全 文 :基金项目:盐城市医学科技发展计划资助项目(YK2014051);江苏高校优势学科建设工程资助项目(YSXK-2014) ;江苏高校品牌专业建设工程
资助项目(PPZY2015A070)
作者简介:刘娟秀,女,硕士研究生 研究方向:中药品质评价 * 通讯作者:刘训红,男,教授,博士生导师 研究方向:中药鉴定与品质
评价 Tel:(025)85811511 E-mail:liuxunh1959@ sohu. com
苍耳草中多元活性成分动态积累的分析与评价
刘娟秀1,罗益远1,刘训红1* ,宋建平2,华愉教1,王胜男1(1. 南京中医药大学,南京 210023;2. 盐城卫生职业技术学院,江苏
盐城 224006)
摘要:目的 建立超高效液相色谱-三重四级杆 /线性离子阱质谱(UPLC-QTRAP-MS /MS)同时测定苍耳草中酚酸、蒽醌及黄酮
类 18 种活性成分的方法,并对其多元活性成分的动态积累进行分析与评价。方法 采用 Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4. 6
mm × 250 mm,5 μm),以甲醇-0. 2%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,负离子多反应监测(MRM)模式测定;用灰色关联度分析
对多元活性成分进行综合评价。结果 18 种活性成分的浓度与峰面积的线性关系良好(r > 0. 999 4);平均加样回收率为
96. 96% ~ 102. 55%,RSD值均小于 3%。苍耳草中各成分的积累动态不一,7 月中、下旬综合质量较好。结论 为揭示苍耳草
中多元活性成分的动态积累规律及确定其药材的适宜采收期提供基础资料,同时为苍耳草药材内在质量的综合评价提供新
的方法参考。
关键词:苍耳草;超高效液相色谱-三重四级杆 /线性离子阱质谱;酚酸;蒽醌;黄酮;动态积累;综合评价
doi:10. 11669 /cpj. 2016. 17. 014 中图分类号:R284 文献标志码:A 文章编号:1001 - 2494(2016)17 - 1498 - 10
Analysis and Evaluation of Dynamic Accumulation of Multiple Active Components in Xanthii Herba
LIU Juan-xiu1,LUO Yi-yuan1,LIU Xun-hong1* ,SONG Jian-ping2,HUA Yu-jiao1,WANG Sheng-nan1(1. Nanjing U-
niversity of Chinese Medicine,Nangjing 210023,China;2. Yancheng Health Vocational & Technical College,Yancheng 224006,China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To develop a method for the determination of phenolic acids,anthraquinones,and flavonoids in Xanthii
Herba at different harvest time by UPLC-QTRAP-MS /MS and analyze the dynamic accumulation of multiple active components in Xan-
thii Herba. METHODS Chromatographic separation was conducted on an Agilent ZORBAX SB-C18(4. 6 mm × 250 mm,5 μm)col-
umn with gradient elution using methanol and 0. 2% formic acid as mobile phases. MS analysis was carried out using electrospray ioni-
zation in negative MRM mode. Grey related degree was used for the comprehensive evaluation. RESULTS The calibration curves for
the 18 components showed good linearity (r > 0. 999 4)in the range of the tested concentrations. The average recoveries of the 18 com-
ponents were from 96. 96% to 102. 55% with relative standard deviations (RSDs)less than 3% . There were differences in the con-
tents of 18 components in Xanthii Herba at different harvest periods. Xanthii Herba had high quality in late July and mid-July. CON-
CLUSION This study reveals the rule of the dynamic accumulation of 18 components in Xanthii Herba and provides information for
the suitable harvest time.
KEY WORDS:Xanthii Herba;UPLC-QTRAP-MS /MS;phenolic acid;anthraquinones;flavonoid;dynamic accumulation;compre-
hensive evaluation
苍耳草系菊科植物苍耳(Xanthium sibiricum
Patr. )的地上部分,收载于 1989 年版《江苏省中药
材标准》[1],具清风热、解毒之功效,主治鼻渊、风寒
头痛、风湿痹痛、风疹、湿疹、疥癣等病症,民间用药
历史悠久[2]。现代研究表明,苍耳草药材含多种酚
酸类、蒽醌和黄酮类成分[3-5]。酚酸类成分具有抗
炎、抗菌、抗血栓等作用[6-7];蒽醌类成分具有抗菌消
炎、抗病毒、降血脂、增加免疫等作用[8];黄酮类成
分具有抗炎作用、抗氧化、抗肿瘤等作用[9-10]。这 3
类成分为苍耳草药材中的重要活性成分,以其作为
综合考察指标,探讨药材的适宜采收期,更具有效性
和实用性。
目前,关于苍耳草药材的品质评价及采收期研
究,主要集中于酚酸、蒽醌及黄酮类成分的分析,多
以单一或单类成分的含量或动态变化为考察指标,
尚未见上述多元活性成分同时测定的研究报道;其
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分析方法有高效液相色谱法(HPLC)[11-13]、高效毛
细管电泳法(HPCE)[14]等。LC-MS 技术具有灵敏
度高、选择性强、定量准确、分析速度快等优
点[15-17]。与 HPLC相比,UPLC 具有分离效率好、峰
容量大及灵敏度高等优势,更适合于中药复杂体系
的分离和分析;UPLC-MS /MS 多采用多重反应监测
(MRM)进行定量分析,对目标物质作中性碎片扫
描,可解决 UPLC难以分离复杂体系的问题。其中,
四级杆-线性离子阱(QTRAP)系统除保留了标准三
重四级杆的所有传统功能,另外在线性离子阱
(LIT)模式下,还能提高全扫描方式的灵敏度及增
强型子离子扫描(EPI),并提供多级子离子扫描
(MS3)等功能[18]。
本实验首次采用超高效液相色谱-串联四级杆 /
线性离子阱质谱(UPLC-QTRAP-MS /MS)同时测定
不同采收期苍耳草中酚酸(绿原酸、新绿原酸、原儿
