]。 有研究发现,种子休眠与种子中缺乏
ABA、 或者是虽然 ABA 含量正常但种胚对 ABA 不
敏感、敏感性降低有关[11,23],本试验的结果说明了擎
天树种子可能并不缺乏抑制种子发芽的内源物质
成分, 这些成分也许在擎天树种子内含量正常,但
由于其种胚对这些内源抑制成分不敏感、或者是敏
感性降低,从而造成擎天树种子出现胎萌现象。 本
研究只对擎天树种子的不同溶剂浸提液进行了生
物测定,初步探究了擎天树种子内抑制物质的基本
特性, 但要确定这些内源成分的组成及其含量,揭
示擎天树种子胎萌现象的实质,尚需对抑制物质做
进一步的提取与分离研究。
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(责任编辑 王 珞)
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(责任编辑 王 珞)
关系,这与前人的研究结果是一致的[7,8]。
5)银盐是一种应用广泛的杀菌剂 [9];而且硫代
硫酸银在植物体内有着较好的移动性,很容易从花
枝移至花冠,是目前广泛使用的乙烯抑制剂 [10]。 用
其处理切花可明显抑制切花的衰老。 但浓度过高或
处理时间过长会对花瓣或叶片造成伤害,如花瓣萎
蔫、花枝黄化、白色花瓣变黄等 [11,12],这些现象在本
试验中也得到了印证。
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