全 文 ：中国农学通报 第 ! 卷 第 # 期 !$$# 年 # 月
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兰州百合是一种具有悠久历史的优良品种! 含有
丰富的糖淀粉和蛋白质!个大色白!鳞片包含紧密!肉
质肥厚!纤维少!味甜美!以名菜良药甲天下!有很高的
食用药用观赏价值#同其它百合一样!其繁殖方法通
常采用分球鳞片扦插等!繁殖速度有限$近年来!关于
百合的组织培养的研究已有不少报道[1,2]!但有关兰州
百合组织培养方面的研究报道甚少且不全面[3]$ 试验
以兰州百合鳞茎为外植体!系统地进行了鳞芽诱导%增
殖和生根移栽研究! 为兰州百合无性快速繁殖和种球
规模化生产提供依据$
! 材料和方法
- 材料 兰州百合由甘肃农业职业技术学院庞勇
老师提供$
-! 方法 试验于 2003&2004年在西北农林科技大
学园艺学院组织培养实验室进行$
-!- 芽苗诱导 将兰州百合鳞茎分成鳞片! 用自来
水冲洗干净! 在超净工作台上用 0.1%HgCl2消毒 5
min!然后用无菌水冲洗 5次!放在灭菌滤纸上吸干
水分! 然后将鳞片切成 1.5cm左右的方块! 接种于
1/2MS+BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L+GA31.0mg/L+PVP
500mg/L芽诱导培养基上$ 培养基附加蔗糖 30g/L!
琼脂6g/L!pH5.8(下同)$
-!-! 鳞茎增殖 以培育 30d的兰州百合试管苗鳞茎
(叶长约4cm)为材料进行增殖筛选试验$
(1)BA和NAA对鳞茎增殖的影响$ 以 MS为基
本培养基!进行不同浓度 BA和 IBA的组合试验!每
处理10瓶!每瓶4个鳞茎$
(2)基本培养基类型对鳞茎增殖的影响$ 以 MS%
1/2MS和 N6为基本培养基 ! 均附加 BA0.6mg/L
+NAA0.1mg/L!每处理10瓶!每瓶4个鳞茎$
兰州百合微繁的研究
徐凌飞 !庞 勇 !!周连霞 !王贵章 !王 婧 !叶红霞
(1西北农林科技大学园艺学院!陕西杨凌 712100’2甘肃农业职业技术学院!甘肃兰州 730020)
摘 要(以兰州百合的鳞茎增殖为基础!进行了离体微繁研究# 鳞茎增殖的适宜激素组合为 $-7 89):
;< =$->$-!89):?<<# 培养基中总离子浓度和氮浓度过高或过低都会影响兰州百合增殖!@ 种基本
培养基 ?A%BC%和 )!BC 以 ?A增殖效果最好# 适当提高糖浓度对鳞茎增殖有促进作用!在各处理中
以蔗糖浓度为 D$9): 增殖倍数高# 兰州百合的适宜生根培养基为 )!BC=E;<$-89):! 生根率达
$$F!生根苗移栽成活率达 7$F#
关键词(兰州百合’鳞茎’离体繁殖
#$%&’%&’()(*#&+ &, !#$% &’(& -(%. $)*+#+,
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第一作者简介(徐凌飞 !男 !1969年出生 !教授 !在读博士研究生!主要从事园艺植物生物技术科研和教学工作# E-mail(ingfxu@tom.com# 收稿日期 (
2004-11-23!修回日期(2004-12-02#
农业生物技术科学 !!) )
ChineseAgriculturalScienceBuletinVol.21No.52005May
!#$%%&’()*+,’-./01’-2)34)*3
表 ! 不同质量浓度的 #$ 对生根的影响
15d 30d IBA(mg/L)
(%) (%)
0 85 1.7 95 4.55
0.1 94.8 2.3 100 8.6
0.3 60 1.25 100 9.25
0.5 40 0.75 100 10.95
(3)糖种类对鳞茎增殖的影响! 采用 N6培养基
植物激素组合及浓度相同 为 BA0.6mg/L+NAA0.1
mg/L糖为蔗糖和葡萄糖浓度均为 20g/L#30g/L#
40g/L总共 6个处理每个处理 9瓶每瓶接种 4个
鳞茎!