茶醛、原儿茶酸、隐绿原酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎
宁酸、阿魏酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰
奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸)、蒽醌(芦荟大黄素、
大黄素、大黄酚)、黄酮(芦丁、槲皮素、紫云英苷、金
丝桃苷)等 18 种活性成分的含量,综合考察其动态
积累变化,并用灰色关联度分析[19-20]对多元活性成
分进行综合评价,为揭示苍耳草中多元活性成分的
动态积累规律及确定其药材的适宜采收期提供基础
资料,同时为苍耳草药材内在质量的综合评价和全
面控制提供新的方法参考。
1 仪器与试药
1. 1 仪器
SHIMADZU SIL - 20A XR 超快速液相色谱
仪(日本岛津公司);API 5500 四极杆-线性离子
阱质谱仪(美国 AB SCIEX 公司),Analyst Soft-
ware1. 5. 2 数据采集处理工作站;ME36S 型电子
分析天平(德国赛多利斯公司);KQ - 500E 型超
声波清洗器(功率 500 W,频率 40 kHz,昆山市超
声仪器有限公司);DHG - 9140A 型电热恒温鼓
风干燥箱(上海沪粤明科学仪器有限公司);湘仪
H1650 - W 高速离心机(湖南湘仪实验室仪器开
发有限公司)。
1. 2 试剂
对照品:绿原酸(chlorogenic acid,批号:110753-
200413)、阿 魏 酸 (ferulic acid,批 号:110773-
201012)、咖 啡 酸 (caffeic acid,批 号: 110885-
200102)、芦荟大黄素(aloeemodin,批号:110756-
201007)、大黄素(emodin,批号:110756-200110)、大
黄酚(chrysophanol,批号:110796-201017)、槲皮素
(quercetin,批号:100081-200907)、芦丁(rutin,批
号:0080-9705)、金丝桃苷(hyperoside,批号:111521-
200303)、紫云英苷(astragalin,批号:11092001)购于
中国食品药品检定研究院,纯度均 > 98%;新绿原酸
(neochlorogenic acid,批号:12112712)、隐绿原酸
(4-dicaffeoylquinic acid,批号:12112605)、1,3-二咖
啡酰 奎 宁 酸 (1,3-dicaffeoylquinic acid,批 号:
12061112)、3,5-二 咖 啡 酰 奎 宁 酸 (3,5-dicaf-
feoylquinic acid,批号:12022803)、4,5-二咖啡酰奎
宁酸(4,5-dicaffeoylquinic acid,批号:12022804)购
于成都普瑞法科技开发有限公司,纯度均 > 98%;原
儿 茶 醛 (protocatechuic aldehyde, 批 号:
YECQ20140819)、原儿茶酸(protocatechuic acid,批
号:YECS20140411)、3,4-二咖啡酰奎宁酸(3,4-di-
caffeoylquinic acid,批号:YLYB2014041901)购于南
京春秋生物工程有限公司,纯度均 > 98%。水为超
纯水,甲醇、甲酸为色谱纯,其余试剂为分析纯。
苍耳草样品实地采集于南京中医药大学药苑,
采集时间分别为 S1:2014 年 5 月 3 日,S2:2014 年 5
月 18 日,S3:2014 年 6 月 14 日,S4:2014 年 6 月 27
日,S5:2014 年 7 月 17 日,S6:2014 年 7 月 31 日,
S7:2014 年 8 月 15 日,S8:2014 年 8 月 31 日,S9:
2014 年 9 月 15 日,S10:2014 年 9 月 30 日,S11:
2014 年 10 月 15 日,均经南京中医药大学中药鉴定
教研室刘训红教授鉴定为菊科植物苍耳(Xanthium
sibiricum Patr. )的干燥地上部分,留样凭证存放于南
京中医药大学中药鉴定实验室。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件
采用 Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4. 6 mm ×
250 mm,5 μm),流动相为甲醇(A)-0. 2%甲酸水溶
液(B),梯度洗脱(0 ~ 10 min,A:20% ~ 30%;10 ~
20 min,A:30% ~35%;20 ~ 30 min,A:35% ~ 80%;
30 ~ 45 min,A:80% ~ 100%;45 ~ 48 min,A:
100% ~20%),流速 1. 0 mL·min -1,柱温 35 ℃,进
样量 5 μL。
2. 2 质谱条件
采用电喷雾离子源(ESI),多反应监测模式
(MRM)检测,检测离子为负离子,离子化温度
(TEM):550 ℃。喷雾电压:- 4 500 V;雾化气
(GS1):55 L·min -1;辅助气(GS2):55 L·min -1;
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气帘气(CUR):30 L·min -1,优化的质谱条件参数
见表 1。
2. 3 溶液制备
2. 3. 1 混合对照品溶液 精密称取绿原酸 1. 62
mg、新绿原酸 1. 46 mg、原儿茶醛 1. 91 mg、原儿茶
酸 0. 97 mg、隐绿原酸 1. 09 mg、咖啡酸 1. 20 mg、
1,3-二咖啡酰奎宁酸 1. 18 mg、阿魏酸 1. 00 mg、3,
4-二咖啡酰奎宁酸 1. 43 mg、3,5-二咖啡酰奎宁酸
1. 08 mg、4,5-二咖啡酰奎宁酸 1. 12 mg、芦荟大黄
素 2. 70 mg、大黄素 2. 97 mg、大黄酚 2. 07 mg、芦
丁 2. 11 mg、槲皮素 1. 55 mg、紫云英苷 1. 78 mg、
金丝桃苷 1. 50 mg 对照品,分别置于 10 mL 量瓶
中,加甲醇溶液溶解定容,得对照品储备液。取各
对照品母液适量,加甲醇配制成含上述对照品的
混合储备液供分析用。
2. 3. 2 供试品溶液 精密称取样品粉末(过 3 号
筛)1. 0 g,置于 100 mL 具塞锥形瓶中,加入 40 mL
体积分数 70%甲醇,称重,室温下超声(500 W,40
kHz)提取 30 min 后取出,放冷以体积分数 70%甲
醇补足失重,摇匀,提取液 12 000 r·min -1离心 10
min,取出上清液经 0. 22 μm 的微孔滤膜滤过,即得
供试品溶液。
2. 4 标准曲线、检测限与定量限
精密吸取“2. 3. 1”项下混合对照品标溶液,置
于 10 mL量瓶中,依次逐级稀释制成一系列浓度的
混合对照品溶液,以对照品的峰面积(Y)对相应
的质量浓度(ρ)进行线性回归,得回归方程、相关系
数和线性范围;以各化合的信噪比(S /N)等于 3 时
相对应的浓度确定为最低检测限(LOQ),以各化合
的信噪比(S /N)等于 10 时相对应的浓度确定为最
低定量限(LOQ)。结果见表 2、图 1。
2. 5 方法学考察
2. 5. 1 精密度试验 取一定浓度的混合对照品溶
液,在 1 d内,重复进样 6 次,考察日内精密度,测得
绿原酸、新绿原酸、原儿茶醛、原儿茶酸、隐绿原酸、
表 1 苍耳草中 18 种成分的部分质谱分析参数
Tab. 1 MS/MS Parameters of eighteen components
Components
Retention
time /min
Precursorion
(m/z)
Production
(m/z)
DP
/V
CE
/V
Chlorogenic acid 4. 38 353. 135 190. 90 -35 -20
Neochlorogenic acid 5. 66 352. 994 191. 00 -80 -26
Protocatechuic aldehyde 6. 27 136. 888 118. 90 -100 -8
Protocatechuic acid 8. 36 152. 936 109. 00 -35 -18
4-Dicaffeoylquinic acid 9. 79 352. 989 173. 00 -75 -22
Caffeic acid 10. 24 178. 613 134. 61 -65 -24
1,3-Dicaffeoylquinic acid 11. 75 514. 989 353. 00 -95 -24
Ferulic acid 19. 96 193. 017 134. 00 -45 -18
3,4-Dicaffeoylquinic acid 23. 99 514. 994 353. 00 -80 -26
3,5-Dicaffeoylquinic acid 24. 46 515. 061 352. 90 -85 -22
Hyperoside 25. 22 462. 936 300. 00 -155 -36
Rutin 25. 51 608. 945 299. 90 -170 -48
4,5-Dicaffeoylquinic acid 26. 26 514. 972 353. 00 -75 -24
Astragalin 27. 20 446. 995 283. 90 -50 -36
Aloeemodin 32. 90 268. 708 240. 00 -200 -28
Emodin 36. 85 268. 900 225. 00 -260 -34
Chrysophanol 38. 68 252. 940 225. 00 -185 -36
Quercetin 45. 22 301. 098 255. 10 -130 -10
表 2 苍耳草药材中 18 种对照品标准曲线、检测限与定量限
Tab. 2 Calibration cures,LODs,and LOQs of eighteen reference substances in Xanthii Herba
Components Regression equation r Linear rang /μg·mL -1 LOD /ng·mL -1 LOQ / ng·mL -1
Chlorogenic acid Y =6. 03 × 107ρ -236 948 0. 999 5 0. 102 5 - 12. 96 2. 15 6. 09
Neochlorogenic acid Y =2. 94 × 106ρ +37 500 0. 999 7 0. 091 3 - 11. 68 2. 23 7. 07
Protocatechuic aldehyde Y =23 781ρ +3. 39 × 10 - 11 0. 999 9 0. 119 4 - 15. 28 9. 83 14. 41
Protocatechuic acid Y =42 028ρ +2. 29 × 10 - 11 0. 999 8 0. 060 6 - 7. 76 5. 02 10. 84
4-Dicaffeoylquinic acid Y =4. 31 × 106ρ -9. 38 × 10 - 9 0. 999 4 0. 272 5 - 17. 44 2. 88 4. 37
Caffeic acid Y =1. 95 × 106ρ +1. 93 × 10 - 9 0. 999 9 0. 150 0 - 9. 60 4. 62 10. 65
1,3-Dicaffeoylquinic acid Y =5. 45 × 106ρ -3. 16 × 10 - 9 0. 999 7 0. 073 8 - 9. 44 4. 22 11. 03
Ferulic acid Y =1. 17 × 106ρ +49 884 0. 999 6 0. 125 0 - 16. 00 2. 13 9. 96
3,4-Dicaffeoylquinic acid Y =2. 20 × 106ρ -1. 64 × 10 - 9 0. 999 9 0. 089 4 - 11. 44 3. 11 8. 42
3,5-Dicaffeoylquinic acid Y =6. 86 × 106ρ -4. 31 × 10 - 9 0. 999 8 0. 067 5 - 8. 64 5. 89 12. 55
Hyperoside Y =7. 76 × 106ρ -374 129 0. 999 9 0. 093 8 - 12. 00 3. 24 8. 20
Rutin Y =5. 88 × 106ρ -4. 78 × 10 - 9 0. 999 7 0. 131 9 - 16. 88 2. 94 7. 18
4,5-Dicaffeoylquinic acid Y =4. 06 × 106ρ -6. 51 × 10 - 9 0. 999 5 0. 070 0 - 8. 96 1. 37 5. 57
Astragalin Y =8. 04 × 106ρ -249 419 0. 999 7 0. 111 3 - 14. 24 3. 06 6. 39
Aloeemodin Y =3. 99 × 107ρ -2. 65 × 106 0. 999 7 0. 168 8 - 21. 60 3. 15 6. 82
Emodin Y =7. 13 × 106ρ -8. 05 × 10 - 9 0. 999 5 0. 185 6 - 23. 76 4. 33 7. 10
Chrysophanol Y =459 415ρ -5. 55 × 10 - 10 0. 999 9 0. 129 4 - 16. 56 4. 56 8. 48
Quercetin Y =3. 40 × 106ρ -161 890 0. 999 8 0. 193 8 - 24. 80 1. 18 3. 29
·0051· Chin Pharm J,2016 September,Vol. 51 No. 17 中国药学杂志 2016 年 9 月第 51 卷第 17 期
咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、阿魏酸、3,4-二咖啡
酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁
酸、芦荟大黄素、大黄素、大黄酚、芦丁、槲皮素、紫云
英苷、金丝桃苷峰面积的 RSD 值;连续 3 d,每天连
续进样 2 次,进样分析考察日间精密度,测得 18 种
对照品峰面积 RSD 值。见表 3,结果表明仪器精密
度良好。
2. 5. 2 重复性试验 称取苍耳草(S3)样品 6 份,
每份 1. 0 g,精密称定,按“2. 3”项下方法制备,进样
测定。计算上述 18 种成分含量及其 RSD 值,考察
方法的重复性,见表 3。结果表明该方法的重复性
良好。
2. 5. 3 稳定性试验 取苍耳草(S3)样品供试液,
分别在 0、2、4、6、12、24 h 进样 6 次,记录峰面积,测
得上述 18 种成分峰面积的 RSD值。见表 3,结果表
明样品溶液中 18 种成分在 24 h内稳定。
2. 5. 4 加样回收率试验 取已知含量的苍耳草
(S3)样品 0. 5 g,精密称定,平行 6 次,分别精密加
入一定量的“2. 3. 1”项下对照品溶液,按“2. 3. 2”项
下方法制备供试溶液,进样测定并计算上述 18 种成
分的回收率。结果见表 4。
2. 5. 5 耐用性实验 通过对 3 种色谱柱(YMC-
Pack ODS-A C18、ACQUITY BEH C18、Agilent ZORB-
AX SB-C18)及流动相流速、柱温的少量改变以考察
方法的耐用性实验。结果表明,分离度和柱效无明