5)6)7 生根和移栽 以兰州百合 4cm长芽苗为外植
体生根培养基选用 1/2MS附加不同浓度的 IBA每
处理 20个鳞茎 分别于 15d和 30d统计其生根情
况! 30d后将生根苗先闭口炼苗 3d再开口炼苗 1d
再将其移栽至以珍珠岩为基质的营养钵中30d后调
查其移栽成活率 移入以田园土为基质的营养钵中
培养调查其移栽成活率!
5)6)8 培养条件 培养室温度 (25!2) 光周期 13
h/d光照强度2000Lx日光灯光源!
% 结果和分析
6)5 芽诱导 在芽诱导培养基上 小鳞芽形成很快
接种10d后发现有个别鳞片切块上有小鳞芽形成!
30d后接种的鳞片中24个鳞片切块上有小鳞芽形
成(接种32块污染3块)! 切块一般都先从鳞片切块
基部伤口处形成绿色小点直接发育成小鳞芽小鳞
芽在诱导培养基上伸长生长发育为芽苗! 将诱导出
的鳞芽转接在 MS+BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L上进
行继代培养!
6)6 鳞茎增殖
6)6)5 不同浓度 9: 和 ;:: 对鳞茎增殖的影响 由
表 1可以看出不同质量浓度 BA和 NAA的组合对
兰州百合鳞茎增殖有不同的影响! 增殖倍数最高的
为 2.60最低的为 1.39! 没有附加 BA和 NAA的组
合增殖倍数最低! 在NAA浓度不变条件下不同浓
度的 BA对鳞茎增殖影响很大 ! 当 BA浓度为
0.3-0.9mg/L时 增殖倍数随着浓度的升高而增大
当 6-BA浓度为 1.2-1.5mg/L时 随着浓度的升高
增殖倍数降低!说明高浓度的BA对兰州百合鳞茎增
殖有抑制作用这与BA对其它百合鳞茎增殖的影响
报道一致[4]! 而NAA为0.1mg/L和0.2mg/L时对鳞
茎增殖影响不大! 适宜的鳞茎增殖组合为 BA0.9
mg/L#NAA0.1-0.2mg/L!
6)6)6 基本培养基种类对鳞茎增殖的影响 基本培养
基种类对鳞茎增殖有不同的影响! 由表2可以看出
3种培养基以 N6的增殖倍数最高 为 2.53 其次是
1/2MS为2.20而MS的增殖倍数最低! 在兰州百合
和其它百合的离体培养中 人们普遍采用 MS培养
基[3-5]认为MS适宜百合的增殖!试验表明MS并不
是兰州百合的适宜增殖培养基N6比较适宜兰州百
合的鳞茎增殖!
6)6)7 糖对鳞茎增殖的影响 由表3可以看出 培养
基中附加的糖的种类和浓度不同对兰州百合鳞茎增
殖影响不同! 无论蔗糖还是葡萄糖随着浓度的升高
(20-40g/L)增殖倍数增加其中以蔗糖 40g/L的增
殖倍数最高为3.03!