显的变化、且各变动因素之间供试品中被测成分含
量结果的 RSD均小于 2%,说明本法的耐用性良好。
图 1 对照品(A)、苍耳草样品(B)的提取离子流图及 18 种
成分的 MRM图(C)
1 -绿原酸;2 -新绿原酸;3 -原儿茶醛;4 -原儿茶酸;5 -隐绿原酸;6 -咖啡
酸;7 - 1,3-二咖啡酰奎宁酸;8 -阿魏酸;9 - 3,4-二咖啡酰奎宁酸;10 - 3,5-二
咖啡酰奎宁酸;11 -金丝桃苷;12 -芦丁;13 - 4,5-二咖啡酰奎宁酸;14 -紫云
英苷;15 -芦荟大黄素;16 -大黄素;17 -大黄酚;18 -槲皮素
Fig. 1 The EICs of mixed standards (A)and Xanthii Herba sam-
ple (B)and the MRM chromatogram of eighteen components (C)
1 - chlorogenic acid;2 - neochlorogenic acid;3 - protocatechuic aldehyde;4 -
protocatechuic acid;5 - 4-dicaffeoylquinic acid;6 - caffeic acid;7 - 1,3-dicaf-
feoylquinic acid;8 - ferulic acid;9 - 3,4-dicaffeoylquinic acid;10 - 3,5-dicaf-
feoylquinic acid;11 - hyperoside;12 - rutin;13 - 4,5-dicaffeoylquinic acid;
14 - astragalin;15 - aloeemodin;16 - emodin;17 - chrysophanol;18 - quercetin
表 3 苍耳草药材中 18 种成分精密度、重复性和稳定性试验结果
Tab. 3 Precision,repeatability,and stability of eighteen components in Xanthii Herba
Components
Precision RSD /%
Intra-day(n =6) Inter-day(n =3)
Repeatability
RSD /%
Stability
RSD /%
Chlorogenic acid 1. 30 2. 39 1. 88 1. 91
Neochlorogenic acid 0. 86 1. 18 0. 99 1. 04
Protocatechuic aldehyde 1. 32 1. 16 1. 40 1. 85
Protocatechuic acid 1. 51 1. 83 1. 42 2. 24
4-Dicaffeoylquinic acid 1. 87 2. 50 0. 46 1. 89
1,3-Dicaffeoylquinic acid 1. 37 1. 74 1. 08 2. 21
Ferulic acid 1. 54 2. 07 1. 50 0. 85
3,4-Dicaffeoylquinic acid 0. 67 1. 48 2. 29 1. 02
3,5-Dicaffeoylquinic acid 1. 01 1. 28 1. 70 2. 77
Hyperoside 1. 03 1. 10 0. 84 2. 74
Rutin 1. 94 2. 21 1. 53 1. 56
4,5-Dicaffeoylquinic acid 2. 28 2. 87 1. 01 1. 39
Astragalin 0. 93 2. 86 1. 16 2. 89
Caffeic acid 1. 42 1. 85 1. 04 0. 99
Aloeemodin 1. 09 1. 89 2. 02 0. 88
Emodin 2. 42 2. 69 0. 85 1. 41
Chrysophanol 1. 21 1. 59 1. 55 1. 15
Quercetin 1. 24 1. 32 2. 97 2. 12
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中国药学杂志 2016 年 9 月第 51 卷第 17 期 Chin Pharm J,2016 September,Vol. 51 No. 17
表 4 苍耳草药材中 18 种成分加样回收率试验结果
Tab. 4 Results of recovery test of eighteen components in Xanthii Herba
Components m(Background)/μg m(Added)/μg m(Found)/μg Recovery /% Average recovery /% RSD /%
Chlorogenic acid 452. 65 454. 74 912. 30 101. 08 101. 65 0. 73
450. 93 454. 74 911. 86 102. 22
455. 27 454. 74 912. 54 100. 44
444. 56 454. 74 899. 13 102. 25
451. 77 454. 74 911. 35 101. 73
452. 77 454. 74 915. 55 102. 21
Neochlorogenic acid 109. 85 107. 45 218. 70 99. 09 96. 96 1. 53
107. 45 107. 45 209. 89 95. 35
115. 02 107. 45 227. 85 98. 26
102. 24 107. 45 201. 49 97. 07
109. 49 107. 45 214. 98 96. 35
114. 92 107. 45 224. 85 95. 65
Protocatechuic aldehyde 24. 56 25. 16 49. 91 100. 80 98. 20 1. 60
26. 58 25. 16 52. 97 99. 25
29. 82 25. 16 58. 65 96. 65
28. 57 25. 16 56. 53 97. 90
25. 64 25. 16 50. 48 96. 88
26. 09 25. 16 51. 59 97. 70
Protocatechuic acid 211. 30 221. 30 433. 65 100. 48 101. 48 0. 68
217. 52 221. 30 435. 04 101. 87
218. 61 221. 30 437. 21 100. 92
218. 91 221. 30 437. 82 101. 86
218. 81 221. 30 437. 62 102. 34
219. 01 221. 30 438. 02 101. 39
4-Dicaffeoylquinic acid 95. 60 95. 56 192. 07 100. 96 100. 06 0. 70
96. 02 95. 56 192. 20 100. 16
95. 74 95. 56 192. 15 100. 69
96. 45 95. 56 192. 09 99. 17
96. 24 95. 56 192. 49 99. 99
96. 02 95. 56 192. 05 99. 40
1,3-Dicaffeoylquinic acid 109. 29 110. 93 220. 64 101. 27 100. 20 0. 57
111. 77 110. 93 234. 98 99. 58
117. 06 110. 93 234. 23 100. 09
118. 00 110. 93 236. 31 100. 25
116. 58 110. 93 233. 06 99. 91
117. 58 110. 93 235. 27 100. 09
Ferulic acid 256. 20 254. 49 512. 52 99. 96 100. 39 0. 94
256. 49 254. 49 512. 99 100. 79
256. 31 254. 49 512. 62 101. 59
250. 64 254. 49 501. 28 99. 60
250. 64 254. 49 501. 28 99. 21
256. 32 254. 49 512. 63 101. 18
3,4-Dicaffeoylquinic acid 393. 13 403. 13 797. 26 100. 25 101. 06 1. 31
390. 83 403. 13 781. 66 100. 45
400. 78 403. 13 821. 57 102. 61
389. 58 403. 13 799. 17 102. 66
406. 45 403. 13 812. 89 100. 94
397. 56 403. 13 795. 12 99. 42
3,5-Dicaffeoylquinic acid 7. 62 7. 64 15. 24 100. 13 100. 20 0. 98
8. 23 7. 64 16. 47 101. 23
7. 74 7. 64 15. 49 101. 31
7. 43 7. 64 14. 86 98. 67
7. 58 7. 64 15. 17 99. 74
·2051· Chin Pharm J,2016 September,Vol. 51 No. 17 中国药学杂志 2016 年 9 月第 51 卷第 17 期
续表 4(continued)
Components m(Background)/μg m(Added)/μg m(Found)/μg Recovery /% Average recovery /% RSD /%
8. 18 7. 64 16. 37 100. 12
Hyperoside 134. 69 133. 94 269. 39 100. 75 100. 63 1. 21
136. 78 133. 94 273. 56 101. 48
131. 74 133. 94 263. 49 98. 36
135. 27 133. 94 270. 54 101. 50
133. 58 133. 94 267. 15 100. 30
143. 49 133. 94 286. 98 101. 41
Rutin 1. 18 1. 21 2. 41 100. 86 100. 04 1. 32
1. 23 1. 21 2. 46 98. 40
1. 20 1. 21 2. 41 101. 03
1. 20 1. 21 2. 40 98. 29
1. 28 1. 21 2. 56 100. 98
1. 22 1. 21 2. 44 100. 70
4,5-Dicaffeoylquinic acid 40. 21 41. 92 82. 42 100. 69 99. 01 1. 66
39. 94 41. 92 77. 88 97. 43
39. 59 41. 92 79. 19 99. 09
40. 24 41. 92 80. 49 97. 58
39. 67 41. 92 78. 83 101. 27
40. 17 41. 92 80. 35 98. 03
Astragalin 11. 98 12. 10 24. 14 100. 47 99. 67 1. 94
12. 58 12. 10 25. 05 99. 20
13. 28 12. 10 26. 35 98. 49
12. 09 12. 10 24. 38 101. 65
11. 93 12. 10 23. 45 96. 65
13. 08 12. 10 26. 35 101. 53
Caffeic acid 11. 19 12. 11 23. 38 100. 57 100. 54 1. 73
10. 92 12. 11 21. 85 101. 87
10. 95 12. 11 21. 89 102. 82
11. 74 12. 11 23. 59 100. 85
10. 24 12. 11 20. 49 98. 09
10. 75 12. 11 21. 50 99. 08
Aloeemodin 1. 33 1. 33 2. 68 101. 51 102. 55 1. 21
1. 33 1. 33 2. 71 103. 76
1. 58 1. 33 2. 68 101. 51
1. 49 1. 33 3. 19 102. 54
1. 53 1. 33 3. 03 103. 35
1. 44 1. 33 3. 06 100. 66
Emodin 0. 45 0. 46 0. 92 101. 16 102. 14 0. 63
0. 40 0. 46 0. 81 102. 52
0. 41 0. 46 0. 82 102. 47
0. 40 0. 46 0. 80 101. 51
0. 42 0. 46 0. 85 102. 38
0. 36 0. 46 0. 73 102. 78
Chrysophanol 0. 30 0. 31 0. 61 100. 57 100. 15 1. 49
0. 31 0. 31 0. 62 100. 00
0. 31 0. 31 0. 62 101. 91
0. 33 0. 31 0. 65 101. 33
0. 31 0. 31 0. 62 99. 32
0. 30 0. 31 0. 62 97. 76
Quercetin 249. 62 251. 96 502. 99 100. 56 99. 53 0. 88
237. 83 251. 96 471. 05 98. 07
230. 79 251. 96 460. 58 99. 57
250. 78 251. 96 500. 37 99. 52
246. 08 251. 96 490. 27 99. 23
240. 78 251. 96 482. 16 100. 25
·3051·
中国药学杂志 2016 年 9 月第 51 卷第 17 期 Chin Pharm J,2016 September,Vol. 51 No. 17
2. 6 样品测定
将供试品溶液注入液相-质谱联用仪,依照
“2. 2”项下条件测定,根据相应线性关系计算供试
样品中 18 种成分的含量,结果见表 5。
2. 7 灰色关联度分析
2. 7. 1 各成分的无量纲化 采用数据均值计算方
法,对表 5 数值建立矩阵并进行无量纲化处理,设有
m个不同采收期样品,有 n 个评价指标(n = 18),则
根据公式:
x1(k)= xi(k)/
1
m∑
m
j = 1
xj(k)
对照本实验,m值为 11,最终所得结果见表 6。
2. 7. 2 求关联系数 关联系数反映了各指标与理
想值的吻合程度,关联系数越大,表明某指标越接近
理想值。由关联度计算公式:
ξi(k)=
iminkmin |X0(k)-Xi(k)| + ρiminkmin |X0(k)-Xi(k)|
|X0(k)-Xi(k)| + ρimaxkmax |X0(k)-Xi(k)|
其中,ρ的取值[21]通常为 0. 5,计算不同采收期
各样品与理想样品的关联系数,结果见表 7。
2. 7. 3 关联系数和权重的确定 由表 7 可知,关
联系数有很多,因而信息过于分散,不便于比较,
为此有必要将各个时刻的关联系数集中为一个
值,而求平均值便是这种信息集中处理的一个方
法,所得平均值即为关联度。关联度的计算根据
公式:
ri =
1
n ∑
n
k = 1
ξi(k)
可求得各指标的关联度 ri,在将其归一化处理
可得各个指标的权重,结果见表 8。
2. 7. 4 确定灰色综合评价值 根据灰色关联评价
指标公式:
ri =
1
n ∑
n
k = 1
ωKξi(k)
将表 7 及表 8 所得结果代入并计算,可以求出
各指标成分的灰色关联评价指标,并对所得值大小
进行排序,结果见表 9。
根据表 9 可知,灰色关联度分析结果关联度
排序为 S6 > S5 > S7 > S8 > S4 > S3 > S9 > S2 >