6)7 生根和移栽 表 4为继代苗芽苗接种 15d和 30d
的生根情况! 接种15d时以IBA0.1mg/L处理生根
效果最好平均生根数最多生根率最高而且苗势
B A (m g /L ) N A A (m g / L )
1 0 0 1 . 3 9
2 0 .3 0 .1 1 . 8 8
3 0 .6 0 .1 2 . 2 0
4 0 .9 0 .1 2 . 5 6
5 1 .2 0 .1 2 . 1 5
6 1 .5 0 .1 2 . 1 0
7 0 .3 0 .2 2 . 1 7
8 0 .6 0 .2 2 . 4 5
9 0 .9 0 .2 2 . 6 0
1 0 1 .2 0 .2 2 . 3 5
1 1 1 .5 0 .2 2 . 0 0
表 & 不同质量浓度 ’$ 和 ($$ 对鳞茎增殖的影响
M S 40 2 .1 8
1 /2M S 40 2 .2 0
N 40 2 .5 3
表 % 基本培养基种类对鳞茎增殖的影响
20 g/L 36 1.94
30 g/L 36 2.53
40 g/L 36 3.03
20 g/L 36 1.97
30 g/L 36 2.44
40 g/L 36 2.67
!表 ) 糖对鳞茎增殖的影响
*下转第 &+% 页$
强壮其次是不附加 IBA的处理而以 IBA0.5mg/L
处理的生根效果最差 根少而且细弱! 当接种 30d
时可看出兰州百合芽苗极易生根各处理的生根率
均高达 95%以上! 未附加 IBA的处理虽然生根数量
较少但根势强壮%附加 IBA的处理虽然发根数较多
但较细弱并且随 IBA浓度升高平均生根数也随之
增加苗势却随之减弱! 综合生根数量及苗势强弱两
农业生物技术科学!!& &
ChineseAgriculturalScienceBuletinVol.21No.52005May
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方面因素! 选用 1/2MS+IBA0.1mg/L为兰州百合的
生根培养基
将经过炼苗的生根试管苗移至灭过菌的珍珠岩基
质中!进行覆盖保湿!每过 5d浇 1次水!30d调查移
栽成活率!成活率达 96% 30d后再将在珍珠岩基质
中生长的芽苗! 移入以田园土为基质的营养钵中!
15d后成活率仍高达 95% 因此可知!兰州百合经两
次移栽后成活率达 90%以上! 移栽成活率高且移栽
后生长状况良好
! 讨论
应用植物离体培养技术可以对兰州百合进行快速
微繁!实现种球规模化周年生产茎芽增殖是微繁的关
键时期!微繁的失败多数都是在这个时期发生的[6] 影
响兰州百合增殖主要因子有 BA浓度和基本培养基
等 其它植物增殖研究也有同样的结论! 如 Grigori-
adou等研究也认为影响# 威廉姆斯$ 和# 高地$ 梨品
种茎增殖速度和质量依赖于品种基因型% 基本培养基
和BA浓度 [7] 因而筛选适宜的基本培养基和合适的
BA浓度是增殖培养的关键 有关 BA对百合增殖的
影响报道较多!而基本培养基的影响报道很少研究表
明! 在百合组织培养中普遍采用的基本培养基MS并
不是兰州百合增殖的适宜培养基!N6比较适宜兰州百
合的增殖在离体培养条件下!不同种植物的组织对营
养有不同的要求!甚至同一种植物不同部分的组织对
营养的要求也不相同 基本培养基对外植体增殖的
影响在于其组成成分和浓度是否满足外植体对营养
的要求!是否适宜于外植体增殖和生长 Mekers[8]认
为凤梨试管苗茎的增殖能力随 MS培养基浓度的降
低而增加 王乔春[9]报道说高离子浓度或高氮浓度的
培养基有利于梨外植体已分化茎的生长!反之!则有
利于茎的分化 分析MS%1/2MS和N6这3种培养基
的各种离子浓度! 其主要差异是 MS的总离子浓度
(94.06mM)和总氮浓度(60.03mM)最高&N6次之 !分
别为 77.4mM和 35.00mM&1/2MS最低 (48.16mM)
和(30.01mM)’由于不同植物外植体茎的分化要求不
同的培养基离子浓度! 因此不同植物在同一培养基
上茎增殖分化的数量不同 由试验结果来看!总离子
浓度和氮浓度过高或过低都会影响兰州百合增殖!
N6培养基比较适合兰州百合鳞茎增殖
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