S10 > S11 > S1,关联度差异较大,最大的为
30. 33%,能够区分样品的质量优劣,分析结果显
示,苍耳草样品 S6(7 月下旬)和 S5(7 月中旬)
的质量较好。
3 讨 论
3. 1 色谱-质谱条件优化
实验考察了甲醇-水、乙腈-水、甲醇-0. 1%甲酸
水、甲醇-0. 2%甲酸水等溶剂作为流动相,由于甲醇
表 5 苍耳草药材中 18 种成分的含量测定结果 . μg·g -1,n = 2
Tab. 5 Contents of eighteen components in Xanthii Herba. μg·g -1,n = 2
No. S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 S11
Chlorogenic acid 625. 85 893. 95 905. 30 919. 35 998. 75 942. 89 930. 85 920. 20 849. 89 843. 14 930. 85
Neochlorogenic acid 202. 73 216. 62 219. 50 222. 42 229. 31 232. 76 221. 54 219. 70 212. 06 203. 21 201. 75
4-Dicaffeoylquinic acid 120. 74 126. 84 191. 19 275. 82 337. 83 390. 27 300. 87 255. 87 150. 92 115. 51 75. 76
Caffeic acid 20. 45 21. 38 22. 38 26. 35 30. 23 28. 34 27. 28 25. 87 24. 77 23. 05 21. 24
Ferulic acid 246. 33 357. 92 512. 41 649. 19 917. 21 1 838. 64 1 100. 77 719. 33 457. 19 382. 78 210. 69
1,3-Dicaffeoylquinic acid 142. 75 214. 52 218. 59 364. 73 789. 16 1 018. 64 756. 47 502. 97 326. 12 183. 71 176. 46
3,4-Dicaffeoylquinic acid 200. 71 574. 01 786. 26 966. 15 1 290. 38 1 551. 03 1 710. 15 827. 48 758. 01 436. 78 277. 26
3,5-Dicaffeoylquinic acid 14. 36 14. 41 15. 24 23. 81 25. 84 31. 38 34. 92 31. 07 18. 67 14. 00 12. 18
4,5-Dicaffeoylquinic acid 72. 04 75. 51 80. 42 80. 76 83. 19 87. 63 113. 75 108. 24 75. 47 72. 80 69. 70
Protocatechuic aldehyde 37. 95 43. 71 49. 12 54. 31 62. 28 94. 39 68. 15 53. 42 39. 47 37. 12 33. 55
Protocatechuic acid 149. 48 376. 52 422. 59 461. 78 526. 44 602. 54 515. 24 472. 97 385. 54 166. 20 139. 61
Aloeemodin 2. 65 2. 65 2. 66 2. 64 2. 66 2. 67 2. 66 2. 66 2. 66 2. 68 2. 66
Emodin 0. 57 0. 72 0. 91 1. 03 1. 30 3. 06 1. 07 1. 03 0. 96 0. 92 1. 03
Chrysophanol 0. 46 0. 53 0. 61 0. 61 0. 86 1. 23 1. 20 0. 52 0. 47 0. 55 0. 76
Rutin 0. 16 1. 35 2. 35 2. 57 4. 54 2. 90 1. 38 0. 86 0. 55 0. 19 0. 07
Quercetin 431. 38 473. 89 499. 24 509. 33 532. 54 553. 85 503. 80 474. 77 472. 21 446. 70 446. 70
Astragalin 7. 48 14. 90 23. 97 33. 79 49. 53 45. 81 34. 25 34. 03 25. 38 20. 59 49. 53
Hyperoside 87. 44 124. 34 269. 39 295. 64 460. 11 262. 41 257. 39 249. 18 169. 88 81. 19 61. 30
Total content 2 363. 52 3 533. 79 4 222. 13 4 890. 27 6 342. 18 7 690. 43 6 581. 72 4 900. 42 3 970. 31 3 031. 09 2 531. 97
·4051· Chin Pharm J,2016 September,Vol. 51 No. 17 中国药学杂志 2016 年 9 月第 51 卷第 17 期
表 6 苍耳草药材中无量纲化处理结果
Tab. 6 Result of standardization in Xanthii Herba
NO. f1 f2 f3 f4 f5 f6 f7 f8 f9 f10 f11 f12 f13 f14 f15 f16 f17 f18
S1 0. 714 9 0. 936 3 0. 567 2 0. 829 1 0. 366 5 0. 334 5 0. 235 4 0. 669 8 0. 861 8 0. 402 0 0. 389 7 0. 996 8 0. 518 5 0. 644 9 0. 105 7 0. 890 1 0. 269 3 0. 414 9
S2 1. 021 2 1. 000 5 0. 595 8 0. 866 8 0. 532 6 0. 502 7 0. 673 3 0. 672 2 0. 903 4 0. 463 1 0. 981 7 0. 998 0 0. 650 2 0. 749 7 0. 878 1 0. 977 9 0. 536 3 0. 590 0
S3 1. 034 1 1. 013 8 0. 898 2 0. 907 1 0. 762 5 0. 512 2 0. 922 2 0. 710 7 0. 962 1 0. 520 4 1. 101 8 1. 000 5 0. 817 7 0. 856 6 1. 530 6 1. 030 2 0. 862 5 1. 278 2
S4 1. 050 2 1. 027 3 1. 295 7 1. 068 1 0. 966 0 0. 854 7 1. 133 2 1. 110 4 0. 966 1 0. 575 4 1. 204 0 0. 993 2 0. 930 0 0. 860 7 1. 670 0 1. 051 0 1. 216 0 1. 402 8
S5 1. 140 9 1. 059 1 1. 587 0 1. 225 7 1. 364 8 1. 849 3 1. 513 5 1. 204 9 0. 995 2 0. 659 9 1. 372 6 0. 999 7 1. 171 2 1. 219 1 2. 950 3 1. 098 9 1. 782 6 2. 183 2
S6 1. 077 1 1. 075 0 1. 833 4 1. 148 9 2. 735 9 2. 387 0 1. 819 3 1. 463 1 1. 048 3 1. 000 0 1. 571 0 1. 002 7 2. 761 9 1. 735 4 1. 883 6 1. 142 9 1. 648 7 1. 245 1
S7 1. 063 3 1. 023 2 1. 413 4 1. 106 1 1. 638 0 1. 772 7 2. 005 9 1. 628 2 1. 360 7 0. 722 0 1. 343 4 1. 000 4 0. 961 5 1. 688 1 0. 896 3 1. 039 6 1. 232 7 1. 221 3
S8 1. 051 1 1. 014 7 1. 202 0 1. 048 6 1. 070 4 1. 178 6 0. 970 6 1. 449 1 1. 294 9 0. 566 0 1. 233 2 1. 002 4 0. 928 4 1. 075 5 0. 560 7 0. 979 7 1. 224 6 1. 182 4
S9 0. 970 8 0. 979 5 0. 709 0 1. 004 2 0. 680 3 0. 764 2 0. 889 1 0. 870 5 0. 902 9 0. 418 2 1. 005 2 0. 999 0 0. 869 9 0. 773 9 0. 358 9 0. 974 4 0. 913 2 0. 806 1
S10 0. 963 1 0. 938 6 0. 542 6 0. 934 4 0. 569 6 0. 430 5 0. 512 3 0. 653 1 0. 870 9 0. 393 2 0. 433 3 1. 007 7 0. 833 6 0. 731 9 0. 121 2 0. 921 7 0. 740 9 0. 385 2
S11 0. 913 4 0. 931 8 0. 355 9 0. 861 1 0. 313 5 0. 413 5 0. 325 2 0. 568 0 0. 833 8 0. 355 4 0. 364 0 0. 999 6 0. 557 1 0. 664 2 0. 044 6 0. 893 7 0. 573 1 0. 290 9
表 7 参评苍耳草样品与主要成分的关联系数
Tab. 7 Correlation coefficients between the test samples and the main components in Xanthii Herba
NO. f1 f2 f3 f4 f5 f6 f7 f8 f9 f10 f11 f12 f13 f14 f15 f16 f17 f18
S1 0. 773 3 0. 912 9 0. 534 3 0. 785 5 0. 380 1 0. 414 5 0. 450 7 0. 602 5 0. 744 4 0. 708 4 0. 551 5 0. 992 5 0. 393 1 0. 571 2 0. 338 1 0. 851 8 0. 489 8 0. 451 0
S2 0. 923 9 0. 951 2 0. 540 0 0. 801 9 0. 397 4 0. 435 3 0. 521 6 0. 603 1 0. 760 6 0. 730 2 0. 711 4 0. 993 3 0. 407 6 0. 595 8 0. 412 2 0. 898 0 0. 538 3 0. 477 0
S3 0. 931 6 0. 959 6 0. 608 4 0. 820 2 0. 424 0 0. 436 6 0. 572 8 0. 612 9 0. 784 7 0. 751 8 0. 755 9 0. 995 1 0. 427 7 0. 623 1 0. 505 8 0. 928 0 0. 612 3 0. 616 2
S4 0. 941 2 0. 968 2 0. 729 9 0. 902 2 0. 450 8 0. 486 7 0. 624 7 0. 737 2 0. 786 4 0. 773 8 0. 798 3 0. 990 1 0. 442 3 0. 624 2 0. 531 6 0. 940 5 0. 719 4 0. 650 5
S5 1. 000 0 0. 989 2 0. 855 0 1. 000 0 0. 514 5 0. 729 9 0. 746 9 0. 774 4 0. 799 0 0. 810 3 0. 879 8 0. 994 5 0. 477 4 0. 737 8 1. 000 0 0. 970 6 1. 000 0 1. 000 0
S6 0. 957 9 1. 000 0 1. 000 0 0. 949 8 1. 000 0 1. 000 0 0. 886 2 0. 898 0 0. 823 0 1. 000 0 1. 000 0 0. 996 5 1. 000 0 1. 000 0 0. 576 6 1. 000 0 0. 915 6 0. 607 6
S7 0. 949 3 0. 965 6 0. 775 7 0. 923 9 0. 569 6 0. 702 8 1. 000 0 1. 000 0 1. 000 0 0. 839 4 0. 864 6 0. 995 0 0. 446 6 0. 968 4 0. 414 3 0. 933 6 0. 725 4 0. 601 7
S8 0. 941 8 0. 960 2 0. 697 1 0. 891 4 0. 465 9 0. 545 9 0. 583 9 0. 890 2 0. 956 6 0. 770 0 0. 811 3 0. 996 4 0. 442 1 0. 687 7 0. 378 1 0. 899 0 0. 722 5 0. 592 1
S9 0. 895 2 0. 938 3 0. 563 7 0. 867 7 0. 414 1 0. 472 4 0. 565 4 0. 657 2 0. 760 4 0. 714 0 0. 719 7 0. 994 0 0. 434 4 0. 601 7 0. 359 2 0. 896 1 0. 625 6 0. 513 4
S10 0. 891 0 0. 914 1 0. 529 5 0. 833 0 0. 401 4 0. 426 1 0. 493 1 0. 598 4 0. 747 9 0. 705 4 0. 560 8 1. 000 0 0. 429 7 0. 591 5 0. 339 3 0. 867 9 0. 582 4 0. 446 9
S11 0. 864 6 0. 910 3 0. 495 8 0. 799 4 0. 374 9 0. 424 0 0. 463 6 0. 578 1 0. 733 8 0. 692 7 0. 546 2 0. 994 5 0. 397 2 0. 575 6 0. 333 3 0. 853 6 0. 545 7 0. 434 3
表 8 参评苍耳草样品的关联度和权重值
Tab. 8 Correlation degrees and weight values of the test samples
Items ri ωК
f1 0. 915 4 0. 070 8
f2 0. 951 8 0. 073 6
f3 0. 666 3 0. 051 5
f4 0. 870 5 0. 067 3
f5 0. 490 2 0. 037 9
f6 0. 552 2 0. 042 7
f7 0. 628 1 0. 048 6
f8 0. 722 9 0. 055 9
f9 0. 808 8 0. 062 5
f10 0. 772 4 0. 059 7
f11 0. 745 4 0. 057 6
f12 0. 994 7 0. 076 9
f13 0. 481 6 0. 037 2
f14 0. 688 8 0. 053 3
f15 0. 471 7 0. 036 5
f16 0. 912 7 0. 070 6
f17 0. 679 7 0. 052 6
f18 0. 581 0 0. 044 9
表 9 待评价苍耳草样品的加权关联度 ri值
Tab. 9 Sequence of the weighted correlation degree ri of the
test samples
NO.
Result of grey correlation analysis
r i Order Correlation degree /%
S1 0. 036 1 11 30. 33
S2 0. 038 5 8 25. 72
S3 0. 040 4 6 22. 15
S4 0. 042 5 5 17. 99
S5 0. 048 3 2 6. 79
S6 0. 051 9 1 0. 00
S7 0. 047 2 3 8. 98
S8 0. 043 1 4 16. 84
S9 0. 039 4 7 24. 11
S10 0. 037 5 9 27. 76
S11 0. 036 4 10 29. 74
可电离出[H]+,较乙腈有更高的响应和较好的峰
形,故选用甲醇作为流动相的有机相。在流动相中
加入一定比例的甲酸可增强样品中待测物的保留,
·5051·
中国药学杂志 2016 年 9 月第 51 卷第 17 期 Chin Pharm J,2016 September,Vol. 51 No. 17
并减少色谱峰拖尾,从而提高分析方法的分离效果
和灵敏度。因此本实验采用甲醇-0. 2%甲酸水作为
流动相梯度洗脱。
在质谱条件考察中选用正、负两种离子模式测
定 18 种成分响应特点,结果显示,18 种成分在负离
子模式下均有较强的离子响应,其提取离子流图及
MRM图见图 1。但在正离子模式下咖啡酸、大黄
素、芦荟大黄素、大黄酚、金丝桃苷、槲皮素、芦丁、紫
云英苷成分离子响应值较弱。因此本实验选用负离
子模式进行分析。
3. 2 供试品制备方法的优化
实验中对提取溶剂(体积分数 50%、70%、
90%、100%甲醇)、料液比(1 ∶ 20、1 ∶ 30、1 ∶ 40、1 ∶
50)、提取时间(30、60、90、120 min)及提取方法
(回流、超声处理)进行了考察。结果表明,体积
分数 70%甲醇作为最适合的溶剂可以提取出更
多待测物;以料液比 1 ∶ 40 具有较大的提取结果;
回流、超声提取效果无明显差异。因此选择以体
积分数 70%甲醇作为溶剂,料液比 1 ∶ 40、超声提
取 30 min。
3. 3 实验结果分析
含量分析结果表明,苍耳草中多元活性成分
的积累与生长期密切相关,其含量呈现动态变
化。苍耳草多元活性成分总量 5 月上旬较低,7
月下旬较高,7 月以后含量呈下降趋势降低;不同
采收期苍耳草均以绿原酸、3,4-二咖啡酰奎宁
酸、阿魏酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、槲皮素含量较
高,芦荟大黄素、大黄素、大黄酚、芦丁含量较低;
不同采收期苍耳草中阿魏酸、芦丁、金丝桃苷、3,
4-二咖啡酰奎宁酸、紫云英苷、隐绿原酸、原儿茶
酸、大黄素含量差异较大,其余成分无明显差异;
咖啡酸、绿原酸、芦丁、紫云英苷、金丝桃苷含量
以 7 月中旬较高,3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖
啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸含量以 8 月中
旬较高,其余均以 7 月下旬较高;4,5-二咖啡酰
奎宁酸、新绿原酸、隐绿原酸、阿魏酸、原儿茶酸、
原儿茶醛、3,5-二咖啡酰奎宁酸、芦丁、金丝桃苷
含量以 10 月中旬较低,其余均以 5 月上旬较低。
由于苍耳草中多元活性成分动态积累不一,难以
直观评价,因而用灰色关联度分析进行综合评
价。综合评价结果显示,苍耳草样品 S6(7 月下
旬)和 S5(7 中旬)的综合质量较好,这与传统采
收期基本相符。
本实验建立了超高效液相色谱-串联四级杆 /
线性离子阱质谱(UPLC-QTRAP-MS /MS)同时测
定苍耳草中酚酸、蒽醌及黄酮类 18 种活性成分
含量的方法,综合考察其动态积累变化,并用灰
色关联度分析对多元活性成分进行综合评价,为
揭示苍耳草中多元活性成分的动态积累规律及
确定其药材的适宜采收期提供基础资料,同时为
苍耳草药材内在质量的综合评价和全面控制提
供新的方法参考。
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(收稿日期:2016-01-10)
第十六届全国感染药学学术会议第一轮通知
中国药学会医院药学专业委员会主办的“第十六届全国感染药学学术会议”将由中国药学会医院药学专业委员会感染药
学专业组、浙江中医药大学附属杭州西溪医院、江苏大学附属镇江三院和《抗感染药学》杂志社共同承办,计划于 2016 年 11
月在江苏镇江市举行。
本次会议的主题:感染药学与药学实践。我们将秉承专委会“传承、务实、合作、创新”的宗旨,为广大药学工作者提供一
个交流与学习的平台,加强全国各地感染药学工作者的学术交流,规范药事管理,促进感染药学的发展。
现面向全国医院药师、临床医师、科研人员及医药相关领域人员征稿,欢迎踊跃投稿和报名参会
1 征文范围
近年来国内外抗感染创新药物研究的新进展、新方法和新技术;药物安全性监测与评价的新理论和新方法;抗感染药物
的临床疗效分析;抗感染药物 TDM与个体化用药的剂量设计;抗感染药物耐药性的研究及不良反应的分析;抗感染药物配伍
分析;药物使用的稳定性问题分析;临床药师培养、培训和考核体系的建立;临床药学的发展方向;临床药师在抗感染药物咨
询和药学服务中的新经验和新体会;抗菌药物临床合理应用的实践与体会;抗感染治疗案例分享;其他药学范畴新进展、新方
法和新技术。
2 征文要求和注意事项
征文应围绕征文范围精心选题,注意理论与实践的结合;论文未在公开刊物发表过,文责自负;论著不超过 3 500 字,综述
不超过 5 000 字,并附 300 字以内的摘要;论文写作格式参照《抗感染药学》杂志要求;来搞请通过 E-mail 发送至指定邮箱:
ganranyaoxue@ sina. com;稿件一律不退,请自留底稿,并务必注明“感染药学会议征文”字样;来稿截至 2016 年 9 月 20 日,来稿
一经大会录用,将另行通知。
3 学分
本次会议授予中国药学会药学继续教育学分 3 分。
4 会议地点和时间
拟于 2016 年 11 月在江苏镇江举行,具体地点和日程安排详见第二轮会议通知。也可查阅中国药学会医院药学专业委员
会网站(www. cpahp. org. cn)。
5 联系人与联系电话
江苏大学附属镇江三院;联系人:武谦虎;电话:0511-80578875,18082119209;浙江中医药大学附属杭州西溪医院,感染药
学专业组办公室;联系人:李婷;电话:0571-86481623,18857896010;E-mail:ganranyaoxue@ sina. com。
doi:10. 11669 /cpj. 2016. 17. 015
[本刊讯]
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中国药学杂志 2016 年 9 月第 51 卷第 17 期 Chin Pharm J,2016 September,Vol. 51 No. 17